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動物細胞融合與單克隆抗體本節(jié)聚焦:什么是動物細胞融合技術(shù)?單克隆抗體是如何制備的?在臨床上有哪些應(yīng)用?抗原
反復(fù)注射動物從動物的血清中分離抗體這種方法的缺點是:產(chǎn)量低、純度低,且抗體的特異性差、靈敏度低??贵w的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法2、什么細胞能無限增殖?癌細胞3、有什么方法將這兩種細胞的特點結(jié)合起來?細胞融合1、在體外培養(yǎng)的條件下,一個B淋巴細胞能不能無限增殖?不能無限增殖閱讀教材,完成下列問題:4min1.動物細胞融合的概念2.誘導(dǎo)動物細胞融合的方法3.滅活病毒誘導(dǎo)動物細胞融合的原理4.動物細胞融合的原理5.動物細胞融合的意義一、動物細胞融合技術(shù)一、動物細胞融合技術(shù)1.概念
動物細胞融合也稱細胞雜交,是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。
融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞,稱為雜交細胞。2.誘導(dǎo)方式物理法:化學(xué)法:生物法:滅活的病毒電刺激、振動、離心聚乙二醇(PEG)3.滅活的病毒誘導(dǎo)動物細胞融合的原理?一、動物細胞融合技術(shù)5.意義突破了有性雜交方法的局限性,使遠緣雜交成為可能6.實例生物種類細胞來源成功年代酵母菌-雞原生質(zhì)體-血紅細胞1975年人-胡蘿卜腹水癌細胞-原生質(zhì)體1976年
人-鼠纖維肉瘤細胞-畸胎瘤細胞1978年4.動物細胞融合基本原理細胞膜的流動性一、動物細胞融合技術(shù)動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法(同左)滅活的病毒物理(離心、振蕩、電刺激).化學(xué)(聚乙二醇)誘導(dǎo)方法使細胞分散后誘導(dǎo)細胞融合去除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合過程細胞膜的流動性細胞膜的流動性、植物細胞全能性原理植物體細胞雜交和動物細胞融合在原理、細胞融合的方法、誘導(dǎo)方法等方面有什么差異呢?3min融合后都需要進行篩選1.在飛船上,科學(xué)家進行了無人搭載的空間動物細胞融合實驗,該實驗所依據(jù)的原理和促進細胞融合的方法分別是
A.細胞的全能性、滅活病毒誘導(dǎo)融合
B.細胞的全能性、電刺激融合
C.細胞膜的流動性、滅活病毒誘導(dǎo)融合
D.細胞膜的流動性、自然融合趁熱打鐵C2.既可用于基因工程又可用于細胞工程的是A.病毒B.氯離子C.質(zhì)粒D.聚乙二醇A一個B淋巴細胞(產(chǎn)生單一的抗A的抗體)骨髓瘤細胞能無限增殖雜交瘤細胞動物細胞培養(yǎng)技術(shù)設(shè)計方案:動物細胞融合技術(shù)單克隆抗體
既能產(chǎn)生特異性抗體,又能大量增殖的細胞1975年英國科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實驗1、給小鼠注射特定的抗原蛋白目的是什么?獲得已免疫的B淋巴細胞2、從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細胞只有一種嗎?為什么?多種;小鼠接觸過環(huán)境當(dāng)中其它的抗原二、單克隆抗體制備問:誘導(dǎo)融合后有多少類雜交細胞(只考慮兩兩融合)?骨髓瘤細胞---骨髓瘤細胞B淋巴細胞---B淋巴細胞B淋巴細胞---骨髓瘤細胞(第1次篩選)選擇性培養(yǎng)基:選出雜交瘤細胞問:兩次篩選的目的和手段分別是什么?抄在課本上,填空,五顆星第2次篩選的目的:選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞方法--專一抗體檢測法(抗體抗原特異性結(jié)合)①②4、獲得大量單克隆抗體的方法有哪些?體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)單克隆抗體篩選二雜交細胞雜交瘤細胞體外或體內(nèi)培養(yǎng)篩選一骨髓瘤細胞
誘導(dǎo)融合分泌特異抗體的雜交瘤細胞雜交瘤細胞群提取已免疫的B淋巴細胞動物細胞融合技術(shù)動物細胞培養(yǎng)技術(shù)單克隆抗體的制備抄在課本上☆☆☆☆☆既能大量繁殖又能產(chǎn)生專一抗體注射抗原(產(chǎn)生單一的抗A的抗體)(填空)三、單克隆抗體的特點和應(yīng)用1.特點特異性強靈敏度高可大量制備閱讀教材”思考與討論”,并總結(jié)出單克隆抗體的
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