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電話:400-998-2324郵箱:service_uplc_ms@163.com網(wǎng)址:本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用!請(qǐng)勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測(cè)等用途!-上海液質(zhì)檢測(cè)技術(shù)有限公司第第頁(yè)尿酸(UA)含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書貨號(hào)UPLC-MS-4556規(guī)格50T/24S
可見分光光度法產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系工作人員。試劑名稱規(guī)格保存條件提取液液體50mL×1瓶2-8℃保存試劑一液體80mL×1瓶2-8℃保存試劑二粉劑×2瓶2-8℃保存試劑三粉劑×1瓶2-8℃保存試劑四粉劑×1瓶2-8℃保存試劑五粉劑×1瓶-20℃保存試劑六粉劑×1瓶-20℃保存標(biāo)準(zhǔn)品液體1mL×1支2-8℃保存溶液的配制:1、試劑二:臨用前加入6mL試劑一,充分混勻后備用;用不完的試劑2-8℃保存1周。212mL2-8℃4周。312mL2-8℃4周。412mL分裝保存,避免反復(fù)凍融。-20℃4周。512mL保分裝保存,避免反復(fù)凍融。-20℃4周。6、標(biāo)準(zhǔn)品:5μmol/mL尿酸溶液。7、工作液A的配制:用于樣本測(cè)定管、空白管及標(biāo)準(zhǔn)管的檢測(cè),按照試劑二:試劑三:試劑四:試劑五:試劑六=1:1:1:1:2的比例配制,根據(jù)樣本量現(xiàn)配現(xiàn)用,配后建議2小時(shí)內(nèi)用完。8B=1:1:1:1:2的2小時(shí)內(nèi)用完。產(chǎn)品說(shuō)明:尿酸為嘌呤代謝的終末產(chǎn)物,嘌呤代謝紊亂、能量代謝異常及腎臟對(duì)尿酸的排泄障礙等均可引起血漿尿酸水平升高或降低,進(jìn)而導(dǎo)致多種疾病如通風(fēng)、腎病、心血管疾病的發(fā)生,尿酸含量的測(cè)定在臨床診斷中有著重要的指導(dǎo)意義。尿酸酶催化尿酸分解為尿囊素、CO2和H2O2,H2O2氧化亞鐵氰化鉀中的Fe2+生成Fe3+,F(xiàn)e3+進(jìn)一步與4-氨基安替比林和酚反應(yīng)生成紅色醌類化合物,在505nm處有特征吸收峰,通過(guò)測(cè)定505nm處的吸光值來(lái)計(jì)算尿酸的含量。Uric
Uricase
AanonHO2
Fe2+
Fe3+
4-AminoantipyinePhenolPOD
Quinonemine(505nm)技術(shù)指標(biāo):最低檢出限:0.0032μmol/mL線性范圍:0.003906-0.25μmol/mL2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。需自備的儀器和用品:/1mL/操作步驟:一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))1︰5~10(0.1g1mL提取液)10000rpm,4℃10min,取上清置于冰上待測(cè)。血清(漿)或尿液:直接檢測(cè)。若溶液有渾濁則離心后取上清進(jìn)行測(cè)定。二、測(cè)定步驟1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至505nm,蒸餾水調(diào)零。序號(hào)稀釋前濃度(μmol/mL)標(biāo)準(zhǔn)液體積(μL)蒸餾水體積(μL)(μmol/mL)1550950序號(hào)稀釋前濃度(μmol/mL)標(biāo)準(zhǔn)液體積(μL)蒸餾水體積(μL)(μmol/mL)15509500.2520.255005000.12530.1255005000.062540.06255005000.0312550.031255005000.01562560.0156255005000.0078備注:實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需250μL標(biāo)準(zhǔn)溶液。3. 操作表:(在1.5mL離心管中)試劑名稱(μL)對(duì)照管測(cè)定管標(biāo)準(zhǔn)管空白管樣本250250--標(biāo)準(zhǔn)溶液--250-蒸餾水250工作液A-750750750工作液B750混勻,混勻,37℃30min1mL505nmAAAAΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白1-2次。三、UA含量計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度(x,μmol/mL)和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)(y,ΔA標(biāo)準(zhǔn)),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA測(cè)定(y,ΔA測(cè)定)帶入公式計(jì)算樣本濃度(x,μmol/mL)。UA含量的計(jì)算:按樣本質(zhì)量計(jì)算UA含量(μg/g質(zhì)量)=x×V提取÷W×M=168x÷W按液體體積計(jì)算UA含量(μg/
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