免疫細(xì)胞治療

關(guān)于免疫細(xì)胞治療第一頁，共二十二頁，2022年，8月28日1免疫細(xì)胞治療細(xì)胞治療服務(wù)手術(shù)放療化療生物治療腫瘤治療手段的發(fā)展暫免疫因子重組抗體基因療法細(xì)胞治療

科學(xué)家重新探索，我們是否可以從腫瘤的發(fā)生、發(fā)展的根源尋找到治療腫瘤的新方法？第二頁，共二十二頁，2022年，8月28日2免疫細(xì)胞治療細(xì)胞治療的技術(shù)特點(diǎn)示意圖第三頁，共二十二頁，2022年，8月28日3免疫細(xì)胞治療

免疫細(xì)胞治療

第四頁，共二十二頁，2022年，8月28日4免疫細(xì)胞治療細(xì)胞免疫理論的建立腫瘤免疫理論的提出免疫監(jiān)視學(xué)說的提出

腫瘤免疫的概念起源于上世紀(jì)初。1909年Ehrlich首先提出，免疫系統(tǒng)不僅負(fù)責(zé)防御微生物侵犯，而且能從機(jī)體內(nèi)清除改變了的宿主成分。并提出了細(xì)胞免疫直接對抗腫瘤的概念，此后人們認(rèn)識到癌細(xì)胞是改變了的宿主成分。

六十年代經(jīng)Thomas、Burnet和Good等人將該觀點(diǎn)系統(tǒng)化，提出了免疫監(jiān)視學(xué)說。

免疫監(jiān)視學(xué)說的中心思想是：免疫系統(tǒng)具有一個十分完備的監(jiān)視功能，能準(zhǔn)確地分辨“自己”和“非己”的成分；它不僅能清除外界侵入的各種微生物，排斥同種異體移植物，而且還能消滅機(jī)體內(nèi)突變的細(xì)胞，防止腫瘤的生長，保護(hù)機(jī)體的健康。

每當(dāng)免疫監(jiān)視功能由于這種或那種原因被消弱時，便為腫瘤的發(fā)生提供了有利條件；如果機(jī)體不具備免疫監(jiān)視功能，人類的腫瘤發(fā)病率會大大的提高。第五頁，共二十二頁，2022年，8月28日5免疫細(xì)胞治療免疫細(xì)胞治療腫瘤體細(xì)胞免疫治療技術(shù)

向腫瘤患者輸入具有抗腫瘤活性的免疫細(xì)胞，直接殺傷腫瘤細(xì)胞或激發(fā)機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)，從而達(dá)到治療腫瘤的目的，這一過程稱為體細(xì)胞免疫治療。

大量研究表明，腫瘤患者的外周血中存在癌細(xì)胞，是引發(fā)腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移、導(dǎo)致患者死亡的重要原因之一。有效清除血循環(huán)中的癌細(xì)胞，對預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)、改善腫瘤晚期患者的生存質(zhì)量具有重要的作用。自體體細(xì)胞醫(yī)療技術(shù)的概念

自體體細(xì)胞治療技術(shù)是應(yīng)用病人自體的體細(xì)胞通過體外培養(yǎng)獲得免疫活性細(xì)胞作為治療手段的醫(yī)療技術(shù)第六頁，共二十二頁，2022年，8月28日6免疫細(xì)胞治療免疫細(xì)胞治療主要技術(shù)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokine-inducedkillercell,CIK）1.1991年發(fā)現(xiàn)的，以共同表達(dá)CD3和CD56為特征；2.增值速度快。經(jīng)過2－3周左右的體外培養(yǎng)，細(xì)胞數(shù)量可增加400倍以上，占總細(xì)胞的比例可達(dá)40%以上。3.殺瘤活性高：殺傷單位（TLU）為LAK細(xì)胞的73倍以上。4.殺瘤譜廣：CIK細(xì)胞雖然以CD3、CD56細(xì)胞為主要效應(yīng)細(xì)胞，卻沒有T淋巴細(xì)胞殺傷時的MHC限制性。5.體外培養(yǎng)依賴CD3單抗和IFN-γ。CD3單抗可作為絲裂原活性單位與T細(xì)胞表面的CD3交聯(lián)，誘導(dǎo)其活化，而IFN-γ則誘導(dǎo)IL-1等細(xì)胞因子的合成。樹突狀細(xì)胞(dendriticcell，DC)是最有效的抗原遞呈細(xì)胞。DC的目標(biāo)在于誘導(dǎo)腫瘤特異性和長期持久的免疫反應(yīng)，這種效應(yīng)有助于防止微小殘留病灶和腫瘤復(fù)發(fā)。LAK/TIL/CD3AK/CTL：自上世紀(jì)80年代以來先后應(yīng)用于臨床的自體免疫細(xì)胞，但由于存在著擴(kuò)增倍速較低、細(xì)胞來源困難、細(xì)胞毒力不高等諸多問題，該療法在臨床應(yīng)用上受到一定限制。經(jīng)基因改變的自體T細(xì)胞：自體T細(xì)胞體外經(jīng)慢病毒轉(zhuǎn)染表達(dá)識別CD19的嵌合受體，該受體識別表達(dá)CD19的CLL腫瘤細(xì)胞后殺傷腫瘤細(xì)胞，這一基因改變的細(xì)胞在回輸后在體內(nèi)增值1000倍以上。第七頁，共二十二頁，2022年，8月28日7免疫細(xì)胞治療免疫細(xì)胞治療的適用范圍Page8Page8優(yōu)勢可以調(diào)節(jié)和增強(qiáng)全身免疫機(jī)能；可有效的殺傷殘余的腫瘤細(xì)胞，防止腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移；緩解晚期患者的臨床癥狀，延長生存期，創(chuàng)造更多的治療機(jī)會，甚至實(shí)現(xiàn)長期帶瘤生存；減輕放、化療的毒副反應(yīng)，提高患者生存質(zhì)量；它特異性極強(qiáng)、無免疫排斥反應(yīng)，相對于其他三種治療模式副作用小。適應(yīng)癥

減少惡性腫瘤傳統(tǒng)治療后的復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移；提高腫瘤綜合治療療效；少數(shù)腫瘤及患者的主要治療手段（對放化療不敏感或者無法耐受的情況以及對免疫原性較強(qiáng)的的腫瘤）。禁忌癥

孕婦；患者不能進(jìn)行淋巴細(xì)胞分離術(shù)或者少量多次抽血者；器官功能衰竭者；有器官移植史的患者；不可控制的感染性疾病，如HIV陽性；有其它免疫缺陷疾病，在4周內(nèi)使用過大量免疫抑制劑的患者；對本治療中所用生物試劑過敏者；T淋巴細(xì)胞瘤患者。第八頁，共二十二頁，2022年，8月28日8免疫細(xì)胞治療治療的基本流程療效觀察單個核細(xì)胞采集細(xì)胞分離、擴(kuò)增細(xì)胞鑒定及無菌檢測細(xì)胞回輸?shù)诰彭摚捕摚?022年，8月28日9免疫細(xì)胞治療可以重點(diǎn)開展的免疫細(xì)胞治療項(xiàng)目

1.NK：自然殺傷細(xì)胞治療2.CIK:細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞治療3.CIK+DC:CIK細(xì)胞+樹突細(xì)胞治療4.TIL:腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞(來自于腫瘤組織、胸水、腹水和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)）治療5.TIL+DC-腫瘤組織

6.DC-腫瘤組織+T細(xì)胞治療4. 7.AAIC:抗原活化的樹突狀細(xì)胞治療

8.EAAL

:治療腫瘤和慢性傳染性病毒感染………..第十頁，共二十二頁，2022年，8月28日10CIK細(xì)胞免疫治療50ml外周血單個核細(xì)胞INF-γ、IL-2、CD3誘導(dǎo)細(xì)胞培養(yǎng)達(dá)1×109以上質(zhì)控檢測細(xì)胞回輸，6個療程或結(jié)合放化療制定方案免疫細(xì)胞治療第十一頁，共二十二頁，2022年，8月28日11免疫細(xì)胞治療免疫細(xì)胞治療CIK細(xì)胞制備培養(yǎng)

用血分機(jī)獲得80ML濃縮血2000g×20min，20℃

175cm2培養(yǎng)瓶CIK培養(yǎng)液（含IFN-γ）第2天加混合細(xì)胞因子PMNC層CIK培養(yǎng)隔2-3天補(bǔ)液擴(kuò)瓶培養(yǎng)瓶內(nèi)細(xì)胞收集、離心、洗滌回輸?shù)?天擴(kuò)瓶后抽樣送檢（細(xì)菌培養(yǎng)和表型分析）第3天擴(kuò)瓶培養(yǎng)留血漿50ML備用分離出富含白細(xì)胞的部分淋巴細(xì)胞分離液第十二頁，共二十二頁，2022年，8月28日12免疫細(xì)胞治療DC-CIK細(xì)胞免疫治療80-100ml外周血單個核細(xì)胞成熟DC與自體CIK混合培養(yǎng)，不加抗原細(xì)胞培養(yǎng)達(dá)1×109以上質(zhì)控檢測細(xì)胞回輸，6個療程或結(jié)合放化療制定方案NK細(xì)胞,T細(xì)胞第十三頁，共二十二頁，2022年，8月28日13免疫細(xì)胞治療樹突狀細(xì)胞制備流程第7-8天，DC細(xì)胞收集、離心、洗滌和回輸?shù)?天加腫瘤抗原，第6天加促熟劑，抽樣送檢第3天補(bǔ)充含半量細(xì)胞因子的培養(yǎng)基6孔板1640培養(yǎng)液2000g×20min，20℃

留血漿50ML備用分離出富含白細(xì)胞的部分淋巴細(xì)胞分離液PMNC層用血分機(jī)獲得80ML濃縮血細(xì)胞貼壁120min貼壁細(xì)胞進(jìn)行DC細(xì)胞培養(yǎng)方案懸浮細(xì)胞進(jìn)行CIK培養(yǎng)方案第十四頁，共二十二頁，2022年，8月28日14免疫細(xì)胞治療腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞（TIL）治療腫瘤組織、腫瘤浸潤的淋巴結(jié)、癌性胸水/腹水體外獲取特異性淋巴細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)達(dá)1×109以上質(zhì)控檢測細(xì)胞回輸，6個療程或結(jié)合放化療制定方案第十五頁，共二十二頁，2022年，8月28日15免疫細(xì)胞治療經(jīng)修飾的自體T淋巴細(xì)胞(DC+T)免疫治療80-100ml外周血單個核細(xì)胞腫瘤相關(guān)抗原誘導(dǎo)DC細(xì)胞培養(yǎng)達(dá)1×109以上質(zhì)控檢測細(xì)胞回輸，6個療程或或結(jié)合放化療制定方案DC刺激自體T淋巴細(xì)胞增殖，CD3誘導(dǎo)Tcells第十六頁，共二十二頁，2022年，8月28日16免疫細(xì)胞治療免疫細(xì)胞治療部分儀器設(shè)備，實(shí)驗(yàn)室照片等第十七頁，共二十二頁，2022年，8月28日17生活質(zhì)量改善免疫功能檢測客觀療效評估不良反應(yīng)細(xì)胞免疫治療的臨床觀察指標(biāo)免疫細(xì)胞治療近期療效：1.靶病灶大小的變化：按照RECIST1.1版評定腫瘤近期療效，即以治療前后影像學(xué)檢查為依據(jù)進(jìn)行評價，分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、病灶穩(wěn)定(SD)和進(jìn)展(PD)2.疾病控制率（DCR）：CR+PR+SD反應(yīng)率（RR）：CR+PR遠(yuǎn)期療效：無病生存時間（DFS）無進(jìn)展生存時間（PFS）總生存（OS）第十八頁，共二十二頁，2022年，8月28日18免疫細(xì)胞治療國外臨床應(yīng)用報告（以CIK治療為例）

德國波恩大學(xué)權(quán)威專家施密特教授于2011年2月在國際腫瘤專業(yè)頂級雜志《JCancerResClinOncol》發(fā)布發(fā)布了關(guān)于CIK臨床應(yīng)用的最新總結(jié)報告，文章題目和摘要如下：

HontschaC,BorckY,ZhouH,MessmerD,Schmidt-WolfIG.ClinicaltrialsonCIKcells:firstreportoftheinternationalregistryonCIKcells(IRCC).JCancerResClinOncol.2011;137(2):305-10.

在867例臨床比對研究中，426例各腫實(shí)體瘤的各個不同階段的病人接受了CIK治療，各例病人輸入的CIK細(xì)胞數(shù)2.19

×

108~5.2

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1010范圍，在可觀察統(tǒng)計的381例中結(jié)果為：24例完全緩解（CR）；27例部分緩解（PR）；40例好轉(zhuǎn)（MR）；161例穩(wěn)定（SD）；129例進(jìn)展（PD）。但病人生存質(zhì)量有顯著提高，而且CIK治療副作用輕微。其中還發(fā)現(xiàn)肝炎病毒負(fù)荷減輕。第十九頁，共二十二頁，2022年，8月28日19免疫細(xì)胞治療國內(nèi)臨床應(yīng)用報告（以CIK治療為例）

據(jù)報道CIK治療256例中晚期各種實(shí)體瘤，無CR，PR+MR