免疫標(biāo)記技術(shù)及分析應(yīng)用

關(guān)于免疫標(biāo)記技術(shù)及分析應(yīng)用第一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日用熒光素、放射性同位素、酶、發(fā)光劑、膠體金或電子致密物質(zhì)等作為示蹤劑，標(biāo)記抗體或抗原進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng)。第一節(jié)免疫標(biāo)記技術(shù)第二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日熒光顯微鏡，射線測量儀，酶標(biāo)檢測儀，電子顯微鏡和發(fā)光免疫測定儀等精密儀器，對實(shí)驗(yàn)結(jié)果直接鏡檢觀察或進(jìn)行自動(dòng)化測定。第三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日免疫標(biāo)記技術(shù)分類：免疫酶技術(shù)(ng)、放射免疫技術(shù)(pg)、免疫熒光技術(shù)、免疫電鏡技術(shù)、免疫膠體金技術(shù)、發(fā)光免疫測定。特點(diǎn)：高度靈敏、特異、快速，定性、定量、定位第四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日反應(yīng)類型實(shí)驗(yàn)技術(shù)結(jié)果判斷標(biāo)記免疫反應(yīng)熒光免疫技術(shù)檢測熒光現(xiàn)象放射免疫技術(shù)檢測放射性強(qiáng)度酶免疫技術(shù)檢測酶底物顯色發(fā)光免疫技術(shù)檢測發(fā)光強(qiáng)度金免疫技術(shù)檢測金顆粒沉淀免疫標(biāo)記技術(shù)第五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日用標(biāo)記物標(biāo)記抗體或抗原進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)借以提高免疫學(xué)診斷的敏感性熒光素：異硫氰酸熒光素（黃綠色熒光）、藻紅蛋白、羅丹明（紅色熒光）放射性同位素：125I、131I酶：辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶免疫熒光檢測法（IFA）放射免疫檢測法（RIA）酶免疫檢測法（EIA）免疫標(biāo)記技術(shù)液相（ELISA）、固相（免疫組化技術(shù)）第六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日免疫熒光技術(shù)第二節(jié)第七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日將抗體或抗原標(biāo)記以熒光素，然后與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合，形成的免疫復(fù)合物在一定波長光的激發(fā)下可產(chǎn)生熒光，借助熒光檢測儀測定或定位被檢抗原或抗體。當(dāng)出現(xiàn)熒光時(shí)，表明標(biāo)記抗體存在，相應(yīng)的抗原也存在。第八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日抗體的熒光素標(biāo)記標(biāo)記原理：利用抗體蛋白的自由氨基與FITC的異硫氰基在堿性溶液中形成硫碳酰胺鍵，使抗體與FITC結(jié)合成熒光抗體。標(biāo)記方法:

攪拌法：適于標(biāo)記體積較大、蛋白含量較高的抗體。標(biāo)記時(shí)間短，熒光素用量少，但有非特異性染色。

透析法：適于標(biāo)記樣品量少，蛋白含量低的抗體。標(biāo)記比較勻，非特異染色較低。FITC異硫氰酸熒光素第十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日常用的熒光素返回第十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日去除游離熒光素及其降解產(chǎn)物：透析或凝膠過濾去除熒光素未結(jié)合和結(jié)合過度的抗體：陰離子交換層析法去除交叉反應(yīng)或非期望抗體：動(dòng)物肝粉吸收或固相抗原吸收熒光抗體的純化第十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日熒光檢測儀（1）熒光顯微鏡（2）熒光分光光度計(jì)（3）流式細(xì)胞儀（4）熒光偏振光分析儀第十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日熒光顯微鏡

利用一定波長的激發(fā)光對樣品進(jìn)行激發(fā)，產(chǎn)生一定波長的熒光，對樣品結(jié)構(gòu)或其組分進(jìn)行定性、定位、定量觀察檢測。

第十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日

熒光顯微鏡的種類

透射式

落射式第十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日熒光顯微鏡的構(gòu)造吸收濾色鏡激發(fā)濾色鏡分色鏡汞燈第十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日流式細(xì)胞儀第十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日熒光酶標(biāo)儀第十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日（1）直接熒光染色法 將熒光素標(biāo)記在特異性抗體上，直接檢測抗原。優(yōu)點(diǎn)：簡單、快速、特異性高。缺點(diǎn)：敏感性差。第二十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日直接法

間接法

第二十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第二十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第二十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日（2）間接熒光染色法 將熒光素標(biāo)記在第二抗體（抗抗體）上或標(biāo)記在SPA上，檢測與抗原結(jié)合的特異性抗體。第二十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日直接法

間接法

第二十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第二十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日（3）補(bǔ)體熒光染色法 將熒光素標(biāo)記在補(bǔ)體的抗體上（抗C3抗體），檢測抗原抗體復(fù)合物。第二十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日優(yōu)點(diǎn)：可檢測所有的抗原抗體系統(tǒng)，具通用性；敏感性高。缺點(diǎn)：操作流程長、干擾因素多、非特異性熒光多，補(bǔ)體易失活、需新鮮制備不方便。第二十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第二十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第三十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日免疫酶技術(shù)EnzymeImmunoassay（EIA）第三節(jié)第三十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日就是將抗原和抗體的特異性免疫反應(yīng)與酶的催化反應(yīng)相結(jié)合而建立的一種免疫檢測技術(shù)。第三十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日抗原抗體反應(yīng)＋酶催化反應(yīng)肉眼、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡、分光光度計(jì)特異、敏感可以在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位，或在μg、甚至ng水平上對其進(jìn)行定量。第三十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日將酶分子與抗體或抗抗體分子共價(jià)結(jié)合，酶標(biāo)記抗體可與存在于組織細(xì)胞或吸附于固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下催化底物水解、氧化或還原等反應(yīng)，產(chǎn)生有顏色的物質(zhì)。酶降解底物的量與呈現(xiàn)的顏色成正比。第三十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日優(yōu)點(diǎn)：①靈敏度高，特異性強(qiáng)；②可定性、定量檢測可溶性抗原和抗體，適用于普查；③試劑來源廣，穩(wěn)定，保存時(shí)間長，且無同位素污染；④結(jié)果可肉眼半定量，也可用儀器定量檢測，且儀器價(jià)格較低廉，可在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室開展；⑤操作簡便，易于掌握和使用，且重復(fù)性好；⑥可用于定位組織細(xì)胞上的抗原或抗體成分。第三十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日缺點(diǎn)： 標(biāo)記反應(yīng)較難掌握，在操作過程中容易引起酶、抗原或抗體的失活。第三十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日一、常用的酶及其底物酶活性高；具有抗原抗體共價(jià)結(jié)合的基團(tuán)；標(biāo)記后不影響酶活性及抗原、抗體反應(yīng)性；產(chǎn)物易判定或測定；酶活性不受樣品中其他成分的影響（用于均相測定的酶標(biāo)抗原與抗體結(jié)合后酶活性出現(xiàn)抑制或激活）；無害；穩(wěn)定，價(jià)廉、易得。常用酶底物顯色

辣根過氧化物酶鄰苯二胺、H2O2橙黃色四甲基聯(lián)苯胺、H2O2藍(lán)色

堿性磷酸酶對硝基苯磷酸酯黃色第三十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第三十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日二、標(biāo)記方法酶結(jié)合物技術(shù)簡單、產(chǎn)率高；不影響酶和抗體（抗原）的生物活性；所得酶標(biāo)記物穩(wěn)定；較少形成酶與酶、抗體與抗體、抗原與抗原的聚合物。第三十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日戊二醛交聯(lián)法：抗原-戊二醛-酶

改良過碘酸鈉標(biāo)記法：過碘酸鈉氧化酶的羥基為醛基，再與抗體蛋白的氨基結(jié)合。HRP-CH2-NH-IgG

第四十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日三、酶標(biāo)記物的純化及鑒定1、純化游離酶：增加非特異染色游離抗原（抗體）：競爭降低特異性染色葡聚糖凝膠層析法50%飽和硫酸銨沉淀提純法第四十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日2、鑒定免疫活性鑒定：免疫電泳/雙擴(kuò)/ELISA酶標(biāo)記率測定：分光光度法第四十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日四、酶標(biāo)儀（酶聯(lián)免疫檢測儀）比色測定波長、吸光度范圍、光學(xué)系統(tǒng)、檢測速度、震板功能、溫度控制、定性和定量的軟件，自動(dòng)洗板、溫育、加樣450nm、492nm、620nm、630nm、650nm、405nm第四十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日返回第四十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第四十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第四十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第四十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日免疫標(biāo)記技術(shù)放射物標(biāo)記技術(shù)酶標(biāo)技術(shù)免疫熒光技術(shù)其他標(biāo)記技術(shù)酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)酶免疫組化技術(shù)雙抗體夾心法競爭法雙抗原夾心法間接法雙位一點(diǎn)法ELISA第四十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ELISAEnzyme-LinkedImmunosorbentAssay第四十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日ELISA基本實(shí)驗(yàn)過程包被：將已知抗原或抗體通過物理吸附到固相載體表面，使抗原或抗體固相化抗原抗體反應(yīng)：先后加入被檢標(biāo)本和酶結(jié)合物，使之與固相抗原或抗體發(fā)生免疫反應(yīng)而被結(jié)合固定酶促反應(yīng)：在反應(yīng)體系中加入酶作用的底物，使發(fā)生酶促反應(yīng)而顯色第五十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日ELISA原理圖YY

①固相的抗原或抗體（免疫吸附劑）

②酶標(biāo)記的抗原或抗體（標(biāo)記物）③酶作用的底物（顯色劑）Y②酶標(biāo)記的抗原或抗體（標(biāo)記物）第五十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日固相抗原或抗體1.固相載體的性狀：聚苯乙烯等固相載體2.試劑的配制：所有試劑的配制都用雙蒸水3.包被：(1)包被緩沖液：pH9.6碳酸鹽緩沖液(2)包被的濃度:10μg/ml(3)包被的時(shí)間：4℃過夜或37℃1-3h(4)包被的量：100μl第五十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日酶底物顯色反應(yīng)

測定波長

辣根過氧化物酶鄰苯二胺

四甲替聯(lián)苯胺

氨基水楊酸

鄰聯(lián)苯甲胺

2,2‘-連胺基-2(3-乙基-并噻唑啉磺酸-6)銨鹽

橘紅色

黃色

棕色

蘭色

藍(lán)綠色492460449

425

642

堿性磷酸酶

4-硝基酚磷酸鹽(PNP)

萘酚-AS-Mx磷酸鹽+重氮鹽黃色

紅色400

500葡萄糖氧化酶

ABTS+HRP+葡萄糖

葡萄糖+甲硫酚嗪+噻唑蘭黃色

深藍(lán)色405420β-Ｄ－半乳糖苷酶

甲基傘酮基半乳糖苷(4MuG)

硝基酚半乳糖苷(ONPG)熒光

黃色

360,450

420

酶及其底物第五十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日DNM-9602G酶標(biāo)分析儀DNM-9602標(biāo)配酶標(biāo)分析儀

DNM-9602A酶標(biāo)分析儀酶標(biāo)分析儀測定OD值第五十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日1.直接法2.間接法3.夾心法4.競爭法5.捕獲法ELISA種類第五十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日1.直接法第五十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日directELISA—forAg第五十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日directELISA—forAb返回第五十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日2.間接法+++

間接法是檢測抗體最常用的方法，其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。第五十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第六十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第六十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日包被固相載體:用已知抗原包被固相載體加待檢標(biāo)本:使相應(yīng)抗體與固相抗原結(jié)合洗滌，除去無關(guān)的物質(zhì)加酶標(biāo)抗抗體:與固相載體上抗原抗體復(fù)合物結(jié)合；洗滌，除去未結(jié)合的酶標(biāo)抗抗體加底物顯色根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量測定間接法ELISA過程第六十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日3.夾心法：+++雙抗體夾心法雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法第六十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第六十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日獲得待分析物的未標(biāo)定抗體將特異性抗體與固相載體連接形成固相抗體洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)加入封閉蛋白溶液以封閉載體表面殘留的蛋白結(jié)合位點(diǎn)洗滌并除去未結(jié)合的封閉蛋白加受檢標(biāo)本（抗原）形成固相抗體－抗原復(fù)合物洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)加酶標(biāo)抗體生成抗體—待測抗原—酶標(biāo)記抗體的復(fù)合物徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體加底物進(jìn)行酶催化反應(yīng)根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量測定雙抗體夾心法第六十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日雙抗原夾心法原理包被體待測抗體包被抗原標(biāo)記抗原第六十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日雙夾心法返回第六十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日4.競爭法第六十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第六十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日競爭法的原理固相支持物表面待測物包被抗體標(biāo)記抗原此法可用于抗原和半抗原的定量測定，也可用于測定抗體。第七十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日用已知特異性抗體包被固相載體測定管加待測抗原和一定量的酶標(biāo)抗原使二者與固相抗體競爭結(jié)合對照管只加一定量酶標(biāo)抗原與固相抗體直接結(jié)合分別洗滌除去未結(jié)合的成分加底物顯色分別測定兩管的吸光度值，根據(jù)對照管與測定管吸光度值之比，計(jì)算標(biāo)本中待測抗原含量第七十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日俘獲抗體（二抗）待測抗體標(biāo)記抗原包被體5.捕獲法血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時(shí)存在，后者會(huì)干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗本多用捕獲法第七十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日包被體待測抗原包被連接物標(biāo)記抗體俘獲抗體特點(diǎn)：所有試劑盒均采用同一包被物和包被工藝第七十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日（1）將抗人IgM抗體連接在固相載體上，形成固相抗人IgM。洗滌。（2）加入稀釋的血清標(biāo)本：保溫反應(yīng)后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質(zhì)成分。（3）加入特異性抗原試劑：它只與固相上的特異性IgM結(jié)合。洗滌。（4）加入針對特異性的酶標(biāo)抗體：使之與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)結(jié)合。洗滌。（5）加底物顯色：如有顏色顯示，則表示血清標(biāo)本中的特異性IgM抗體存在，是為陽性反應(yīng)。捕獲法操作過程第七十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日食品中鹽酸克倫特羅的測定食品中毒素的測定（主要包括黃曲霉毒素，赭曲霉毒素）食品中有害微生物的快速篩檢（如沙門氏菌）甲胺磷殘留分析甲基對硫磷殘留分析呋喃丹殘留分析ELISA在食品安全檢測中的應(yīng)用ELISA用于農(nóng)藥殘留的檢測第七十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日河豚毒素

植物毒素如罌粟鹼、嗎啡、藻類毒素苯并芘

主要有除草劑與殺蟲劑兩大類例如殺暝松（FN）、甲氟磷酸異已酶（SOMAN）、草不綠（Alachor）、西維因（Carbaryl）、多菌靈及克菌丹（Captan）等。農(nóng)藥的檢測：第七十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日ELISA檢測“非典型肺炎”冠狀病毒ELISA在結(jié)締組織病早期診斷中的應(yīng)用檢測抗異質(zhì)性胞核核糖蛋白A2（hnRNPA2）/類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（PtA）33抗體ELISA在疾病診斷中的作用ELISA法檢測幽門螺桿菌抗體第七十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日ELISA試劑盒第七十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日放射免疫分析（radioimmunoassay，RIA）第四節(jié)第七十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日利用放射性同位素標(biāo)記技術(shù)檢測抗原的技術(shù)靈敏度高，用于檢測激素等血清中微量物質(zhì)第八十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日RosalynYalow

（美國）（1977年獲諾貝爾生理和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)）“forthedevelopmentofradioimmunoassaysofpeptidehormones”VeteransAdministrationHospital

Bronx,NY,USAb.19211959年，Yalow和Berson首次應(yīng)用放射免疫分析法測定胰島素第八十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日與此同時(shí)，Ekins利用競爭性蛋白結(jié)合分析技術(shù)測定甲狀腺素獲得成功開創(chuàng)了生物活性物質(zhì)微量測定技術(shù)的新時(shí)代，是微量分析方法學(xué)上的一個(gè)突破。第八十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日放射免疫技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：①特異性強(qiáng)，即抗原抗體的特異性反應(yīng)；②靈敏度高，結(jié)果精確，檢測范圍10-910-12g；③操作流程簡單易行，加樣程序簡單，測量和數(shù)據(jù)處理自動(dòng)化；④樣品用量少、一般無需復(fù)雜的提純步驟；⑤應(yīng)用范圍廣泛，尤其是測量小分子半抗原。缺點(diǎn)：需要昂貴的檢測儀器；同位素污染。第八十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日結(jié)合相游離相第八十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日免疫膠體金標(biāo)記技術(shù)第五節(jié)第八十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日膠體金標(biāo)記技術(shù)以膠體金作為示蹤標(biāo)記物，應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)的一種新型免疫標(biāo)記技術(shù)。膠體金顆粒表面帶有較多電荷，用膠體金顆粒標(biāo)記抗體，檢測組織或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原。

第八十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日膠體金是由氯金酸在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉和鞣酸等作用下，聚合成特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，故稱為膠體金。利用它在堿性環(huán)境中帶負(fù)電荷的性質(zhì)，與蛋白質(zhì)分子的正電荷基團(tuán)藉靜電吸引而形成牢固結(jié)合，除抗體蛋白外，膠體金還可與其他多種生物大分子結(jié)合。第八十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日吸附在膠體金表面的抗原或抗體能定向?qū)⒛z體金顆粒運(yùn)載到組織或細(xì)胞內(nèi)、固相載體上的相應(yīng)抗體、抗原的位置。由于金顆粒具有高電子密度的特性，這些標(biāo)記物在抗原抗體反應(yīng)處聚集達(dá)到一定密度時(shí)（即金顆粒107個(gè)/mm2），出現(xiàn)肉眼可見的粉紅色斑點(diǎn)。第八十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日

膠體金標(biāo)記技術(shù)第八十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日膠體金紙條的不同種類第九十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日層析法技術(shù)優(yōu)勢：簡單\現(xiàn)場\快速第九十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日試紙條組成結(jié)構(gòu)控制線（C線）第九十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日與常規(guī)診斷方法相比：優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)快速：全部檢測過程僅需5-30分鐘。簡便：不需其它任何儀器設(shè)備，操作也極其簡單，無需專業(yè)人員，攜帶方便，可隨時(shí)隨地進(jìn)行。廉價(jià)：單個(gè)測試條成本極低

可單份檢測：對標(biāo)本既能成批檢測，又可單份檢測，可立刻拿到結(jié)果，不必等待。

穩(wěn)定性好：金標(biāo)試劑穩(wěn)定，可長期保存。

檢測標(biāo)本種類多：在臨床檢測中，樣品可能有尿、血液、血清、唾液或其他體液。在非臨床檢測中，樣本可能是由土壤、粉塵、植物或者食品制備的微量溶液。定量問題靈敏度問題第九十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日應(yīng)用領(lǐng)域類別應(yīng)用領(lǐng)域檢測的物質(zhì)人類醫(yī)學(xué)各級醫(yī)院，血站，CDC，防疫站，診斷中心；家庭自檢；商檢系統(tǒng)；邊檢口岸；公安系統(tǒng)傳染病（乙肝五項(xiàng)，HIV,SARS等）標(biāo)志物（AFP、肌鈣蛋白、糞便血紅蛋白等）女性妊娠（hCG(早孕)，LH，F(xiàn)SH)毒品（嗎啡、K粉、搖頭丸、冰毒）農(nóng)牧業(yè)畜牧獸醫(yī)站,商檢系統(tǒng),邊檢口岸，農(nóng)牧類院系和研究所傳染病（禽流感，獸瘟疫等）病毒（煙草花葉病毒、犬細(xì)小病毒等）環(huán)境