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2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項(xiàng):1.答題前,考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫清楚,將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2.選擇題必須使用2B鉛筆填涂;非選擇題必須使用0.5毫米黑色字跡的簽字筆書寫,字體工整、筆跡清楚。3.請(qǐng)按照題號(hào)順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無效;在草稿紙、試題卷上答題無效。4.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.從蛙體內(nèi)分離出坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本,固定之后,在相距較遠(yuǎn)的a、b兩點(diǎn)膜外連接一個(gè)靈敏電流計(jì),然后在圖中①位置給予一適宜強(qiáng)度的刺激,在某一時(shí)刻觀察到電流計(jì)指針呈現(xiàn)如圖所示的偏轉(zhuǎn)。下列說法正確的是()A.若指針偏轉(zhuǎn)角度為最大值,則b點(diǎn)膜處于極化狀態(tài)B.a(chǎn)點(diǎn)鈉離子通道一定為關(guān)閉狀態(tài),鉀離子通道開放C.①位點(diǎn)收到適宜刺激,腓腸肌一定能發(fā)生收縮反射D.興奮傳至腓腸肌需要借助化學(xué)信號(hào)-電信號(hào)-化學(xué)信號(hào)的轉(zhuǎn)換2.制備單克隆抗體過程中,下列與雜交瘤細(xì)胞的獲取相關(guān)敘述中正確的是()A.利用了細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜流動(dòng)性和基因重組等原理B.可利用振動(dòng)、電刺激等物理方法直接誘導(dǎo)細(xì)胞融合C.可利用細(xì)胞中染色體的數(shù)目和形態(tài)篩選雜交瘤細(xì)胞D.利用選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細(xì)胞可直接生產(chǎn)單抗3.下列有關(guān)人體細(xì)胞的敘述,不正確的是()A.細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果,細(xì)胞種類會(huì)增多B.衰老的細(xì)胞表現(xiàn)為大多數(shù)酶活性降低,細(xì)胞核體積增大C.衰老細(xì)胞的染色質(zhì)收縮有利于RNA的合成D.石棉和黃曲霉毒素是相同類型的致癌因子4.下列不符合生態(tài)工程基本原理的說法是()A.超載放牧導(dǎo)致草地退化,主要違背協(xié)調(diào)與平衡原理B.礦區(qū)生態(tài)環(huán)境的恢復(fù)工程中,關(guān)鍵是土壤微生物群的構(gòu)建和植被恢復(fù)C.城市生活垃圾實(shí)現(xiàn)廢物資源化利用依據(jù)的是物質(zhì)循環(huán)再生原理D.退耕還濕地和建立自然保護(hù)區(qū)的主要目的是為了給人類提供游覽勝地5.下列有關(guān)教材實(shí)驗(yàn)中使用的試劑和實(shí)驗(yàn)原理的敘述,正確的是()A.制作人的口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片觀察線粒體時(shí),需在潔凈載玻片中央滴一滴生理鹽水B.鹽酸在觀察細(xì)胞有絲分裂和觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布實(shí)驗(yàn)中的作用相同C.向某溶液中加入斐林試劑,水浴加熱后出現(xiàn)磚紅色沉淀,說明該溶液中含有葡萄糖D.在提取純凈的動(dòng)物細(xì)胞膜和植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原實(shí)驗(yàn)中水的作用原理相近6.無子西瓜的培育過程如圖所示,下列敘述正確的是()A.①過程只能用秋水仙素處理,它的作用主要是抑制細(xì)胞有絲分裂前期紡錘體的形成B.由三倍體種子發(fā)育成無子西瓜,與中心體有密切的關(guān)系C.四倍體西瓜與二倍體西瓜不存在生殖隔離,它們屬于同一物種D.上圖四倍體植株所結(jié)的西瓜,胚細(xì)胞內(nèi)含有3個(gè)染色體組7.早在19世紀(jì)末有醫(yī)生發(fā)現(xiàn),癌癥患者手術(shù)后意外感染釀膿鏈球菌,其免疫功能增強(qiáng)、存活時(shí)間延長(zhǎng),從而開啟了"癌癥免疫療法”的大門。"癌癥免疫療法”是指通過自身免疫系統(tǒng)來抗擊癌細(xì)胞的療法。下列相關(guān)敘述正確的是A.患者免疫功能增強(qiáng)是因?yàn)獒勀撴溓蚓秩氚┘?xì)胞使其裂解死亡B.釀膿鏈球菌激活患者的非特異性免疫功能從而消滅癌細(xì)胞C.癌癥免疫療法主要是通過增強(qiáng)患者的細(xì)胞免疫功能來殺死癌細(xì)胞D.癌癥免疫療法通過改變癌細(xì)胞的遺傳信息來達(dá)到治療目的8.(10分)森林群落中由于老齡樹木死亡造成林冠層出現(xiàn)空隙,稱為林窗。研究者調(diào)查了某森林中林窗下與林下的土壤動(dòng)物群落,得到如圖所示的結(jié)果。據(jù)此可以推斷出()A.在各層次中林窗的土壤動(dòng)物豐富度均高于林下B.林窗下和林下土壤動(dòng)物種類均隨深度的增加而增加C.光照只影響土壤動(dòng)物群落的水平結(jié)構(gòu)D.林窗下和林下不同層次的土壤動(dòng)物種群密度相同二、非選擇題9.(10分)VNN1基因(1542bp)與炎癥相關(guān)性疾病有關(guān),GFP基因(4735bp)控制綠色熒光蛋白的合成,該蛋白可在相應(yīng)波長(zhǎng)的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。某研究小組進(jìn)行鼠源GFP-VNNI重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其功能研究,回答下列問題:(l)為構(gòu)建重組質(zhì)粒,研究小組從數(shù)據(jù)庫查找到VNNl的DNA序列,并設(shè)計(jì)引物。上游引物:5?-AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC-3?下劃線為HindⅢ酶切位點(diǎn)),下游引物:5?-GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA-3?(下劃線為BamHI酶切位點(diǎn)),之后進(jìn)行PCR擴(kuò)增,PCR的原理是________。擴(kuò)增后的VNNI基因要與含GFP基因的載體連接,需用________(填具體酶)切割VNNI基因和含GFP基因的載體,再用________酶處理,構(gòu)建重組質(zhì)粒。(2)GFP基因在重組質(zhì)粒中可作為________________,其作用是________。用之前相同的限制酶對(duì)GFP-VNNI重組質(zhì)粒切割后,進(jìn)行電泳鑒定時(shí)得到如圖1所示的部分條帶,結(jié)果表明________。(3)IL-6為體內(nèi)重要的炎癥因子,能與相應(yīng)的受體結(jié)合,激活炎癥反應(yīng)。圖2為GFP-VNNI重組質(zhì)粒對(duì)細(xì)胞分泌IL-6的影響,由此說明________________,同時(shí)發(fā)現(xiàn)與正常組比較,空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組IL-6的表達(dá)有輕微升高,造成這種現(xiàn)象的可能原因是________________________。10.(14分)玉米為雌雄同株異花的二倍體植物,染色體數(shù)目為。下圖中a與b、c與d分別為玉米細(xì)胞中的兩對(duì)同源染色體?;卮鹣铝杏嘘P(guān)問題:(1)對(duì)玉米進(jìn)行人工雜交的步驟為_______________,若要測(cè)定玉米的基因組,應(yīng)測(cè)定___________條染色體上的DNA序列。(2)已知常見的玉米無某種抗性基因,導(dǎo)入外源抗性基因的玉米都能表現(xiàn)出抗性性狀,若某玉米植株M的細(xì)胞中a染色體上已導(dǎo)入一個(gè)抗性基因,欲將另一個(gè)抗性基因?qū)氲組的染色體上,用一次雜交實(shí)驗(yàn)來判斷另一個(gè)抗性基因?qū)氲奈恢茫ㄖ豢紤]圖中a、b、e、d四條染色體),請(qǐng)寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路、預(yù)期結(jié)果及結(jié)論_______________。11.(14分)基因工程載體是DNA重組技術(shù)使用的基本工具。回答下列問題(1)大腸桿菌的質(zhì)粒常被用來做基因工程中的載體,其主要優(yōu)點(diǎn)是_______________(至少兩項(xiàng))?;蚬こ讨谐J褂玫妮d體除質(zhì)粒外,還有_______________(至少兩項(xiàng))。(2)在進(jìn)行基因工程操作中,真正被用作載體的質(zhì)粒都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行人工改造過的。在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),通過人工改造,基因表達(dá)載體中除了含有目的基因外,還必須有_____________________。構(gòu)建目的基因表達(dá)載體的目的一方面是使目的基因在受體細(xì)胞中_______________,并遺傳給下一代;另一方面,使目的基因能夠_______________,從而得到轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品或生物。(3)利用乳腺生物反應(yīng)器來生產(chǎn)基因工程藥物時(shí),與藥用蛋白基因連在一起的是__________啟動(dòng)子,這樣才能使該目的基因在乳腺細(xì)胞中表達(dá)。(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法常用的載體為____________,構(gòu)建此表達(dá)載體時(shí),要將目的基因插入到質(zhì)粒的___________上,這樣就能夠通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞并插入到染色體中DNA上,使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。12.模式生物是科學(xué)家選定的用于研究具有普遍生命規(guī)律的生物,如果蠅、酵母菌、小鼠等。某一果蠅新品系,圓眼和棒眼是關(guān)于眼型的一對(duì)相對(duì)性狀,現(xiàn)用一只圓眼果蠅和一只棒眼果蠅進(jìn)行雜交,F(xiàn)1的表現(xiàn)型及比例為圓眼♀:圓眼♂∶棒眼♀∶棒眼♂=1∶1∶1∶1(不考慮基因位于X、Y染色體上的同源區(qū)段的情況)。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題:(1)果蠅作為遺傳學(xué)模式生物的主要優(yōu)點(diǎn)是____________;相對(duì)性狀是指______________________________________。(2)現(xiàn)有純合圓眼和純合棒眼雌雄果蠅若干只,請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)雜交實(shí)驗(yàn),以確定控制果蠅眼型相對(duì)性狀的等位基因是位于常染色體上還是位于X染色體上。寫出實(shí)驗(yàn)思路并預(yù)測(cè)結(jié)果和結(jié)論。_______________________________。(3)若研究發(fā)現(xiàn)控制圓眼和棒眼的等位基因位于X染色體上。現(xiàn)以題中所述F,為實(shí)驗(yàn)材料,請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一次雜交實(shí)驗(yàn),確定該相對(duì)性狀的顯隱性。寫出實(shí)驗(yàn)思路并預(yù)測(cè)結(jié)果和結(jié)論。____________________________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】
興奮在神經(jīng)纖維上雙向傳導(dǎo),在①處給予適宜強(qiáng)度的電刺激,興奮先后傳導(dǎo)到b、a所在部位,電流表先后觀察到兩次方向相反的偏轉(zhuǎn)。【詳解】A、圖示中指針向左偏轉(zhuǎn),說明b處膜外為正電荷,a處膜外為負(fù)電荷,即當(dāng)指針偏轉(zhuǎn)角度為最大值時(shí),b點(diǎn)膜處于外正內(nèi)負(fù)的極化狀態(tài),A正確;B、a點(diǎn)為外負(fù)內(nèi)正的動(dòng)作電位,鈉離子通道開放,鉀離子通道關(guān)閉,B錯(cuò)誤;C、反射需要經(jīng)過完整的反射弧,圖示從①點(diǎn)到腓腸肌不能構(gòu)成完整反射弧,且①位點(diǎn)受到適宜刺激產(chǎn)生興奮,若該神經(jīng)細(xì)胞釋放的是抑制性遞質(zhì),則腓腸肌也不發(fā)生收縮反應(yīng),C錯(cuò)誤;D、興奮傳至腓腸肌需要借助電信號(hào)-化學(xué)信號(hào)-電信號(hào)的轉(zhuǎn)換,D錯(cuò)誤。故選A。2、B【解析】
單克隆抗體的制備過程是:對(duì)小動(dòng)物注射抗原,從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞,將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞,克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞(體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)),最后獲取單克隆抗體?!驹斀狻緼、單克隆抗體的制備過程利用了細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜流動(dòng)性等原理,沒有用到基因重組,A錯(cuò)誤;B、誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞與效應(yīng)B細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞的物理方法有振動(dòng)、電刺激等,B正確;C、雜交瘤細(xì)胞的篩選需要使用特定的篩選培養(yǎng)基,觀察細(xì)胞染色體數(shù)目和形態(tài)只能判斷細(xì)胞是否融合,故不能通過觀察染色體的數(shù)目和形態(tài)篩選雜交瘤細(xì)胞,C錯(cuò)誤;D、利用選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細(xì)胞,還需要進(jìn)行專一抗體檢測(cè)和克隆化培養(yǎng)后才能用于生產(chǎn)單克隆抗體,D錯(cuò)誤。故選B?!军c(diǎn)睛】本題主要考查單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí),目的是考查學(xué)生對(duì)制備過程各環(huán)節(jié)的識(shí)記、理解和應(yīng)用,明確制備過程中的注意事項(xiàng)和關(guān)鍵手段。3、C【解析】
細(xì)胞的后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞衰老是指細(xì)胞在執(zhí)行生命活動(dòng)過程中,隨著時(shí)間的推移,細(xì)胞增殖與分化能力和生理功能逐漸發(fā)生衰退的變化過程。細(xì)胞衰老主要有以下特征:①細(xì)胞內(nèi)的色素會(huì)出現(xiàn)積累的現(xiàn)象。②細(xì)胞內(nèi)的水分會(huì)減小,體積相應(yīng)的也會(huì)變小,人體的新陳代謝速度也會(huì)減小。③細(xì)胞的呼吸速度會(huì)減慢,細(xì)胞核的體積會(huì)增大等。【詳解】A、細(xì)胞分化的根本原因是有些基因表達(dá)了,有些基因沒有表達(dá),導(dǎo)致細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能發(fā)生穩(wěn)定性的差異,細(xì)胞種類增多,A正確;B、衰老的細(xì)胞表現(xiàn)為大多數(shù)酶活性降低,細(xì)胞核體積增大,B正確;C、RNA合成是DNA轉(zhuǎn)錄而來,染色質(zhì)收縮不利于解開DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu),因此不有利于RNA的合成,C錯(cuò)誤;D、石棉和黃曲霉毒素是相同類型的致癌因子,都屬于化學(xué)致癌因子,D正確。故選C。4、D【解析】
生態(tài)工程依據(jù)的基本原理:(1)物質(zhì)循環(huán)再生原理:物質(zhì)能在生態(tài)系統(tǒng)中循環(huán)往復(fù),分層分級(jí)利用;(2)物種多樣性原理:物種繁多復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)具有較高的抵抗力穩(wěn)定性;(3)協(xié)調(diào)與平衡原理:生態(tài)系統(tǒng)的生物數(shù)量不能超過環(huán)境承載力(環(huán)境容納量)的限度;(4)整體性原理:生態(tài)系統(tǒng)建設(shè)要考慮自然、經(jīng)濟(jì)、社會(huì)的整體影響;(5)系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理:系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理:要通過改善和優(yōu)化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)改善功能;系統(tǒng)整體性原理:系統(tǒng)各組分間要有適當(dāng)?shù)谋壤P(guān)系,使得能量、物質(zhì)、信息等的轉(zhuǎn)換和流通順利完成,并實(shí)現(xiàn)總體功能大于各部分之和的效果,即“1+1>2”?!驹斀狻緼、超載放牧導(dǎo)致草地退化,主要違背協(xié)調(diào)與平衡原理,A正確;B、土壤微生物群的構(gòu)建和植被恢復(fù)是礦區(qū)生態(tài)環(huán)境的恢復(fù)工程中的關(guān)鍵的措施,B正確;C、城市生活垃圾實(shí)現(xiàn)廢物資源化利用依據(jù)的是物質(zhì)循環(huán)再生原理,C正確;D、退耕還濕地和建立自然保護(hù)區(qū)的主要目的是為了保護(hù)野生動(dòng)植物,D錯(cuò)誤。故選D。5、D【解析】
1.質(zhì)壁分離的原理:當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí),細(xì)胞就會(huì)通過滲透作用而失水,細(xì)胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進(jìn)入到溶液中,使細(xì)胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大,當(dāng)細(xì)胞不斷失水時(shí),原生質(zhì)層就會(huì)與細(xì)胞壁分離。2.質(zhì)壁分離復(fù)原的原理:當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時(shí),細(xì)胞就會(huì)通過滲透作用而吸水,外界溶液中的水分就通過原生質(zhì)層進(jìn)入到細(xì)胞液中,整個(gè)原生質(zhì)層就會(huì)慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài),緊貼細(xì)胞壁,使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原?!驹斀狻緼、制作人的口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片觀察線粒體時(shí),在潔凈載玻片中央滴一滴用生理鹽水配制的健那綠染液,A錯(cuò)誤;B、鹽酸在觀察細(xì)胞有絲分裂中的作用是解離,而在觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布實(shí)驗(yàn)中的作用是改變細(xì)胞膜的通透性,進(jìn)而使染色劑容易進(jìn)入,B錯(cuò)誤;C、向某溶液中加入斐林試劑,水浴加熱后出現(xiàn)磚紅色沉淀,說明該溶液中含有可溶性還原糖,C錯(cuò)誤;D、在提取純凈的動(dòng)物細(xì)胞膜和植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原實(shí)驗(yàn)中利用了滲透作用的原理,實(shí)驗(yàn)的結(jié)果都是吸水或失水造成的,D正確。故選D。6、D【解析】
分析題圖:圖示表示無子西瓜的培育過程,首先①用秋水仙素(抑制紡錘體的形成)處理二倍體西瓜的幼苗,獲得四倍體植株;②用該四倍體西瓜和二倍體進(jìn)行雜交得到種子發(fā)育成的即是三倍體西瓜;③三倍體西瓜結(jié)的種子再種植即可獲得三倍體無籽西瓜?!驹斀狻緼、①過程用秋水仙素處理或者低溫處理,它的作用是抑制有絲分裂過程中紡錘體的形成,A錯(cuò)誤;B、由三倍體種子發(fā)育成無子西瓜,涉及到細(xì)胞的有絲分裂和分化,而高等植物細(xì)胞不存在中心體,B錯(cuò)誤;C、由于二倍體西瓜與四倍體西瓜之間雜交產(chǎn)生的三倍體西瓜是高度不育的,因此二倍體西瓜與四倍體西瓜之間存在生殖隔離,C錯(cuò)誤;D、四倍體植株所結(jié)的西瓜中所含的胚是由四倍體的母本產(chǎn)生的卵細(xì)胞和二倍體的父本產(chǎn)生的精子結(jié)合形成的受精卵發(fā)育而來的,因此胚細(xì)胞內(nèi)含有3個(gè)染色體組,D正確。故選D。7、C【解析】
1、免疫是指正常機(jī)體所具有的識(shí)別“自己”排除“非己”的能力。免疫分為非特異性免疫和特異性免疫。2、免疫系統(tǒng)具有防衛(wèi)、監(jiān)控和清除功能。免疫系統(tǒng)監(jiān)控并清除體內(nèi)衰老或因其他因素而被破壞的細(xì)胞,以及癌變的細(xì)胞?!驹斀狻緼、患者免疫功能增強(qiáng)是因?yàn)獒勀撴溓蚓秩雽?dǎo)致免疫功能增強(qiáng),效應(yīng)T細(xì)胞攻擊癌細(xì)胞,A錯(cuò)誤;B、釀膿鏈球菌激活患者的特異性免疫功能從而消滅癌細(xì)胞,錯(cuò)誤;C、由題意可知,癌癥免疫療法主要是通過增強(qiáng)患者的細(xì)胞免疫功能來殺死癌細(xì)胞,C正確;D、癌癥免疫療法通過直接殺死癌細(xì)胞來達(dá)到治療目的,D錯(cuò)誤。故選C。8、A【解析】
分析柱形圖:隨著枯落物層的深度的增加,土壤動(dòng)物種類數(shù)逐漸減少,但林窗和林下不同層次的土壤動(dòng)物種群密度不相同,在各層次中林窗的土壤動(dòng)物豐富度均高于林下?!驹斀狻緼、由圖可知,在各層次中林窗的土壤動(dòng)物豐富度均高于林下,A正確;B、由圖可知,林窗和林下土壤動(dòng)物種類隨深度的增加而減少,B錯(cuò)誤;C、隨著枯落物層的深度的增加,土壤動(dòng)物種類數(shù)逐漸減少,由此可知光照明顯影響了土壤動(dòng)物群落的垂直結(jié)構(gòu),C錯(cuò)誤;D、由圖可知,林窗和林下不同層次的土壤動(dòng)物種群密度各不相同,D錯(cuò)誤。故選A。二、非選擇題9、DNA雙鏈復(fù)制HindⅢ酶和BamHⅠ酶DNA連接標(biāo)記基因鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含目的基因的細(xì)胞篩選出來VNN1基因已插入到含GFP基因的載體中(合理即可)VNN1基因表達(dá)產(chǎn)物能促進(jìn)細(xì)胞分泌炎癥因子IL-6操作過程中對(duì)細(xì)胞的損傷(或用到的化學(xué)試劑對(duì)細(xì)胞具有一定的毒性作用),可以激活相應(yīng)細(xì)胞分泌炎癥因子IL-6【解析】
基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的獲?。涸嘶虿扇≈苯臃蛛x獲得,真核基因是人工合成,人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。第二步:基因表達(dá)載體的構(gòu)建第三步:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞常用的轉(zhuǎn)化方法:將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞:最常用的方法是顯微注射技術(shù);將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:先用Ca2+處理細(xì)胞,使其成為感受態(tài)細(xì)胞,再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過程。第四步:目的基因的檢測(cè)和表達(dá)?!驹斀狻浚?)PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制,為防止切割的質(zhì)粒環(huán)化,通常選擇兩種的限制酶進(jìn)行切割,同時(shí)需要用相同的限制酶對(duì)目的基因進(jìn)行處理,所以選擇HindⅢ酶和BamHI切割VNNI基因和含GFP基因的載體,再用DNA連接酶處理形成重組質(zhì)粒。(2)GFP基因(4735bp)控制綠色熒光蛋白的合成,該蛋白可在相應(yīng)波長(zhǎng)的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光,所以在重組質(zhì)粒中可以作為標(biāo)記基因;鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含目的基因的細(xì)胞篩選出來;電泳條帶顯示分子量增加表明VNN1基因已插入到含GFP基因的載體中。(3)從柱狀圖中看出VNN1組中IL-6的濃度增加,說明了VNN1基因表達(dá)產(chǎn)物能促進(jìn)細(xì)胞分泌炎癥因子IL-6;空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組IL-6的表達(dá)有輕微升高,可能原因是操作過程中對(duì)細(xì)胞的損傷(或用到的化學(xué)試劑對(duì)細(xì)胞具有一定的毒性作用),可以激活相應(yīng)細(xì)胞分泌炎癥因子IL-6?!军c(diǎn)睛】本題重點(diǎn)考查了基因工程的操作知識(shí),考生需要數(shù)量掌握其操作步驟。10、套袋---授粉----套袋10實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路:可以選用無抗性基因的玉米與M植株進(jìn)行雜交,觀察并統(tǒng)計(jì)子代玉米的抗性性狀出現(xiàn)的比例。預(yù)期結(jié)果及結(jié)論:①若子代玉米的抗性性狀占子代總數(shù)的1/2,則另一個(gè)抗性基因?qū)氲絘染色體上。②若子代玉米的抗性性狀占子代總數(shù)的1,則另一個(gè)抗性基因?qū)氲絙染色體上。③若子代玉米的抗性性狀占子代總數(shù)的3/4.則另一個(gè)抗性基因?qū)氲絚或d染色體上?!窘馕觥?/p>
植物的雜交實(shí)驗(yàn)方法通常是去雄、套袋、傳粉、再套袋。基因組計(jì)劃通常需要對(duì)該物種的基因的全部DNA序列進(jìn)行測(cè)序。在設(shè)計(jì)雜交實(shí)驗(yàn)時(shí)需考慮基因?qū)氲奈恢?,基因可能?dǎo)入到同一條染色體上,或同源染色體上,或非同源染色體上?!驹斀狻浚?)因?yàn)橛衩诪榇菩弁戤惢ǎ虼藢?duì)玉米進(jìn)行人工雜交時(shí)無需去雄,步驟為套袋---授粉----套袋,雌雄同株的植物沒有性染色體,所以玉米的一個(gè)單倍體基因組中有10條染色體;(2)選用無抗性基因的玉米與M植株進(jìn)行雜交,三種導(dǎo)人情況如圖所示:①細(xì)胞可產(chǎn)生帶抗性基因的配子占配子總數(shù)的1/2,②細(xì)胞產(chǎn)生的配子全是帶抗性基因的,③細(xì)胞可產(chǎn)生帶抗性基因的配子占配子總數(shù)的3/4,上述配子分別與無抗性基因的配子結(jié)合后,預(yù)期結(jié)果及結(jié)論為:①若子代玉米的抗性性狀占子代總數(shù)的1/2,則另一個(gè)抗性基因?qū)氲絘染色體上;②若子代玉米的抗性性狀占子代總數(shù)的1,則另一個(gè)抗性基因?qū)氲絙染色體上;③若子代王米的抗性性狀占子代總數(shù)的3/4,則另一個(gè)抗性基因?qū)氲絚或d染色體上?!军c(diǎn)睛】該題的難點(diǎn)在于設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)判定基因的位置關(guān)系,以實(shí)驗(yàn)的方法考察了同一條染色體,同源染色體和非同源染色體的位置關(guān)系及所遵循的定律,需要學(xué)生對(duì)遺傳的基本規(guī)律和一對(duì)相對(duì)性狀的雜交實(shí)驗(yàn)及兩對(duì)性狀的雜交實(shí)驗(yàn)有很扎實(shí)的基礎(chǔ)。11、分子小,能自主復(fù)制,有標(biāo)記基因,有多個(gè)酶切位點(diǎn)λ噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因穩(wěn)定存在表達(dá)并發(fā)揮作用乳腺蛋白基因Ti質(zhì)粒T—DNA【解析】
運(yùn)載體是基因工程進(jìn)行所必須的工具,在進(jìn)行目的基因的轉(zhuǎn)移時(shí),常常需要將目的基因與運(yùn)載體相結(jié)合,一般常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒,噬菌體和動(dòng)植物病毒。目的基因建構(gòu)時(shí),要保證形成的重組載體具有目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因,識(shí)記基因工程的基本工具和操作步驟是本題的解題關(guān)鍵?!驹斀狻浚?)基因工程中常使用的載體為質(zhì)粒,質(zhì)粒的優(yōu)點(diǎn)有:分子小,分子上有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn),供外源DNA片段插入,質(zhì)粒可在細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制,質(zhì)粒DNA分子上有特殊的標(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇;除質(zhì)粒外,λ噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒也是常用的基因工程載體;(2)構(gòu)建的表達(dá)載體應(yīng)包括啟動(dòng)子、終止子,以便驅(qū)動(dòng)和停止轉(zhuǎn)錄,標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因;構(gòu)建目基因表達(dá)載體后,通過復(fù)制原點(diǎn),目的基因一方面在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,可以遺傳給下一代;同時(shí),在啟動(dòng)子的調(diào)控下,目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用,從而得到轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品或生物;(3)如果要利用乳腺生物反應(yīng)器來生產(chǎn)基因工程藥物,啟動(dòng)子必須是乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子,這樣才能使該目的基因在乳腺細(xì)胞中表達(dá);(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法常用的載體為Ti質(zhì)粒,它含有一段可轉(zhuǎn)移的DNA,這段DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并且整合到受體染色體的DNA上;構(gòu)建表達(dá)載體時(shí),將目的基因插入到質(zhì)粒的T—DNA上,就能夠使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞并插人到染色體的DNA上,使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。【點(diǎn)睛】該題重點(diǎn)考察了基因表達(dá)載體的
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