生物化學(xué)習(xí)題和答案解析

xxx公司文件編號(hào)：文件日期：修訂次數(shù)：第1.0次更改批準(zhǔn)審核制定方案設(shè)計(jì)，管理制度習(xí)題試題第1單元蛋白質(zhì)（一）名詞解釋1．兼性離子（zwitterion）；2.等電點(diǎn)（isoelectricpoint,pI）；3.構(gòu)象(conformation）；4.別構(gòu)效應(yīng)(allostericeffect）；5.超二級(jí)結(jié)構(gòu)(super-secondarystructure）；6.結(jié)構(gòu)域（structuraldomain,domain）；7.蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)（tertiarystractureofprotein）；8.Edman降解法（Edmandegradation）；9.蛋白質(zhì)的變性作用(denaturationofprotein)；10.Bohr效應(yīng)（Bohreffect）；11.多克隆抗體（polyclonalantibody）和單克隆抗體（monochonalantibody）；12.分子伴侶（molecularchaperone）；13.鹽溶與鹽析(saltinginandsaltingout）。（二）填充題1.氨基酸在等電點(diǎn)時(shí)，主要以__________離子形式存在，在pH＞pI的溶液中，大部分以________離子形式存在，在pH＜pI的溶液中，大部分以________離子形式存在。2.組氨酸的pK1(α-COOH)值是1.82，pK2(咪唑基)值是6.00，pK3(α-NH3+)值是9.17，它的等電點(diǎn)是__________。3.Asp的pK1=2.09，pK2=3.86，pK3=9，82，其pI等于________。4.在近紫外區(qū)能吸收紫外光的氨基酸有________、________和_________。其中_______的摩爾吸光系數(shù)最大。5.蛋白質(zhì)分子中氮的平均含量為_______，故樣品中的蛋白質(zhì)含量常以所測氮量乘以_______即是。6.實(shí)驗(yàn)室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基與中性甲醛反應(yīng)，然后用堿(NaOH)來滴定_________上放出的__________。7.除半胱氨酸和胱氨酸外，含硫的氨基酸還有_________，除蘇氨酸和酪氨酸外，含羥基的氨基酸還有__________，在蛋白質(zhì)中常見的20種氨基酸中，__________是一種亞氨基酸，___________不含不對(duì)稱碳原子。8.蛋白質(zhì)的氨基酸殘基是由_________鍵連接成鏈狀結(jié)構(gòu)的，其氨基酸殘基的______稱蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)。9.β-折疊片結(jié)構(gòu)的維持主要依靠兩條肽鍵之間的肽鍵形成________來維持。10.在螺旋中C=O和N—H之間形成的氫鍵與_______基本平行，每圈螺旋包含_____個(gè)氨基酸殘基，高度為_______，每個(gè)氨基酸殘基使螺旋軸上升______，并沿軸旋轉(zhuǎn)______度。11.蛋白質(zhì)顆粒在電場中移動(dòng)的速率主要取決于_______的大小和_______量的多少。12.用凝膠過濾法分離蛋白質(zhì)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)在柱中滯留的時(shí)間較_______，因此最先流出凝膠柱的蛋白質(zhì)，其相對(duì)分子質(zhì)量最_______。13.血紅蛋白的輔基是________，當(dāng)其中的1個(gè)亞基與氧結(jié)合后，其余亞基與氧的親合力______，這種現(xiàn)象稱________，當(dāng)CO2或H+濃度增高時(shí)，血紅蛋白與氧的親合力_______，這種現(xiàn)象稱_________。14蛋白質(zhì)變性時(shí)空間結(jié)構(gòu)________，而一級(jí)結(jié)構(gòu)_________，變性后，蛋白質(zhì)的溶解度一般會(huì)_________，生物學(xué)功能________。15.穩(wěn)定蛋白質(zhì)膠體溶液的因素是________和________。16.凝集素是一類能與_________相互作用的蛋白質(zhì)。17.免疫球蛋白G（IgG）含有________條重鏈，_______條輕鏈，通過________鍵聯(lián)接成Y形結(jié)構(gòu)，每一分子含有_______個(gè)抗原結(jié)合部位。18.球狀蛋白質(zhì)形成空間結(jié)構(gòu)時(shí)，肽鏈的熵_________，而環(huán)境中水的熵_________。19.一般說來，球狀蛋白質(zhì)在其分子內(nèi)部含有________性氨基酸殘基，而在分子外表面含________性氨基酸殘基。20.胰蛋白酶專一性地切斷________和________的羧基端肽鍵。（三）選擇題（在備選答案中選出1個(gè)或多個(gè)正確答案）1.下列蛋白質(zhì)組分中，哪一種在280nm具有最大的光吸收？A.色氨酸的吲哚環(huán)B.酪氨酸的酚環(huán)C.苯丙氨酸的苯環(huán)D.半胱氨酸的硫原子E.肽鍵2.關(guān)于氨基酸的敘述哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的？A.酪氨酸和絲氨酸含羥基B.酪氨酸和苯丙氨酸含苯環(huán)C.亮氨酸和纈氨酸是支鏈氨基酸D.賴氨酸和精氨酸是堿性氨基酸E.谷氨酸和天冬氨酸含兩個(gè)氨基3.在pH7時(shí)，其R基帶有電荷的氨基酸是A.纈氨酸B.甘氨酸C.半胱氨酸D.酪氨酸E.賴氨酸4.每個(gè)蛋白質(zhì)分子必定具有的結(jié)構(gòu)是什么A.α-螺旋B.β-折疊C.三級(jí)結(jié)構(gòu)D.四級(jí)結(jié)構(gòu)5.下列哪一種氨基酸側(cè)鏈基團(tuán)的pKa值最接近于生理pH值？A.半胱氨酸B.谷氨酸C.谷氨酰胺D.組氨酸E.賴氨酸6.Arg的pK1ˊ=2.17，pK2ˊ=9.04，pK3ˊ=12.48其pIˊ等于A.5.613B.7.332C.7.903D.10.767.關(guān)于蛋白質(zhì)中L-氨基酸之間形成的肽鍵，下列哪些敘述是正確的A.具有部分雙鍵的性質(zhì)B.比通常的C-N單鍵短C.通常有一個(gè)反式構(gòu)型D.能自由旋轉(zhuǎn)8.典型的螺旋是A.2.610B.310C.3.613D.4.0159.維持蛋白質(zhì)分子中的α螺旋主要靠A.鹽鍵B.范德華鍵C.共價(jià)鍵D.氫鍵10.維系蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的最重要的鍵或作用力是A鹽鍵B二硫鍵C氫鍵D疏水作用力E范德華力11.血紅蛋白質(zhì)的氧合曲線是A.雙曲線B.拋物線C.S形曲線D.直線E.鐘罩形12.維持蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要化學(xué)鍵是A.肽鍵B.二硫鍵C.氫鍵D.疏水鍵13.存在于蛋白質(zhì)分子中的下列作用力，哪項(xiàng)不是次級(jí)鍵A.氫鍵B.肽鍵C.鹽鍵D.疏水鍵E.二硫鍵14.關(guān)于蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)的描述錯(cuò)誤的是A.有三級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)均有酶活性B.球蛋白均有三級(jí)結(jié)構(gòu)C.三級(jí)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性由多種次級(jí)鍵維系D.親水基團(tuán)多分布在三級(jí)結(jié)構(gòu)的表面E.決定盤曲折疊的因素是氨基酸序列15.某蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)為7.5，在pH6.0的條件下進(jìn)行電泳，它的泳動(dòng)方向是A.在原點(diǎn)不動(dòng)B.向正極移動(dòng)C.向負(fù)極移動(dòng)D.無法預(yù)測.16.用凝膠過濾層析柱分離蛋白質(zhì)時(shí)，下列哪項(xiàng)是正確的A.分子體積最大的蛋白質(zhì)最先洗脫下來B.分子體積最小的蛋白質(zhì)最先洗脫下來C.不帶電荷的蛋白質(zhì)最先洗脫來來D.帶電荷的蛋白質(zhì)最先洗脫來來E.沒有被吸附的蛋白質(zhì)最先洗脫下來17.有一蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物在pH6用陽離子交換柱層析時(shí)，第一個(gè)被洗脫下來的氨基酸是A.Val（pI為5.96）B.Lys（pI為9.74）C.Asp（pI為2.77）D.Arg（pI為10.76）18.為獲得不變性的蛋白質(zhì)，常用的方法有A.用三氯醋酸沉淀B.用苦味酸沉淀C.用重金屬鹽沉淀D.低溫鹽析E.常溫醇沉淀19.用6mol/LHCl水解某種蛋白質(zhì)時(shí)能檢出的氨基酸種類是A.20種B.19種C.18種D.17種或更少20.SDS凝膠電泳分離蛋白質(zhì)是根據(jù)各種蛋白質(zhì)A.pI的差異B.分子大小的差異C.分子極性的差異D.溶解度的差異E.以上說法都不對(duì)21.血紅蛋白的氧合曲線向右移動(dòng)是由于A.O2分壓降低B.CO2分壓降低C.CO2分壓增高D.N2分壓增高E.pH值降低22.如果要測定一個(gè)小肽的氨基酸順序，下列試劑中你認(rèn)為最合適使用哪一個(gè)A.茚三酮B.CNBrC.胰蛋白酶D.異硫氰酸苯酯23.下列有關(guān)血紅蛋白運(yùn)輸氧的敘述哪些是正確的？A.四個(gè)血紅素基各自獨(dú)立地與氧結(jié)合，彼此之間并無聯(lián)系B.以血紅蛋白結(jié)合氧的百分?jǐn)?shù)對(duì)氧分壓作圖，曲線呈S形C.氧與血紅蛋白的結(jié)合能力比一氧化碳弱D.氧與血紅蛋白的結(jié)合并不引起血紅素中鐵離子價(jià)數(shù)的變化24.關(guān)于蛋白質(zhì)變性的敘述哪些是正確的？A.蛋白質(zhì)變性是由于特定的肽鍵斷裂B.是由于非共價(jià)鍵破裂引起的C.用透析法除去尿素有時(shí)可以使變性蛋白質(zhì)復(fù)性D.變性的蛋白質(zhì)一定會(huì)沉淀25.一個(gè)生物樣品的含氮量為5%，它的蛋白質(zhì)含量為A.12.50%B.16.00%C.38.00%D.31.25%（四）判斷題1.氨基酸為氨基取代的羧酸，可直接用酸堿滴定法進(jìn)行定量測定。2.當(dāng)溶液的pH等于某一可解離基團(tuán)的pKa時(shí)，該基團(tuán)一半被解離。3.在pH很高或很低的溶液中，氨基酸主要以非離子化形式出現(xiàn)。4.肽鏈的主鏈有1/3化學(xué)鍵不能旋轉(zhuǎn)。5.溴化氰可以斷裂甲硫氨酸的氨基參與形成的肽鏈。6.體內(nèi)合成肽鏈的方向是從N端向C端，而在體外用固相化學(xué)合成法合成多肽時(shí)，通常是從C端向N端合成。7.核磁共振研究蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)的主要優(yōu)勢是可以研究溶液中的蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)，并能提供有關(guān)的動(dòng)態(tài)信息。8.在水溶液中，蛋白質(zhì)折疊形成疏水核心，會(huì)使水的熵增加。9.原子之間的距離越小，范德華引力越強(qiáng)。10.在α-螺旋中，每3.6個(gè)氨基酸繞一圈，并形成1個(gè)氫鍵。11.膠原蛋白的原膠原分子是3股右手螺旋扭曲成的左手螺旋。12.球蛋白的三維折疊多采取親水側(cè)基在外，疏水側(cè)基藏于分子內(nèi)部的結(jié)構(gòu)模式。13.胎兒血紅蛋白與2，3-二磷酸甘油（2,3—DPG）的結(jié)合力較弱。14.血紅蛋白與氧的結(jié)合能力隨pH降低而增高。15.由于一級(jí)結(jié)構(gòu)可以決定空間結(jié)構(gòu)，基因工程表達(dá)的肽鏈一定可以自然地形成天然構(gòu)象。16.測定別構(gòu)酶的相對(duì)分子質(zhì)量可以用SDS。17.當(dāng)溶液的pH小于某蛋白質(zhì)的pI時(shí)，該蛋白質(zhì)在電場中向陽極移動(dòng)。18.用凝膠過濾分離蛋白質(zhì)，小分子蛋白由于所受的阻力小首先被洗脫出來。19.若蛋白質(zhì)與陰離子交換劑結(jié)合較牢，可用增加NaCI濃度或降低pH的方法將其從層析柱洗脫出來。20.糖蛋白的N-糖肽鍵是指與天冬酰胺的γ-酰胺N原子與寡糖鏈形成糖苷鏈。23.糖蛋白的O-糖肽鍵是指氨基酸殘基的羧基O原子與寡糖鏈形成的糖苷鍵。（五）分析和計(jì)算題1.判斷氨基酸所帶的凈電荷，用pI-pH比pH-pI更好，為什么？2.分別計(jì)算谷氨酸、精氨酸和丙氨酸的等電點(diǎn)。3.在下面指出的pH條件下，下列蛋白質(zhì)在電場中向哪個(gè)方向移動(dòng)？A表示向陽極，B表示向陰極，C表示不移動(dòng)。人血清蛋白：pH5.5，pH3.5；血紅蛋白：pH7.07，pH9.0；胸腺組蛋白：pH5.0，pH8.0，pH11.5；已知：人血清蛋白的pI=4.64血紅蛋白的pI=7.07胸腺組蛋白的pI=10.8。4.簡述蛋白質(zhì)溶液的穩(wěn)定因素，和實(shí)驗(yàn)室沉淀蛋白質(zhì)的常用方法。5.簡要敘述蛋白質(zhì)形成寡聚體的生物學(xué)意義。6.在體外，用下列方法處理，對(duì)血紅蛋白與氧的親和力有何影響（

1）pH值從7.0增加到7.4；(2)CO2分壓從1000Pa增加到4000Pa；(3)O2分壓從6000Pa下降到2000Pa；(4)2,3-二磷酸甘油酸的濃度從8×10-4mol/L下降到2×10-4ol/L；（5）α2β2解聚成單個(gè)亞基。7.胎兒血紅蛋白（HbF）在相當(dāng)于成年人血紅蛋白（HbA）鏈143殘基位置含有Ser，而成年人鏈的這個(gè)位置是具陽離子的His殘基。殘基143面向亞基之間的中央空隙。（1）為什么2，3-二磷酸甘油酸（2，3-BPG）同脫氧HbA的結(jié)合比同脫氧HbF更牢固（

2）HbF對(duì)2，3-BPG低親和力如何影響到HbF對(duì)氧的親和力？這種差別對(duì)于氧從母體血液向胎兒血液的運(yùn)輸有何意義。8.試述蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的三種基本類型。9.蛋白質(zhì)變性后，其性質(zhì)有哪些變化？10.為什么大多數(shù)球狀蛋白質(zhì)在溶液中具有下列性質(zhì)。（1）在低pH值時(shí)沉淀。（2）當(dāng)離子強(qiáng)度從零逐漸增加時(shí)，其溶解度開始增加，然后下降，最后出現(xiàn)沉淀。（3）在一定的離子強(qiáng)度下，達(dá)到等電點(diǎn)pH值時(shí)，表現(xiàn)出最小的溶解度。（4）加熱時(shí)沉淀。（5）加入一種可和水混溶的非極性溶劑減小其介質(zhì)的介電常數(shù)，導(dǎo)致溶解度的減小。（6）如果加入一種非極性強(qiáng)的溶劑。使介電常數(shù)大大地下降會(huì)導(dǎo)致變性。11.凝膠過濾和SDS 均是利用凝膠，按照分子大小分離蛋白質(zhì)的，為什么凝膠過濾時(shí)，蛋白質(zhì)分子越小，洗脫速度越慢，而在SDS中，蛋白質(zhì)分子越小，遷移速度越快？12.已知牛血清白蛋白含色氨酸0.58%（按質(zhì)量計(jì)），色氨酸相對(duì)分子質(zhì)量為204。（1）計(jì)算牛血清白蛋白的最低相對(duì)分子質(zhì)量（2）用凝膠過濾測得牛血清白蛋白相對(duì)分子質(zhì)量大約為7萬，問牛血清白蛋白分子中含幾個(gè)色氨酸殘基？參考答案（一）名詞解釋1．氨基酸、蛋白質(zhì)等分子既含有酸性基團(tuán)，又含有堿性基團(tuán)，在中性pH的水溶液中，羧基等酸性基團(tuán)脫去質(zhì)子帶負(fù)電荷，氨基等堿性基團(tuán)結(jié)合質(zhì)子帶正電荷，這種既有帶負(fù)電荷基團(tuán)，又有帶正電荷基團(tuán)的離子稱兼性離子或兩性離子，亦稱偶極離子（dipolarion）2.調(diào)節(jié)兩性離子（氨基酸、蛋白質(zhì)等）溶液的pH，使該兩性離子所帶的凈電荷為零，在電場中既不向正極，也不向負(fù)極移動(dòng)，此時(shí)，溶液的pH稱該兩性離子的等電點(diǎn)（pI）。不同結(jié)構(gòu)的兩性離子有不同的pI值。3.構(gòu)象是指具有相同結(jié)構(gòu)式和相同構(gòu)型的分子在空間里可能的多種形態(tài)，構(gòu)象形態(tài)間的改變不涉及共價(jià)鍵的破裂。一個(gè)給定的蛋白質(zhì)理論上可采取多種構(gòu)象，但在生理?xiàng)l件下，只有一種或很少幾種在能量上是有利的。4.多亞基蛋白質(zhì)一般具有多個(gè)配體結(jié)合部位，結(jié)合在蛋白質(zhì)分子的特定部位上的配體對(duì)該分子的其它部位所產(chǎn)生的影響(如改變親和力或催化能力)稱為別構(gòu)效應(yīng)。別構(gòu)效應(yīng)可分為同促效應(yīng)和異促效應(yīng)。5.在蛋白質(zhì)中，特別是球狀蛋白質(zhì)中，經(jīng)?？梢钥吹接扇舾上噜彽亩?jí)結(jié)構(gòu)單遠(yuǎn)組合在一起，彼此相互作用，形成有規(guī)則、在空間上能辯認(rèn)的二級(jí)結(jié)構(gòu)組合體，充當(dāng)三級(jí)結(jié)構(gòu)的構(gòu)件，稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)在結(jié)構(gòu)的組織層次上高于二級(jí)結(jié)構(gòu)，但沒有構(gòu)成完整的結(jié)構(gòu)域。常見的超二級(jí)結(jié)構(gòu)有，，Rossman折疊，-發(fā)夾，-曲折，希臘花式拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)（Greekkeytopology）等。6.蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)常可區(qū)分成1個(gè)和數(shù)個(gè)球狀區(qū)域，折疊得較為緊密，各行其功能，稱為結(jié)構(gòu)域。7.蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)指肽鏈在二級(jí)結(jié)構(gòu)，超二級(jí)結(jié)構(gòu)，結(jié)構(gòu)域（對(duì)分子較大，由多個(gè)結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)而言）基礎(chǔ)上形成的完整空間結(jié)構(gòu)，一個(gè)三級(jí)結(jié)構(gòu)單位通常由一條肽鏈組成，但也有一些三級(jí)結(jié)構(gòu)單位是由經(jīng)二硫鍵連接的多條肽鏈組成的，如胰島素就是由兩條肽鏈折疊成的1個(gè)三級(jí)結(jié)構(gòu)單位。8.為肽鏈氨基酸測序的方法。異硫氰酸苯脂與肽段氨基末端的游離-氨基作用，再用冷稀酸處理，氨基末端殘基從肽鏈上脫落下來，成為異硫氰酸苯酯的衍生物，用層析的方法可鑒定為何種氨基酸的衍生物。殘留的肽鏈可繼續(xù)與異硫氰酸苯酯作用，逐個(gè)鑒定出氨基酸的排列順序。9.天然蛋白質(zhì)因受物理的或化學(xué)的因素影響，其分子內(nèi)部原有的高度規(guī)律性結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，致使蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)和生物學(xué)性質(zhì)都有所改變，但并不導(dǎo)致蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的破壞，這種現(xiàn)象稱變性作用。10.H+和CO2濃度增加，會(huì)降低氧和血紅蛋白的親和力，使得血紅蛋白的氧合曲線向右移動(dòng)，提高了O2從血紅蛋白的釋放量，這種作用稱作Bohy效應(yīng)。11.多克隆抗體是識(shí)別一個(gè)抗原的不同抗原決定簇的多種抗體的混合物。單克隆抗體由同一個(gè)B細(xì)胞克隆合成并分泌，是一種均一的抗體，識(shí)別同一個(gè)抗原決定簇。12.是一個(gè)協(xié)助新合成的多肽鏈正確折疊和轉(zhuǎn)運(yùn)的蛋白質(zhì)家族。它們能夠阻止部分肽段的錯(cuò)誤折疊，抑制新生肽鏈的不恰當(dāng)聚集，排除與其他蛋白質(zhì)的不合理結(jié)合，協(xié)助多肽鏈的正確折疊和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，協(xié)助寡聚蛋白的組裝。13.低濃度的中性鹽可以增加蛋白質(zhì)的溶解度，這種現(xiàn)象稱為鹽溶。鹽溶作用主要是由于蛋白質(zhì)分子吸附某種鹽類離子后，帶電層使蛋白質(zhì)分子彼此排斥，而蛋白質(zhì)分子與水分子間的相互作用卻加強(qiáng)，因而溶解度增高。當(dāng)離子強(qiáng)度增加到足夠高時(shí)，很多蛋白質(zhì)可以從水溶液中沉淀出來，這種現(xiàn)象稱為鹽析。鹽析作用主要是由于大量中性鹽的加入使水的活度降低，原來溶液中的大部分甚至全部的自由水轉(zhuǎn)變?yōu)辂}離子的結(jié)合水。鹽析法沉淀出來的蛋白質(zhì)一般不變性，且不同的蛋白質(zhì)可以用不同濃度的鹽沉淀出來，稱作分段鹽析。鹽析法是對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行粗分離的常用方法。（二）填充題1.兩性，負(fù)，正；2.7.59；3.2.97；4.苯丙氨酸，酪氨酸，色氨酸，色氨酸；5.16%，6.25；6.，H+；7.甲硫氨酸，絲氨酸，脯氨酸，甘氨酸；8.肽，排列順序；9.氫鍵；10.螺旋軸，3.6，0.54，0.15，100；11.分子，凈電荷；12.長，大；13.血紅素，增加，正協(xié)同效應(yīng)，下降，Bohr效應(yīng)；14.破壞，不變，下降，喪失；15.水化層，雙電層；16.糖基；17.2，2，二硫，2；18.減少，增加；19.疏水，親水；20.賴氨酸，精氨酸；（三）選擇題1.（A）色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸在280nm的摩爾消光系數(shù)分別為5500，540，120，顯然色氨酸的光吸收最大。由于大多數(shù)蛋白質(zhì)中含酪氨酸的量比色氨酸多，蛋白質(zhì)在280nm處的光吸收主要來源于酪氨酸。肽鍵在215nm處具有最大的光吸收，胱氨酸中的二硫鍵在240nm處只有微弱的光吸收。半胱氨酸中的硫原子在這一波長范圍內(nèi)無明顯光吸收。2.（E）谷氨酸和天冬氨酸含有兩個(gè)羧基，而不是含有兩個(gè)氨基。其它選項(xiàng)的敘述均是正確的。3.（E）在pH7時(shí)，賴氨酸的R基上的帶有正電荷，纈氨酸和甘氨酸的R基不含可解離的基團(tuán)，半胱氨酸的-SH和酪氨酸的-OH在pH7時(shí)不可能解離，因而不會(huì)帶電荷。4.（C）α-螺旋是蛋白質(zhì)常見的、最典型的一種結(jié)構(gòu)元件。而絲心蛋白沒有α-螺旋結(jié)構(gòu)。羊毛、豬毛、鳥毛等蛋白質(zhì)幾乎全是α-螺旋結(jié)構(gòu)，不存在β-折疊。不少蛋白質(zhì)沒有四級(jí)結(jié)構(gòu)，但所有的蛋白質(zhì)都具有三級(jí)結(jié)構(gòu)。5.（D）組氨酸咪唑基的為6.0，最接近于生理pH值。6.（D）Arg是堿性氨基酸，其等電點(diǎn)pI=1/2（pK2+pK3）=1/2（9.02+12.48）7.（A，B，C）肽鍵的部分雙鍵性質(zhì)防止了肽鍵的自由旋轉(zhuǎn)。肽鍵通常有反式構(gòu)型，并且比C-N單鍵短。8.（C）典型的螺旋是3.613。表示每圈螺旋包含3.6個(gè)氨基酸殘基，氫鍵所封閉的環(huán)有13個(gè)原子。9.（D）α螺旋的構(gòu)象是相當(dāng)穩(wěn)定的，這是因?yàn)樗邪被釟埢妳⑴c了鏈內(nèi)氫鍵的形成。10.（D）維持蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)最主要的作用力是疏水作用力，二硫鍵是一種很強(qiáng)的共價(jià)鍵，但蛋白質(zhì)形成特定的空間結(jié)構(gòu)，最主要的作用力是氨基酸殘基側(cè)鏈的疏水相互作用。11.（C）血紅蛋白與氧的結(jié)合有正協(xié)同效應(yīng)，所以氧合曲線呈S形。12..（C）蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)如螺旋，折疊，轉(zhuǎn)角等均是由氫鍵維持的。13.(B，E)肽鍵和二硫鍵屬于共價(jià)鍵，氫鍵、鹽鍵、疏水鍵、范德華力屬于次級(jí)鍵。14.（A）有些有三級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)沒有催化功能。15.（C）在pH6.0的條件下，pI為7.5的蛋白質(zhì)帶正電荷，向負(fù)極移動(dòng)。16..（A）凝膠過濾時(shí)，分子體積最大的蛋白質(zhì)最先被洗脫，蛋白質(zhì)的帶電狀況和吸附作用對(duì)洗脫速度影響不大。17.（C)氨基酸與陽離子交換樹脂作用力的大小次序是堿性氨基酸>中性氨基酸>酸性氨基酸。溶液的pH高于等電點(diǎn)時(shí)氨基酸帶正電，低于等電點(diǎn)時(shí)氨基酸帶負(fù)電。選項(xiàng)中Arg（pI為10.76）所帶正電荷最多，與交換樹脂親和力最強(qiáng)，后被洗脫。Asp（pI為2.77）所帶負(fù)電荷最多，與交換樹脂親和力最弱，先被洗脫。18.（D）低溫鹽折沉淀的蛋白質(zhì)不會(huì)變性，題中列出的其它方法沉淀的蛋白質(zhì)均會(huì)變性。19.(D)用6mol/LHCl水解蛋白質(zhì)時(shí)，色氨酸完全破壞，天冬酰胺被水解成天冬氨酸，谷氨酰胺被水解成谷氨酸，絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸遭到部分破壞。20.（B）SDS使蛋白質(zhì)解離成亞基，并結(jié)合大量的SDS，從而使蛋白質(zhì)分子帶有足夠的負(fù)電荷，消除了蛋白質(zhì)分子原有的電荷差異，所以電泳速度只取決于蛋白質(zhì)分子的大小。21.（C，E）曲線向右移動(dòng)表明血紅蛋白結(jié)合氧的能力降低，降低pH值或增加CO2的分壓均會(huì)導(dǎo)致血紅蛋白與氧親和力的下降，促使氧合血紅蛋白釋放氧，這就是所謂的波耳（Bohr）效應(yīng)。22.(D)茚三酮反應(yīng)可以鑒定并定量測定各種氨基酸，CNBr只斷裂由甲硫氨酸殘基的羧基參加形成的肽鏈，胰蛋白酶是蛋白水解酶，只斷裂賴氨酸或精氨酸殘基的羧基參與形成的肽鍵，多肽或蛋白質(zhì)的末端氨基能與異硫氰酸苯酯反應(yīng)，生成PTC-多肽或蛋白質(zhì)。此方法可以用來測定氨基酸序列。23.（B，C，D）由于分子中四個(gè)氧結(jié)合位的協(xié)同作用使其飽和曲線呈S形。氧與血紅蛋白結(jié)合并不引起亞鐵離子價(jià)數(shù)的變化。一氧化碳和氰化物與血紅蛋白的親和力比氧大。24.（B，C）蛋白質(zhì)變性是由于次級(jí)鏈破裂引起空間結(jié)構(gòu)破壞，但一級(jí)結(jié)構(gòu)保持完整，用透析法除去尿素有時(shí)可以使變性蛋白質(zhì)復(fù)性，稀溶液中的蛋白質(zhì)用弱酸、弱堿等變性后，有時(shí)可以不沉淀。25.(D)各種蛋白質(zhì)含氮量的平均值是16%。因此含氮量為5%，它的蛋白質(zhì)含量為5х6.25=31.25%（四）判斷題1.錯(cuò)。不能用酸堿滴定法直接進(jìn)行滴定，只能用甲醛滴定法滴定氨基。2.對(duì)。4.對(duì)。在多肽鏈的主鏈中1/3為不能旋轉(zhuǎn)的肽鍵。5.錯(cuò)。溴化氰專一性地?cái)嗔鸭琢虬彼岬聂然鶇⑴c形成的肽鍵。6.對(duì)。7.對(duì)。8.對(duì)。9.錯(cuò)。原子間的距離小于兩個(gè)原子的范德華半徑之和會(huì)產(chǎn)生范德華斥力。10.錯(cuò)。-螺旋每3.6個(gè)氨基酸繞一圈，但除螺旋一端的4個(gè)-N-H和另一端的4個(gè)-C=0不參與形成氫鍵外，其余的-N-H和-C=0均參與氫鍵的形成。11.錯(cuò)。原膠原分子是由3股左手螺旋扭曲成的右手螺旋。12.對(duì)。13.對(duì)。胎兒血紅蛋白與2，3-DPG的結(jié)合力弱，因而與氧的結(jié)合力強(qiáng)，有利于胎兒從母體血液獲取氧。14.錯(cuò)。隨著pH的降低，血紅蛋白與氧的結(jié)合力降低，這有利于血紅蛋白在CO2含量較高的組織釋放氧。15.錯(cuò)。真核生物的蛋白質(zhì)折疊常有分子伴侶參與，所以，用原核生物表達(dá)的真核蛋白質(zhì)不一定能自然地形成天然構(gòu)象。另外，基因工程表達(dá)的蛋白質(zhì)有時(shí)會(huì)形成包含體，需要先分離包含體，裂解包含體后，再使蛋白質(zhì)復(fù)性，才能形成天然構(gòu)象。16.錯(cuò)。別構(gòu)酶一般由多個(gè)亞基構(gòu)成，SDS只能測定亞基的相對(duì)分子質(zhì)量。17.錯(cuò)。當(dāng)溶液的pH小于某蛋白質(zhì)的pI時(shí)，該蛋白質(zhì)帶凈正電荷，向陰極移動(dòng)。18.錯(cuò)。用凝膠過濾法分離蛋白質(zhì)時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)先流出層析柱。19.對(duì)。20.對(duì)。21.錯(cuò)。O-糖肽鍵是指氨基酸殘基的羥基O原子與寡糖鏈形成的糖苷鍵。（五）分析和計(jì)算題1.當(dāng)一種氨基酸的凈電荷用q=pI-pH表達(dá)時(shí)，若q為正值，則該氨基酸帶正電荷；若q為負(fù)值，則該氨基酸帶負(fù)電荷。q值的正與負(fù)和該氨基酸所帶電荷的種類是一致的。如果采用q=pH-pI來表達(dá)，則會(huì)出現(xiàn)相反的結(jié)果，即q為負(fù)值時(shí)，氨基酸帶正電荷；q為正值時(shí)，氨基酸帶負(fù)電荷。因此，用pI-pH更好。2.每個(gè)氨基酸可解離基團(tuán)的pKa在生化書中可以查到（也可根據(jù)酸堿滴定曲線確定），氨基酸的凈電荷為零時(shí)溶液的pH（即等電點(diǎn)，pI）在滴定曲線上位于兩個(gè)相應(yīng)基團(tuán)pKa之間的中點(diǎn)，在這兩個(gè)pKa點(diǎn)上，它們的凈電荷分別是+0.5和-0.5。因此：（1）根據(jù)谷氨酸的解離曲線，其pI應(yīng)該是它的-羧基和側(cè)鏈羧基pK。值之和的算術(shù)平均值，即pI=（2.1+4.07）/2=3.08；（2）精氨酸pI應(yīng)該是它的-氨基和側(cè)鏈胍基的pK。和之的算術(shù)平均值，即pI=（8.99+12.48）/2=10.7；（3）丙氨酸pI應(yīng)該是它的-氨基和-羧基pKa值之和的算術(shù)平均值，即pI=(2.35+9.87)/2=6.11。3.人血清蛋白的pI=4.64，在pH5.5的電場中帶負(fù)電荷，向陽極移動(dòng)；在pH3.5的電場中帶正電荷，向負(fù)極移動(dòng)。血紅蛋白的pI=7.07，在pH7.07不帶凈電荷，在電場中不移動(dòng)；在pH9.0時(shí)帶負(fù)電荷，向陽極移動(dòng)。胸腺組蛋白的pI=10.8，在pH5.0和pH8.0時(shí)帶正電荷，向陰極移動(dòng)；在pH11.5時(shí)帶負(fù)電荷，在電場中向陽極移動(dòng)。4.維持蛋白質(zhì)溶液穩(wěn)定的因素有兩個(gè)：（1）水化膜：蛋白質(zhì)顆粒表面大多為親水基團(tuán)，可吸引水分子，使顆粒表面形成一層水化膜，從而阻斷蛋白質(zhì)顆粒的相互聚集，防止溶液中蛋白質(zhì)的沉淀析出。（2）同種電荷：在pH≠pI的溶液中，蛋白質(zhì)帶有同種電荷。若pH＞pI，蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷；若pH<pI，蛋白質(zhì)帶正電荷。同種電荷相互排斥，阻止蛋白質(zhì)顆粒相互聚集而發(fā)生沉淀。沉淀蛋白質(zhì)的方法，常用的有：（1）鹽析法，在蛋白質(zhì)溶液加入大量的硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等中性鹽，去除蛋白質(zhì)的水化膜，中和蛋白質(zhì)表面的電荷，使蛋白質(zhì)顆粒相互聚集，發(fā)生沉淀。用不同濃度的鹽可以沉淀不同的蛋白質(zhì)，稱分段鹽析。鹽析是對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行粗分離的常用方法。（2）有機(jī)溶劑沉淀法：使用丙酮沉淀時(shí)，必須在0～4℃低溫下進(jìn)行，丙酮用量一般10倍于蛋白質(zhì)溶液的體積，蛋白質(zhì)被丙酮沉淀時(shí)，應(yīng)立即分離，否則蛋白質(zhì)會(huì)變性。除了丙酮以外，也可用乙醇沉淀。此外，還可用加重金屬鹽，加某些有機(jī)酸，加熱等方法將樣品中的蛋白質(zhì)變性沉淀。5.（1）能提高蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。亞基結(jié)合可以減少蛋白質(zhì)的表面積/體積比，使蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性增高。（2）提高遺傳物質(zhì)的經(jīng)濟(jì)性和有效性。編碼一個(gè)能裝配成同聚體的單位所需的基因長度比編碼一個(gè)與同聚體相同相對(duì)分子質(zhì)量的超長肽鏈所需的基因長度要小得多（如煙草花葉病毒的外殼有2130多個(gè)亞基）。（3）形成功能部位。不少寡聚蛋白的單體相互聚集可以形成新的功能部位。（4）形成協(xié)同效應(yīng)。寡聚蛋白與配體相互作用時(shí)，有可能形成類似血紅蛋白或別構(gòu)酶那樣的協(xié)同效應(yīng)，使其功能更加完善。有些寡聚蛋白的不同亞基可以執(zhí)行不同的功能，如一些酶的亞基可分為催化亞基和調(diào)節(jié)亞基。6.（1）pH值增加，Hb與氧的親和力增加。（2）CO2分壓增加，Hb與氧的親和力下降。（3）O2分壓下降，Hb與氧的親和力下降。（4）2，3-DPG濃度下降，Hb與氧的親和力增加。（5）α2β2解聚成單個(gè)亞基，Hb與氧的親和力增加。7.（1）由于2，3-BPG是同脫氧HbA中心空隙帶正電荷的側(cè)鏈結(jié)合，而脫氧HbF缺少帶正電荷的側(cè)鏈，因此2，3-BPG是同脫氧HbA的結(jié)合比同脫氧Hb