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第2節(jié)基因工程及其應(yīng)用第6章從雜交育種到基因工程
資料以往,治療糖尿病的胰島素是從動物胰腺中提取的,從100千克豬、牛等動物的胰腺只能提取3-4克胰島素,治療一個患者需宰殺40-50頭牛,這種藥物的造價就可想而知了。
微生物可以有分泌產(chǎn)物,且微生物繁殖速率快設(shè)想二能否讓微生物產(chǎn)生出人的胰島素、干擾素等珍貴的藥物?經(jīng)過多年的努力,科學(xué)家于20世紀(jì)70年代創(chuàng)立了可以定向改造生物的新技術(shù)——基因工程。什么叫基因工程?基因工程的基本工具有哪些?閱讀教材P102,解決以下問題:能力體現(xiàn)基因工程的操作步驟?基因工程概念
基因工程:又叫基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)。就是按照人們的意愿,把一種生物的某種基因提取出來,加以修飾和改造,然后放到另一種生物的細(xì)胞里,定向的改變生物的遺傳性狀?;蛑亟M原理:操作水平:DNA分子水平結(jié)果:定向地改造生物的遺傳性狀,獲得人類所需要的品種。基因工程操作的工具將目的基因片斷從人體細(xì)胞內(nèi)提取,需要基因的剪刀——限制性內(nèi)切酶。將目的基因與運(yùn)載體DNA連接,需要基因的針線——DNA連接酶。將目的基因運(yùn)入大腸桿菌,需要基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體。分布:主要在微生物中。特點(diǎn):專一性和特異性,即識別特定核苷酸序列,切割特定切點(diǎn)。結(jié)果:產(chǎn)生黏性未端(堿基互補(bǔ)配對)。舉例:大腸桿菌的一種限制酶(EcoRⅠ)能識別GAATTC序列,并在G和A之間切開。一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列,并在特定的切割點(diǎn)上將DNA分子切斷。目前已發(fā)現(xiàn)的限制酶有200多種。1.基因的剪刀—限制性內(nèi)切酶限制性內(nèi)切酶(EcoRⅠ)作用過程點(diǎn)擊播放什么是黏性末端?被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口帶有幾個伸出的核苷酸,它們之間正好互補(bǔ)配對,這樣的切口叫黏性末端。模型構(gòu)建1CTTCATGAATTCCCTAA
GAAGTACTTAAGGGATTGGCATCTTAAAATTCCGTAG練習(xí)使用EcoRI剪切目的基因CTTCATGAATTCCCTAA
GAAGTACTTAAGGGATTGGCATCTTAAAATTCCGTAG
目的基因黏性末端
被同一種限制酶切斷的幾個DNA是否具有相同的黏性末端?思考:是基因的針線:DNA連接酶G
AA
TT
CC
TT
AA
GG
AA
TT
CC
TT
AA
GGC
TT
AA
AA
TT
C
GG
C
TT
AA
AA
TT
C
GGC
TT
AA
AA
TT
C
G用同種限制酶切割2.基因的針線—DNA連接酶DNA連接酶連接的是兩個脫氧核苷酸分子的什么部位?磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵模型構(gòu)建2使用DNA連接酶制作重組DNA分子甲片段CTTCATGAATTCCCTAA
GAAGTACTTAAGGGATT乙片段GGCATCTTAAAATTCCGTAG
重組DNA分子GGCATCTTAAAATTCCGTAGDNA連接酶的作用是:A.子鏈和母鏈之間形成氫鍵
B.黏性末端之間形成氫鍵
C.兩個DNA末端間的縫隙連接(磷酸二酯鍵)
D.A、B、C都對CCTT
AAG
AA
TTCG重組DNA分子(外源基因)?如何將外源基因送入受體細(xì)胞呢?作用:將外源基因送入受體細(xì)胞。種類:質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒。能將外源基因送入細(xì)胞的工具就是運(yùn)載體?;蚬こ套畛S玫倪\(yùn)載體是___質(zhì)粒____3.基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體大腸桿菌DNA
質(zhì)粒(環(huán)狀DNA分子)控制質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移的基因抗生素抗性基因利用質(zhì)粒將外源基因運(yùn)載入受體細(xì)胞中基因操作的基本步驟提取目的基因目的基因與運(yùn)載體結(jié)合將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測和表達(dá)歸納:?如何讓大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素?①從細(xì)胞中分離出DNA①②③④⑤⑥②限制酶截取DNA片斷③分離大腸桿菌中的質(zhì)粒④DNA重組⑤用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌⑥培養(yǎng)大腸桿菌克隆大量基因12基因工程的操作工具1.基因的剪刀
——限制性內(nèi)切酶2.基因的針線
——DNA連接酶
3.基因的運(yùn)輸工具
——運(yùn)載體
基因工程的操作步驟1.目的基因的提取2.目的基因與運(yùn)載體結(jié)合3.目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4.目的基因的檢測與表達(dá)基因工程(geneengineering)的原理小結(jié)基因工程的應(yīng)用1、基因工程與作物育種:轉(zhuǎn)基因抗蟲棉、耐貯存番茄、耐鹽堿棉花、抗除草作物、轉(zhuǎn)基因奶牛、超級綿羊等等2、基因工程與藥物研制:干擾素、白細(xì)胞介素、溶血栓劑、凝血因子、疫苗3、基因工程與環(huán)境保護(hù):超級細(xì)菌四、基因工程的應(yīng)用一、基因工程與作物育種轉(zhuǎn)基因西紅柿轉(zhuǎn)基因驅(qū)蚊草轉(zhuǎn)入熒光素酶蛋白基因的發(fā)熒光煙草藍(lán)色妖姬轉(zhuǎn)基因超級小鼠導(dǎo)入人基因具特殊用途的豬和小鼠能發(fā)熒光的熱帶斑馬魚普通熱帶斑馬魚是不發(fā)熒光的如何讓普通熱帶斑馬魚也發(fā)熒光?2、基因工程與藥物研制我國生產(chǎn)的部分基因
工程疫苗和藥物許多藥品的生產(chǎn)是從生物組織中提取的。受材料來源限制產(chǎn)量有限,其價格往往十分昂貴。微生物生長迅速,容易控制,適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。若將生物合成相應(yīng)藥物成分的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞內(nèi),讓它們產(chǎn)生相應(yīng)的藥物,不但能解決產(chǎn)量問題,還能大大降低生產(chǎn)成本。胰島素從豬、牛等動物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰島素,其產(chǎn)量之低和價格之高可想而知。將合成的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌,每2000L培養(yǎng)液就能產(chǎn)生100g胰島素!使其價格降低了30%-50%!3、環(huán)境保護(hù)
基因工程做成的“超級細(xì)菌”能吞食和分解多種污染環(huán)境的物質(zhì)。通常一種細(xì)菌只能分解石油中的一種烴類,用基因工
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