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動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體本節(jié)聚焦:什么是動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)?單克隆抗體是如何制備的?在臨床上有哪些應(yīng)用?抗原
反復(fù)注射動(dòng)物從動(dòng)物的血清中分離抗體這種方法的缺點(diǎn)是:產(chǎn)量低、純度低,且抗體的特異性差、靈敏度低??贵w的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法2、什么細(xì)胞能無(wú)限增殖?癌細(xì)胞3、有什么方法將這兩種細(xì)胞的特點(diǎn)結(jié)合起來(lái)?細(xì)胞融合1、在體外培養(yǎng)的條件下,一個(gè)B淋巴細(xì)胞能不能無(wú)限增殖?不能無(wú)限增殖閱讀教材,完成下列問(wèn)題:4min1.動(dòng)物細(xì)胞融合的概念2.誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法3.滅活病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的原理4.動(dòng)物細(xì)胞融合的原理5.動(dòng)物細(xì)胞融合的意義一、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)一、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)1.概念
動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。
融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞。2.誘導(dǎo)方式物理法:化學(xué)法:生物法:滅活的病毒電刺激、振動(dòng)、離心聚乙二醇(PEG)3.滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的原理?一、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)5.意義突破了有性雜交方法的局限性,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能6.實(shí)例生物種類細(xì)胞來(lái)源成功年代酵母菌-雞原生質(zhì)體-血紅細(xì)胞1975年人-胡蘿卜腹水癌細(xì)胞-原生質(zhì)體1976年
人-鼠纖維肉瘤細(xì)胞-畸胎瘤細(xì)胞1978年4.動(dòng)物細(xì)胞融合基本原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性一、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法(同左)滅活的病毒物理(離心、振蕩、電刺激).化學(xué)(聚乙二醇)誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合過(guò)程細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性原理植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合在原理、細(xì)胞融合的方法、誘導(dǎo)方法等方面有什么差異呢?3min融合后都需要進(jìn)行篩選1.在飛船上,科學(xué)家進(jìn)行了無(wú)人搭載的空間動(dòng)物細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn),該實(shí)驗(yàn)所依據(jù)的原理和促進(jìn)細(xì)胞融合的方法分別是
A.細(xì)胞的全能性、滅活病毒誘導(dǎo)融合
B.細(xì)胞的全能性、電刺激融合
C.細(xì)胞膜的流動(dòng)性、滅活病毒誘導(dǎo)融合
D.細(xì)胞膜的流動(dòng)性、自然融合趁熱打鐵C2.既可用于基因工程又可用于細(xì)胞工程的是A.病毒B.氯離子C.質(zhì)粒D.聚乙二醇A一個(gè)B淋巴細(xì)胞(產(chǎn)生單一的抗A的抗體)骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖雜交瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)設(shè)計(jì)方案:動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)單克隆抗體
既能產(chǎn)生特異性抗體,又能大量增殖的細(xì)胞1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實(shí)驗(yàn)1、給小鼠注射特定的抗原蛋白目的是什么?獲得已免疫的B淋巴細(xì)胞2、從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細(xì)胞只有一種嗎?為什么?多種;小鼠接觸過(guò)環(huán)境當(dāng)中其它的抗原二、單克隆抗體制備問(wèn):誘導(dǎo)融合后有多少類雜交細(xì)胞(只考慮兩兩融合)?骨髓瘤細(xì)胞---骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞---B淋巴細(xì)胞B淋巴細(xì)胞---骨髓瘤細(xì)胞(第1次篩選)選擇性培養(yǎng)基:選出雜交瘤細(xì)胞問(wèn):兩次篩選的目的和手段分別是什么?抄在課本上,填空,五顆星第2次篩選的目的:選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞方法--專一抗體檢測(cè)法(抗體抗原特異性結(jié)合)①②4、獲得大量單克隆抗體的方法有哪些?體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)單克隆抗體篩選二雜交細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞體外或體內(nèi)培養(yǎng)篩選一骨髓瘤細(xì)胞
誘導(dǎo)融合分泌特異抗體的雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞群提取已免疫的B淋巴細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)單克隆抗體的制備抄在課本上☆☆☆☆☆既能大量繁殖又能產(chǎn)生專一抗體注射抗原(產(chǎn)生單一的抗A的抗體)(填空)三、單克隆抗體的特點(diǎn)和應(yīng)用1.特點(diǎn)特異性強(qiáng)靈敏度高可大量制備閱讀教材”思考與討論”,并總結(jié)出單克隆抗體的
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