食品安全快速檢測技術(shù)農(nóng)藥殘留檢測專題全面課件_第1頁
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文檔簡介

4食品安全快速檢測技術(shù)及應(yīng)用4食品安全快速檢測技術(shù)及應(yīng)用1項目二農(nóng)藥殘留快速檢測回顧上節(jié)課內(nèi)容1.樣品制備2.農(nóng)藥、農(nóng)藥殘留的概念12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測回顧上節(jié)課內(nèi)容12/19/2022212/22/202212/19/2022312/22/202212/19/20224酶抑制率法12/22/2022酶抑制率法12/19/20225注意事項12/22/2022注意事項12/19/20226項目二農(nóng)藥殘留快速檢測實驗二、蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測GB/T5009.199-2003蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測一、實驗?zāi)康模簩W(xué)習(xí)快速卡法測定有機磷農(nóng)殘快速檢驗法及熟悉檢驗結(jié)果評定12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測實驗二、蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類7項目二農(nóng)藥殘留快速檢測實驗原理膽堿脂酶可催化靛酚乙酸脂(紅色)水解為乙酸與靛酚(藍色),有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥對膽堿脂酶有抑制作用,使催化、水解、變色的過程發(fā)生改變,由此可判斷出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥的存在12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測實驗?zāi)憠A脂酶可催化靛酚乙酸脂(紅色8項目二農(nóng)藥殘留快速檢測實驗試劑固化有膽堿脂酶和靛酚乙酸脂試紙卡片磷酸鹽緩沖液快速檢測儀12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測實驗試劑固化有膽堿脂酶和靛酚乙酸脂9快速檢測試紙法12/22/2022快速檢測試紙法12/19/202210項目二農(nóng)藥殘留快速檢測四、速測卡測定農(nóng)藥殘留的主要步驟1)整體測定法剪成1cm碎片,取5g放入帶蓋瓶,加入10ml緩沖液,振搖50次,靜置2min。取1片速測片,用白色藥品蘸取提取液,放置10min以上進行預(yù)反應(yīng)速測卡對折,用手捏3min或用恒溫3min,使紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng),每批設(shè)定一個空白12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測四、速測卡測定農(nóng)藥殘留的主要步驟111項目二農(nóng)藥殘留快速檢測四.速測卡測定農(nóng)藥殘留的主要步驟2)表面測定法(粗篩法)滴2-3滴緩沖液溶液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦取1片速測卡,將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上放置10min以上,進行預(yù)反應(yīng)將速測卡對折,用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min,使紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)。每批測定設(shè)一個空白對照12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測四.速測卡測定農(nóng)藥殘留的主要步驟112請注意12/22/2022請注意12/19/20221312/22/202212/19/202214項目二農(nóng)藥殘留快速檢測五、速測卡測定農(nóng)藥殘留的注意事項1)空白對照2)次生物質(zhì)3)預(yù)反應(yīng)溫度4)反應(yīng)時間5)滴加溶液的數(shù)量6)預(yù)反應(yīng)時間一致7)觀察結(jié)果時間1min12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測五、速測卡測定農(nóng)藥殘留的注意事項115項目二農(nóng)藥殘留快速檢測六、檢測結(jié)果判斷

1、結(jié)果判斷結(jié)果以酶被有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥抑制(為陽性)、未抑制(陰性)表示。與空白對照卡比較:白色藥片不變色或略有淺藍色均為陽性結(jié)果。白色藥片變?yōu)樘焖{色或與空白對照卡相同為陰性結(jié)果。對陽性結(jié)果的樣品可用其他方法進一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。

2、樣品檢測結(jié)果記錄并對檢測結(jié)果進行評價。12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測六、檢測結(jié)果判斷12/19/2016說明12/22/2022說明12/19/202217知識擴展112/22/2022知識擴展112/19/20221812/22/202212/19/20221912/22/202212/19/20222012/22/202212/19/20222112/22/202212/19/2022221、結(jié)果判斷結(jié)果以酶被有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥抑制(為陽性)、未抑制(陰性)表示。食品安全快速檢測技術(shù)及應(yīng)用1、結(jié)果判斷結(jié)果以酶被有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥抑制(為陽性)、未抑制(陰性)表示。剪成1cm碎片,取5g放入帶蓋瓶,加入10ml緩沖液,振搖50次,靜置2min。開機:插上電源,打開儀器背面綠色電源開關(guān),儀器顯示開機畫面,按畫面提示操作,按下回車鍵,儀器開始自檢,時間約1min5mL待測液——加入100μL酶液和顯色劑,混勻——靜置10min——加入100μL(或20μL)底物,搖勻并立即倒入比色杯中。自檢完畢后,儀器進入待機檢測狀態(tài)按〈B〉鍵,顯示屏下方延遲10s后,測量時間開始倒計時,計時完畢,顯示屏顯示吸光度增量(ΔC)及抑制率。開機:插上電源,打開儀器背面綠色電源開關(guān),儀器顯示開機畫面,按畫面提示操作,按下回車鍵,儀器開始自檢,時間約1min7)觀察結(jié)果時間1min3、底物:取1瓶底物加12.取1片速測卡,將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上5mL待測液——加入100μL酶液和顯色劑,混勻——靜置10min——加入100μL(或20μL)底物,搖勻并立即倒入比色杯中。5mL蒸餾水或純凈水溶解,使用時取100μL,4℃冰箱保存;剪成1cm碎片,取5g放入帶蓋瓶,加入10ml緩沖液,振搖50次,靜置2min。1、緩沖液:取1包緩沖劑加入500mL蒸餾水或純凈水中,攪拌溶解制成磷酸緩沖液(pH7.自檢完畢后,儀器進入待機檢測狀態(tài)開機:插上電源,打開儀器背面綠色電源開關(guān),儀器顯示開機畫面,按畫面提示操作,按下回車鍵,儀器開始自檢,時間約1min2、樣品檢測結(jié)果記錄并對檢測結(jié)果進行評價。項目二農(nóng)藥殘留快速檢測開機:插上電源,打開儀器背面綠色電源開關(guān),儀器顯示開機畫面,按畫面提示操作,按下回車鍵,儀器開始自檢,時間約1min5mL蒸餾水或純凈水溶解,使用時取20μL,4℃冰箱保存。及時放入儀器的測量室通道,合上蓋。5mL待測液——加入100μL酶液和顯色劑,混勻——靜置10min——加入100μL(或20μL)底物,搖勻并立即倒入比色杯中。對陽性結(jié)果的樣品可用其他方法進一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。5mL蒸餾水或純凈水溶解,使用時取20μL,4℃冰箱保存。放置10min以上,進行預(yù)反應(yīng)與空白對照卡比較:白色藥片不變色或略有淺藍色均為陽性結(jié)果。取1片速測卡,將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上項目二農(nóng)藥殘留快速檢測項目二農(nóng)藥殘留快速檢測12/22/20221、結(jié)果判斷結(jié)果以酶被有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥抑制(為2312/22/202212/19/202224項目二農(nóng)藥殘留快速檢測第二法:酶抑制率分光光度法12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測第二法:12/19/20222512/22/202212/19/20222612/22/202212/19/20222712/22/202212/19/20222812/22/202212/19/20222912/22/202212/19/20223012/22/202212/19/20223112/22/202212/19/20223212/22/202212/19/20223312/22/202212/19/20223412/22/202212/19/202235項目二農(nóng)藥殘留快速檢測12/22/2022開機:插上電源,打開儀器背面綠色電源開關(guān),儀器顯示開機畫面,按畫面提示操作,按下回車鍵,儀器開始自檢,時間約1min自檢完畢后,儀器進入待機檢測狀態(tài)項目二農(nóng)藥殘留快速檢測12/19/2022開機:插上電源36項目二農(nóng)藥殘留快速檢測2、試劑配制2.1、緩沖液:取1包緩沖劑加入500mL蒸餾水或純凈水中,攪拌溶解制成磷酸緩沖液(pH7.6),常溫保存。2.2、顯色劑:取1瓶顯色劑加25mL緩沖液溶解,使用時取100μL,4℃冰箱保存。2.3、底物:取1瓶底物加12.5mL蒸餾水或純凈水溶解,使用時取100μL,4℃冰箱保存;或取1瓶底物加2.5mL蒸餾水或純凈水溶解,使用時取20μL,4℃冰箱保存。2.4、膽堿酯酶:酶制劑無需配制,可直接取用,使用時取100μL,4℃冰箱保存。12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測2、試劑配制12/19/202237項目二農(nóng)藥殘留快速檢測12/22/20223、樣品提取取2g果蔬樣品(塊莖類取4g),葉菜剪成25px左右見方的碎片,塊莖類取橫截面樣品或取其表皮,放入三角瓶中,加入10mL緩沖液,振蕩1~2min,倒出提取液,靜置2min,待測項目二農(nóng)藥殘留快速檢測12/19/20223、樣品提取38項目二農(nóng)藥殘留快速檢測4、測試1)對照測試:2.5mL緩沖液——加入100μL酶液——顯色劑——混勻,靜置10min——加入100μL(或20μL)底物——搖勻,立即倒入比色杯中。及時放入儀器的測量室第1通道,合上蓋。按〈B〉鍵,顯示屏下方延遲10s后,測量時間開始倒計時,計時完畢,顯示屏顯示吸光度增量(ΔC)及抑制率。在進行對照測試時,2~8通道可同時進行樣品測試。12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測4、測試12/19/202239項目二農(nóng)藥殘留快速檢測4、測試2)樣品測試:2.5mL待測液——加入100μL酶液和顯色劑,混勻——靜置10min——加入100μL(或20μL)底物,搖勻并立即倒入比色杯中。及時放入儀器的測量室通道,合上蓋。按〈M〉鍵,顯示屏下方延遲10s后,測量時間開始倒計時,計時完畢,顯示屏顯示吸光度增量(ΔS)及抑制率。數(shù)據(jù)自動保存,如有需要按〈P〉鍵打印12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測4、測試12/19/2022404食品安全快速檢測技術(shù)及應(yīng)用4食品安全快速檢測技術(shù)及應(yīng)用41項目二農(nóng)藥殘留快速檢測回顧上節(jié)課內(nèi)容1.樣品制備2.農(nóng)藥、農(nóng)藥殘留的概念12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測回顧上節(jié)課內(nèi)容12/19/20224212/22/202212/19/20224312/22/202212/19/202244酶抑制率法12/22/2022酶抑制率法12/19/202245注意事項12/22/2022注意事項12/19/202246項目二農(nóng)藥殘留快速檢測實驗二、蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測GB/T5009.199-2003蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測一、實驗?zāi)康模簩W(xué)習(xí)快速卡法測定有機磷農(nóng)殘快速檢驗法及熟悉檢驗結(jié)果評定12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測實驗二、蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類47項目二農(nóng)藥殘留快速檢測實驗原理膽堿脂酶可催化靛酚乙酸脂(紅色)水解為乙酸與靛酚(藍色),有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥對膽堿脂酶有抑制作用,使催化、水解、變色的過程發(fā)生改變,由此可判斷出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥的存在12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測實驗?zāi)憠A脂酶可催化靛酚乙酸脂(紅色48項目二農(nóng)藥殘留快速檢測實驗試劑固化有膽堿脂酶和靛酚乙酸脂試紙卡片磷酸鹽緩沖液快速檢測儀12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測實驗試劑固化有膽堿脂酶和靛酚乙酸脂49快速檢測試紙法12/22/2022快速檢測試紙法12/19/202250項目二農(nóng)藥殘留快速檢測四、速測卡測定農(nóng)藥殘留的主要步驟1)整體測定法剪成1cm碎片,取5g放入帶蓋瓶,加入10ml緩沖液,振搖50次,靜置2min。取1片速測片,用白色藥品蘸取提取液,放置10min以上進行預(yù)反應(yīng)速測卡對折,用手捏3min或用恒溫3min,使紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng),每批設(shè)定一個空白12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測四、速測卡測定農(nóng)藥殘留的主要步驟151項目二農(nóng)藥殘留快速檢測四.速測卡測定農(nóng)藥殘留的主要步驟2)表面測定法(粗篩法)滴2-3滴緩沖液溶液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦取1片速測卡,將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上放置10min以上,進行預(yù)反應(yīng)將速測卡對折,用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min,使紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)。每批測定設(shè)一個空白對照12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測四.速測卡測定農(nóng)藥殘留的主要步驟152請注意12/22/2022請注意12/19/20225312/22/202212/19/202254項目二農(nóng)藥殘留快速檢測五、速測卡測定農(nóng)藥殘留的注意事項1)空白對照2)次生物質(zhì)3)預(yù)反應(yīng)溫度4)反應(yīng)時間5)滴加溶液的數(shù)量6)預(yù)反應(yīng)時間一致7)觀察結(jié)果時間1min12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測五、速測卡測定農(nóng)藥殘留的注意事項155項目二農(nóng)藥殘留快速檢測六、檢測結(jié)果判斷

1、結(jié)果判斷結(jié)果以酶被有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥抑制(為陽性)、未抑制(陰性)表示。與空白對照卡比較:白色藥片不變色或略有淺藍色均為陽性結(jié)果。白色藥片變?yōu)樘焖{色或與空白對照卡相同為陰性結(jié)果。對陽性結(jié)果的樣品可用其他方法進一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。

2、樣品檢測結(jié)果記錄并對檢測結(jié)果進行評價。12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測六、檢測結(jié)果判斷12/19/2056說明12/22/2022說明12/19/202257知識擴展112/22/2022知識擴展112/19/20225812/22/202212/19/20225912/22/202212/19/20226012/22/202212/19/20226112/22/202212/19/2022621、結(jié)果判斷結(jié)果以酶被有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥抑制(為陽性)、未抑制(陰性)表示。食品安全快速檢測技術(shù)及應(yīng)用1、結(jié)果判斷結(jié)果以酶被有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥抑制(為陽性)、未抑制(陰性)表示。剪成1cm碎片,取5g放入帶蓋瓶,加入10ml緩沖液,振搖50次,靜置2min。開機:插上電源,打開儀器背面綠色電源開關(guān),儀器顯示開機畫面,按畫面提示操作,按下回車鍵,儀器開始自檢,時間約1min5mL待測液——加入100μL酶液和顯色劑,混勻——靜置10min——加入100μL(或20μL)底物,搖勻并立即倒入比色杯中。自檢完畢后,儀器進入待機檢測狀態(tài)按〈B〉鍵,顯示屏下方延遲10s后,測量時間開始倒計時,計時完畢,顯示屏顯示吸光度增量(ΔC)及抑制率。開機:插上電源,打開儀器背面綠色電源開關(guān),儀器顯示開機畫面,按畫面提示操作,按下回車鍵,儀器開始自檢,時間約1min7)觀察結(jié)果時間1min3、底物:取1瓶底物加12.取1片速測卡,將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上5mL待測液——加入100μL酶液和顯色劑,混勻——靜置10min——加入100μL(或20μL)底物,搖勻并立即倒入比色杯中。5mL蒸餾水或純凈水溶解,使用時取100μL,4℃冰箱保存;剪成1cm碎片,取5g放入帶蓋瓶,加入10ml緩沖液,振搖50次,靜置2min。1、緩沖液:取1包緩沖劑加入500mL蒸餾水或純凈水中,攪拌溶解制成磷酸緩沖液(pH7.自檢完畢后,儀器進入待機檢測狀態(tài)開機:插上電源,打開儀器背面綠色電源開關(guān),儀器顯示開機畫面,按畫面提示操作,按下回車鍵,儀器開始自檢,時間約1min2、樣品檢測結(jié)果記錄并對檢測結(jié)果進行評價。項目二農(nóng)藥殘留快速檢測開機:插上電源,打開儀器背面綠色電源開關(guān),儀器顯示開機畫面,按畫面提示操作,按下回車鍵,儀器開始自檢,時間約1min5mL蒸餾水或純凈水溶解,使用時取20μL,4℃冰箱保存。及時放入儀器的測量室通道,合上蓋。5mL待測液——加入100μL酶液和顯色劑,混勻——靜置10min——加入100μL(或20μL)底物,搖勻并立即倒入比色杯中。對陽性結(jié)果的樣品可用其他方法進一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。5mL蒸餾水或純凈水溶解,使用時取20μL,4℃冰箱保存。放置10min以上,進行預(yù)反應(yīng)與空白對照卡比較:白色藥片不變色或略有淺藍色均為陽性結(jié)果。取1片速測卡,將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上項目二農(nóng)藥殘留快速檢測項目二農(nóng)藥殘留快速檢測12/22/20221、結(jié)果判斷結(jié)果以酶被有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥抑制(為6312/22/202212/19/202264項目二農(nóng)藥殘留快速檢測第二法:酶抑制率分光光度法12/22/2022項目二農(nóng)藥殘留快速檢測第二法:12/19/20226512/22/202212/19/20226612/22/202212/19/20226712/22/202212/19/20226812/22/202212/19/20226912/22/202212/19/20227012/22/202212/19/20227112/22/202212/19/20227212/22/202212/19/20227312/22/202212/19/20227412/22/202212/19/202275項目二農(nóng)藥殘留快速檢測12/22/2022開機:插上電源,打開儀器背面綠色電源開關(guān),儀器顯示開機畫面,按畫面提示操作,按下回車鍵,儀器開始自檢,時間約1min自檢完畢后,儀器進入待機檢測狀態(tài)項目二農(nóng)藥殘留快速檢測12/19/2022開機:插上電源76項目二農(nóng)藥殘留快速檢測2、試劑配制2.1、緩沖液:取1包緩沖劑加入500mL蒸餾水或純凈水中,攪拌溶解制成磷酸緩沖液(pH7.6),常溫保存。2.2、顯色劑:取1瓶顯色劑加25mL緩沖液溶解,使用時取100μL,4℃冰箱保存。2.3、底物:取1瓶底物加12

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