【人教版】生物《優(yōu)化方案》選修1課件專題2課題2

課題2

土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)課題2課標(biāo)領(lǐng)航1．舉例說明什么是選擇培養(yǎng)基，并研究培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。2．設(shè)置重復(fù)組和對照組，對土壤中分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離和計數(shù)。【重點】選擇培養(yǎng)基的作用?！倦y點】菌落數(shù)目的統(tǒng)計。課標(biāo)領(lǐng)航情境導(dǎo)引德國著名化學(xué)家維勒是尿素的發(fā)現(xiàn)者。他在一次實驗中，意外地發(fā)現(xiàn)在金屬氰化物和氨水相互作用時，經(jīng)溫水加熱，容器的底部出現(xiàn)了一些白色的沉淀物。一種強烈的好奇心驅(qū)使他要探個究竟，他緊緊抓住這種新的實驗現(xiàn)象，反復(fù)實驗研究，精心論證，經(jīng)過近四年的艱苦努力，終于在1828年查明，金屬氰化物和氨水相互作用，首先生成的物質(zhì)是氰酸銨，氰酸銨經(jīng)加熱就會轉(zhuǎn)化為尿素。情境導(dǎo)引

核心要點突破知能過關(guān)演練課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)基礎(chǔ)自主梳理 核心要點突破知能過關(guān)演練課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離基礎(chǔ)自主梳理一、研究思路1．自然界中目的菌株的篩選(1)依據(jù)：根據(jù)它對___________的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。(2)實例：PCR技術(shù)過程中用到的耐高溫的TaqDNA聚合酶，就是從熱泉中篩選出來的Taq細(xì)菌中分離到的。生存環(huán)境基礎(chǔ)自主梳理一、研究思路生存環(huán)境2．實驗室中目的菌株的篩選(1)理論依據(jù)人為提供有利于____________生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，同時抑制或阻止其他微生物生長。(2)選擇培養(yǎng)基指在微生物學(xué)中，允許_____種類的微生物生長，同時_____或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。目的菌株特定抑制2．實驗室中目的菌株的篩選目的菌株特定抑制3．統(tǒng)計菌落數(shù)目(1)常用方法：___________法。①統(tǒng)計依據(jù)a．當(dāng)樣品的__________足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個____。b．通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中大約含有的活菌數(shù)。②注意事項：為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)。(2)其他方法：利用_________直接計數(shù)。4．設(shè)置對照目的是排除實驗組中______________對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度?；罹嫈?shù)稀釋度活菌顯微鏡非測試因素3．統(tǒng)計菌落數(shù)目活菌計數(shù)稀釋度活菌顯微鏡非測試因素二、實驗設(shè)計1．土壤取樣(1)土壤要求：富含_______、pH接近____且潮濕。(2)取樣部位：距地表約3～8cm的土壤層。2．樣品處理樣品的___________直接影響平板上生長的______，選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，保證菌落數(shù)在30～300之間，便于計數(shù)。有機(jī)質(zhì)中性稀釋程度菌落二、實驗設(shè)計有機(jī)質(zhì)中性稀釋程度菌落3．微生物的培養(yǎng)與觀察將培養(yǎng)基平板放于30～37℃溫室中培養(yǎng)1～2天，每隔24h統(tǒng)計一次______數(shù)目，最后選取數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果。4．細(xì)菌的計數(shù)當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時，取同一_______下的至少3個平板進(jìn)行計數(shù)，求出平均值，并根據(jù)所對應(yīng)的公式計算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目。菌落稀釋度3．微生物的培養(yǎng)與觀察菌落稀釋度三、結(jié)果分析與評價1．培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落______的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長，說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染。牛肉膏培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯_____選擇培養(yǎng)基的數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些菌落。2．樣品的稀釋操作是否成功如果得到了2個或2個以上菌落數(shù)目在30～300的平板，則說明稀釋操作比較成功，并能夠進(jìn)行菌落的計數(shù)。對照大于三、結(jié)果分析與評價對照大于3．重復(fù)組的結(jié)果是否一致如果學(xué)生選取的是同一種土樣，統(tǒng)計的結(jié)果應(yīng)該_____。四、操作提示1．無菌操作(1)取土樣的用具在使用前都需要_____。(2)應(yīng)在火焰旁稱取土壤，并在火焰附近將土樣倒入燒瓶中，塞好棉塞。(3)在_______土壤溶液的過程中，每一步都要在_____旁操作。接近滅菌稀釋火焰3．重復(fù)組的結(jié)果是否一致接近滅菌稀釋火焰2．做好標(biāo)記

本實驗使用的______和試管比較多，為避免混淆，最好在使用前就做好標(biāo)記。3．規(guī)劃時間對于耗時較長的生物實驗，要事先規(guī)劃時間，以便提高工作效率，在操作時更加有條不紊。五、課題延伸細(xì)菌合成的_____將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌，若指示劑變___，可確定該種細(xì)菌能夠分解尿素。平板脲酶紅2．做好標(biāo)記 平板脲酶紅核心要點突破要點一選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進(jìn)需要的微生物的生長。目的是從眾多微生物中分離出所需要的微生物.1．加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。2．加入高濃度的食鹽溶液可得到金黃色葡萄球菌.3．如培養(yǎng)基中缺乏氮源時，可以分離固氮微生物，因為非固氮微生物不能在此培養(yǎng)基上生存。核心要點突破要點一選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化4．當(dāng)培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時，也具有分離效果。例如，石油是惟一碳源時，可以抑制不能利用石油的微生物的生長，使能夠利用石油的微生物生存，達(dá)到分離出能消除石油污染的微生物的目的。5．改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達(dá)到分離微生物的目的，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。4．當(dāng)培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時，也具有分離效果。 (2011年青島市高二檢測)氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料，因其不易降解，會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實驗方案(圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌，培養(yǎng)基配方如表1。圖1例1 (2011年青島市高二檢測)氯苯化合物是重要的有機(jī)化工表1培養(yǎng)基的組成液體培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化鈉硝酸銨無機(jī)鹽(無碳)蒸餾水Ⅰ號10g5g5mg5g－－1LⅡ號－－50mg5g3g適量1LⅢ號－－20～80mg5g3g適量1L表1培養(yǎng)基的組成液體培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化鈉硝酸銨無機(jī)(1)配制Ⅱ號固體培養(yǎng)基時，除添加Ⅱ號液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加1%的__________。(2)培養(yǎng)基配制時，滅菌與調(diào)pH的先后順序是__________。(3)從用途上來說，Ⅰ號培養(yǎng)基和Ⅱ號培養(yǎng)基分別屬于__________培養(yǎng)基和__________培養(yǎng)基。在Ⅱ號培養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成分是__________。(4)在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時，SP1的菌體會變成一個圓形的休眠體，這種休眠體被稱為__________。(1)配制Ⅱ號固體培養(yǎng)基時，除添加Ⅱ號液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長曲線(如圖2)。從圖2可知SP1菌在________培養(yǎng)條件下最早停止生長，其原因是_________________________________。圖2(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到【嘗試解答】

(1)瓊脂(2)先調(diào)pH，后滅菌(3)通用選擇硝酸銨(4)芽孢(5)20mg/L氯苯碳源最早耗盡【解析】

(1)固體培養(yǎng)基必須含有適量的瓊脂。(2)配制培養(yǎng)基時應(yīng)先調(diào)pH后滅菌?！緡L試解答】(1)瓊脂(2)先調(diào)pH，后滅菌(3)Ⅰ號培養(yǎng)基是為了獲得更多的菌株，屬于通用培養(yǎng)基，Ⅱ號培養(yǎng)基是為選擇出SP1菌株，屬于選擇培養(yǎng)基，Ⅱ號培養(yǎng)基成分中含N物質(zhì)為硝酸銨，則應(yīng)由它為SP1菌株提供氮源。(4)在惡劣環(huán)境下一些菌體會形成芽孢休眠體，來度過不良環(huán)境。(5)SP1菌株是以氯苯為碳源，當(dāng)氯苯消耗盡菌株因缺少碳源而不能繼續(xù)生存，故氯苯含量越少，SP1菌株越早停止生長。(3)Ⅰ號培養(yǎng)基是為了獲得更多的菌株，屬于通用培養(yǎng)基，Ⅱ號培跟蹤訓(xùn)練某種細(xì)菌必須從環(huán)境中攝取亮氨酸才能正常生活，此菌株對鏈霉素敏感(即缺乏抗性)。實驗者用誘變劑處理此種菌株，欲從經(jīng)處理的菌株中篩選出不依賴亮氨酸且對鏈霉素不敏感(即有抗性)的變異類型，則應(yīng)選用的培養(yǎng)基是下表中的(

)選項亮氨酸鏈霉素A＋＋B＋－C－＋D－－跟蹤訓(xùn)練某種細(xì)菌必須從環(huán)境中攝取亮氨酸才能正常生活，此菌株注：①表格中“＋”表示加入，“－”表示未加入；②4種培養(yǎng)基除添加亮氨酸和鏈霉素有差異外，其他成分及條件均相同且適合細(xì)菌生長。解析：選C。解答本題首先必須弄清選擇的目標(biāo)是要選出不依賴亮氨酸且對鏈霉素有抗性的菌株，因此培養(yǎng)基要針對目的菌株的上述兩個特點配制：無亮氨酸(不依賴，能存活)，有鏈霉素(有抗性，對鏈霉素不敏感，其存在不影響其生存)。注：①表格中“＋”表示加入，“－”表示未加入；②4種培養(yǎng)基除要點二顯微鏡直接計數(shù)法與稀釋涂布平板法的比較顯微鏡直接計數(shù)法是利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)，是一種常用的微生物計數(shù)方法。此法是將經(jīng)過適當(dāng)稀釋的菌懸液放在血球計數(shù)板的載玻片與蓋玻片之間的計數(shù)室中，在顯微鏡下進(jìn)行計數(shù)。由于計數(shù)室的容積是一定的(0.1mm3)，所以可以根據(jù)在顯微鏡下觀察到的微生物數(shù)目來換算成單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)目。要點二顯微鏡直接計數(shù)法與稀釋涂布平板法的比較顯微鏡直接計數(shù)法由于此法計得的是活菌和死菌的總和，故又稱為總菌計數(shù)法。此法的優(yōu)點是直觀、快速，但需要與血球計數(shù)板配套使用，且計數(shù)隨機(jī)性大，所以對菌體數(shù)量不能做出較為宏觀、全面的反映。平板菌落計數(shù)法通常做梯度稀釋，所以計數(shù)的線性范圍大。由于是菌懸液涂布，所以比較均勻，能較好地反映菌落的疏密程度，重復(fù)性、平行性好，是經(jīng)典的計數(shù)方法。但需要平板上長出菌落一段時間后才能計數(shù)，因此速度慢是最大的缺點。由于此法計得的是活菌和死菌的總和，故又稱為總菌計數(shù)法。此法的 某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上測得平板上的菌落數(shù)的平均值為234，那么每毫升樣品中菌落數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1mL)(

)A．2.34×108

B．2.34×109C．234 D．23.4【嘗試解答】

__B__例2 某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上測得平板上的菌落數(shù)【解析】稀釋倍數(shù)為106,0.1mL稀釋液的菌落數(shù)的平均值為234，則每毫升樣品中菌落數(shù)就為234/0.1×106＝2.34×109?！疽渍`警示】在設(shè)計實驗時，一定要涂布至少3個平板作為重復(fù)組；在分析實驗結(jié)果時，一定要考慮所設(shè)置的重復(fù)組的結(jié)果是否一致，如果結(jié)果差別過大，則意味著操作有誤，需重新實驗?！窘馕觥肯♂尡稊?shù)為106,0.1mL稀釋液的菌落數(shù)的平均跟蹤訓(xùn)練用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，正確的是(

)A．涂布了1個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是230B．涂布了2個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是215和260，取平均值238C．涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、212和256，取平均值163D．涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210、240和250，取平均值233跟蹤訓(xùn)練用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對應(yīng)解析：選D。在設(shè)計實驗時，一定要涂布至少3個平板，作為重復(fù)組，才能增強實驗的說服力與準(zhǔn)確性，所以A、B兩項不正確。C項雖涂布了3個平板，但是，其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠(yuǎn)，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地用3個平板的計數(shù)值求平均值。解析：選D。在設(shè)計實驗時，一定要涂布至少3個平板，作為重復(fù)組知能過關(guān)演練知能過關(guān)演練本部分內(nèi)容講解結(jié)束點此進(jìn)入課件目錄按ESC鍵退出全屏播放謝謝使用本部分內(nèi)容講解結(jié)束點此進(jìn)入課件目錄按ESC鍵退出全屏播放謝謝課題2

土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)課題2課標(biāo)領(lǐng)航1．舉例說明什么是選擇培養(yǎng)基，并研究培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。2．設(shè)置重復(fù)組和對照組，對土壤中分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離和計數(shù)?！局攸c】選擇培養(yǎng)基的作用?！倦y點】菌落數(shù)目的統(tǒng)計。課標(biāo)領(lǐng)航情境導(dǎo)引德國著名化學(xué)家維勒是尿素的發(fā)現(xiàn)者。他在一次實驗中，意外地發(fā)現(xiàn)在金屬氰化物和氨水相互作用時，經(jīng)溫水加熱，容器的底部出現(xiàn)了一些白色的沉淀物。一種強烈的好奇心驅(qū)使他要探個究竟，他緊緊抓住這種新的實驗現(xiàn)象，反復(fù)實驗研究，精心論證，經(jīng)過近四年的艱苦努力，終于在1828年查明，金屬氰化物和氨水相互作用，首先生成的物質(zhì)是氰酸銨，氰酸銨經(jīng)加熱就會轉(zhuǎn)化為尿素。情境導(dǎo)引

核心要點突破知能過關(guān)演練課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)基礎(chǔ)自主梳理 核心要點突破知能過關(guān)演練課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離基礎(chǔ)自主梳理一、研究思路1．自然界中目的菌株的篩選(1)依據(jù)：根據(jù)它對___________的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。(2)實例：PCR技術(shù)過程中用到的耐高溫的TaqDNA聚合酶，就是從熱泉中篩選出來的Taq細(xì)菌中分離到的。生存環(huán)境基礎(chǔ)自主梳理一、研究思路生存環(huán)境2．實驗室中目的菌株的篩選(1)理論依據(jù)人為提供有利于____________生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，同時抑制或阻止其他微生物生長。(2)選擇培養(yǎng)基指在微生物學(xué)中，允許_____種類的微生物生長，同時_____或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。目的菌株特定抑制2．實驗室中目的菌株的篩選目的菌株特定抑制3．統(tǒng)計菌落數(shù)目(1)常用方法：___________法。①統(tǒng)計依據(jù)a．當(dāng)樣品的__________足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個____。b．通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中大約含有的活菌數(shù)。②注意事項：為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)。(2)其他方法：利用_________直接計數(shù)。4．設(shè)置對照目的是排除實驗組中______________對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。活菌計數(shù)稀釋度活菌顯微鏡非測試因素3．統(tǒng)計菌落數(shù)目活菌計數(shù)稀釋度活菌顯微鏡非測試因素二、實驗設(shè)計1．土壤取樣(1)土壤要求：富含_______、pH接近____且潮濕。(2)取樣部位：距地表約3～8cm的土壤層。2．樣品處理樣品的___________直接影響平板上生長的______，選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，保證菌落數(shù)在30～300之間，便于計數(shù)。有機(jī)質(zhì)中性稀釋程度菌落二、實驗設(shè)計有機(jī)質(zhì)中性稀釋程度菌落3．微生物的培養(yǎng)與觀察將培養(yǎng)基平板放于30～37℃溫室中培養(yǎng)1～2天，每隔24h統(tǒng)計一次______數(shù)目，最后選取數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果。4．細(xì)菌的計數(shù)當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時，取同一_______下的至少3個平板進(jìn)行計數(shù)，求出平均值，并根據(jù)所對應(yīng)的公式計算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目。菌落稀釋度3．微生物的培養(yǎng)與觀察菌落稀釋度三、結(jié)果分析與評價1．培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落______的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長，說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染。牛肉膏培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯_____選擇培養(yǎng)基的數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些菌落。2．樣品的稀釋操作是否成功如果得到了2個或2個以上菌落數(shù)目在30～300的平板，則說明稀釋操作比較成功，并能夠進(jìn)行菌落的計數(shù)。對照大于三、結(jié)果分析與評價對照大于3．重復(fù)組的結(jié)果是否一致如果學(xué)生選取的是同一種土樣，統(tǒng)計的結(jié)果應(yīng)該_____。四、操作提示1．無菌操作(1)取土樣的用具在使用前都需要_____。(2)應(yīng)在火焰旁稱取土壤，并在火焰附近將土樣倒入燒瓶中，塞好棉塞。(3)在_______土壤溶液的過程中，每一步都要在_____旁操作。接近滅菌稀釋火焰3．重復(fù)組的結(jié)果是否一致接近滅菌稀釋火焰2．做好標(biāo)記

本實驗使用的______和試管比較多，為避免混淆，最好在使用前就做好標(biāo)記。3．規(guī)劃時間對于耗時較長的生物實驗，要事先規(guī)劃時間，以便提高工作效率，在操作時更加有條不紊。五、課題延伸細(xì)菌合成的_____將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌，若指示劑變___，可確定該種細(xì)菌能夠分解尿素。平板脲酶紅2．做好標(biāo)記 平板脲酶紅核心要點突破要點一選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進(jìn)需要的微生物的生長。目的是從眾多微生物中分離出所需要的微生物.1．加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。2．加入高濃度的食鹽溶液可得到金黃色葡萄球菌.3．如培養(yǎng)基中缺乏氮源時，可以分離固氮微生物，因為非固氮微生物不能在此培養(yǎng)基上生存。核心要點突破要點一選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化4．當(dāng)培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時，也具有分離效果。例如，石油是惟一碳源時，可以抑制不能利用石油的微生物的生長，使能夠利用石油的微生物生存，達(dá)到分離出能消除石油污染的微生物的目的。5．改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達(dá)到分離微生物的目的，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。4．當(dāng)培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時，也具有分離效果。 (2011年青島市高二檢測)氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料，因其不易降解，會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實驗方案(圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌，培養(yǎng)基配方如表1。圖1例1 (2011年青島市高二檢測)氯苯化合物是重要的有機(jī)化工表1培養(yǎng)基的組成液體培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化鈉硝酸銨無機(jī)鹽(無碳)蒸餾水Ⅰ號10g5g5mg5g－－1LⅡ號－－50mg5g3g適量1LⅢ號－－20～80mg5g3g適量1L表1培養(yǎng)基的組成液體培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化鈉硝酸銨無機(jī)(1)配制Ⅱ號固體培養(yǎng)基時，除添加Ⅱ號液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加1%的__________。(2)培養(yǎng)基配制時，滅菌與調(diào)pH的先后順序是__________。(3)從用途上來說，Ⅰ號培養(yǎng)基和Ⅱ號培養(yǎng)基分別屬于__________培養(yǎng)基和__________培養(yǎng)基。在Ⅱ號培養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成分是__________。(4)在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時，SP1的菌體會變成一個圓形的休眠體，這種休眠體被稱為__________。(1)配制Ⅱ號固體培養(yǎng)基時，除添加Ⅱ號液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長曲線(如圖2)。從圖2可知SP1菌在________培養(yǎng)條件下最早停止生長，其原因是_________________________________。圖2(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到【嘗試解答】

(1)瓊脂(2)先調(diào)pH，后滅菌(3)通用選擇硝酸銨(4)芽孢(5)20mg/L氯苯碳源最早耗盡【解析】

(1)固體培養(yǎng)基必須含有適量的瓊脂。(2)配制培養(yǎng)基時應(yīng)先調(diào)pH后滅菌。【嘗試解答】(1)瓊脂(2)先調(diào)pH，后滅菌(3)Ⅰ號培養(yǎng)基是為了獲得更多的菌株，屬于通用培養(yǎng)基，Ⅱ號培養(yǎng)基是為選擇出SP1菌株，屬于選擇培養(yǎng)基，Ⅱ號培養(yǎng)基成分中含N物質(zhì)為硝酸銨，則應(yīng)由它為SP1菌株提供氮源。(4)在惡劣環(huán)境下一些菌體會形成芽孢休眠體，來度過不良環(huán)境。(5)SP1菌株是以氯苯為碳源，當(dāng)氯苯消耗盡菌株因缺少碳源而不能繼續(xù)生存，故氯苯含量越少，SP1菌株越早停止生長。(3)Ⅰ號培養(yǎng)基是為了獲得更多的菌株，屬于通用培養(yǎng)基，Ⅱ號培跟蹤訓(xùn)練某種細(xì)菌必須從環(huán)境中攝取亮氨酸才能正常生活，此菌株對鏈霉素敏感(即缺乏抗性)。實驗者用誘變劑處理此種菌株，欲從經(jīng)處理的菌株中篩選出不依賴亮氨酸且對鏈霉素不敏感(即有抗性)的變異類型，則應(yīng)選用的培養(yǎng)基是下表中的(

)選項亮氨酸鏈霉素A＋＋B＋－C－＋D－－跟蹤訓(xùn)練某種細(xì)菌必須從環(huán)境中攝取亮氨酸才能正常生活，此菌株注：①表格中“＋”表示加入，“－”表示未加入；②4種培養(yǎng)基除添加亮氨酸和鏈霉素有差異外，其他成分及條件均相同且適合細(xì)菌生長。解析：選C。解答本題首先必須弄清選擇的目標(biāo)是要選出不依賴亮氨酸且對鏈霉素有抗性的菌株，因此培養(yǎng)基要針對目的菌株的上述兩個特點配制：無亮氨酸(不依賴，能存活)，有鏈霉素(有抗性，對鏈霉素不敏感，其存在不影響其生存)。注：①表格中“＋”表示加入，“－”表示未加入；②4種培養(yǎng)基除要點二顯微鏡直接計數(shù)法與稀釋涂布平板法的比較顯微鏡直接計數(shù)法是利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)，是一種常用的微生物計數(shù)方法。此法是將經(jīng)過適當(dāng)稀釋的菌懸液放在血球計數(shù)板的載玻片與蓋玻片之間的計數(shù)室中，在顯微鏡下進(jìn)行計數(shù)。由于計數(shù)室的容積是一定的(0.1mm3)，所以可以根據(jù)在顯微鏡下觀察到的微生物數(shù)目來換算成單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)目。要點二顯微鏡直接計數(shù)法與稀釋涂布平板法的比較顯微鏡直接計數(shù)法由于此法計得的是活菌和死菌的總和，故又稱為總菌計數(shù)法。此法的優(yōu)點是直觀、快速，但需要與血球計數(shù)板配套使用，且計數(shù)隨機(jī)性大，所以對菌體數(shù)量不能做出較為宏觀、全面的反映。平板菌落計數(shù)法通常