不發(fā)酵革蘭陰性桿菌課件

第9章不發(fā)酵革蘭陰性桿菌精選課件1第9章不發(fā)酵革蘭陰性桿菌精選課件1不發(fā)酵革蘭陰性桿菌

概述定義：一大群不發(fā)酵葡萄糖或僅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厭氧、無芽胞的革蘭陰性桿菌；多為條件致病菌。鮑曼不動桿菌革蘭染色精選課件2不發(fā)酵革蘭陰性桿菌

概述定義：一大群不發(fā)酵葡萄糖或僅以氧不發(fā)酵革蘭陰性桿菌假單胞菌屬(Pseudomonas)產(chǎn)堿桿菌屬(Alcaligenes)不動桿菌屬(Acinetobacter)莫拉菌屬(Moraxella)無色桿菌屬(Achromobacter)金氏桿菌屬(Kingella)黃桿菌屬(Flavobacterium)艾肯菌屬(Eikenella)

土壤桿菌屬(Agrobacterium)

黃單胞菌屬(Xanthomonas)

叢毛單胞菌屬(Comamonas)

精選課件3不發(fā)酵革蘭陰性桿菌假單胞菌屬黃桿菌屬精選課件3常見不發(fā)酵革蘭陰性桿菌的初步分群鑒定試驗假單胞菌屬無色桿菌屬黃桿菌屬不動桿菌屬產(chǎn)堿桿菌屬叢毛菌屬莫拉菌屬氧化酶+++/--+++/-O/F試驗O/-OOO/----動力+/-+/-+/--++-注：+：90%以上陽性；-10%以下的陽性；+/-：約70%為陽性；O：為氧化。不發(fā)酵革蘭陰性桿菌精選課件4常見不發(fā)酵革蘭陰性桿菌的初步分群鑒定試驗假單胞菌屬無色桿菌屬

第一節(jié)假單胞菌屬

（Pseudomonas）一、概述

1．分類

2．臨床意義

3．微生物檢驗

(1)

檢驗程序

(2)

鑒定

(3)

藥物敏感性試驗(AntibacterialSusceptibilityTest)精選課件5第一節(jié)假單胞菌屬

假單胞菌屬

1．分類假單菌屬按rRNA同源性分群，現(xiàn)把馬勒伯克霍爾德菌屬，嗜麥芽窄食單胞菌屬從假單胞菌屬分出。一群需氧、不發(fā)酵葡萄糖，無芽胞，有鞭毛；氧化酶陽性的革蘭陰性桿菌；多為條件致病菌。精選課件6假單胞菌屬

1．分類假單菌屬按rRNA同源性分群假單胞菌屬

2．臨床意義假單胞菌屬分布廣泛，人類不發(fā)酵菌感染中，假單胞菌占70％～80％，主要為銅綠假單胞菌。精選課件7假單胞菌屬

2．臨床意義精選課件7假單胞菌屬

3．微生物檢驗(1)檢驗程序

(2)培養(yǎng)鑒定革蘭陰性、無芽胞、專性需氧。有端鞭毛或叢鞭毛。生長溫度范圍廣，最適生長溫度為35℃。產(chǎn)生各種水溶性色素：綠膿素、膿玉紅素、熒光素、膿褐素(3)藥物敏感性試驗按CLSI（ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute）推薦，分為4組：A、B、C、Ｄ／Ｕ。精選課件8假單胞菌屬

3．微生物檢驗(1)檢驗程

致病機制

粘附素：黏附結構成分多糖似莢膜物質

毒素內毒素：LPS毒力因子外毒素：A阻止真核細胞蛋白質合成

S干擾吞噬殺菌作用綠膿素：具有氧化還原活性，催化超氧化物和過氧化氫產(chǎn)生有毒基團酶類彈性蛋白酶:絲氨酸蛋白酶（Las-A）降解彈性鋅金屬蛋白酶（Las-B）蛋白磷脂酶C:分解脂質和卵磷脂，損傷組織細胞銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)精選課件9致病機制銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)精選銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)

3．微生物檢驗（1）檢驗程序（2）顯微鏡涂片革蘭陰性，長短不一，單鞭毛。銅綠假單胞菌革蘭染色精選課件10銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)

3．微生物檢驗（銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)血平板上毛玻璃樣，金屬光澤，生姜味可產(chǎn)生多種色素熒光素與綠膿素銅綠假單胞菌產(chǎn)熒光素精選課件11銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)血平板上毛玻璃樣，銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)銅綠假單胞菌產(chǎn)綠膿素精選課件12銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)銅綠假單胞菌產(chǎn)綠膿銅綠假單胞菌（P.aeruginosa）（3）分離培養(yǎng)與鑒定：標本可接種于血瓊脂平板培養(yǎng)基和選擇性培養(yǎng)基，生長溫度25℃～42℃。生化鑒定：氧化酶陽性、還原硝酸鹽、分解尿素、精氨酸酶陽性。精選課件13銅綠假單胞菌（P.aeruginosa）（3）分離培養(yǎng)銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)（4）抗原檢測：血清學分型、噬菌體分型。（5）核酸檢測：質粒指紋圖分析、脈沖場凝膠電泳分析（PFGEpulsedfieldgelelectrophoresis）、基因芯片、PCR技術、16SrDNA分型鑒定技術。精選課件14銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)（4）抗原檢測：血銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)（６）檢驗結果分析與報告：

診斷一定要與臨床表現(xiàn)相結合。治療過程中，3～4天后重復藥敏測試。精選課件15銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)（６）檢驗結果分析耐藥機制：1.產(chǎn)酶金屬酶，OXA酶。2.外膜蛋白的改變（Outermembraneproteins，OMP）為主要機制。3.主動泵出機制對喹諾酮類。

MexA-MexB-OprM及MecC-MexD-Oprj4.整合子1類，3類。銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)精選課件16耐藥機制：銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)精選課件第二節(jié)伯克霍爾德菌屬屬于rRNA第II群。洋蔥伯克霍爾德菌(Burkholderiacepacia)馬勒伯克霍爾德菌(Burkholderiamallei)偽馬勒伯克霍爾德菌(Burrkholderiapseudomeuei)精選課件17第二節(jié)伯克霍爾德菌屬屬于rRNA第II群。精選課件17克霍爾德菌屬

一、臨床意義1．洋蔥伯克霍爾德菌醫(yī)院感染的常見病原菌之一；引起敗血癥、肺炎、傷口感染、膿腫等；囊性纖維化和慢性肉芽腫患者呼吸道感染的機會致病菌。精選課件18克霍爾德菌屬

一、臨床意義1．洋蔥伯克霍爾德菌精選課件18克霍爾德菌屬

一、臨床意義2．馬勒伯與偽馬勒伯克霍爾德菌鼻疽病與類鼻疽病的病原體；（肺鼻疽病、皮膚鼻疽病、內臟膿腫、菌血癥、膿毒血癥）。人類感染是經(jīng)傷口、黏膜、呼吸道。急性患者可有高熱、衰竭等全身癥狀。為人獸共患病原菌；可能成為生物恐怖的細菌。精選課件19克霍爾德菌屬

一、臨床意義2．馬勒伯與偽馬勒伯克霍爾德菌精伯克霍爾德菌屬

二、微生物檢驗1．顯微鏡涂片革蘭陰性桿菌無芽胞、無莢膜。洋蔥伯克霍爾德菌革蘭染色洋蔥伯克霍爾德菌革蘭染色精選課件20伯克霍爾德菌屬

二、微生物檢驗1．顯微鏡涂片洋蔥伯克霍爾德菌伯克霍爾德菌

二、微生物檢驗2．抗原檢測馬勒伯克霍爾德菌與偽馬勒伯克霍爾德菌熒光直接法染色鏡檢，可快速診斷。精選課件21伯克霍爾德菌

二、微生物檢驗2．抗原檢測精選課件21伯克霍爾德菌屬

二、微生物檢驗3．分離培養(yǎng)與鑒定需氧菌；生長溫度35℃。（血瓊脂、麥康凱）洋蔥伯克霍爾德菌生長較緩慢；含鐵培養(yǎng)基上可產(chǎn)生亮黃色色素馬勒鼻伯克霍爾德菌無鞭毛無動力，42℃不生長偽馬勒鼻伯克霍爾德菌一端有叢鞭毛(1~4根)，4℃不能生長生化鑒定精選課件22伯克霍爾德菌屬

二、微生物檢驗3．分離培養(yǎng)與鑒定精選課件第三節(jié)嗜麥芽窄食單胞菌

一、分類

屬于假單胞菌科的rRNA同源群Ⅴ。嗜麥芽窄食單胞菌（S.maltophilia）和S.africana。

精選課件23第三節(jié)嗜麥芽窄食單胞菌

一、分類精選課件23嗜麥芽窄食單胞菌

二、臨床意義為條件致病菌。呼吸道、泌尿道、傷口等部位感染，菌血癥及心內膜炎。在不發(fā)酵菌引起的感染中，僅次于銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌，居臨床分離陽性率的第三位。精選課件24嗜麥芽窄食單胞菌

二、臨床意義精選課件24嗜麥芽窄食單胞菌

三、微生物檢驗1．顯微鏡涂片

革蘭陰性，端鞭毛，

(1~8)根，有動力、無芽孢、無莢膜。嗜麥芽窄食單胞菌革蘭染色精選課件25嗜麥芽窄食單胞菌

三、微生物檢驗嗜麥芽窄食單胞菌革蘭染色精

嗜麥芽窄食單胞菌三、微生物檢驗2．分離培養(yǎng)與鑒定（１）分離培養(yǎng)：生長溫度為35℃，4℃不長，血瓊脂、普通培養(yǎng)基。菌落中等大小、圓形、光滑、濕潤、產(chǎn)生不溶血的黃色色素。嗜麥芽窄食單胞菌麥康凱培養(yǎng)基菌落

精選課件26

嗜麥芽窄食單胞菌三、微生物檢驗嗜麥芽窄食單胞菌麥康凱培養(yǎng)基嗜麥芽窄食單胞菌

三、微生物檢驗2．分離培養(yǎng)與鑒定（２）生化鑒定

氧化酶陰性；液化明膠、水解七葉苷；賴氨酸脫羧酶陽性。氧化分解麥芽糖。精選課件27嗜麥芽窄食單胞菌

三、微生物檢驗精選課件27嗜麥芽窄食單胞菌

四、藥物敏感試驗及結果解釋治療首選磺胺類：TMP/SMZ；喹锘酮類：環(huán)丙氟派酸或替卡西林/棒酸。泰能(Imipenem)天然耐藥。藥敏試驗紙片法僅有三種抗生素：左氧氟沙星、米諾環(huán)素、復方磺胺有折點。其他藥敏試驗應選用肉湯、瓊脂稀釋法作MIC，或采用E-TEST的方法。精選課件28嗜麥芽窄食單胞菌

四、藥物敏感試驗及結果解釋精選課件28第四節(jié)不動桿菌屬

一、分類醋酸鈣不動桿菌(A.calcoaceticus)

洛菲不動桿菌(A.lwoffi)

溶血不動桿菌(A.haemolgticus)

鮑曼不動桿菌(A.baumannii)

瓊氏不動桿菌(A.junii)

約翰遜不動桿菌(A.johnsonii)

精選課件29第四節(jié)不動桿菌屬

一、分類精選課件29不動桿菌屬

二、臨床意義為條件致病菌在不發(fā)酵菌的感染中僅次于假單胞菌，近年呈上升趨勢。精選課件30不動桿菌屬

二、臨床意義精選課件30不動桿菌屬

三、微生物檢驗1．檢驗程序2．顯微鏡涂片

革蘭陰性桿菌，多為球桿狀，常見成對排列無芽胞，無鞭毛鮑曼不動桿菌革蘭染色鮑曼不動桿菌革蘭染色精選課件31不動桿菌屬

三、微生物檢驗1．檢驗程序鮑曼不動桿菌革蘭染色精不動桿菌屬

四、微生物檢驗2．分離培養(yǎng)與鑒定專性需氧菌生長溫度為35℃

普通培養(yǎng)基，麥康凱、血平板均生長氧化酶陰性，動力陰性，硝酸鹽試驗陰性精選課件32不動桿菌屬

四、微生物檢驗2．分離培養(yǎng)與鑒定精選課件32不動桿菌屬

四、微生物檢驗鮑曼不動桿菌菌落在血瓊脂培養(yǎng)基可形成圓形、灰白色、光滑、邊緣整齊、直徑2~3mm的菌落洛菲不動桿菌菌落小，直徑為1~1.5mm

鮑曼不動桿菌麥康凱培養(yǎng)基菌落精選課件33不動桿菌屬

四、微生物檢驗鮑曼不動桿菌菌落鮑曼不動桿菌麥康不動桿菌屬

五、藥物敏感試驗及結果解釋Kirby-Bauer法做藥敏試驗，藥物的選擇與假單胞菌抗生素的分組相同。鮑曼氏不動桿菌，對全部氨基青霉素、一代二代頭孢菌素和一代喹諾酮類抗生素天然耐藥。精選課件34不動桿菌屬

五、藥物敏感試驗及結果解釋精選課件34第五節(jié)產(chǎn)堿桿菌屬

一、分類糞產(chǎn)堿桿菌(A.faecalis)

皮喬特產(chǎn)堿桿菌(A.Piechaudii)

糞產(chǎn)堿桿菌亞型(A.faecalistypeⅡ)

木糖氧化產(chǎn)堿桿菌(A.xylosoxidans)

脫硝亞種(Subsp.denitrificans)

木糖氧化亞種(Subsp

xylosoxidans)

精選課件35第五節(jié)產(chǎn)堿桿菌屬

一、分類糞產(chǎn)堿桿菌(A.faec產(chǎn)堿桿菌屬二、臨床意義人體的正常菌群醫(yī)院感染的病原菌之一精選課件36產(chǎn)堿桿菌屬二、臨床意義精選課件36產(chǎn)堿桿菌屬

三、微生物檢驗1．顯微鏡涂片革蘭氏陰性桿菌周鞭毛、有動力糞產(chǎn)堿桿菌革蘭染色精選課件37產(chǎn)堿桿菌屬

三、微生物檢驗糞產(chǎn)堿桿菌革蘭染色精選課件37產(chǎn)堿桿菌屬

三、微生物檢驗2．分離培養(yǎng)與鑒定最適生長溫度為25℃~35℃，普通培養(yǎng)基上生長糞產(chǎn)堿桿菌麥康凱培養(yǎng)基菌落精選課件38產(chǎn)堿桿菌屬

三、微生物檢驗糞產(chǎn)堿桿菌麥康凱培養(yǎng)基菌落精選課件產(chǎn)堿桿菌屬

三、微生物檢驗pH至8.6為本菌特點氧化酶陽性觸酶陽性不分解任何糖類

O-F基礎培養(yǎng)呈堿性脲素酶陰性不液化明膠糞產(chǎn)堿桿菌O-F基礎培養(yǎng)呈堿性精選課件39產(chǎn)堿桿菌屬

三、微生物檢驗pH至8.6為本菌特點糞產(chǎn)堿桿第六節(jié)黃桿菌屬

一、分類短黃桿菌(F.breve)

腦膜炎敗血性黃桿菌(F.meningospticum)芳香黃桿菌(F.odoratum)水田黃桿菌(F.mizutaii)嗜糖黃桿菌(F.multrivorum)

嗜醇黃桿菌(F.spiritivorum)

嗜溫黃桿菌(F.thalpophilum)

藪內黃桿菌(F.gaduuchiae)

Ⅱb群黃桿菌(F.groupⅡb)

Ⅱe群黃桿菌(F.groupⅡe)

Ⅱh群黃桿菌(F.groupⅡh)

Ⅱi群黃桿菌(F.groupⅡi)

精選課件40第六節(jié)黃桿菌屬

一、分類短黃桿菌嗜溫黃桿菌(F.thal黃桿菌屬

二、臨床意義是條件致病菌醫(yī)院感染的常見菌之一引起敗血癥、新生兒及嬰幼兒的化膿性腦膜炎精選課件41黃桿菌屬

二、臨床意義精選課件41黃桿菌屬

三、微生物檢驗1．顯微鏡涂片革蘭陰性桿菌無鞭毛、無動力、無莢膜、無芽胞腦膜炎敗血性黃桿菌革蘭染色精選課件42黃桿菌屬

三、微生物檢驗腦膜炎敗血性黃桿菌革蘭染色精選課件黃桿菌屬

三、微生物檢驗2．分離培養(yǎng)與鑒定需氧代謝氧化酶、觸酶、磷酸酶陽性腦膜炎敗血性黃桿菌菌落精選課件43黃桿菌屬

三、微生物檢驗腦膜炎敗血性黃桿菌菌落精選課件43黃桿菌屬三、微生物檢驗2．分離培養(yǎng)與鑒定血瓊脂培養(yǎng)基生長溫度為35℃

菌落：光滑、有光澤、邊緣整齊，淡黃色，也有的呈黃色或棕黃色腦膜炎敗血性黃桿菌血培養(yǎng)菌落精選課件44黃桿菌屬2．分離培養(yǎng)與鑒定腦膜炎敗血性黃桿菌血培養(yǎng)菌落精選課黃桿菌屬

四、藥物敏感試驗及結果解釋

臨床經(jīng)驗用藥可選磺胺及大環(huán)內脂類的紅霉素。臨床上常見的腦膜炎敗血黃桿菌及芳香黃桿菌等對廣譜抗菌藥有耐藥性，所以最好根據(jù)藥敏試驗選擇用藥。精選課件45黃桿菌屬

四、藥物敏感試驗及結果解釋精選課件45第七節(jié)莫拉菌屬

一、分類莫拉菌屬(Moraxella)屬莫拉菌科（Moraxellaceae）醫(yī)學上重要的莫拉菌有：腔隙莫拉菌（M.lacunata）卡他莫拉菌（M.catarrhalis）非液化莫拉菌(M.nonliquefaciens)

奧斯陸莫拉菌(M.osloensis)

亞特蘭大莫拉菌(M.atlantae)

狗莫拉菌(M.canis)林肯莫拉菌(M.lincolnii)

精選課件46第七節(jié)莫拉菌屬

一、分類莫拉菌屬(Moraxella)屬莫莫拉菌屬

二、臨床意義引起眼結膜炎、氣管炎、肺炎、腦膜炎、腦膿腫、心包炎、心內膜炎及泌尿生殖系統(tǒng)炎癥。精選課件47莫拉菌屬

二、臨床意義精選課件47莫拉菌屬

三、微生物檢驗1.顯微鏡涂片革蘭陰性球桿菌，呈雙短鏈狀排列，具有多形性。

非液化莫拉菌革蘭染色精選課件48莫拉菌屬

三、微生物檢驗非液化莫拉菌革蘭染色精選課件48莫拉菌屬

三、微生物檢驗

2.分離培養(yǎng)與鑒定營養(yǎng)要求較高。生長溫度32℃~35℃。血瓊脂平板上生長良好。針尖大小的圓形凸起、光滑、半透明、邊緣整齊不溶血的菌落。非液化莫拉菌血培養(yǎng)菌落精選課件49莫拉菌屬

三、微生物檢驗

2.分離培養(yǎng)與鑒定非液化莫拉菌血培莫拉菌屬

三、微生物檢驗

2.分離培養(yǎng)與鑒定鑒定氧化酶陽性觸酶陽性無動力不分解任何糖類吲哚試驗陰性精選課件50莫拉菌屬

三、微生物檢驗

2.分離培養(yǎng)與鑒定精選課件50莫拉菌屬

四、藥物敏感試驗及結果解釋對青霉素類敏感對頭孢類、四環(huán)素類、喹諾酮類、氨基糖甙類藥物均為敏感腦炎或腦膜炎、腦膿腫應注意藥物通過血腦屏障的問題精選課件51莫拉菌屬

四、藥物敏感試驗及結果解釋精選課件51第八節(jié)軍團菌屬

一、分類軍團菌屬(Legionella)屬于軍團菌科（Legionellaceae）常見的與人類疾病有關的軍團菌：嗜肺軍團菌（Legionellapneumophila）米克戴德軍團菌（L.micdadei）長灘軍團菌（L.longbeachae）杜莫夫軍團菌（L.dumoffii）波茲曼軍團菌（L.bozemanii）精選課件52第八節(jié)軍團菌屬

一、分類軍團菌屬(Legionella)軍團菌屬

二、臨床意義引起肺炎型和非肺炎型（龐蒂亞克熱Pontiacfever）感染。肺炎型:多器官損害，肺部、消化道及神經(jīng)系統(tǒng)癥狀及體征，致死率高。醫(yī)院感染可高達23%。慢性心、肺、腎病變、艾滋病或接受免疫抑制劑者易發(fā)本病，且死亡率高達45%。精選課件53軍團菌屬

二、臨床意義引起肺炎型和非肺炎型（龐蒂亞克熱Pon軍團菌屬

二、臨床意義空氣-乳膠微粒傳播發(fā)病機制:1.內毒素和細胞產(chǎn)生的多種酶

2.裂解紅細胞

3.消化卵黃囊精選課件54軍團菌屬

二、臨床意義精選課件54軍團菌屬

三、微生物檢驗

1．標本采集及處理臨床標本以痰、氣管分泌物、胸水和血液為主。病理組織標本，必須制成懸液，再進行涂片和分離培養(yǎng)。環(huán)境污染標本，應先濃縮再接種。精選課件55軍團菌屬

三、微生物檢驗

1．標本采集及處理精選課件55軍團菌屬

三、微生物檢驗2．顯微鏡涂片革蘭陰性桿菌菌體呈線狀無芽胞，無莢膜，有端鞭毛或側鞭毛

嗜肺軍團菌革蘭染色精選課件56軍團菌屬

三、微生物檢驗嗜肺軍團菌革蘭染色精選課件56軍團菌屬

三、微生物檢驗

3．分離培養(yǎng)與鑒定（1）分離培養(yǎng)

嚴格需氧營養(yǎng)要求苛刻，生長緩慢，生長溫度為35℃

最適pH6.7~7.0

初次分離必須采用(BCYE)

3~5天可形成1~2mm直徑的光澤菌落嗜肺軍團菌菌落（BCYEa平板）精選課件57軍團菌屬

三、微生物檢驗

3．分離培養(yǎng)與鑒定嗜肺軍團菌菌落（軍團菌屬

三、微生物檢驗（2）鑒定觸酶陽性可液化明膠不分解糖類部份菌株氧化酶陽性精選課件58軍團菌屬

三、微生物檢驗（2）鑒定精選課件58軍團菌屬

三、微生物檢驗4．其他檢驗核酸檢測是快速特異的方法，采用DNA探針及PCR擴增rRNA的方法均可用于軍團菌的快速診斷抗體檢測是檢測軍團菌感染臨床常用手段，常采用方法：IFA、MAA、TAT、ELISA法等精選課件59軍團菌屬

三、微生物檢驗4．其他檢驗精選課件59軍團菌感染診斷試驗試驗敏感性(%)特異性(%)評注培養(yǎng)70100參考方法直接免疫熒光25～70>95不推薦常規(guī)應用間接免疫熒光70～90>99只用于嗜肺軍團菌血清群1酶標記免疫70～90>99乳膠凝集55～9085～99血清學（間接免疫熒光）70～80>95輔助培養(yǎng)

軍團菌屬三、微生物檢驗精選課件60軍團菌感染診斷試驗敏感性(%)特異性(%)評

非發(fā)酵菌嗜麥芽窄食單胞菌葡萄糖產(chǎn)酸無色桿菌屬土壤桿菌屬假單胞菌屬動力+OXOX－不動桿菌屬+葡萄糖產(chǎn)酸黃色素摩拉氏菌屬黃桿菌屬－－－++端鞭毛－+－++產(chǎn)堿桿菌屬尿素－+常見不發(fā)酵菌的鑒定雙岐索引精選課件61非發(fā)酵菌嗜麥芽窄食單胞菌葡萄糖產(chǎn)酸無色桿菌屬土壤桿菌屬假單42℃生長明膠液化鞭毛++極單鞭毛···銅綠假單胞菌-+極多鞭毛···熒光假單胞菌--極多鞭毛···惡臭假單胞菌醫(yī)院環(huán)境及用品、臨床標本分離培養(yǎng)基涂片檢查OF試驗：O氧化酶：+精氨酸水解：+葡萄糖酸氧化：+氮氣：+肉湯培養(yǎng)基血瓊脂平板SS、麥康凱瓊脂平板挑選可疑菌落（37℃培養(yǎng)18～24h觀察有無色素產(chǎn)生，色素鑒別接種金氏A、B培養(yǎng)基）無色素菌株-42℃+綠膿素+綠膿菌熒光素銅綠假單胞菌假單胞菌鑒定程序精選課件6242℃明膠鞭++極單鞭毛···銅綠假單胞菌-+極多鞭毛··1.肉浸湯2.胰化酪蛋白大豆肉湯37℃培養(yǎng)18～24h挑選菌落鑒定分型血清學噬菌體綠膿素初步鑒定菌落特征、色素、綠膿素：+涂片、革蘭染色、氧化酶：+最后鑒定生化反應腦脊液、胸（腹）水、膿液、分泌物、痰、尿液、十二指腸引流液血液、環(huán)境用品分離培養(yǎng)：直接涂片革蘭染色糞便血瓊脂平板SS、麥康凱分離培養(yǎng)：37℃如生長銅綠假單胞菌檢驗程序精選課件631.肉浸湯37℃培養(yǎng)18～24h分型初步鑒定最膿汁、分泌物、尿液腦脊液、血液直接涂片革蘭染色分離培養(yǎng)血液瓊脂平板麥康凱瓊脂平板增菌培養(yǎng)挑選可疑菌落最后鑒定生化反應

初步鑒定KIA：底層、斜面不變氧化酶硝酸鹽還原動力35℃～37℃18h-24h不動桿菌屬檢驗程序精選課件64膿汁、分泌物、尿液腦脊液、血液直接涂片分離培養(yǎng)增菌培養(yǎng)挑選可第9章不發(fā)酵革蘭陰性桿菌精選課件65第9章不發(fā)酵革蘭陰性桿菌精選課件1不發(fā)酵革蘭陰性桿菌

概述定義：一大群不發(fā)酵葡萄糖或僅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厭氧、無芽胞的革蘭陰性桿菌；多為條件致病菌。鮑曼不動桿菌革蘭染色精選課件66不發(fā)酵革蘭陰性桿菌

概述定義：一大群不發(fā)酵葡萄糖或僅以氧不發(fā)酵革蘭陰性桿菌假單胞菌屬(Pseudomonas)產(chǎn)堿桿菌屬(Alcaligenes)不動桿菌屬(Acinetobacter)莫拉菌屬(Moraxella)無色桿菌屬(Achromobacter)金氏桿菌屬(Kingella)黃桿菌屬(Flavobacterium)艾肯菌屬(Eikenella)

土壤桿菌屬(Agrobacterium)

黃單胞菌屬(Xanthomonas)

叢毛單胞菌屬(Comamonas)

精選課件67不發(fā)酵革蘭陰性桿菌假單胞菌屬黃桿菌屬精選課件3常見不發(fā)酵革蘭陰性桿菌的初步分群鑒定試驗假單胞菌屬無色桿菌屬黃桿菌屬不動桿菌屬產(chǎn)堿桿菌屬叢毛菌屬莫拉菌屬氧化酶+++/--+++/-O/F試驗O/-OOO/----動力+/-+/-+/--++-注：+：90%以上陽性；-10%以下的陽性；+/-：約70%為陽性；O：為氧化。不發(fā)酵革蘭陰性桿菌精選課件68常見不發(fā)酵革蘭陰性桿菌的初步分群鑒定試驗假單胞菌屬無色桿菌屬

第一節(jié)假單胞菌屬

（Pseudomonas）一、概述

1．分類

2．臨床意義

3．微生物檢驗

(1)

檢驗程序

(2)

鑒定

(3)

藥物敏感性試驗(AntibacterialSusceptibilityTest)精選課件69第一節(jié)假單胞菌屬

假單胞菌屬

1．分類假單菌屬按rRNA同源性分群，現(xiàn)把馬勒伯克霍爾德菌屬，嗜麥芽窄食單胞菌屬從假單胞菌屬分出。一群需氧、不發(fā)酵葡萄糖，無芽胞，有鞭毛；氧化酶陽性的革蘭陰性桿菌；多為條件致病菌。精選課件70假單胞菌屬

1．分類假單菌屬按rRNA同源性分群假單胞菌屬

2．臨床意義假單胞菌屬分布廣泛，人類不發(fā)酵菌感染中，假單胞菌占70％～80％，主要為銅綠假單胞菌。精選課件71假單胞菌屬

2．臨床意義精選課件7假單胞菌屬

3．微生物檢驗(1)檢驗程序

(2)培養(yǎng)鑒定革蘭陰性、無芽胞、專性需氧。有端鞭毛或叢鞭毛。生長溫度范圍廣，最適生長溫度為35℃。產(chǎn)生各種水溶性色素：綠膿素、膿玉紅素、熒光素、膿褐素(3)藥物敏感性試驗按CLSI（ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute）推薦，分為4組：A、B、C、Ｄ／Ｕ。精選課件72假單胞菌屬

3．微生物檢驗(1)檢驗程

致病機制

粘附素：黏附結構成分多糖似莢膜物質

毒素內毒素：LPS毒力因子外毒素：A阻止真核細胞蛋白質合成

S干擾吞噬殺菌作用綠膿素：具有氧化還原活性，催化超氧化物和過氧化氫產(chǎn)生有毒基團酶類彈性蛋白酶:絲氨酸蛋白酶（Las-A）降解彈性鋅金屬蛋白酶（Las-B）蛋白磷脂酶C:分解脂質和卵磷脂，損傷組織細胞銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)精選課件73致病機制銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)精選銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)

3．微生物檢驗（1）檢驗程序（2）顯微鏡涂片革蘭陰性，長短不一，單鞭毛。銅綠假單胞菌革蘭染色精選課件74銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)

3．微生物檢驗（銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)血平板上毛玻璃樣，金屬光澤，生姜味可產(chǎn)生多種色素熒光素與綠膿素銅綠假單胞菌產(chǎn)熒光素精選課件75銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)血平板上毛玻璃樣，銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)銅綠假單胞菌產(chǎn)綠膿素精選課件76銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)銅綠假單胞菌產(chǎn)綠膿銅綠假單胞菌（P.aeruginosa）（3）分離培養(yǎng)與鑒定：標本可接種于血瓊脂平板培養(yǎng)基和選擇性培養(yǎng)基，生長溫度25℃～42℃。生化鑒定：氧化酶陽性、還原硝酸鹽、分解尿素、精氨酸酶陽性。精選課件77銅綠假單胞菌（P.aeruginosa）（3）分離培養(yǎng)銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)（4）抗原檢測：血清學分型、噬菌體分型。（5）核酸檢測：質粒指紋圖分析、脈沖場凝膠電泳分析（PFGEpulsedfieldgelelectrophoresis）、基因芯片、PCR技術、16SrDNA分型鑒定技術。精選課件78銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)（4）抗原檢測：血銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)（６）檢驗結果分析與報告：

診斷一定要與臨床表現(xiàn)相結合。治療過程中，3～4天后重復藥敏測試。精選課件79銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)（６）檢驗結果分析耐藥機制：1.產(chǎn)酶金屬酶，OXA酶。2.外膜蛋白的改變（Outermembraneproteins，OMP）為主要機制。3.主動泵出機制對喹諾酮類。

MexA-MexB-OprM及MecC-MexD-Oprj4.整合子1類，3類。銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)精選課件80耐藥機制：銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)精選課件第二節(jié)伯克霍爾德菌屬屬于rRNA第II群。洋蔥伯克霍爾德菌(Burkholderiacepacia)馬勒伯克霍爾德菌(Burkholderiamallei)偽馬勒伯克霍爾德菌(Burrkholderiapseudomeuei)精選課件81第二節(jié)伯克霍爾德菌屬屬于rRNA第II群。精選課件17克霍爾德菌屬

一、臨床意義1．洋蔥伯克霍爾德菌醫(yī)院感染的常見病原菌之一；引起敗血癥、肺炎、傷口感染、膿腫等；囊性纖維化和慢性肉芽腫患者呼吸道感染的機會致病菌。精選課件82克霍爾德菌屬

一、臨床意義1．洋蔥伯克霍爾德菌精選課件18克霍爾德菌屬

一、臨床意義2．馬勒伯與偽馬勒伯克霍爾德菌鼻疽病與類鼻疽病的病原體；（肺鼻疽病、皮膚鼻疽病、內臟膿腫、菌血癥、膿毒血癥）。人類感染是經(jīng)傷口、黏膜、呼吸道。急性患者可有高熱、衰竭等全身癥狀。為人獸共患病原菌；可能成為生物恐怖的細菌。精選課件83克霍爾德菌屬

一、臨床意義2．馬勒伯與偽馬勒伯克霍爾德菌精伯克霍爾德菌屬

二、微生物檢驗1．顯微鏡涂片革蘭陰性桿菌無芽胞、無莢膜。洋蔥伯克霍爾德菌革蘭染色洋蔥伯克霍爾德菌革蘭染色精選課件84伯克霍爾德菌屬

二、微生物檢驗1．顯微鏡涂片洋蔥伯克霍爾德菌伯克霍爾德菌

二、微生物檢驗2．抗原檢測馬勒伯克霍爾德菌與偽馬勒伯克霍爾德菌熒光直接法染色鏡檢，可快速診斷。精選課件85伯克霍爾德菌

二、微生物檢驗2．抗原檢測精選課件21伯克霍爾德菌屬

二、微生物檢驗3．分離培養(yǎng)與鑒定需氧菌；生長溫度35℃。（血瓊脂、麥康凱）洋蔥伯克霍爾德菌生長較緩慢；含鐵培養(yǎng)基上可產(chǎn)生亮黃色色素馬勒鼻伯克霍爾德菌無鞭毛無動力，42℃不生長偽馬勒鼻伯克霍爾德菌一端有叢鞭毛(1~4根)，4℃不能生長生化鑒定精選課件86伯克霍爾德菌屬

二、微生物檢驗3．分離培養(yǎng)與鑒定精選課件第三節(jié)嗜麥芽窄食單胞菌

一、分類

屬于假單胞菌科的rRNA同源群Ⅴ。嗜麥芽窄食單胞菌（S.maltophilia）和S.africana。

精選課件87第三節(jié)嗜麥芽窄食單胞菌

一、分類精選課件23嗜麥芽窄食單胞菌

二、臨床意義為條件致病菌。呼吸道、泌尿道、傷口等部位感染，菌血癥及心內膜炎。在不發(fā)酵菌引起的感染中，僅次于銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌，居臨床分離陽性率的第三位。精選課件88嗜麥芽窄食單胞菌

二、臨床意義精選課件24嗜麥芽窄食單胞菌

三、微生物檢驗1．顯微鏡涂片

革蘭陰性，端鞭毛，

(1~8)根，有動力、無芽孢、無莢膜。嗜麥芽窄食單胞菌革蘭染色精選課件89嗜麥芽窄食單胞菌

三、微生物檢驗嗜麥芽窄食單胞菌革蘭染色精

嗜麥芽窄食單胞菌三、微生物檢驗2．分離培養(yǎng)與鑒定（１）分離培養(yǎng)：生長溫度為35℃，4℃不長，血瓊脂、普通培養(yǎng)基。菌落中等大小、圓形、光滑、濕潤、產(chǎn)生不溶血的黃色色素。嗜麥芽窄食單胞菌麥康凱培養(yǎng)基菌落

精選課件90

嗜麥芽窄食單胞菌三、微生物檢驗嗜麥芽窄食單胞菌麥康凱培養(yǎng)基嗜麥芽窄食單胞菌

三、微生物檢驗2．分離培養(yǎng)與鑒定（２）生化鑒定

氧化酶陰性；液化明膠、水解七葉苷；賴氨酸脫羧酶陽性。氧化分解麥芽糖。精選課件91嗜麥芽窄食單胞菌

三、微生物檢驗精選課件27嗜麥芽窄食單胞菌

四、藥物敏感試驗及結果解釋治療首選磺胺類：TMP/SMZ；喹锘酮類：環(huán)丙氟派酸或替卡西林/棒酸。泰能(Imipenem)天然耐藥。藥敏試驗紙片法僅有三種抗生素：左氧氟沙星、米諾環(huán)素、復方磺胺有折點。其他藥敏試驗應選用肉湯、瓊脂稀釋法作MIC，或采用E-TEST的方法。精選課件92嗜麥芽窄食單胞菌

四、藥物敏感試驗及結果解釋精選課件28第四節(jié)不動桿菌屬

一、分類醋酸鈣不動桿菌(A.calcoaceticus)

洛菲不動桿菌(A.lwoffi)

溶血不動桿菌(A.haemolgticus)

鮑曼不動桿菌(A.baumannii)

瓊氏不動桿菌(A.junii)

約翰遜不動桿菌(A.johnsonii)

精選課件93第四節(jié)不動桿菌屬

一、分類精選課件29不動桿菌屬

二、臨床意義為條件致病菌在不發(fā)酵菌的感染中僅次于假單胞菌，近年呈上升趨勢。精選課件94不動桿菌屬

二、臨床意義精選課件30不動桿菌屬

三、微生物檢驗1．檢驗程序2．顯微鏡涂片

革蘭陰性桿菌，多為球桿狀，常見成對排列無芽胞，無鞭毛鮑曼不動桿菌革蘭染色鮑曼不動桿菌革蘭染色精選課件95不動桿菌屬

三、微生物檢驗1．檢驗程序鮑曼不動桿菌革蘭染色精不動桿菌屬

四、微生物檢驗2．分離培養(yǎng)與鑒定專性需氧菌生長溫度為35℃

普通培養(yǎng)基，麥康凱、血平板均生長氧化酶陰性，動力陰性，硝酸鹽試驗陰性精選課件96不動桿菌屬

四、微生物檢驗2．分離培養(yǎng)與鑒定精選課件32不動桿菌屬

四、微生物檢驗鮑曼不動桿菌菌落在血瓊脂培養(yǎng)基可形成圓形、灰白色、光滑、邊緣整齊、直徑2~3mm的菌落洛菲不動桿菌菌落小，直徑為1~1.5mm

鮑曼不動桿菌麥康凱培養(yǎng)基菌落精選課件97不動桿菌屬

四、微生物檢驗鮑曼不動桿菌菌落鮑曼不動桿菌麥康不動桿菌屬

五、藥物敏感試驗及結果解釋Kirby-Bauer法做藥敏試驗，藥物的選擇與假單胞菌抗生素的分組相同。鮑曼氏不動桿菌，對全部氨基青霉素、一代二代頭孢菌素和一代喹諾酮類抗生素天然耐藥。精選課件98不動桿菌屬

五、藥物敏感試驗及結果解釋精選課件34第五節(jié)產(chǎn)堿桿菌屬

一、分類糞產(chǎn)堿桿菌(A.faecalis)

皮喬特產(chǎn)堿桿菌(A.Piechaudii)

糞產(chǎn)堿桿菌亞型(A.faecalistypeⅡ)

木糖氧化產(chǎn)堿桿菌(A.xylosoxidans)

脫硝亞種(Subsp.denitrificans)

木糖氧化亞種(Subsp

xylosoxidans)

精選課件99第五節(jié)產(chǎn)堿桿菌屬

一、分類糞產(chǎn)堿桿菌(A.faec產(chǎn)堿桿菌屬二、臨床意義人體的正常菌群醫(yī)院感染的病原菌之一精選課件100產(chǎn)堿桿菌屬二、臨床意義精選課件36產(chǎn)堿桿菌屬

三、微生物檢驗1．顯微鏡涂片革蘭氏陰性桿菌周鞭毛、有動力糞產(chǎn)堿桿菌革蘭染色精選課件101產(chǎn)堿桿菌屬

三、微生物檢驗糞產(chǎn)堿桿菌革蘭染色精選課件37產(chǎn)堿桿菌屬

三、微生物檢驗2．分離培養(yǎng)與鑒定最適生長溫度為25℃~35℃，普通培養(yǎng)基上生長糞產(chǎn)堿桿菌麥康凱培養(yǎng)基菌落精選課件102產(chǎn)堿桿菌屬

三、微生物檢驗糞產(chǎn)堿桿菌麥康凱培養(yǎng)基菌落精選課件產(chǎn)堿桿菌屬

三、微生物檢驗pH至8.6為本菌特點氧化酶陽性觸酶陽性不分解任何糖類

O-F基礎培養(yǎng)呈堿性脲素酶陰性不液化明膠糞產(chǎn)堿桿菌O-F基礎培養(yǎng)呈堿性精選課件103產(chǎn)堿桿菌屬

三、微生物檢驗pH至8.6為本菌特點糞產(chǎn)堿桿第六節(jié)黃桿菌屬

一、分類短黃桿菌(F.breve)

腦膜炎敗血性黃桿菌(F.meningospticum)芳香黃桿菌(F.odoratum)水田黃桿菌(F.mizutaii)嗜糖黃桿菌(F.multrivorum)

嗜醇黃桿菌(F.spiritivorum)

嗜溫黃桿菌(F.thalpophilum)

藪內黃桿菌(F.gaduuchiae)

Ⅱb群黃桿菌(F.groupⅡb)

Ⅱe群黃桿菌(F.groupⅡe)

Ⅱh群黃桿菌(F.groupⅡh)

Ⅱi群黃桿菌(F.groupⅡi)

精選課件104第六節(jié)黃桿菌屬

一、分類短黃桿菌嗜溫黃桿菌(F.thal黃桿菌屬

二、臨床意義是條件致病菌醫(yī)院感染的常見菌之一引起敗血癥、新生兒及嬰幼兒的化膿性腦膜炎精選課件105黃桿菌屬

二、臨床意義精選課件41黃桿菌屬

三、微生物檢驗1．顯微鏡涂片革蘭陰性桿菌無鞭毛、無動力、無莢膜、無芽胞腦膜炎敗血性黃桿菌革蘭染色精選課件106黃桿菌屬

三、微生物檢驗腦膜炎敗血性黃桿菌革蘭染色精選課件黃桿菌屬

三、微生物檢驗2．分離培養(yǎng)與鑒定需氧代謝氧化酶、觸酶、磷酸酶陽性腦膜炎敗血性黃桿菌菌落精選課件107黃桿菌屬

三、微生物檢驗腦膜炎敗血性黃桿菌菌落精選課件43黃桿菌屬三、微生物檢驗2．分離培養(yǎng)與鑒定血瓊脂培養(yǎng)基生長溫度為35℃

菌落：光滑、有光澤、邊緣整齊，淡黃色，也有的呈黃色或棕黃色腦膜炎敗血性黃桿菌血培養(yǎng)菌落精選課件108黃桿菌屬2．分離培養(yǎng)與鑒定腦膜炎敗血性黃桿菌血培養(yǎng)菌落精選課黃桿菌屬

四、藥物敏感試驗及結果解釋

臨床經(jīng)驗用藥可選磺胺及大環(huán)內脂類的紅霉素。臨床上常見的腦膜炎敗血黃桿菌及芳香黃桿菌等對廣譜抗菌藥有耐藥性，所以最好根據(jù)藥敏試驗選擇用藥。精選課件109黃桿菌屬

四、藥物敏感試驗及結果解釋精選課件45第七節(jié)莫拉菌屬

一、分類莫拉菌屬(Moraxella)屬莫拉菌科（Moraxellaceae）醫(yī)學上重要的莫拉菌有：腔隙莫拉菌（M.lacunata）卡他莫拉菌（M.catarrhalis）非液化莫拉菌(M.nonliquefaciens)

奧斯陸莫拉菌(M.osloensis)

亞特蘭大莫拉菌(M.atlantae)

狗莫拉菌(M.canis)林肯莫拉菌(M.lincolnii)

精選課件110第七節(jié)莫拉菌屬

一、分類莫拉菌屬(Moraxella)屬莫莫拉菌屬

二、臨床意義引起眼結膜炎、氣管炎、肺炎、腦膜炎、腦膿腫、心包炎、心內膜炎及泌尿生殖系統(tǒng)炎癥。精選課件111莫拉菌屬

二、臨床意義精選課件47莫拉菌屬

三、微生物檢驗1.顯微鏡涂片革蘭陰性球桿菌，呈雙短鏈狀排列，具有多形性。

非液化莫拉菌革蘭染色精選課件112莫拉菌屬

三、微生物檢驗非液化莫拉菌革蘭染色精選課件48莫拉菌屬

三、微生物檢驗

2.分離培養(yǎng)與鑒定營養(yǎng)要求較高。生長溫度32℃~35℃。血瓊脂平板上生長良好。針尖大小的圓形凸起、光滑、半透明、邊緣整齊不溶血的菌落。非液化莫拉菌血培養(yǎng)菌落精選課件113莫拉菌屬

三、微生物檢驗

2.分離培養(yǎng)與鑒定非液化莫拉菌血培莫拉菌屬

三、微生物檢驗

2.分離培養(yǎng)與鑒定鑒定氧化酶陽性觸酶陽性無動力不分解任何糖類吲哚試驗陰性精選課件114莫拉菌屬

三、微生物檢驗

2.分離培養(yǎng)與鑒定精選課件50莫拉菌屬

四、藥物敏感試驗及結果解釋對青霉素類敏感對頭孢類、四環(huán)素類、喹諾酮類、氨基糖甙類藥物均為敏感腦炎或腦膜炎、腦膿腫應注意藥物通過血腦屏障的問題精選課件115莫拉菌屬

四、藥物敏感試驗及結果解釋精選課件51第八節(jié)軍團菌屬

一、分類軍團菌屬(Legionella)屬于軍團菌科（Legionellaceae）常見的與人類疾病有關的軍團菌：嗜肺軍團菌（Legionellapneumophila）米克戴德軍團菌（L.micdadei）長灘軍團菌（L.longbeachae）杜莫夫軍團菌（L.dumoffii）波茲曼軍團菌（L.bozemanii）精選課件116第八節(jié)軍團菌屬

一、分類軍團菌屬(Legionella)軍團菌屬

二、臨床意義引起肺炎型和非肺炎型（龐蒂亞克熱Pontiacfever）感染。肺炎型:多器官損害，肺部、消化道及神經(jīng)系統(tǒng)癥狀及體征，致死率高。醫(yī)院感染可高達23%。慢性心、肺、腎病變、艾滋病或接受免疫抑制劑者易發(fā)本病，且死亡率高達45%。精選課件11