微生物檢驗(yàn)李魯平

臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)沈陽市第六人民醫(yī)院李魯平電話：23393138E-mail：luping4758@163.com12/15/20221臨床標(biāo)本的采集與處理細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查細(xì)菌的分離培養(yǎng)與接種技術(shù)細(xì)菌生化反應(yīng)鑒定的理論基礎(chǔ)醫(yī)院感染的實(shí)驗(yàn)診斷抗菌藥物敏感性試驗(yàn)12/15/20222一、微生物檢查基本方法12/15/20223致病菌的檢驗(yàn)程序標(biāo)本直接涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定病原菌抗原檢測(cè)其它檢測(cè)形態(tài)、結(jié)構(gòu)、染色性涂片鏡檢菌落特征生化反應(yīng)藥敏試驗(yàn)血清學(xué)反應(yīng)沉淀反應(yīng)協(xié)同凝集免疫熒光對(duì)流免疫電泳酶免疫測(cè)定免疫印跡細(xì)菌代謝產(chǎn)物（氣相色譜）細(xì)菌核酸（PCR）噬菌體分離細(xì)菌素測(cè)定分子生物學(xué)技術(shù)動(dòng)物試驗(yàn)12/15/20224一、微生物檢查基本方法與診斷技術(shù)

(一)

細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查法:1.顯微鏡檢查法:①普通光學(xué)顯微鏡：②

暗視野顯微鏡：③

相差顯微鏡：④

熒光顯微鏡：⑤

電子顯微鏡：2.細(xì)菌標(biāo)本染色法;①單染色法:用一種染料將細(xì)菌和周圍物體染成同一種染色。②復(fù)染色法:用兩種或兩種以上染料染色的方法革蘭染色；抗酸染色；12/15/20225(二)

細(xì)菌的人工培養(yǎng)及生化實(shí)驗(yàn)1.細(xì)菌的人工培養(yǎng)法

①培養(yǎng)基:根據(jù)用途分基礎(chǔ)培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、特殊培養(yǎng)基。根據(jù)物理性狀分液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基。②

細(xì)菌接種法:③細(xì)菌培養(yǎng)法:需氧培養(yǎng);厭氧培養(yǎng);二氧化碳培養(yǎng);微需氧培養(yǎng)。12/15/202262.細(xì)菌生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)方法、種類及原理

①

糖分解產(chǎn)物實(shí)驗(yàn)糖發(fā)酵試驗(yàn);葡萄糖代謝類型鑒別試驗(yàn);七葉苷水解試驗(yàn);淀粉水解實(shí)驗(yàn);甲基紅試驗(yàn);V-P試驗(yàn);ONPG試驗(yàn).

②

蛋白質(zhì)分解產(chǎn)物試驗(yàn)明膠液化試驗(yàn);吲哚試驗(yàn);硫化氫試驗(yàn);尿素酶試驗(yàn);苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn);氨基酸脫羧酶試驗(yàn).③碳源利用試驗(yàn)枸櫞酸鹽利用試驗(yàn),丙二酸鹽利用試驗(yàn).④呼吸酶類試驗(yàn)氧化酶試驗(yàn);觸酶試驗(yàn);硝酸鹽還原試驗(yàn).⑤其他生化試驗(yàn)脂酶試驗(yàn);磷酸酶試驗(yàn);DNA試驗(yàn);凝固酶實(shí)驗(yàn)；膽汁溶菌試驗(yàn)12/15/20227細(xì)菌L型生長(zhǎng)緩慢，營(yíng)養(yǎng)要求高，對(duì)滲透壓敏感，普通營(yíng)養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)，培養(yǎng)時(shí)必須用高滲的含血清的培養(yǎng)基。細(xì)菌L型在高滲的含血清的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)后形成三種類型的菌落。

(三)

細(xì)菌L型的概念及檢查法12/15/20228二、微生物學(xué)檢驗(yàn)概述

(一)標(biāo)本采集種類與原則1)血液：一般在病人發(fā)熱初期或高峰期采集，懷疑細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時(shí)，血培養(yǎng)不少于三次。一般為靜脈血，成人采血量10—20ml，嬰兒和兒童1—2ml。2)尿液：最好用導(dǎo)尿管收集尿液，要防止逆行性感染。3)糞便：取膿血或粘液的糞便置清潔容器中送檢。排便困難者，可用直腸拭子采樣。4)鼻咽拭子：5)痰：清晨第一口痰為宜，必須先用清水漱口，避免唾液混入。12/15/202296)腦脊液及其他：CSF應(yīng)無菌操作進(jìn)行腰椎穿刺；胸水、腹水、包液、滑囊液等用注射器無菌操作采集。7）眼,耳部標(biāo)本：用無菌拭子采集，及時(shí)接種相應(yīng)培養(yǎng)基。8)性傳播疾病標(biāo)本：男性采取尿道膿性分泌物，女性采取宮頸分泌物，供鏡檢及培養(yǎng)；梅毒取皮膚滲出物和淋巴穿刺液涂片；皰疹取皰內(nèi)液體或刺破小皰后，用無菌拭子采樣。9)創(chuàng)傷、組織、膿腫標(biāo)本：根據(jù)不同部位采取不同標(biāo)本。12/15/202210標(biāo)本運(yùn)運(yùn)送1）采采集時(shí)時(shí)間應(yīng)應(yīng)在在疾病病早期期,急急性期期,癥癥狀典典型或或用藥藥之前前采集集標(biāo)本本.2）根根據(jù)不不同目目的采采用不不同的的采集集方法法.3）除除痰,大便便,肛肛拭子子等體體外標(biāo)標(biāo)本,其他他標(biāo)本本采集集時(shí)應(yīng)應(yīng)用無無菌操作作,采采集量量不得得過少少.4）最最好床床邊接接種.(保保溫,冷藏藏,厭厭氧或或種入入運(yùn)送送培養(yǎng)養(yǎng)基內(nèi)內(nèi)).5)采采集集運(yùn)送送時(shí)必必須注注意安安全,防止止污染染及交交叉感感染.12/7/202211（二））微微生物物學(xué)檢檢查接到標(biāo)標(biāo)本后后立即即進(jìn)行行微生生物學(xué)學(xué)檢查查.1.直直接接鏡檢檢：標(biāo)本本經(jīng)涂涂片染染色或或制備備濕片片鏡檢檢。2.快快速速診斷斷：快速速檢測(cè)測(cè)病原原體成成分主主要是是指特特異性性抗原原和和核酸酸檢測(cè)測(cè).特特異性抗抗原檢檢測(cè)包包括免免疫熒熒光技技術(shù),膠乳乳凝集集試驗(yàn)驗(yàn),酶酶免疫疫技術(shù),對(duì)流流免疫電泳泳,化學(xué)發(fā)發(fā)光免疫測(cè)測(cè)定等.3.直直接藥敏試試驗(yàn)：直接將標(biāo)標(biāo)本接種于于平板，用用抗生素紙紙片作藥物物敏感試驗(yàn)，在18—24h內(nèi)可獲獲得結(jié)果。。4.

常規(guī)規(guī)檢驗(yàn)：1)分離離培養(yǎng)：：通常由正正常無菌部部位采取的的標(biāo)本接種種血平板，，置空氣或5%—10%二氧氧化碳的氣氣缸中培養(yǎng)養(yǎng)，大部分分細(xì)菌可于24—48h生長(zhǎng)長(zhǎng)良好。2)鑒定定：分離出出的細(xì)菌一一般經(jīng)過細(xì)細(xì)菌形態(tài),菌落特點(diǎn)點(diǎn),生化化反應(yīng),血血清學(xué)試驗(yàn)驗(yàn),動(dòng)物接接種等鑒定定。12/7/2022123)體體外外純純菌菌藥藥物物敏敏感感性性試試驗(yàn)驗(yàn):包包括括抑抑菌菌試試驗(yàn)驗(yàn),殺殺菌菌試試驗(yàn)驗(yàn),聯(lián)合合藥藥敏敏試試驗(yàn)驗(yàn)和和檢檢測(cè)測(cè)細(xì)細(xì)菌菌產(chǎn)產(chǎn)生生的的抗抗生生素素滅滅活活酶酶等等。。4)報(bào)報(bào)告告:直接接鏡鏡檢檢要要求求2小小時(shí)時(shí)報(bào)報(bào)告告,說說明明標(biāo)標(biāo)本本合合格格,發(fā)發(fā)現(xiàn)現(xiàn)微微生生物物情情況況和和特特點(diǎn)點(diǎn);初初步步鑒鑒定定和和直直接接藥藥敏敏結(jié)結(jié)果果于于24小小時(shí)時(shí)或或次次晨晨報(bào)報(bào)告告,報(bào)報(bào)告告可可能能的的病病原原菌菌和和直直接接藥藥敏敏結(jié)結(jié)果果;最最后后鑒鑒定定和和細(xì)細(xì)菌菌藥藥敏敏結(jié)結(jié)果果一一般般不不超超過過3天天。。5.血血清清學(xué)學(xué)診診斷斷:是是指指用用已已知知抗抗原原或或已已知知抗抗體體檢檢測(cè)測(cè)患患者者血血清清中中相相應(yīng)應(yīng)抗抗體體或或抗抗原原的的方方法法。。血清清學(xué)學(xué)凝凝集集試試驗(yàn)驗(yàn)：采采用用含含有有已已知知特特異異性性抗抗體體的的血血清清與與分分離培培養(yǎng)養(yǎng)出出的的未未知知純純種種細(xì)細(xì)菌菌或或標(biāo)標(biāo)本本種種的的抗抗原原進(jìn)進(jìn)行行血血清清學(xué)學(xué)反反應(yīng),以以確確定定病病原原菌菌的的種種或或型型。。12/7/202213臨床床微微生生物物實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室安安全全措措施施和和質(zhì)質(zhì)量量保保證證1.感感染染性性廢廢棄棄物物的的處處理理1)去去污污染染,任任何何污污染染材材料料未未經(jīng)經(jīng)消消毒毒不不能能拿拿出出實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室.2)液液體體廢廢棄棄物物必必須須收收集集在在防防漏漏,未未破破的的容容器器內(nèi)內(nèi),經(jīng)經(jīng)高高濃濃度度的的化化學(xué)學(xué)消消毒毒劑劑處處理理.3)對(duì)對(duì)剩剩余余的的標(biāo)標(biāo)本本,接接種種過過的的培培養(yǎng)養(yǎng)基基,菌菌種種等等丟丟棄棄前前均均須須消消毒毒.4)對(duì)對(duì)于于任任何何有有污污染染的的銳銳器器如如針針頭頭,注注射射器器,玻玻片片等等在在處處理理前前不不要要用用手手接接觸觸.12/7/2022142.微微生物物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室的的室內(nèi)內(nèi)質(zhì)控控1)對(duì)對(duì)細(xì)菌菌檢驗(yàn)驗(yàn)人員員的要要求;2)操作手手冊(cè);3)儀儀器設(shè)設(shè)備的的功能能監(jiān)測(cè)測(cè);4)培培養(yǎng)基基的質(zhì)質(zhì)量控控制;5)試試劑,染色色液以以及抗抗血清清的質(zhì)質(zhì)量控控制;6)標(biāo)標(biāo)本檢檢驗(yàn)的的質(zhì)量量控制制;7)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)菌株株的來來源和和保存存及室室內(nèi)質(zhì)質(zhì)量的全面面控制制.微生物物檢驗(yàn)驗(yàn)的室室間質(zhì)質(zhì)評(píng)12/7/2022151.微生生物檢查查基本方方法與診診斷技術(shù)術(shù)。2.微生生物學(xué)檢檢驗(yàn)概述述。內(nèi)容小結(jié)結(jié)12/7/202216二、臨床床常見的的微生物物及檢驗(yàn)驗(yàn)方法(例）12/7/202217一、球菌菌葡萄球菌菌(一)生生物學(xué)特特性1.形態(tài)與結(jié)結(jié)構(gòu)：本菌菌屬G染染色陽性性,呈圓圓球形,不規(guī)則則成堆排列列,形似似葡萄串串狀,無無莢膜.無鞭毛毛和芽孢孢.2.培養(yǎng)特性性：需氧或或兼性厭厭氧,營(yíng)營(yíng)養(yǎng)要求求不高.最適PH為7.4,經(jīng)37℃24—48h培培養(yǎng),可可形成圓圓形,凸凸起,表表面光滑滑濕潤(rùn),邊緣整整齊不透透明的菌菌落,可可產(chǎn)生不不同的脂脂溶性色色素,如如白色,金黃色色,檸檬檬色色素素。在血平板板上,幾幾乎所有有的葡萄萄球菌可可產(chǎn)生αα,ββ,γγ和δδ溶血在在液體培培養(yǎng)基中中生長(zhǎng)迅迅速生長(zhǎng)長(zhǎng)呈均勻勻混濁狀狀.12/7/2022183)分類方法法：根據(jù)其其在固體體培養(yǎng)基基上產(chǎn)生生的不同同色素分分為金黃黃色葡萄萄球菌、、白色葡葡萄球菌菌和檸檬檬色葡萄萄球菌。。1965年年,國(guó)際際葡萄球球菌和微微球菌分分類委員員會(huì)將葡葡萄球菌菌分為凝凝固酶陽陽性和陰陰性葡萄萄（CNS）。。CNS包括括表葡、、腐生葡葡萄球菌菌。凝固固酶陽性性葡萄球球菌包括括金葡、、中間型型和家畜畜葡萄球球菌。(二)微微生物物檢查1.標(biāo)本本采集:膿汁汁,滲出出液,分分泌物,血,尿尿,糞便便,痰液液及腦脊脊液。2.檢查查方法及及鑒定12/7/2022191)直接接鏡檢涂片,G染色鏡鏡檢,如如為陽性性球菌呈呈葡萄狀狀排列可可初診.初報(bào)為找到G陽性葡葡萄狀排排列球球菌,疑疑為葡萄萄球菌。。2)分離離培養(yǎng)膿汁,尿尿液.腦腦脊液等等離心沉沉淀,可可直接接接種血平平板。37℃18—24h培培養(yǎng)可產(chǎn)產(chǎn)生不同同色素的的菌落.金黃色色葡萄球球菌在周圍有透透明溶血血環(huán).3)鑒定定試驗(yàn)a.觸酶酶試驗(yàn)：細(xì)菌產(chǎn)產(chǎn)生的過過氧化氫氫酶催化化雙氧水水生成水水和氧氣,產(chǎn)產(chǎn)生氣泡泡.b.血漿漿凝固酶酶試驗(yàn)：血漿凝凝固酶是是金黃色色葡萄球球菌所產(chǎn)產(chǎn)生的一種種與其致致病力有有關(guān)的侵侵襲性酶酶,分游游離型和和結(jié)合型型。其作用是是血漿中中的纖維維蛋白在在菌體表表面沉積積和凝固固以阻礙吞噬噬細(xì)胞的的吞噬。。12/7/202220c.甘甘露醇發(fā)發(fā)酵試驗(yàn)驗(yàn)d.新新生霉素素敏感試試驗(yàn)?zāi)堂戈庩幮缘钠掀咸亚蚓好舾袨楸肀砥て咸烟亚蚓?耐藥為腐腐生葡萄萄球菌。。e.同同時(shí)進(jìn)行行體外藥藥物敏感感試驗(yàn)本唑西林林：MSS/MRSβ-內(nèi)酰酰胺酶萬古酶素素的敏感感性。金黃色葡葡萄球菌菌:觸觸酶+凝固固酶+甘甘露露醇+新生生酶素S表皮葡萄萄球菌:+-+S腐生葡萄萄球菌:+-+R報(bào)告:檢檢出出XXX葡萄球球菌12/7/2022214)耐藥性性檢測(cè):耐甲氧西林林金葡菌（（MRSA），耐甲氧西林林的表葡菌菌（MRSE）。5)

臨床床意義：葡萄球菌感感染的特點(diǎn)點(diǎn)是感染部部位組織的的化膿，壞死和和膿腫形成成。金葡，，表葡和腐腐生葡萄球菌是是引起臨床床感染最常常見的葡萄萄球菌。①金葡菌引引起癤，癰癰，外科傷傷口，創(chuàng)傷傷的局部化化膿性感染染，入血后后可引起深深部組織的的化膿性感感染。其產(chǎn)產(chǎn)生的腸毒毒素可引起起食物中毒毒，表現(xiàn)為為急性胃腸腸炎。主要致病物物質(zhì)有血漿漿凝固酶，，葡萄球菌菌溶血素，，殺WBC素，腸毒素，表表皮溶解毒毒素和毒性性休克綜合合癥毒素②表葡是存在在于皮膚的的正常菌群群，由于各各種導(dǎo)管植植入和人造組織的的使用，該該菌已成為為醫(yī)院感染染的重要病病原菌，是導(dǎo)致血培培養(yǎng)污染的的常見菌之之一。③腐生葡萄球球菌是導(dǎo)致致尿路感染染的常見菌菌之一。12/7/202222四、醫(yī)院感感染與抗菌菌藥物敏感感性試驗(yàn)12/7/202223一、醫(yī)院獲獲得性感染染(hospitalacquiredinfection)：包括醫(yī)院內(nèi)內(nèi)各種人群群所獲得的的感染。對(duì)象——一一切在醫(yī)院院內(nèi)活動(dòng)的的人群（主主要為住院院病人）地點(diǎn)——感感染發(fā)生必必須在醫(yī)院院內(nèi)時(shí)間——病病人在住院院期間或出出院后不久久發(fā)生的感感染，及與與前次住院有關(guān)關(guān)的感染。。一、醫(yī)院院感染12/7/202224醫(yī)院感染的的類型按微生物來來源內(nèi)源性醫(yī)院院感染———由自身正常常菌群轉(zhuǎn)變變成機(jī)會(huì)性性致病菌所所致特定條件———寄居部部位改變——免疫功功能下降——菌群失失調(diào)外源性醫(yī)院院感染（交交叉感染））——患者遭受醫(yī)醫(yī)院內(nèi)非自自身存在的的病原體侵侵襲而發(fā)生生的感染。。病人之間、、醫(yī)患之間間、污染醫(yī)醫(yī)護(hù)用品或或診治設(shè)備備、環(huán)境空空氣等，也也稱醫(yī)院內(nèi)內(nèi)感染。按感染部位位分類——全身各各部位均可可發(fā)生12/7/202225易感宿宿主：主主要是是原發(fā)發(fā)病引引起機(jī)機(jī)體抵抵抗力力低下下，接接受影響響免疫疫功能能的藥藥物治治療或或接受受侵襲襲性操作作措施施的病病人。。這些些病人人主要要表現(xiàn)現(xiàn)為局部部或全全身免免疫功功能受受損，，正常常菌群群被破壞壞，抑抑制外外部細(xì)細(xì)菌定定植能能力減減弱或或消失，，使病病人處處于高高度易易感狀狀態(tài)。。醫(yī)院感感染常常見的的微生生物主要是是機(jī)會(huì)會(huì)性致致病菌菌（常常為內(nèi)內(nèi)源性性感染染）常常為耐耐藥菌菌;新新的病病原菌菌不斷斷出現(xiàn)現(xiàn);主主要是是細(xì)菌菌，其其次為為病毒毒和真真菌。。常見的的微生生物有有：1．細(xì)細(xì)菌葡葡萄球球菌屬屬、微微球菌菌屬、、鏈球球菌屬屬、腸腸桿菌菌科、、假單單胞菌菌屬、、不動(dòng)動(dòng)桿菌菌屬、、軍團(tuán)團(tuán)菌、、腦膜膜炎敗敗血性性黃桿桿菌、、結(jié)核核桿菌菌、李李斯特特菌、、類桿桿菌、、產(chǎn)氣氣莢膜膜梭菌菌、破破傷風(fēng)風(fēng)桿菌菌、核核梭桿桿菌、、丙酸酸桿菌菌、消消化球球菌等等。12/7/2022262．真真菌念念珠菌菌、組組織胞胞漿菌菌、球球孢子子菌、、隱球球菌、、曲曲霉菌菌等。。3．病病毒肝肝炎病病毒、、水痘痘病毒毒、流流感病病毒、、輪狀狀病毒毒、單純皰皰疹病病毒、、巨細(xì)細(xì)胞病病毒等等。4．對(duì)對(duì)于機(jī)機(jī)體的的不同同系統(tǒng)統(tǒng)，醫(yī)醫(yī)院感感染的的病原原菌也也不同同，目前G陰性性桿菌菌仍占占主要要地位位，凝凝固酶酶陰陰性葡葡萄球球菌及及腸球球菌感感染率率逐漸漸上升升，尤尤其應(yīng)應(yīng)該注注意的的是MRSA及及耐萬萬古霉霉素腸腸球菌菌引起起的醫(yī)醫(yī)院感感染。。12/7/202227二、監(jiān)監(jiān)控控抗感感染治治療的的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室方方法(一)抗抗菌菌藥物物選擇擇原則則：合合理理使用用抗生生素，，應(yīng)根根據(jù)病病原學(xué)學(xué)及其其藥敏敏試驗(yàn)驗(yàn)結(jié)果果，結(jié)結(jié)合抗抗生素素的性性能，，藥理理學(xué)情情況及及患者者生理理、病病理、、免疫疫狀態(tài)態(tài)合理理選用用抗生生素。。(二)抑抑菌試試驗(yàn)原理理及方法法目前前常用的的方法是是紙片瓊瓊脂擴(kuò)散法，，是一種種半定量量的方法。美國(guó)國(guó)CLSI(NCCLS)紙紙片擴(kuò)散法敏感感試驗(yàn)分分委會(huì)所所推薦的標(biāo)準(zhǔn)方方法是K—B法法，此法法是目前公公認(rèn)的標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)方法。。12/7/202228紙片瓊脂脂擴(kuò)散法法原理將含有定定量抗菌菌藥物的的紙片貼貼在已接接種待檢檢菌的瓊瓊脂平板板上，紙紙片中所所含的藥藥物吸取取瓊脂中中的水分分溶解后后會(huì)不斷斷地向紙紙片周圍圍區(qū)擴(kuò)散散，形成成遞減的的剃度濃濃度，在在紙片周周圍抑菌菌濃度范范圍內(nèi)待待檢菌的的生長(zhǎng)被被抑制，，從而產(chǎn)產(chǎn)生透明明的抑菌菌圈。抑抑菌圈的的大小反反應(yīng)檢測(cè)測(cè)菌對(duì)測(cè)測(cè)定藥物物的敏感感程度，，并與該該菌對(duì)待待檢菌的的最低抑抑菌濃度度呈負(fù)相相關(guān)。試驗(yàn)方法法在純培養(yǎng)養(yǎng)平板上上挑取相相同的菌菌落4-5個(gè)。。用無菌生生理鹽水水調(diào)菌液液為0.5麥?zhǔn)鲜蠁挝唬ǎs含菌菌１Ｘ１１０８ＣＦＵ／／ｍｌ）），在15min內(nèi)接接種完。。12/7/202229用無菌棉棉試蘸取取菌液，，在試管管壁上擠擠壓幾次次，壓去去多余的的菌液，，分三個(gè)個(gè)方向即即每次旋旋轉(zhuǎn)平板板60°°,使整整個(gè)MH平板涂涂布均勻勻.涂布菌液液的平板板于室溫溫中干燥燥3-5min后,用用紙片分分配器或或無菌鑷鑷子取藥藥敏紙片片,貼于于平板表表面,并并用鑷尖尖輕壓一一下紙片片,使其其貼平.每張紙紙片的間間距不小小于24mm,紙片的的中心距距平板的的邊緣不不小于15mm,90mm直直徑的平平板宜貼貼6張藥藥敏紙片片.將將貼好紙紙片的平平板置35℃孵孵育18-24h后,用標(biāo)尺尺量取抑抑菌圈直直徑.結(jié)果判斷斷根據(jù)量取取抑菌圈圈的直徑徑（包含含紙片的的直徑）），以毫毫米數(shù)報(bào)報(bào)告（取取整數(shù)））。(不不同抗生生素其抑抑菌圈大大小的標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)不一一致),判斷為為敏感(S)、、耐藥(R)或或中度敏敏感結(jié)果果判讀。。12/7/202230結(jié)果報(bào)告告敏感（susceptible，，S）：：是指當(dāng)當(dāng)使用常常規(guī)推薦薦劑量的的抗菌藥藥物進(jìn)行行治療時(shí)時(shí)，該抗抗菌藥在在患者感感染部位位所能達(dá)達(dá)到的濃濃度可抑抑制該感感染菌的的生長(zhǎng)。。耐藥（resistant，R））：是指指使用常常規(guī)推薦薦劑量的的抗菌藥藥物進(jìn)行行治療時(shí)時(shí)，該抗抗菌藥在在患者感感染部位位通常所所能達(dá)到到的濃度度不能抑抑制該感感染菌的的生長(zhǎng)；；或者該該藥對(duì)該該感染菌菌的臨床床療效尚尚未在以以往的治治療研究究中被證證實(shí)是可可靠的；；或者抑抑菌圈直直徑落在在特定細(xì)細(xì)菌發(fā)揮揮耐藥機(jī)機(jī)制（如如β-內(nèi)內(nèi)酰胺胺酶）的的合適范范圍。12/7/202231中介介（intermesiate，，I））抗菌菌藥藥對(duì)對(duì)感感染染菌菌的的MIC接接近近該該藥藥在在血血液液和和組組織織中中的的濃濃度度，，感感染染菌菌的的臨臨床床應(yīng)應(yīng)答答率率可可能能低低于于敏敏感感菌菌。。根據(jù)據(jù)藥藥代代動(dòng)動(dòng)力力學(xué)學(xué)資資料料分分析析，，若若某某藥藥在在生生理理濃濃集集部部位位具具有有臨臨床床效效力力，，如如尿尿中中喹喹諾諾酮酮類類和和β-內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺酶酶類類藥藥物物濃濃度度較較高高，，則則中中介介意意味味著著該該藥藥治治療療該該部部位位的的感感染染可可能能有有效效；；于于之之相相反反，，若若某某藥藥由由于于通通透透性性等等原原因因在在某某個(gè)個(gè)組組織織、、器器官官或或體體液液中中濃濃度度較較低低，，甚甚至至在在炎炎癥癥的的情情況況下下濃濃度度亦亦較較低低，，如如一一些些藥藥在在腦腦脊脊液液中中，，則則中中介介意意味味著著盡盡可可能能不不用用該該藥藥進(jìn)進(jìn)行行治治療療，，而而應(yīng)應(yīng)選選用用其其他他有有效效藥藥物物.12/7/202232若某某藥藥在在高高劑劑量量使使用用時(shí)時(shí)是是安安全全的的（（如如ββ-內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺酶酶藥藥物物）），，則則中中介介意意味味著著高高劑劑量量給給藥藥可可能能奏奏效效在判判斷斷藥藥敏敏試試驗(yàn)驗(yàn)結(jié)結(jié)果果時(shí)時(shí)，，中中介介的的數(shù)數(shù)據(jù)據(jù)位位置置處處于于敏敏感感與與耐耐藥藥之之間間，，它它可可作作為為一一個(gè)個(gè)緩緩沖沖帶帶，，用用以以防防止止因因?yàn)闉橐灰恍┬┬⌒〉牡?、、不不能能控控制制的的技技術(shù)術(shù)因因素素而而引引起起的的結(jié)結(jié)果果解解釋釋的的偏偏差差，，特特別別對(duì)對(duì)于于那那些些藥藥毒毒范范圍圍（（pharmacotoxicitymargin））較較窄窄的的藥藥物物來來講講這這個(gè)個(gè)緩緩沖沖帶帶相相當(dāng)當(dāng)重重要要。。12/7/202233局限性：體體外試驗(yàn)敏敏感的，體體內(nèi)不一定定敏感。細(xì)菌室分離離的病原菌菌不一定都都是致病菌菌我國(guó)采用的的藥敏試驗(yàn)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)為美美國(guó)CLSI根據(jù)藥敏標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)推薦的的抗生素結(jié)結(jié)合當(dāng)?shù)赜糜盟幒涂股卣哌x選擇選擇代表性性抗生素，，推測(cè)其他他藥物結(jié)果果（包括某些些耐藥機(jī)制制的檢測(cè)））耐藥表型(個(gè)體)→→耐藥機(jī)制制→耐藥表表型(同類類)(預(yù)測(cè)藥物物)(同類類藥物)不是所有抗抗生素都需需要檢測(cè)敏敏感性12/7/2022341、、必必須須進(jìn)進(jìn)行行藥藥敏敏試試驗(yàn)驗(yàn)的的情情況況當(dāng)某某些些致致病病菌菌或或條條件件致致病病菌菌的的藥藥敏敏特特點(diǎn)點(diǎn)不不能能從從其其種種屬屬特特征征上上了了解解時(shí)時(shí)，，或或其其藥藥敏敏結(jié)結(jié)果果易易變變時(shí)時(shí)，，這這些些菌菌的的臨臨床床分分離離株株必必須須進(jìn)進(jìn)行行藥藥敏敏試試驗(yàn)驗(yàn)。。如如：：腸腸桿桿菌菌科科的的細(xì)細(xì)菌菌、、非非發(fā)發(fā)酵酵菌菌、、葡葡萄萄球球菌菌屬屬和和腸腸球球菌菌屬屬的的細(xì)細(xì)菌菌等等。。2、、不不需需要要進(jìn)進(jìn)行行藥藥敏敏試試驗(yàn)驗(yàn)的的情情況況①自自標(biāo)標(biāo)本本中中分分離離出出多多種種細(xì)細(xì)菌菌（（呈呈混混合合生生長(zhǎng)長(zhǎng)）），，不不能能區(qū)區(qū)別別和和確確定定致致病病菌菌，，即即分分離離菌菌可可能能系系來來自自環(huán)環(huán)境境或或人人體體正正常常菌菌群群的的污污染染時(shí)時(shí)，，通通常常不不必必做做藥藥敏敏試試驗(yàn)驗(yàn)，，以以免免試試驗(yàn)驗(yàn)結(jié)結(jié)果果誤誤導(dǎo)導(dǎo)臨臨床床治治療療。。②當(dāng)當(dāng)某某致致病病菌菌對(duì)對(duì)某某抗抗菌菌藥藥物物高高度度敏敏感感而而從從未未見見有有耐耐藥藥情情況況報(bào)報(bào)告告時(shí)時(shí)，，常常規(guī)規(guī)藥藥敏敏試試驗(yàn)驗(yàn)可可不不進(jìn)進(jìn)行行。。③分分離離自自正正常常寄寄生生部部位位的的條條件件致致病病菌菌和和非非條條件件致致病病菌菌，，不不需需要要做做藥藥敏敏試試驗(yàn)驗(yàn)。。如如糞糞便便中中分分離離出出的的非非致致病病性性大大腸腸埃埃希希菌菌，，皮皮膚膚上上分分離離出出的的微微球球菌菌和和陰陰道道中中分分離離出出的的丙丙酸酸桿桿菌菌。。12/7/202235CLSI將將藥藥敏敏試試驗(yàn)驗(yàn)抗抗生生素素分分為為4組組A組組：：首首選選試試驗(yàn)驗(yàn)和和報(bào)報(bào)告告B組組：：首首選選試試驗(yàn)驗(yàn)但但選選擇擇報(bào)報(bào)告告C組組：：補(bǔ)補(bǔ)充充試試驗(yàn)驗(yàn)選選擇擇報(bào)報(bào)告告U組組：：僅僅用用于于泌泌尿尿系系12/7/202236臨床床用用藥藥規(guī)規(guī)則則（K-B法法））腸桿桿菌菌科科屬屬A組組（（首首選選））B組組（（次次選選））氨芐芐西西林林-10阿阿米米卡卡星星-30頭孢孢唑唑林林-30阿阿莫莫西西林林/棒棒酸酸-20/10頭孢孢噻噻吩吩-30頭頭孢孢孟孟多多-30慶大大酶酶素素-10頭頭孢孢吡吡肟肟-30。。。。。。。。。。。12/7/202237腸桿菌科科屬C組（補(bǔ)補(bǔ)選）U組（（尿標(biāo)本本）氨曲南-30羧羧芐西西林-100氯霉素-30氯氯碳頭頭孢-30卡那霉素素-30呋呋喃妥妥因-300奈替米星星-30磺磺胺異異惡唑-250。。。。。。。。。。。。。。。臨床用藥藥規(guī)則（（K-B法）12/7/202238葡萄球菌屬屬A組（首