革蘭氏陽性芽孢桿菌課件

第六章革蘭氏陽性產(chǎn)芽孢桿菌第一節(jié)芽孢桿菌屬（Bacillus）

第二節(jié)梭菌屬（Clostridium）

1精選課件第六章革蘭氏陽性產(chǎn)芽孢桿菌第一節(jié)芽孢桿菌屬（Bacil第一節(jié)芽胞桿菌屬（Bacillus）

芽胞桿菌屬是一群需氧、能形成芽孢的革蘭氏陽性大桿菌。本屬中主要的致病菌為炭疽芽胞桿菌，是引起動(dòng)物和人炭疽的病原菌；蠟狀芽胞桿菌的某些菌株可產(chǎn)生腸毒素，引致食物中毒；其他大多為腐生菌，主要存在于土壤、水和灰塵中，如枯草芽孢桿菌。

2精選課件第一節(jié)芽胞桿菌屬（Bacillus）芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌（B.anthracis）炭疽芽胞桿菌俗稱炭疽桿菌，是引起人類、各種家畜和野生動(dòng)物炭疽（Anthrax）的病原。3精選課件炭疽芽胞桿菌（B.anthracis）炭疽芽胞桿菌俗稱一、形態(tài)及染色特性

革蘭氏陽性大桿菌，菌體平直，兩端平截。在組織和血液中，單在或短鏈，經(jīng)培養(yǎng)后形成長鏈，呈竹節(jié)狀。在組織中或含血液的培養(yǎng)基中可形成莢膜。芽孢在有氧條件下形成，位于菌體中央，不膨出菌體。無鞭毛。4精選課件一、形態(tài)及染色特性4精選課件二、培養(yǎng)特性1.需氧菌或兼性厭氧，最適生長溫度30℃-37℃，營養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基中即能生長良好。

強(qiáng)毒菌株形成灰白色不透明、大而扁平、表面干燥；無毒或弱毒菌株形成稍小而隆起、表面較為光滑濕潤、邊緣比較整齊的光滑型菌落。強(qiáng)毒株菌落5精選課件二、培養(yǎng)特性強(qiáng)毒株菌落5精選課件2.在血瓊脂上一般不溶血，但個(gè)別菌株也可輕微溶血。6精選課件2.在血瓊脂上一般不溶血，但個(gè)別菌株也可輕微溶血。6精選課3.液體培養(yǎng)基中呈絮狀沉淀生長4.明膠穿刺培養(yǎng)，呈倒松樹狀，表面液化呈漏斗狀7精選課件3.液體培養(yǎng)基中呈絮狀沉淀生長7精選課件5.在含青霉素的培養(yǎng)基中，可形成串珠反應(yīng)，與其它需氧芽孢桿菌區(qū)別。

串珠反應(yīng)：在含青霉素0.5U/ml的培養(yǎng)基中，幼齡炭疽桿菌因細(xì)胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生質(zhì)體相互連接成串。8精選課件5.在含青霉素的培養(yǎng)基中，可形成串珠反應(yīng)，與其它需氧芽孢桿菌三、抵抗力

本菌繁殖體的抵抗力不強(qiáng)，同一般無芽孢桿菌。常用消毒劑均能于短時(shí)間內(nèi)將其殺死。芽孢抵抗力較強(qiáng)，在干燥背光處可存活40年以上。煮沸1h或干熱140℃3h可殺滅芽孢，對(duì)碘敏感。9精選課件三、抵抗力本菌繁殖體的抵抗力不強(qiáng)，同一般無芽孢桿菌。常

五、抗原結(jié)構(gòu)

（一）結(jié)構(gòu)抗原1.莢膜抗原：多肽，僅見于有毒菌株，與毒力和抗吞噬有關(guān)

2.菌體抗原：多糖，與細(xì)菌毒力無關(guān)。性質(zhì)穩(wěn)定，經(jīng)加熱煮沸甚至高壓蒸汽處理，抗原性不被破壞。

在病畜皮毛或腐敗臟器中經(jīng)長時(shí)間煮沸仍能與特異性抗體發(fā)生反應(yīng)形成環(huán)狀沉淀，稱為Ascoli反應(yīng)。

3.芽胞抗原：是芽胞的外膜和皮質(zhì)組成，具有免疫原性。（二）保護(hù)性抗原（PA）

炭疽毒素（PA、LF、EF）的組成成分之一，具有免疫原性。

10精選課件五、抗原結(jié)構(gòu)10精選課件六、致病性此菌毒力主要與莢膜和毒素有關(guān)，莢膜可增強(qiáng)細(xì)菌抗吞噬能力，使之易于擴(kuò)散；炭疽毒素是造成感染、動(dòng)物致病和死亡的主要原因，三種成分單獨(dú)無毒性，只有EF或LF與PA結(jié)合時(shí)，才有致死或水腫效應(yīng)。本菌可引致各種家畜、野獸和人類的炭疽，草食動(dòng)物易感性最強(qiáng)，此菌主要通過消化道傳染，也可經(jīng)呼吸道及皮膚創(chuàng)傷或通過吸血昆蟲傳播。11精選課件六、致病性此菌毒力主要與莢膜和毒素有關(guān)，莢膜可增強(qiáng)細(xì)菌抗吞噬七、微生物學(xué)診斷

1.細(xì)菌學(xué)檢查

（１）鏡檢：大桿菌，兩端平截，竹節(jié)狀

（２）分離培養(yǎng)：用普通瓊脂或血瓊脂

（３）純培養(yǎng):鏡檢、串珠試驗(yàn)、生化試驗(yàn)

（４）動(dòng)物試驗(yàn)：將檢驗(yàn)材料制成懸液或純培養(yǎng)物給小鼠注射，24-36h,小鼠死于敗血癥。

12精選課件七、微生物學(xué)診斷1.細(xì)菌學(xué)檢查12精選課件

2.血清學(xué)檢查

（１）Ascoli沉淀反應(yīng)

用加熱抽提待檢炭疽菌體多糖抗原與已知抗體進(jìn)行的沉淀試驗(yàn)。

（２）間接血凝試驗(yàn)（３）協(xié)同凝集試驗(yàn)（４）串珠熒光抗體檢查（５）瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)13精選課件2.血清學(xué)檢查13精選課件炭疽痊愈動(dòng)物可獲得堅(jiān)強(qiáng)的免疫，再次感染者很少第Ⅱ號(hào)炭疽芽胞苗、無毒炭疽芽胞苗預(yù)防接種高免血清進(jìn)行緊急預(yù)防接種

青霉素作為首選藥物進(jìn)行治療八、免疫防治14精選課件八、免疫防治14精選課件第二節(jié)梭菌屬（Clostridium）

該屬細(xì)菌多數(shù)嚴(yán)格厭氧，革蘭氏染色陽性，能形成芽孢，芽孢直徑往往比菌體粗，使菌體膨脹成梭狀，但并非梭菌屬的細(xì)菌均為梭狀，如破傷風(fēng)梭菌，芽孢位于菌體頂端，菌體呈鼓槌狀。該屬細(xì)菌能產(chǎn)生多種外毒素和侵襲性酶，致病性強(qiáng)。產(chǎn)氣莢膜梭菌、腐敗梭菌、諾維梭菌、肉毒梭菌和破傷風(fēng)梭菌等。15精選課件第二節(jié)梭菌屬（Clostridium）該屬細(xì)菌多數(shù)嚴(yán)格產(chǎn)氣莢膜梭菌（Cl.perfringens）舊名魏氏梭菌，在自然界分布很廣。一定條件下，可引起多種嚴(yán)重疾患，局部組織出現(xiàn)壞死、水腫、產(chǎn)氣。16精選課件產(chǎn)氣莢膜梭菌（Cl.perfringens）舊名魏氏梭菌，一、形態(tài)及染色特征

菌體直桿狀，革蘭氏染色陽性。一般條件下不形成芽胞，在無糖培養(yǎng)基上可形成。芽胞大而卵圓，位于菌體中央或近端，使菌體膨脹。多數(shù)菌株可形成莢膜，無鞭毛。

無芽孢有芽孢有莢膜17精選課件一、形態(tài)及染色特征無芽孢

本菌對(duì)厭氧程度的要求并不嚴(yán)，在普通培養(yǎng)基上可生長，若加葡萄糖、血液，則生長更好。菌落多為圓形、光滑、隆起、灰白色的圓屋頂樣，也可形成圓盤形、邊緣成鋸齒狀、表面有輻射狀條紋的大菌落。

生長非常迅速，快速移植法可幫助此菌的分離。厭氧肉肝湯中培養(yǎng)，呈均勻渾濁，并產(chǎn)生大量氣體。二、培養(yǎng)特性18精選課件二、培養(yǎng)特性18精選課件血平板上，多數(shù)菌株有雙層溶血環(huán)，內(nèi)環(huán)完全溶血，外環(huán)不完全溶血。19精選課件血平板上，多數(shù)菌株有雙層溶血環(huán)，內(nèi)環(huán)19精選課件

三、生化特性

肉渣湯培養(yǎng)基牛乳培養(yǎng)基高糖瓊脂培養(yǎng)基接種產(chǎn)氣莢膜桿菌本菌最突出的生化特性是對(duì)牛乳培養(yǎng)基的“暴烈發(fā)酵”。20精選課件三、生化特性肉渣湯培養(yǎng)基牛乳培養(yǎng)基高糖瓊脂培養(yǎng)基接種A型：人氣性壞疽和食物中毒B型：羔羊痢疾

C型：綿羊猝狙

D型：牛腸毒血癥

E型：犢牛、羔羊腸毒血癥

四、致病性

21精選課件A型：人氣性壞疽和食物中毒四、致病性21精選課件

1.直接涂片鏡檢：G+大桿菌，并有莢膜2.分離培養(yǎng)：接種血平板，有雙層溶血環(huán)

3.純培養(yǎng)：引起牛奶暴烈發(fā)酵

4.動(dòng)物試驗(yàn)：小鼠、家兔或鴿5.腸毒素檢查：

取回腸內(nèi)容物加適量滅菌生理鹽水稀釋，經(jīng)離心沉淀后取上清液分成兩份，一份不加熱，一份加熱，分別靜脈注射家兔或小鼠。如有毒素存在，不加熱組動(dòng)物常于數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡，而加熱組動(dòng)物不死亡。五、微生物學(xué)診斷22精選課件1.直接涂片鏡檢：G+大桿菌，并有莢膜五、微生物學(xué)診斷2破傷風(fēng)梭菌（Cl.tetani）

破傷風(fēng)梭菌是引起人畜破傷風(fēng)的病原。具有芽孢，其芽孢廣泛存在于各類土壤中。本病以骨骼肌發(fā)生強(qiáng)直性痙攣的癥狀為特征，此菌也稱為強(qiáng)直梭菌。23精選課件破傷風(fēng)梭菌（Cl.tetani）破傷風(fēng)梭菌是引起人畜一、形態(tài)

G+，兩端鈍圓、細(xì)長的桿菌，無莢膜，多具周鞭毛而能運(yùn)動(dòng)。在動(dòng)物體內(nèi)外均能形成圓形芽胞，位于菌體一端，呈鼓槌狀。24精選課件一、形態(tài)24精選課件二、培養(yǎng)特性嚴(yán)格厭氧菌，接觸氧后很快死亡。普通培養(yǎng)基上即能生長，形成不規(guī)則菌落，中心緊密、四周疏松似羽毛。不易獲得單個(gè)菌落，擴(kuò)散成薄膜狀覆蓋整個(gè)平板表面。用高濃度瓊脂可抑制其擴(kuò)散生長。25精選課件二、培養(yǎng)特性嚴(yán)格厭氧菌，接觸氧后很快死亡。普通培養(yǎng)基上此菌產(chǎn)生兩種毒素：1.破傷風(fēng)痙攣毒素：引起神經(jīng)興奮性的異常增高和骨骼肌痙攣。

2.破傷風(fēng)溶血素：不耐熱，對(duì)氧敏感，可溶解馬及家兔的紅細(xì)胞，與破傷風(fēng)梭菌的致病性無關(guān)。

三、致病性26精選課件此菌產(chǎn)生兩種毒素：三、致病性26精選課件四、微生物學(xué)診斷

一般不需微生物學(xué)診斷。如有特殊需要，可采取創(chuàng)傷部的分泌物或壞死組織進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查。27精選課件四、微生物學(xué)診斷一般不需微生物學(xué)診斷。如有特殊需要，可采取主動(dòng)免疫預(yù)防可用明礬沉淀破傷風(fēng)類毒素

破傷風(fēng)抗毒素血清可用于緊急預(yù)防五、免疫防治28精選課件五、免疫防治28精選課件復(fù)習(xí)思考題1.炭疽桿菌的主要培養(yǎng)特性有哪些？2.如何進(jìn)行炭疽病的微生物學(xué)診斷？3.產(chǎn)氣莢膜梭菌的主要生化特點(diǎn)。4.產(chǎn)氣莢膜梭菌分型及其對(duì)動(dòng)物的致病性?5.破傷風(fēng)梭菌的主要生物學(xué)特性。29精選課件復(fù)習(xí)思考題1.炭疽桿菌的主要培養(yǎng)特性有哪些？29精選課件第六章革蘭氏陽性產(chǎn)芽孢桿菌第一節(jié)芽孢桿菌屬（Bacillus）

第二節(jié)梭菌屬（Clostridium）

30精選課件第六章革蘭氏陽性產(chǎn)芽孢桿菌第一節(jié)芽孢桿菌屬（Bacil第一節(jié)芽胞桿菌屬（Bacillus）

芽胞桿菌屬是一群需氧、能形成芽孢的革蘭氏陽性大桿菌。本屬中主要的致病菌為炭疽芽胞桿菌，是引起動(dòng)物和人炭疽的病原菌；蠟狀芽胞桿菌的某些菌株可產(chǎn)生腸毒素，引致食物中毒；其他大多為腐生菌，主要存在于土壤、水和灰塵中，如枯草芽孢桿菌。

31精選課件第一節(jié)芽胞桿菌屬（Bacillus）芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌（B.anthracis）炭疽芽胞桿菌俗稱炭疽桿菌，是引起人類、各種家畜和野生動(dòng)物炭疽（Anthrax）的病原。32精選課件炭疽芽胞桿菌（B.anthracis）炭疽芽胞桿菌俗稱一、形態(tài)及染色特性

革蘭氏陽性大桿菌，菌體平直，兩端平截。在組織和血液中，單在或短鏈，經(jīng)培養(yǎng)后形成長鏈，呈竹節(jié)狀。在組織中或含血液的培養(yǎng)基中可形成莢膜。芽孢在有氧條件下形成，位于菌體中央，不膨出菌體。無鞭毛。33精選課件一、形態(tài)及染色特性4精選課件二、培養(yǎng)特性1.需氧菌或兼性厭氧，最適生長溫度30℃-37℃，營養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基中即能生長良好。

強(qiáng)毒菌株形成灰白色不透明、大而扁平、表面干燥；無毒或弱毒菌株形成稍小而隆起、表面較為光滑濕潤、邊緣比較整齊的光滑型菌落。強(qiáng)毒株菌落34精選課件二、培養(yǎng)特性強(qiáng)毒株菌落5精選課件2.在血瓊脂上一般不溶血，但個(gè)別菌株也可輕微溶血。35精選課件2.在血瓊脂上一般不溶血，但個(gè)別菌株也可輕微溶血。6精選課3.液體培養(yǎng)基中呈絮狀沉淀生長4.明膠穿刺培養(yǎng)，呈倒松樹狀，表面液化呈漏斗狀36精選課件3.液體培養(yǎng)基中呈絮狀沉淀生長7精選課件5.在含青霉素的培養(yǎng)基中，可形成串珠反應(yīng)，與其它需氧芽孢桿菌區(qū)別。

串珠反應(yīng)：在含青霉素0.5U/ml的培養(yǎng)基中，幼齡炭疽桿菌因細(xì)胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生質(zhì)體相互連接成串。37精選課件5.在含青霉素的培養(yǎng)基中，可形成串珠反應(yīng)，與其它需氧芽孢桿菌三、抵抗力

本菌繁殖體的抵抗力不強(qiáng)，同一般無芽孢桿菌。常用消毒劑均能于短時(shí)間內(nèi)將其殺死。芽孢抵抗力較強(qiáng)，在干燥背光處可存活40年以上。煮沸1h或干熱140℃3h可殺滅芽孢，對(duì)碘敏感。38精選課件三、抵抗力本菌繁殖體的抵抗力不強(qiáng)，同一般無芽孢桿菌。常

五、抗原結(jié)構(gòu)

（一）結(jié)構(gòu)抗原1.莢膜抗原：多肽，僅見于有毒菌株，與毒力和抗吞噬有關(guān)

2.菌體抗原：多糖，與細(xì)菌毒力無關(guān)。性質(zhì)穩(wěn)定，經(jīng)加熱煮沸甚至高壓蒸汽處理，抗原性不被破壞。

在病畜皮毛或腐敗臟器中經(jīng)長時(shí)間煮沸仍能與特異性抗體發(fā)生反應(yīng)形成環(huán)狀沉淀，稱為Ascoli反應(yīng)。

3.芽胞抗原：是芽胞的外膜和皮質(zhì)組成，具有免疫原性。（二）保護(hù)性抗原（PA）

炭疽毒素（PA、LF、EF）的組成成分之一，具有免疫原性。

39精選課件五、抗原結(jié)構(gòu)10精選課件六、致病性此菌毒力主要與莢膜和毒素有關(guān)，莢膜可增強(qiáng)細(xì)菌抗吞噬能力，使之易于擴(kuò)散；炭疽毒素是造成感染、動(dòng)物致病和死亡的主要原因，三種成分單獨(dú)無毒性，只有EF或LF與PA結(jié)合時(shí)，才有致死或水腫效應(yīng)。本菌可引致各種家畜、野獸和人類的炭疽，草食動(dòng)物易感性最強(qiáng)，此菌主要通過消化道傳染，也可經(jīng)呼吸道及皮膚創(chuàng)傷或通過吸血昆蟲傳播。40精選課件六、致病性此菌毒力主要與莢膜和毒素有關(guān)，莢膜可增強(qiáng)細(xì)菌抗吞噬七、微生物學(xué)診斷

1.細(xì)菌學(xué)檢查

（１）鏡檢：大桿菌，兩端平截，竹節(jié)狀

（２）分離培養(yǎng)：用普通瓊脂或血瓊脂

（３）純培養(yǎng):鏡檢、串珠試驗(yàn)、生化試驗(yàn)

（４）動(dòng)物試驗(yàn)：將檢驗(yàn)材料制成懸液或純培養(yǎng)物給小鼠注射，24-36h,小鼠死于敗血癥。

41精選課件七、微生物學(xué)診斷1.細(xì)菌學(xué)檢查12精選課件

2.血清學(xué)檢查

（１）Ascoli沉淀反應(yīng)

用加熱抽提待檢炭疽菌體多糖抗原與已知抗體進(jìn)行的沉淀試驗(yàn)。

（２）間接血凝試驗(yàn)（３）協(xié)同凝集試驗(yàn)（４）串珠熒光抗體檢查（５）瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)42精選課件2.血清學(xué)檢查13精選課件炭疽痊愈動(dòng)物可獲得堅(jiān)強(qiáng)的免疫，再次感染者很少第Ⅱ號(hào)炭疽芽胞苗、無毒炭疽芽胞苗預(yù)防接種高免血清進(jìn)行緊急預(yù)防接種

青霉素作為首選藥物進(jìn)行治療八、免疫防治43精選課件八、免疫防治14精選課件第二節(jié)梭菌屬（Clostridium）

該屬細(xì)菌多數(shù)嚴(yán)格厭氧，革蘭氏染色陽性，能形成芽孢，芽孢直徑往往比菌體粗，使菌體膨脹成梭狀，但并非梭菌屬的細(xì)菌均為梭狀，如破傷風(fēng)梭菌，芽孢位于菌體頂端，菌體呈鼓槌狀。該屬細(xì)菌能產(chǎn)生多種外毒素和侵襲性酶，致病性強(qiáng)。產(chǎn)氣莢膜梭菌、腐敗梭菌、諾維梭菌、肉毒梭菌和破傷風(fēng)梭菌等。44精選課件第二節(jié)梭菌屬（Clostridium）該屬細(xì)菌多數(shù)嚴(yán)格產(chǎn)氣莢膜梭菌（Cl.perfringens）舊名魏氏梭菌，在自然界分布很廣。一定條件下，可引起多種嚴(yán)重疾患，局部組織出現(xiàn)壞死、水腫、產(chǎn)氣。45精選課件產(chǎn)氣莢膜梭菌（Cl.perfringens）舊名魏氏梭菌，一、形態(tài)及染色特征

菌體直桿狀，革蘭氏染色陽性。一般條件下不形成芽胞，在無糖培養(yǎng)基上可形成。芽胞大而卵圓，位于菌體中央或近端，使菌體膨脹。多數(shù)菌株可形成莢膜，無鞭毛。

無芽孢有芽孢有莢膜46精選課件一、形態(tài)及染色特征無芽孢

本菌對(duì)厭氧程度的要求并不嚴(yán)，在普通培養(yǎng)基上可生長，若加葡萄糖、血液，則生長更好。菌落多為圓形、光滑、隆起、灰白色的圓屋頂樣，也可形成圓盤形、邊緣成鋸齒狀、表面有輻射狀條紋的大菌落。

生長非常迅速，快速移植法可幫助此菌的分離。厭氧肉肝湯中培養(yǎng)，呈均勻渾濁，并產(chǎn)生大量氣體。二、培養(yǎng)特性47精選課件二、培養(yǎng)特性18精選課件血平板上，多數(shù)菌株有雙層溶血環(huán)，內(nèi)環(huán)完全溶血，外環(huán)不完全溶血。48精選課件血平板上，多數(shù)菌株有雙層溶血環(huán)，內(nèi)環(huán)19精選課件

三、生化特性

肉渣湯培養(yǎng)基牛乳培養(yǎng)基高糖瓊脂培養(yǎng)基接種產(chǎn)氣莢膜桿菌本菌最突出的生化特性是對(duì)牛乳培養(yǎng)基的“暴烈發(fā)酵”。49精選課件三、生化特性肉渣湯培養(yǎng)基牛乳培養(yǎng)基高糖瓊脂培養(yǎng)基接種A型：人氣性壞疽和食物中毒B型：羔羊痢疾

C型：綿羊猝狙

D型：牛腸毒血癥

E型：犢牛、羔羊腸毒血癥

四、致病性

50精選課件A型：人氣性壞疽和食物中毒四、致病性21精選課件

1.直接涂片鏡檢：G+大桿菌，并有莢膜2.分離培養(yǎng)：接種血平板，有雙層溶血環(huán)

3.純培養(yǎng)：引起牛奶暴烈發(fā)酵

4.動(dòng)物試驗(yàn)：小鼠、家兔或鴿5.腸毒素檢查：

取回腸內(nèi)容物加適量滅菌生理鹽水稀釋，經(jīng)離心沉淀后取上清液分成兩份，一份不加熱，一份加熱，分別靜脈注射家兔或小鼠。如有毒素存在，不加熱組動(dòng)物常于數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡，而加熱組動(dòng)物不死亡。五、微生物學(xué)診斷51精選課件1.直接涂片鏡檢：G+大桿菌，并有莢膜