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關(guān)于動(dòng)物免疫學(xué)-抗原抗體反應(yīng)第一頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日一、基本原理
第一節(jié)抗原抗體反應(yīng)原理
Ag決定簇和Ab分子超變區(qū)相互作用(相互吻合,具有互補(bǔ)性)分子表面特異的可逆的弱結(jié)合力在極短距離內(nèi)才能發(fā)生基本條件:結(jié)合力親和性親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體第二頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日抗原和抗體的結(jié)合是互補(bǔ)性的特異性結(jié)合不形成牢固的共價(jià)鍵,通過(guò)非共價(jià)鍵結(jié)合這種弱的結(jié)合力涉及幾種分子間的作用力
一、抗原抗體結(jié)合力一、抗原抗體結(jié)合力*1.靜電引力*2.范德華引力*3.氫鍵結(jié)合力*4.疏水作用力第三頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日抗原抗體結(jié)合力示意圖抗原抗體氫鍵結(jié)合力
ONONHH靜電引力--++范得華力-++-+--+疏水作用力排斥的水第四頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日
二、抗原抗體親和性(affinity)*親和性是抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)與對(duì)應(yīng)的抗原決定簇之間的相適應(yīng)性而存在著的引力,這是抗原與抗體之間固有的結(jié)合力。*親和力(avidity)是指反應(yīng)系統(tǒng)中復(fù)雜抗原與相應(yīng)抗體之間的結(jié)合能力。親和力與親和性、抗體的結(jié)合價(jià)和抗原的有效決定簇?cái)?shù)目相關(guān)。親和力越大,抗原抗體結(jié)合越牢固。第五頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日
親和常數(shù)親和常數(shù)K=
K值大的抗體與抗原牢固結(jié)合,不易解離,說(shuō)明該抗體有高親和力。抗體與抗原結(jié)合是可逆的反應(yīng),在平衡時(shí)其第六頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日血清學(xué)反應(yīng)條件下,抗原抗體均帶負(fù)電荷,使極化的水分子在其周圍形成水化層,成為親水膠體。
三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體
當(dāng)抗原與抗體結(jié)合后,表面電荷減少,水化層變??;而且由于抗原抗體復(fù)合物形成后,與水接觸的表面積減少,由親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體。在電解質(zhì)作用下,各疏水膠體之間靠攏,形成可見(jiàn)的抗原抗體復(fù)合物。第七頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日
親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體示意圖親水膠體疏水膠體轉(zhuǎn)化NaCl可見(jiàn)反應(yīng)第八頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日第二節(jié)抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)*1.特異性*2.比例性*3.可逆性
第九頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日
一、
特異性(specificity)*概念:抗原分子,只能與由它刺激所產(chǎn)生的抗體結(jié)合而起反應(yīng)的專一性能。一、特異性*決定因素:由抗原決定簇和抗體分子超變區(qū)之間空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性決定的。
抗體分子N端可變區(qū)形成3nm×1.5nm×0.7nm的槽溝,只有與其空間結(jié)構(gòu)互補(bǔ)的抗原決定簇才能如楔狀嵌入。*交叉反應(yīng)(crossreaction)兩種不同的抗原物質(zhì)具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原決定簇,則可與彼此相應(yīng)的抗體反應(yīng)。第十頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日特異性示意圖第十一頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日*最適比(optimalratio)或等價(jià)點(diǎn)(equivzlencepoint)最迅速出現(xiàn)沉淀時(shí)的抗原抗體的濃度比或量比。
二、比例性(proportionality)等價(jià)帶(equivalencezone)抗原與抗體分子比例合適的范圍。帶現(xiàn)象:Ag與Ab比例不適而不出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)。*前帶(prozone)抗體過(guò)量時(shí)。*后帶(postzone)
抗原過(guò)量時(shí)。第十二頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日比例性示意圖抗體過(guò)量比例合適抗原的量抗原過(guò)量抗體沉淀的量前帶等價(jià)帶后帶第十三頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日
三、可逆性(reversibility)概念:是指抗原與抗體結(jié)合成復(fù)合物后,在一定條件下可解離為游離抗原與抗體的特性。
解離后抗原抗體仍保持原有特性。一定條件:低pH、高濃度鹽等。常用于解離抗原抗體復(fù)合物的物質(zhì)有:3mol/L硫氰化鉀、pH2.40.1mol/L甘氨酸、7mol/L尿素等。第十四頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日抗體混有SPAg抗體-SPAg抗體-SPAg分離劑一、抗原抗體結(jié)合二、分離抗體
可逆性示意圖抗體第十五頁(yè),共十七頁(yè),2022年,8月28日第三節(jié)抗原抗體反應(yīng)影響因素一、反應(yīng)物自身因素
*抗原:1.理化特性2.Ag決定簇?cái)?shù)量3.Ag決定簇種類*抗體:1.來(lái)源2.特異性與親和力3.濃度二、環(huán)境條件:*電解質(zhì):0.85%NaCl*酸堿度:pH6
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