血液系統(tǒng)疾病動物模型制備

Contents一.血栓形成的動物模型二.DIC的動物模型三.貧血的動物模型第一頁，共八十頁。一.血栓形成的實驗動物模型第二頁，共八十頁。在活體心血管系統(tǒng)內(nèi)血液成分形成固體質(zhì)塊的過程稱為血栓形成

(thrombosis)。第三頁，共八十頁。第四頁，共八十頁。血管的止血功能血液凝固反應血小板的作用3．機體的止、凝血功能第五頁，共八十頁。血管壁的損傷：內(nèi)皮損傷，內(nèi)皮下基質(zhì)(ECM)裸露血流狀態(tài)的改變：血流緩慢或渦流形成血液性質(zhì)的改變：高凝狀態(tài)血栓形成的機理：第六頁，共八十頁。1.兔體外血栓形成模型造模原理：血流緩慢或有渦流,血小板進入邊流,增加黏附于管壁的可能性凝血因子易于在局部堆積和活化，啟動凝血過程血液接觸異物能使凝血系統(tǒng)和血小板激活第七頁，共八十頁。造模方法：Rabbitsanesthetizedwithintramuscularinjectionsof5mg/kgxylazine(甲苯噻嗪)and30mg/kgketaminehydrochloride,maintaineddilutedketamine(2mg/ml,IV)atarateof1.53mg/kg/hrMechanicalventilationviaatracheotomyBodytemperaturemonitoredwitharectalprobeandmaintainedat37°Cusingawater-jacketedheatingblanket.Extracorporealcirculation(ECC,4hrs)bycannulatingtheleftcarotidarteryforECCinflowandleftfemoralvein（orrightexternaljugularvein）forECCoutflow第八頁，共八十頁。15cm，1/4inchpolyurethane

catheter

15cm，1/4inch亞安酯catheter

8cm，3/8inch聚亞安酯catheter

頸總動脈股靜脈造模方法第九頁，共八十頁。PlateletaggregationusingaChrono-Logopticalaggregometer.Obtain

PRPandPPPbycentrifugation,100%lighttransmissionsetbyPPPand0%byPRP模型評估和應用第十頁，共八十頁。Flowcytometrydetection:PlateletactivationP-selectin(CD62P)expression,ActivatedGPIIb/IIIa(fibrinogenreceptor)LeukocyteactivationMonocyteMAC-1(CD11b/CD18)andCD14expressionNutrophilMAC-1andCD14expressionPlatelet-leukocyteadhesionPlateletmarker(CD61,CD42)andleukocytemarker(CD11b),doublestained模型評估和應用第十一頁，共八十頁。Thrombusquantitation:Circuitsremovedafter4hrsonECCRinsedwithnormalsalineResidualthrombusinthelargertubingofECCphotographedImagequantitatedusingImageJimagingsoftware模型評估和應用第十二頁，共八十頁。Biomaterials.2010Apr;31(10):2736.

模型評估和應用第十三頁，共八十頁。造模原理：血小板接觸粗糙面發(fā)生粘附激活血小板因粘附而激活，因激活而聚集，形成白色血栓2.大鼠血栓形成模型第十四頁，共八十頁。造模方法：

麻醉后行氣管插管

分離一側(cè)頸總動脈和另側(cè)頸外靜脈（股靜脈）

頸總動脈和股靜脈之間接三段相連的聚乙烯管,

管中充滿肝素生理鹽水,中段內(nèi)放一段絲線

經(jīng)一定時間后取出沿絲線形成的血栓第十五頁，共八十頁。中段絲線頸總動脈股靜脈造模方法第十六頁，共八十頁。模型評估和應用：剝離沿絲線形成的血栓，直接稱量血栓,

濕重和干重方法簡便可靠，應用于檢測處理因素（如

藥物）對血小板粘附和聚集功能的影響第十七頁，共八十頁。3.兔腹主動脈血栓形成模型造模原理:損傷血管內(nèi)膜,使內(nèi)皮下細胞外基質(zhì)(ECM)裸露,促使血小板與ECM(主要是膠原纖維)接觸而被激活和黏附。同時裸露的膠原纖維激活Ⅻ因子以及損傷的內(nèi)皮細胞釋放出組織因子,啟動了內(nèi)源性和外源性凝血過程,導致血栓形成。第十八頁，共八十頁。造模方法

標記血小板：動物麻

醉后分離一側(cè)

股靜脈和股動脈

股靜脈

取血20ml,用111In標記血小板,從耳緣靜脈注入標記好的血小板第十九頁，共八十頁。損傷內(nèi)膜：經(jīng)股

動脈插入Fogarty(5f)氣

囊導管至

胸、腹主動脈交

界處,氣

囊充氣至80kPa

后下拉氣囊管10cm,放氣后重新插至交界

處,充氣下拉,反復6次,撤除導管,結(jié)扎動脈血栓檢測：去內(nèi)

膜后1小時

靜脈注射0.5%伊文斯蘭5ml,然后靜注過量戊巴比妥鈉處死動物,

分離主動脈,截取上端5cm胸主動脈和下

端10cm均勻蘭染的腹主動脈,計數(shù)各動脈

段的CPM值,充分干燥后稱重,計算每克干

重動脈段上標記的血小板數(shù)。造模方法第二十頁，共八十頁。通過CPM可準確定量受損血管壁上粘附聚集的血小板可評估檢測處理因素對血小板粘附和聚集功能的影響應用于血栓機制的研究和抗血栓藥物的篩選模型評估和應用第二十一頁，共八十頁。4.冠狀動脈血栓形成模型造模原理:直流電（1.5mA）刺激頸動脈壁可使血管損傷,血管內(nèi)膜變得粗糙不平,引起血小板黏附、聚集和釋放反應,促進凝血活性；同時，受損內(nèi)膜暴露膠原纖維激活內(nèi)源性凝血系統(tǒng),還可通過釋放組織因子激活外源性凝血系統(tǒng),導致動脈管腔內(nèi)逐漸形成肉眼可見的混合血栓。第二十二頁，共八十頁。造模方法

犬經(jīng)麻醉、人工呼吸、開胸剪開心包膜,左房插管備注射

藥物用。

分離冠狀動脈左旋支,用1.5mA直流電刺激左旋支6小時以

破壞血管壁,促進血栓形成。

同時記錄冠脈血流量、動脈血壓、心外膜電圖。6小時后處死動物并從左心房插管注射20%活性藍

(1ml/5kg)以測定左室心肌梗塞的大小。

觀察血栓形成的百分率，并稱量血栓重量第二十三頁，共八十頁。模型評估和應用該模型所形成的血栓組成和形態(tài)近似人冠狀動脈，適用于冠狀動脈急性血栓形成的機制、防治研究。第二十四頁，共八十頁。5.家兔耳緣靜脈血栓形成模型

血流速度變慢，促進血液凝固

凝血酶使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白單體

凝血酶使XIII激活，后者使纖維蛋白單體轉(zhuǎn)變

成纖維蛋白多聚體，導致血液凝固

凝血酶激活蛋白C導致tPA釋放，后者使纖溶酶

原激活

凝血酶同時能直接激活纖溶酶，使纖維蛋白多

聚體降解導致血栓溶解造模原理:第二十五頁，共八十頁。

家兔耳緣靜脈分離出2cm長的靜脈段,用絲線同時結(jié)扎遠

心端和近心端,并用血管夾夾住兩側(cè)分枝以阻止血流流入用針頭抽去該段血液,注入凝血酶(20NIH凝血酶單位/毫升)

松開血管夾使血液流入,再夾住分枝使靜脈段內(nèi)形成血塊撤去血管夾,放開結(jié)扎線,用透射光觀察血栓消失及血流恢

復時間造模方法：第二十六頁，共八十頁。模型評估和應用本模型形成的血栓為紅色血栓方法簡便主要用于溶栓藥物溶栓作用的觀察。第二十七頁，共八十頁。二.DIC的動物模型第二十八頁，共八十頁。第二十九頁，共八十頁。

彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)是一種由不同原因引起的以全身性血管內(nèi)凝血系統(tǒng)激活為特征的獲得性綜合征，表現(xiàn)為先發(fā)生廣泛性微血栓形成，繼而因大量凝血因子和血小板被消耗（有時伴有纖溶亢進），導致多部位出血、休克、器官功能障礙及微血管病性溶血性貧血。第三十頁，共八十頁。實驗對象：成年家兔，雌雄隨機

1.家兔DIC模型的復制第三十一頁，共八十頁。

造模原理正常體內(nèi)循環(huán)血液中不含組織因子，當組織損傷或內(nèi)皮細胞和白細胞激活時，組織因子能釋放或暴露于循環(huán)血液啟動外源性凝血過程。兔腦粉含有組織因子，靜脈注射兔腦粉后通過激活外源性凝血途徑引起DIC.第三十二頁，共八十頁。兔腦粉浸液的制備：健康成年家兔安樂處死后,即刻開顱摘取兔腦，除去血管、腦膜和其它結(jié)締組織，用PBS洗凈后，置于研缽中伴丙酮研磨成粥狀懸液，靜置數(shù)分鐘后棄上清液，再加入丙酮研磨重復前述步驟多次，直至腦組織完全脫水成白色粉末，置4oC保存待用。造模方法：第三十三頁，共八十頁。稱重后，用20%烏拉坦4ml/kg耳緣靜脈注射麻醉

動物用生理鹽水配制4％兔腦粉溶液，按2ml／kg體重計算兔腦粉溶液，加生理鹽水稀釋至20m1后，由耳緣靜脈緩慢注入（10min）。分別于注入兔腦粉溶液前15min、注入后15min和45min，記錄家兔的血壓和呼吸，并取血置于有肝素的注射器中，以測定3P試驗、PT、纖維蛋白原、血小板計數(shù)。造模方法復制DIC模型：第三十四頁，共八十頁。凝血酶原時間(PT)測定①P試液配制：取兔腦粉0.2g，加入5mlNS充分混勻，置C37oC恒溫水浴箱內(nèi)孵育1hr，孵育期間用玻璃棒攪拌3至4次，孵育后混勻、離心(1000rpmx5min）,取上清液與等量氯化鈣（0.025mol／L）溶液混勻。取被檢血漿0.1ml，置于小試管內(nèi)放于37℃水浴中。②取待測血漿0.1ml加入P試液0.2ml，輕輕地側(cè)動，直至液體停止流動或出現(xiàn)粗顆粒，即為凝血酶原時間.③重復3次，取平均值,家兔正常值為6～8sec。造模方法檢查急性DIC的幾種血液學常規(guī)方法：第三十五頁，共八十頁。血小板計數(shù)吸取20μl全血加入到0.38ml血小板稀釋液中混勻，用滴管將上述混懸液一小滴滴入血球計數(shù)板內(nèi)，靜置15min后，用高倍鏡計數(shù)。數(shù)5個方格內(nèi)之血小板數(shù)，乘以1000，即得每立方毫米血小板數(shù)。造模方法第三十六頁，共八十頁。魚精蛋白副凝實驗(3P實驗)①取全血置于EP管中，離心（5000rpmx3min）后，取上清液即血漿。②取血漿0.4ml置于試管中，加入0.1ml1%硫酸魚精蛋白液混勻。③室溫下靜置30min后搖動試管，出現(xiàn)白色纖維或凝塊者為陽性，均勻渾濁而沒有出現(xiàn)白色纖維者為陰性。造模方法第三十七頁，共八十頁。血清纖維蛋白(原)含量測定(飽和鹽水法)①取血漿0.5m1置于12X100mm的試管中，加入飽和氯化鈉溶液4.5m1，充分混勻，置于37℃水浴中孵育3min，取血后再次混勻，用721型分光光度計比色，測定光密度.②以生理鹽水代替飽和氯化鈉溶液，進行同樣操作作為對照。③對照管調(diào)零點，測出光密度(波長520mm)后，按下式計算纖維蛋白原含量：測定管光密度

×1000=mg%0.5造模方法第三十八頁，共八十頁。動物死后觀察各臟器的變化造模方法尸檢第三十九頁，共八十頁。2.小鼠DIC模型的復制第四十頁，共八十頁。Shwartzmanreaction:ageneralizedreactionfollowingtwointravenousinjectionsofendotoxingiven24hoursapartandmarkedbywidespreadhemorrhage,reducednumbersofwhitebloodcellsandplatelets,renalnecrosis,anddeathoftheanimal—calledalsogeneralizedShwartzmanreaction第四十一頁，共八十頁。

造模原理：感染是DIC發(fā)生的最常見的原因，而單核吞噬系統(tǒng)功能障礙是DIC發(fā)生的重要誘因之一，第一次注射小劑量致敏內(nèi)毒素能導致單核吞噬系統(tǒng)功能障礙，當24小時后第二次注射亞致死量內(nèi)毒素即可誘發(fā)DIC.第四十二頁，共八十頁。二、實驗對象和材料實驗對象：

10Weekold,femaleC57Bl/6mice第四十三頁，共八十頁。Twoconsecutiveinjections:alowdoseendotoxinpriminginjectionof5μgSerratiamarcescens(靈

桿菌)LPS(in40μl,Sigma)orsterilesalinecontrol(no-priming)wasgiveninthefoot(intradermally)24hlaterbyanintravenousLPSchallenge(300μgSerratiamarcescens

LPS)(in100μl).MicereceivingtwoendotoxininjectionswilldevelopaShwartzmanreaction.No-primingcontrolsrepresentasingle-doseendotoxemiamodel.Miceweresacrificedatbaselinelevels(t=-24h),24hoursafterpriming(t=0h),2hoursafterchallenge(t=2h)and6hoursafterchallenge(t=6h).Eachgroupcontained8mice.復制DIC模型第四十四頁，共八十頁。Thrombiformationinliverandlung.Formationof(micro-)thrombiafterLPSchallengewithandwithout24hoursoflowdoseendotoxinpriming.(a)Representsthenumberofthrombiinliver.(b)Demonstratesthenumberofthrombiin10microscopicfields(25×)inlungtissue.(mean±SE)第四十五頁，共八十頁。Hepatic(ischemic)necrosis.Necroticareasintheliverwerescoredfor10microscopicfields(25×)usinghaematoxylinandeosinstainedsections(mean±SE)第四十六頁，共八十頁。LPS-inducedkidneyandliverdamage.(a)Creatininelevelsinplasmaofmicerepresentingkidneyfailure.(b+c)Transaminaseleakageintoplasmareflectsacutecellularandmitochondrialhepaticinjury(mean±SE)第四十七頁，共八十頁。三.貧血的動物模型貧血是指人體外周血紅細胞容量減少，低于正常范圍下限的一種常見的臨床癥狀。第四十八頁，共八十頁。1、缺鐵性貧血動物模型造模原理：缺鐵性貧血（irondeficiencyanemia，IDA）是指各種原因引起的缺鐵導致紅細胞生成減少而導致的貧血。通過低鐵飼料喂養(yǎng)動物使鐵攝入減少，外加多次少量放血使鐵丟失，造成體內(nèi)鐵的缺乏。第四十九頁，共八十頁。造模方法實驗動物：選用4周齡SD大鼠，雌雄不拘，體重65g左右，HGB≥130g/L。建模方法：采用EDTA浸泡處理以去除飼料中的鐵（低鐵飼料）后喂養(yǎng)動物。采用去離子水作為動物飲水，以排除飲水中鐵離子的影響。在低鐵飼料飼喂2周后進行，常用尾靜脈放血法，1～1.5ml/次，2次/周。第五十頁，共八十頁。飼料中的含鐵量是誘導IDA模型的關鍵：（1）飼喂含鐵量<15.63mg/Kg的飼料35天，SD大鼠出現(xiàn)典型IDA表現(xiàn)；（2）飼喂含鐵40.30mg/Kg的飼料SD大鼠出現(xiàn)缺鐵，但并不表現(xiàn)貧血癥狀。模型指標：（1）HGB≤100g/L；（2）血象：紅細胞體積較正常紅細胞偏小，大小不一，中心淡染區(qū)擴大，MCV減小、MCHC降低；（3）血清鐵降低，<10μmol/L，血清總鐵結(jié)合力增高，>60μmol/L。用于缺鐵性貧血藥物作用和缺鐵性貧血機制的研究，但不適用于鐵吸收不良相關的防治研究。模型評估和應用第五十一頁，共八十頁。2、溶血性貧血動物模型

溶血性貧血(hemolyticanemia,)是一種常見的貧血類型，是指由于某種原因使紅細胞存活期縮短(15-20天），破壞增加，超過了骨髓代償能力（6-8倍）所引起的一類貧血，是常見的造血系統(tǒng)疾病。第五十二頁，共八十頁。

造模原理：動物注射一定量的乙酰苯肼(acetylphenylhydrazine,APH)，APH是一種強氧化劑，能特異性地對紅細胞起緩慢而進行性地氧化損傷作用，尤其是干擾紅細胞內(nèi)的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶，促進血紅蛋白變性而形成海氏小體，也可直接破壞紅細胞的膜蛋白和脂類，使膜溶解破裂，紅細胞崩解，造成溶血性貧血。第五十三頁，共八十頁。造模方法：

小鼠第1、4、7天皮下注射APH生

理

鹽水溶液0.2g/kg、0.1g/kg、0.2g/kg，第9天造模成功，其

他給藥方法也可以造成此模型。

大鼠

第1、4天

皮

下

注射APH生理鹽水溶液0.16g/kg、0.08g/kg，第8天造模成功；或兩次劑

量均為0.2g/kg，第10天造模成功。

家兔以2％APH生理鹽水溶液給實驗動物皮下或

肌內(nèi)注

射2～3次，劑量為0.1g/kg，即可建立溶

血性貧血模型。第五十四頁，共八十頁。外周血血紅蛋白和紅細胞進行性下降；網(wǎng)織紅細胞、海氏小體和白細胞總數(shù)則顯著增多。本方法建模周期短，操作簡便，模型動物癥狀和外周血象、血細胞的生化學變化與人類溶血性貧血基本相似，為研究實驗性溶血性貧血提供了一種簡易模型。模型評估和應用第五十五頁，共八十頁。3.失血性貧血動物模型造模原理：急性失血后貧血(posthemorrhagicanemia)是快速大量出血引起的貧血；慢性失血后貧血是由于長期中度出血所致的小細胞性貧血。通過人為放血導致動物血容量和血細胞的減少，從而導致動物出現(xiàn)短期的貧血特征，以此制作失血性貧血模型。第五十六頁，共八十頁。造模方法：

小鼠:

眼眶后靜脈叢放血6～8滴(約0.5ml)，隔日

放血1次，連續(xù)5次可形成慢性失血性貧血模型。

每天剪尾放血0.5ml，連續(xù)7天，也可造成貧血。

大鼠:

大鼠剪尾放血1.5～2ml，隔日1次，連續(xù)5

次，可形成慢性失血性貧血。

家兔或犬:

從動物靜脈或者動脈采集全血容量的1/3，每天1次，反復幾次，即可造成失血性貧血

動物模型。第五十七頁，共八十頁。模型評估和應用：通過較短時間內(nèi)向體外大量放血，造成急性失血性貧血。也可通過反復多次放血，造成慢性失血性貧血。該方法操作簡單，指標明確，但樣本間失血量較難控制完全一致。該模型用于一般失血性貧血的發(fā)病機制及其新藥藥效學篩選研究。第五十八頁，共八十頁。4、再生障礙性貧血動物模型再生障礙性貧血（aplasticanemia），簡稱再障，系多種病因引起的造血系統(tǒng)退行性變，紅骨髓總?cè)萘坎粩鄿p少，黃骨髓不斷增加，造血衰竭，以全血細胞減少為主要表現(xiàn)的一組綜合征。建模方法包括化學建模、物理建模及免疫介導等。再障的發(fā)病機制尚未完全闡明。第五十九頁，共八十頁。

化學方法建模：造模原理：化學藥物的毒副作用抑制骨髓造血功能，誘導再生障礙性貧血。腺嘌呤可導致腎臟病變，使促紅細胞生成素（EPO）分泌不足，進而導致紅系和巨核系造血障礙。白消安可選擇性抑制骨髓。苯類化學物質(zhì)進入動物體內(nèi)后，在骨髓富集（可達血清濃度的20倍），對骨髓有較強的抑制作用，可導致再障。第六十頁，共八十頁。腺嘌呤致大鼠腎性貧血模型：實驗動物：SD大鼠，雌雄不拘。利用飼喂含腺嘌呤0.75%，投飼量300mg/kg/d，連續(xù)喂養(yǎng)6-7周，獲得腎衰竭貧血模型實驗動物紅細胞、血紅蛋白及紅細胞壓積等主要紅系指標均、血小板均顯著下降。第六十一頁，共八十頁。白消安致骨髓抑制的再障模型：實驗動物：小鼠、SD大鼠、家兔，雌雄不拘。建模方法：白消安（馬利蘭）（1）口服給藥，15mg/kg/周或30mg/kg/周，總給藥劑量達到120-150mg/kg時，可致家兔的再障，出現(xiàn)全血細胞減少、淋巴細胞比值增加、骨髓黃化和骨髓纖維化。（2）一次性給藥，20-35mg/kg腹腔注射，可致大鼠再障。（3）小鼠每天腹腔注射15mg/kg，持續(xù)8-9天，停藥60天后，可使骨髓造血功能抑制。出現(xiàn)血細胞減少和骨髓有核細胞降低，建模穩(wěn)定、實驗動物存活率高。第六十二頁，共八十頁。苯致骨髓抑制的再障模型：實驗動物：CD1小鼠、家兔。建模方法：苯類化學物質(zhì)進入動物體內(nèi)后，在骨髓富集（可達血清濃度的20倍），對骨髓有較強的抑制作用，可導致再障。（1）皮下注射給藥，苯與玉米油1:1混合物，4.0ml/kg，3次/周，共給藥25次，可致CD1小鼠再障，表現(xiàn)為全血細胞減少、骨髓黃化、脂肪細胞等非造血細胞數(shù)目增多，骨髓間質(zhì)血竇充血、出血伴水腫。（2）皮下注射給藥，純苯，天，3次/周，連續(xù)給藥2-3周，可致全血細胞減少、造血細胞減少。第六十三頁，共八十頁?；瘜W毒物誘導再障動物模型與人類再生障礙性貧血有相似之處，該模型成功率高，結(jié)果穩(wěn)定，但造模時間過長，易造成骨髓永久損害。可作再生障礙性貧血的發(fā)病機制研究、疾病進展研究和治療藥物篩選的動物模型。模型評估和應用第六十四頁，共八十頁。

物理方法建模造模原理：放射物質(zhì)產(chǎn)生的高能射線可穿透機體，起DNA損傷，干擾DNA復制，阻斷有絲分裂，對造血干細胞等分裂增值活躍的細胞有強抑制作用，可使動物造血干細胞和袓細胞減少，破壞骨髓造血細胞的增殖能力。第六十五頁，共八十頁。造模方法--外部照射建模法：實驗動物：小鼠，雌雄不拘。建模方法：γ射線等高能射線可穿透機體，起DNA損傷，絲分裂，對造血干細胞等分裂增值活躍的細胞有強抑制作用。使用鈷60等放射性同位素，照射劑量3-4Gy（戈瑞），可使造血干細胞數(shù)量減少；亞致死劑量（6.0Gy）照射以后，可致小鼠全血再障，維持時間較長，但輻照的劑量不好控制，稍大易致小鼠死亡，稍低則個別小鼠不易達到造血抑制效果。第六十六頁，共八十頁。造模方法--內(nèi)部照射建模法：實驗動物：小鼠，雌雄不拘。建模方法：放射性同位素153Sm（釤）、89Sr（鍶）、32P（32磷）、186Re(186錸)、188Re(188錸)、105Rh（105銠）、177LU（177镥）和60Co（60鈷），能產(chǎn)生β射線及親骨性特點，進入人體后對造血組織進行內(nèi)照射。將32磷給小鼠一次靜脈注射1.4mCi/kg體重可致再障；氯化鍶，按每克體重6或2μCi（居里）腹腔注射給予11~12周齡的小鼠，6μCi組動物于35d后全部死亡．2μCi組動物全部存活。6μCi組的小鼠于21d后股骨骨髓顯示為脂肪髓。全血細胞減少，骨髓有核細胞數(shù)和CFU-S產(chǎn)率都減少。第六十七頁，共八十頁。本模型與人類再生障礙性貧血相似，該模型成功率高，結(jié)果穩(wěn)定，但需要特殊設備及防護，亦為防護照射損傷的研究提供了良好實驗方法。模型評估和應用第六十八頁，共八十頁。謝謝！第六十九頁，共八十頁。血管內(nèi)皮損傷

損傷的因素：感染、免疫因素、機械性損傷、化學物質(zhì)和代謝產(chǎn)物的作用促血栓形成機制：內(nèi)皮屏障缺失:暴露內(nèi)皮下粘附分子，促血小板聚集內(nèi)皮下的膠原纖維暴露，從而激活Ⅻ因子，內(nèi)源性凝血系統(tǒng)被激活。內(nèi)皮促凝作用增強：表達組織因子,激活外凝系統(tǒng)抗