試驗中醫(yī)學(xué)教學(xué)大綱

《實驗中醫(yī)學(xué)》教學(xué)大綱方肇勤上海中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實驗中醫(yī)學(xué)教研室

(2013/9/23)一、前言實驗中醫(yī)學(xué)是采用科學(xué)實驗的方法研究和發(fā)展中醫(yī)學(xué)的一門學(xué)科?！秾嶒炛嗅t(yī)學(xué)》是中醫(yī)基礎(chǔ)學(xué)科的重要課程?！秾嶒炛嗅t(yī)學(xué)》課程的主要授課對象為中醫(yī)院校的本科生，包括中醫(yī)專業(yè)，中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)專業(yè)，針灸專業(yè)，推拿專業(yè)和中藥專業(yè)等。開設(shè)課程目的是介紹實驗中醫(yī)學(xué)的進展，培養(yǎng)學(xué)生采用現(xiàn)代科學(xué)的實驗方法和技術(shù)研究和發(fā)展中醫(yī)學(xué)的素質(zhì)和能力；培養(yǎng)學(xué)生的科研思維和實驗?zāi)芰Γ诶^承的基礎(chǔ)上，開展中醫(yī)現(xiàn)代化研究，發(fā)揚中醫(yī)藥的優(yōu)勢，為發(fā)展中醫(yī)藥事業(yè)和人類的健康事業(yè)作出貢獻。本教材分七個章：第一章緒論；第二章實驗中醫(yī)學(xué)的基本方法；第三章中醫(yī)臨床實驗研究；第四章中醫(yī)動物實驗研究；第五章中醫(yī)細胞生物學(xué)實驗研究；第六章實驗中醫(yī)學(xué)常用實驗方法及其應(yīng)用；第七章實驗指導(dǎo)。二、教學(xué)內(nèi)容和要求第一章緒論［目的要求］.掌握實驗中醫(yī)學(xué)的性質(zhì)、內(nèi)容和任務(wù)。.掌握學(xué)習(xí)實驗中醫(yī)學(xué)的注意事項。.了解實驗中醫(yī)學(xué)的發(fā)展簡史。［教學(xué)內(nèi)容］.實驗中醫(yī)學(xué)的性質(zhì)、內(nèi)容和任務(wù)。.實驗中醫(yī)學(xué)發(fā)展簡史。.學(xué)習(xí)實驗中醫(yī)學(xué)的注意事項。第二章實驗中醫(yī)學(xué)的基本方法［目的要求］.掌握中醫(yī)文獻的收集與研究方法。.掌握中醫(yī)實驗研究的基本方法和要求(1)選題。(2)實驗研究設(shè)計。包括實驗設(shè)計的3個基本原則、研究設(shè)計的基本要素、樣本大小的確定、常用實驗設(shè)計方案。(3)研究準(zhǔn)備。(4)實驗實施。(5)常見的偏倚、誤差及控制方法。(6)實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。(7)原始材料歸類與存檔。(8)研究論文撰寫與答辯。.了解中醫(yī)藥實驗研究的道德(1)以人為被試的研究準(zhǔn)則，以及世界醫(yī)學(xué)大會赫爾辛基宣言《人體醫(yī)學(xué)研究的倫理準(zhǔn)則》。(2)以動物為被試的研究準(zhǔn)則。(3)嚴(yán)禁科學(xué)欺騙。.了解古典中醫(yī)文獻的主要參考書。［教學(xué)內(nèi)容］第一節(jié)中醫(yī)文獻的收集與研究.中醫(yī)文獻在實驗研究中的重要性。.古典中醫(yī)文獻的收集、整理與研究(1)中醫(yī)古典文獻的特點。(2)中醫(yī)古典文獻收集的原則。(3)中醫(yī)古典文獻的收集方法。(4)中醫(yī)古典文獻的整理與研究。.當(dāng)代中醫(yī)文獻的收集、整理與研究(1)充分利用大型工具書。(2)深入挖掘名老中醫(yī)經(jīng)驗。(3)重視利用現(xiàn)代檢索技術(shù)方法。(4)借助統(tǒng)計學(xué)方法進行文獻研究。.古典中醫(yī)文獻的主要參考書。第二節(jié)中醫(yī)實驗研究的基本方法和要求.選題。.實驗研究設(shè)計(1)實驗設(shè)計的3個基本原則。(2)研究設(shè)計的基本要素。(3)樣本大小的確定。(4)常用實驗設(shè)計方案。.研究準(zhǔn)備。.實驗實施。.常見的偏倚、誤差及控制方法。.實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。.原始材料歸類與存檔。.研究論文撰寫與答辯。第三節(jié)中醫(yī)藥實驗研究的道德.以人為被試的研究準(zhǔn)則。.以動物為被試的研究準(zhǔn)則。.嚴(yán)禁科學(xué)欺騙。.附錄：世界醫(yī)學(xué)大會赫爾辛基宣言《人體醫(yī)學(xué)研究的倫理準(zhǔn)貝IJ》。第三章中醫(yī)臨床實驗研究［目的要求］.掌握中醫(yī)臨床實驗的基本方法。.掌握中醫(yī)臨床實驗設(shè)計，包括臨床實驗設(shè)計的3個基本要素、4個基本原則和方法，以及臨床實驗設(shè)計的一些方案。.掌握中醫(yī)臨床實驗的質(zhì)量控制。.掌握中醫(yī)辨證方法與標(biāo)準(zhǔn)。.掌握中醫(yī)治療學(xué)實驗的主要方法。.了解中醫(yī)臨床實驗的一些方法及沿革，包括古代和現(xiàn)代中醫(yī)臨床采用的一些研究方法。.了解舌診和脈象的實驗研究。.了解中醫(yī)證本質(zhì)的實驗研究。.了解中醫(yī)治療學(xué)實驗研究的案例與進展。［教學(xué)內(nèi)容］第一節(jié)中醫(yī)臨床實驗的基本方法1.中醫(yī)臨床實驗的一些方法及沿革（1）古代中醫(yī)臨床采用的一些研究方法。（2）現(xiàn)代中醫(yī)臨床采用的一些研究方法：流行病學(xué)、循證醫(yī)學(xué)、實驗、數(shù)理統(tǒng)計、信息科學(xué)、社會科學(xué)和軟科學(xué)方法。.中醫(yī)臨床實驗設(shè)計（1）中醫(yī)臨床實驗設(shè)計及其意義。（2）臨床實驗設(shè)計的3個基本要素一一研究對象、處理因素、實驗效應(yīng)。（3）臨床實驗設(shè)計的4個基本原則和方法一一對照、隨機、重復(fù)、盲法。（4）臨床實驗設(shè)計的一些方案：自身對照設(shè)計、配對設(shè)計、交叉設(shè)計、完全隨機設(shè)計、隨機區(qū)組設(shè)計、序貫實驗設(shè)計、隊列研究、病例-對照研究。.中醫(yī)臨床實驗的質(zhì)量控制（1）偏倚的產(chǎn)生及控制：選擇偏倚、測量偏倚、混雜偏倚。（2）機遇的認識與控制。（3）依從性的評價及改善措施。第二節(jié)中醫(yī)診斷學(xué)實驗研究.舌診的實驗研究。.脈象的實驗研究。.中醫(yī)辨證方法與標(biāo)準(zhǔn)的研究（1）中醫(yī)辨證方法。（2）一些代表性的辨證標(biāo)準(zhǔn)。(3)癥狀嚴(yán)重程度與療效評價標(biāo)準(zhǔn)。4.中醫(yī)證本質(zhì)的實驗研究(1)血瘀證的實驗研究。(2)脾虛證的實驗研究。第三節(jié)中醫(yī)治療學(xué)實驗研究.中醫(yī)治療學(xué)實驗的主要方法(1)遵循中醫(yī)臨床實驗的基本方法。(2)臨床治療學(xué)研究的方法。(3)臨床治療學(xué)的臨床前實驗。.中醫(yī)治療學(xué)實驗研究的案例(1)膽寧片治療慢性膽囊炎、膽石病的臨床試驗。(2)醒腦開竅針刺法治療中風(fēng)750例臨床回顧研究。(3)中西醫(yī)結(jié)合治療急腹癥。(4)支氣管哮喘的治療研究。(5)回族湯瓶八診療法。(6)壯醫(yī)的特色診療方法。第四章中醫(yī)動物實驗研究［目的要求］.掌握動物實驗的一般原則和方法。包括實驗動物的選擇，以及中醫(yī)動物實驗研究的注意點。.掌握中醫(yī)證候動物模型的建立方法。.掌握常用實驗動物大鼠、小鼠的四診和辨證方法。.了解證候動物模型的開創(chuàng)和發(fā)展。.了解大鼠、小鼠的四診和辨證方法的創(chuàng)建與發(fā)展。.了解動物實驗在中醫(yī)研究中的應(yīng)用。涉及：藏象氣血理論，針刺鎮(zhèn)痛，血瘀與活血化瘀研究，治則與治法研究，中藥資源開發(fā)，中藥生物工程，中藥炮制與藥性、藥效，青蒿素類藥物藥效學(xué)研究，中藥毒性研究，中藥復(fù)方藥代動力學(xué)研究，方劑研究等。［教學(xué)內(nèi)容］第一節(jié)動物實驗的一般原則和方法.實驗動物的選擇。.中醫(yī)動物實驗研究的注意點。第二節(jié)證候動物模型與實驗動物辨證.證候動物模型的開創(chuàng)和發(fā)展(1)證本質(zhì)和證動物模型的開創(chuàng)和發(fā)展。(2)中醫(yī)證候動物模型的復(fù)制方法。(3)動物模型研究存在的問題及展望。.大鼠、小鼠的四診和辨證方法的創(chuàng)建與發(fā)展(1)大鼠、小鼠的四診采集。(2)大鼠、小鼠計量化、標(biāo)準(zhǔn)化四診采集。(3)大鼠、小鼠常見證候辨證標(biāo)準(zhǔn)。(4)大鼠、小鼠計量辨證方法和標(biāo)準(zhǔn)。第三節(jié)動物實驗在中醫(yī)研究中的應(yīng)用.藏象氣血理論。.針刺鎮(zhèn)痛。.血瘀與活血化瘀研究。.治則與治法研究。.中藥資源開發(fā)。.中藥生物工程。.中藥炮制與藥性、藥效。.青蒿素類藥物藥效學(xué)研究。.中藥毒性研究。.中藥復(fù)方藥代動力學(xué)研究。.方劑研究。第五章中醫(yī)細胞生物學(xué)實驗研究［目的要求］.掌握細胞生物學(xué)的基本概念及內(nèi)容。包括細胞的基本結(jié)構(gòu)與功能、細胞的增殖與分化、細胞的衰老與死亡。.掌握細胞培養(yǎng)的概念和方法。.掌握中藥血清藥理學(xué)的概念和方法。.了解細胞生物學(xué)的其它常用研究技術(shù)。包括顯微鏡技術(shù)、細胞化學(xué)技術(shù)、細胞周期分析、細胞凋亡的測定、細胞結(jié)構(gòu)成分的離心分離技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)等。.了解細胞生物學(xué)技術(shù)在中醫(yī)研究中應(yīng)用的現(xiàn)狀。［教學(xué)內(nèi)容］第一節(jié)細胞生物學(xué).細胞的基本結(jié)構(gòu)與功能。.細胞的增殖與分化。.細胞的衰老與死亡。第二節(jié)細胞生物學(xué)常用實驗技術(shù).細胞培養(yǎng)技術(shù)(1)細胞體外培養(yǎng)的一般條件。(2)細胞的凍存與復(fù)蘇。(3)培養(yǎng)細胞的生長與觀察。.顯微鏡技術(shù)。.中藥血清藥理學(xué)(1)中藥血清藥理學(xué)實驗方法的提出。(2)中藥血清藥理學(xué)實驗方法的主要內(nèi)容。.細胞化學(xué)技術(shù)。.細胞周期分析。.細胞凋亡的測定。.細胞結(jié)構(gòu)成分的離心分離技術(shù)。.分子生物學(xué)技術(shù)。第三節(jié)細胞生物學(xué)技術(shù)在中醫(yī)研究中的應(yīng)用.中藥資源的開發(fā)與利用。.中藥藥理研究的體外實驗(1)中藥制劑的體外實驗。(2)中藥有效成分的體外實驗。.中醫(yī)基礎(chǔ)理論的探討。第六章實驗中醫(yī)學(xué)常用實驗方法及其應(yīng)用［目的要求］.掌握生理學(xué)、形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等不同學(xué)科實驗研究方法的特點和優(yōu)勢。.掌握依據(jù)實驗研究的不同目的，選擇合適的實驗技術(shù)和綜合多種技術(shù)。.了解生理學(xué)的主要方法及其在中醫(yī)研究中的應(yīng)用。.了解形態(tài)學(xué)的主要方法及其在中醫(yī)研究中的應(yīng)用。包括解剖學(xué)、病理解剖學(xué)方法，組織學(xué)、病理學(xué)方法，電子顯微鏡方法。.了解生物化學(xué)的主要方法及其在中醫(yī)研究中的應(yīng)用。.了解分子生物學(xué)的主要方法及其在中醫(yī)研究中的應(yīng)用。［教學(xué)內(nèi)容］第一節(jié)生理學(xué)方法及其在中醫(yī)研究中的應(yīng)用.生理學(xué)的主要方法(1)生理學(xué)實驗常用儀器：刺激系統(tǒng)，探測系統(tǒng)，信號調(diào)節(jié)系統(tǒng)，顯示、記錄系統(tǒng)，機體或離體組織生命維持設(shè)備/保障系統(tǒng)。(2)生理學(xué)實驗常用方法：神經(jīng)系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)。.實驗中醫(yī)學(xué)應(yīng)用生理學(xué)方法的現(xiàn)狀與案例(1)腎的研究。(2)脾的研究。第二節(jié)形態(tài)學(xué)方法及其在中醫(yī)研究中的應(yīng)用.形態(tài)學(xué)的主要方法(1)解剖學(xué)、病理解剖學(xué)方法。(2)組織學(xué)、病理學(xué)方法：普通光鏡標(biāo)本制備技術(shù)，涂片、鋪片、磨片標(biāo)本的制備，組織化學(xué)，免疫組織化學(xué)，放射自顯影，流式細胞術(shù)，激光掃描共聚焦顯微術(shù)，細胞凋亡檢測技術(shù)，組織學(xué)常用顯微鏡，病理細胞的采集與觀察。(3)電子顯微鏡方法：電子顯微鏡(透射電鏡、掃描電鏡)、電子顯微術(shù)、病理超微結(jié)構(gòu)觀察。.實驗中醫(yī)學(xué)應(yīng)用形態(tài)學(xué)方法的現(xiàn)狀與案例（1）藏象理論：腎、脾、肝、心、肺的研究。（2）證候理論：實熱、虛熱證候的研究，血瘀證候的研究，溫病營血證候的研究。（3）經(jīng)絡(luò)理論。（4）新近發(fā)展形態(tài)學(xué)技術(shù)的引進。第三節(jié)生物化學(xué)方法及其在中醫(yī)研究中的應(yīng)用.生物化學(xué)的主要方法（1）生物大分子物質(zhì)的分離和提純；（2）離心技術(shù)；（3）層析技術(shù)；（4）電泳技術(shù)；（5）光譜技術(shù)；（6）其他。.實驗中醫(yī)學(xué)應(yīng)用生物化學(xué)方法的現(xiàn)狀與案例（1）陰虛與陽虛；（2）心氣虛；（3）肝和肝虛證；（4）脾虛證；（5）肺虛證；（6）腎虛與物質(zhì)代謝；（7）體質(zhì)學(xué)說。第四節(jié)分子生物學(xué)方法及其在中醫(yī)研究中的應(yīng)用.分子生物學(xué)的主要技術(shù)和方法（1）載體；（2）分子克隆常用酶；（3）重組載體；（4）DNA的凝膠電泳；（5）真核細胞RNA的制備；（6）Northernblot；（7）基因表達譜芯片和DNA陣列技術(shù)；（8）標(biāo)記DNA或RNA探針；（9）cDNA文庫構(gòu)建；（10）真核細胞DNA的提??；（11）DNA文庫構(gòu)建；（12）Southernblot；（13）DNA的測序；（14）PCR、DD-PCR和RT-PCR；（15）DNA的誘變；（16）克隆化基因在大腸桿菌和哺乳動物培養(yǎng)細胞中表達；（17）克隆化基因所表達蛋白質(zhì)的檢測和分析；（18）Westernblot；（19）蛋白雙向電泳。.實驗中醫(yī)學(xué)應(yīng)用分子生物學(xué)方法的現(xiàn)狀與案例（1）分子生物學(xué)技術(shù)在中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究中的應(yīng)用：腎本質(zhì)的研究、中醫(yī)藥延緩衰老的研究、瘀血和活血化瘀治法的研究、治則治法研究。（2）分子生物學(xué)技術(shù)在中醫(yī)臨床上的應(yīng)用。（3）分子生物學(xué)技術(shù)在針灸研究中的應(yīng)用。（4）分子生物技術(shù)在方藥研究中的應(yīng)用：在方劑研究中的應(yīng)用、在中藥研究中的應(yīng)用（中藥品種鑒定與質(zhì)量評價、中藥材藥效評價與篩選、改良中藥品質(zhì)和提高藥品質(zhì)量）。第七章實驗指導(dǎo)［目的要求］1.目的（1）增進學(xué)生對實驗中醫(yī)學(xué)的理解。（2）培養(yǎng)初步的中醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)和能力。2.要求（1）積極、熱情投入。最大程度地激發(fā)出學(xué)習(xí)與探索的潛能和積極性。要求勤思考、勤觀察、勤提問、勤動手。（2）認真參與實驗研究的每一個過程，在研究中去觀察問題，發(fā)現(xiàn)問題，思考問題，提出問題，參考文獻，綜合分析，得出合理的研究結(jié)論。培養(yǎng)分析問題的能力、解決問題的能力。（3）要求在學(xué)習(xí)研究中要求發(fā)揚團隊協(xié)作精神。（4）要求培養(yǎng)科學(xué)的實事求是學(xué)風(fēng)，客觀地進行實驗設(shè)計、分析報道實驗結(jié)果。（5）掌握各實驗的實驗原理。（6）掌握各實驗所用的儀器設(shè)備，藥品，試劑的調(diào)試，準(zhǔn)備和配制以及全部實驗準(zhǔn)備工作。（7）掌握各實驗的具體操作技術(shù)和方法，做好觀察和記錄。（8）掌握實驗結(jié)果的統(tǒng)計方法，準(zhǔn)確分析實驗結(jié)果。（9）掌握實驗報告的撰寫方法。［教學(xué)內(nèi)容］實驗一實驗的一些基本要求與技術(shù)。實驗二動物實驗的基本方法與技術(shù)。實驗三小鼠的四診和辨證方法及體質(zhì)篩選。實驗四“氣能攝血”實驗。實驗五生三七粉對小鼠凝血時間的作用。實驗六不同治法對利血平氣虛證小鼠的作用比較。實驗七不同治法對環(huán)磷酰胺陽虛證小鼠的作用比較。實驗八不同急性胃潰瘍模型小鼠的比較及評價。實驗九肺氣腫和肺氣虛證大鼠模型的建立。實驗十氣虛血瘀證局灶性腦缺血大鼠模型及中藥干預(yù)。實驗十一溫病衛(wèi)氣營血動物模型實驗。［教學(xué)方法］.理論與教學(xué)實驗配合如下：第一章“緒論”：實驗一“實驗的一些基本要求與技術(shù)”，實驗室示教和配制試劑，為學(xué)生進入實驗室進行準(zhǔn)備。第二章“實驗中醫(yī)學(xué)的基本方法”：實驗二“動物實驗的基本方法與技術(shù)”，包括小鼠、大鼠、家兔的抓取固定、標(biāo)記編號、給藥、采血、麻醉、處死、解剖等技術(shù)培訓(xùn)。第三章“中醫(yī)臨床實驗研究”：實驗三“小鼠的四診和辨證方法及體質(zhì)篩選”，以及實驗四、五兩個小的動物實驗，以增進四診和辨證標(biāo)準(zhǔn)，及治療方法驗證與發(fā)展的理解，熟練動物實驗技能。第四章“中醫(yī)動物實驗研究”：實驗六、七，觀察證候動物造模后的證候?qū)傩?，以及不同治法的作用與異同。第五章“中醫(yī)細胞生物學(xué)實驗研究”，鑒于大多細胞培養(yǎng)室有嚴(yán)格的無菌操作要求，建議采用示教或采用多媒體教學(xué)。第六章“實驗中醫(yī)學(xué)常用實驗方法及其應(yīng)用”：實驗八、九、十，我國常見病動物模型，以及實驗十一的外感熱病動物模型，及其治療干預(yù)。有關(guān)形態(tài)學(xué)、生理學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)實驗，分別出現(xiàn)在實驗六及以后的各章節(jié)中，可以安排對應(yīng)的實驗操作。.在觀摩教學(xué)課件后，學(xué)員自愿分組，4?6人一組，以小組為單位開展實驗。三、參考性教學(xué)時數(shù)分配.理論課36個學(xué)時。大致安排為：理論課內(nèi)容（學(xué)時） 總學(xué)時TOC\o"1-5"\h\z第一章緒論（3） 3第二章實驗中醫(yī)學(xué)的基本方法：中醫(yī)文獻（2）、實驗基本方法（5）、研究的道德（1） 8第三章中醫(yī)臨床實驗研究：基本方法（2）、斷學(xué)/治療（2） 4第四章中醫(yī)動物實驗研究：原則和方法（2）、證候動物模型與實驗動物辨證（4） 6第五章中醫(yī)細胞生物學(xué)實驗研究 3第六章實驗中醫(yī)學(xué)常用實驗方法及其應(yīng)用：生理學(xué)（2）、形態(tài)學(xué)（6）、生物化學(xué)（2）、分子生物學(xué) 122）合計 362.實驗課72個學(xué)時（我校開展“中醫(yī)學(xué)綜合實驗”，以替代該實驗課）。建議安排為：理論課內(nèi)容 學(xué)時實驗一實驗的一些基本要求與技術(shù) 3實驗二動物實驗的基本方法與技術(shù) 3實驗三小鼠的四診和辨證方法及體質(zhì)篩選 6實驗四“氣能攝血”實驗 6實驗五生三七粉對小鼠凝血時間的作用 6實驗六不同治法對利血平氣虛證小鼠的作用比較 9實驗七不同治法對環(huán)磷酰胺陽虛證小鼠的作用比較9實驗八不同急性胃潰瘍模型小鼠的比較及評價 9實驗九，或?qū)嶒炇?，或?qū)嶒炇甞一 21合計 72四、考試和考核辦法.理論課考試：筆試。.實驗課考核建議：學(xué)習(xí)和實驗態(tài)度（40%）、研究報告（60%）。五、大綱使用說明.本大綱供中醫(yī)基礎(chǔ)專業(yè)、七年制專業(yè)使用，亦適用于其它專業(yè)，包括研究生選修或輔修本課程的學(xué)生。.在教學(xué)過程中，任課教師可根據(jù)具體情況對大綱所規(guī)定的教學(xué)內(nèi)容和教學(xué)時數(shù)安排進行適當(dāng)調(diào)整，但不能影響課程的基本體系。六、主要參考書目[1]克洛德?貝爾納.實驗醫(yī)學(xué)研究導(dǎo)論（夏康農(nóng),管光東譯）.第一版.北京：商務(wù)印書館,1991.[2]國家中醫(yī)藥管理局主編.中醫(yī)臨床研究方法指南（網(wǎng)絡(luò)版）.[3]孟慶云.中國中醫(yī)藥發(fā)展五十年:1949-1999.第一版.關(guān)B州：河南醫(yī)科大學(xué)出版社,1999.[4]方肇勤主編.中醫(yī)辨證論治學(xué).第一版.上海:上海中醫(yī)藥大學(xué)出版社,2008.[5]方肇勤主編.中醫(yī)學(xué)綜合實驗.第一版.上海：上海中醫(yī)藥大學(xué)出版社,2004.[6]馬繼興.中醫(yī)文獻學(xué).第一版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社.1990.[7]張燦坤.中醫(yī)古籍文獻學(xué).第一版.北京:人民衛(wèi)生出版社，1998.[8]賁長恩主編.醫(yī)學(xué)科研思路方法與程序.第一版.北京：人民衛(wèi)生出版社,2009.[9]汪謙主編.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實驗方法.第一版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1998.[10]金正均.醫(yī)學(xué)試驗設(shè)計原理.第一版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1964.[11]倪宗瓚.醫(yī)學(xué)統(tǒng)計學(xué).第二版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1998.[12]楊樹勤.衛(wèi)生統(tǒng)計學(xué).第三版.北京:人民衛(wèi)生出版社，1992.[13]周仁郁，崔相學(xué).統(tǒng)計方法及實驗.第一版.成都:西南交通大學(xué)出版社,2002.[14]袁肇凱.中醫(yī)診斷實驗方法學(xué).第一版.北京:科學(xué)出版社,2003.[15]朱文鋒.中醫(yī)診斷學(xué).第一版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1999.[16]袁肇凱.中醫(yī)診斷實驗方法學(xué).第一版.北京:科學(xué)出版社,2003.[17]程虹譯.人類疾病的動物模型.第一版.上海:上海醫(yī)科大學(xué)出版社,1989.[18]方喜業(yè).醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué).第一版.北京：人民衛(wèi)生出版社,1995.[19]盧耀增.實驗動物學(xué).第一版.北京:北京醫(yī)科大學(xué)，中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社,1995.[20]楊幼明.醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué).第一版.上海:上海醫(yī)科大學(xué)出版社,1998.[21]劉福英，劉田福.實驗動物學(xué).第一版.北京:中國科學(xué)技術(shù)出版社,2005.[22]陳小野.實用中醫(yī)證候動物模型學(xué).第一版.北京：北京醫(yī)科大學(xué)，中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社,1993.[23]鄭小偉主編.中醫(yī)實驗動物模型方法學(xué).第一版.上海：上海中醫(yī)藥大學(xué)出版社,1999.[24]方肇勤主編.辨證論治實驗方法學(xué)一一實驗小鼠診法和辨證.第一版.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2006.[25]方肇勤主編.大鼠/小鼠辨證論治實驗方法學(xué).第一版.科學(xué)出版社,2009.[26]李儀奎.中藥藥理實驗方法學(xué).第一版.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社,1991.[27]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué).第一版.北京：人民衛(wèi)生出版社,1993.[28]徐叔云主編.藥理實驗方法學(xué).第二版.北京：人民衛(wèi)生出版社,1994.[29]王夔主編.中藥研究現(xiàn)代方法學(xué).第一版.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2004.[30]日本?真島英信.生理學(xué)（姚承禹等校譯）.第一版.北京:人們衛(wèi)生出版社,1987.[31]陳次青編著.生理學(xué).第一版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1991.[32]韓濟生主編.神經(jīng)科學(xué)綱要.第一版.北京:北京醫(yī)科大學(xué)，中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社,1993.[33]沈岳良主編.現(xiàn)代生理學(xué)實驗教程.第一版.北京:科學(xué)出版社,2002.[34]鄭思競主編.人體解剖學(xué).第二版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1985.[35]杜卓民.實用組織學(xué)技術(shù).第二版.北京：人民衛(wèi)生出版社,1998.[36]武忠弼主編.病理學(xué).第四版.北京：人民衛(wèi)生出版社,1994.[37]周庚寅主編.組織病理學(xué)技術(shù).第一版.北京:北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社,2006.[38]鐘慈聲主編.細胞和組織的超微結(jié)構(gòu).第一版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1984.[39]陳嘯梅.組織化學(xué)手冊.第一版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1982.[40]周愛儒主編.生物化學(xué)，第五版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2001.[41]張龍翔，張庭芳,李令媛主編.生化實驗方法和技術(shù).第二版.北京:高等教育10出版社,1997.[42]趙永芳編著.生物化學(xué)技術(shù)原理及其應(yīng)用.第二版.武漢:武漢大學(xué)出版社,1994.[43]黃培堂等譯.分子克隆實驗指南.第三版.北京：科學(xué)出版社,2002.[44]方肇勤主編.分子生物學(xué)技術(shù)在中醫(yī)藥研究中的應(yīng)用.第二版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2008.[45]沈關(guān)心，周汝麟主編.現(xiàn)代免疫學(xué)實驗技術(shù).第一版.武漢：湖北醫(yī)科大學(xué)出版社,1998.[46]錢玉昆主編.實用免疫學(xué)新技術(shù).第一版.北京：北京醫(yī)科大學(xué)，中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1994.[47]許賢豪.神經(jīng)免疫學(xué).第一版.北京:北京醫(yī)科大學(xué)，中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社,1994.B.H.坎特威茨,H.L.羅迪格（III）,D.G.埃爾姆斯.實驗心理學(xué)一一掌握心理學(xué)的研究（郭秀艷等譯）.第一版.上海:華東師范大學(xué)出版社,2001.中醫(yī)學(xué)綜合實驗PBL/案例教學(xué)教學(xué)大綱上海中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實驗中醫(yī)學(xué)教研室

方肇勤2013-9-23修訂目錄：一、課程性質(zhì)和學(xué)習(xí)目標(biāo)二、教學(xué)內(nèi)容三、PBL/案例教學(xué)教學(xué)評價原則和方法四、教材和教學(xué)條件五、參考書和參考文獻一、課程性質(zhì)和學(xué)習(xí)目標(biāo).課程性質(zhì)《中醫(yī)學(xué)綜合實驗》是一門由學(xué)生獨立自主設(shè)計和采用多手段實驗研究的綜合實驗課。本課程培養(yǎng)學(xué)生獨立地綜合運用多種實驗方法開展中醫(yī)藥科研課題研究的能力，要求學(xué)生獨立地進行選題、設(shè)計、實驗準(zhǔn)備、實驗研究、實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析、撰寫實驗研究報告，從而初步奠定基本的科研基礎(chǔ)。課程中采用PBL/案例教學(xué)教學(xué)，在于進一步完善和貫徹綜合實驗課程的教學(xué)理念，使學(xué)生在教師的指導(dǎo)下，通過自行查閱相關(guān)文獻資料、組間交流討論和分析，以及針對具體案例開展實驗設(shè)計，最大限度地投入課程的各個教學(xué)環(huán)節(jié)，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性和主動性，完成教學(xué)大綱的各項要求，取得滿意的教學(xué)效果，以期實現(xiàn)從學(xué)到用11的能力的培養(yǎng)。.教學(xué)的目的和要求(1)PBL/案例教學(xué)教學(xué)的一般目的和要求1)PBL/案例教學(xué)教學(xué)的一般目的本課程的目的是鼓勵學(xué)生獨立學(xué)習(xí)、給學(xué)生在探究未知的不易解決的困惑中發(fā)現(xiàn)自身的欠缺，通過PBL/案例教學(xué)課程的每一階段，了解相關(guān)問題的來龍去脈進而解決問題的實踐機會。希望能夠激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)好奇心，鼓勵其尋根問底地探究和深入細致地探討問題中所包含的內(nèi)容、概念和原理，使學(xué)生能夠獨立地綜合運用多種實驗方法開展中醫(yī)實驗研究的能力、中醫(yī)藥學(xué)研究的創(chuàng)新、創(chuàng)造、開拓的精神和能力、使學(xué)生具備良好的科研素質(zhì)。通過參與PBL/案例教學(xué)教學(xué)過程學(xué)生應(yīng)達到下述教學(xué)目標(biāo)：①PBL/案例教學(xué)基本教學(xué)目標(biāo)，有知識、能力及情感等多重目標(biāo)。②學(xué)習(xí)本學(xué)科的學(xué)習(xí)方法，提高自主學(xué)習(xí)的能力，以及獲取和評價信息的能力。③還應(yīng)培養(yǎng)團隊協(xié)作能力和共同開展研究的能力，善于思考，敢于發(fā)表個人意見；通過彼此回饋與分享，協(xié)助學(xué)生了解與他人的互動模式，察覺自己的人際關(guān)系，建立情感支持及鼓勵，提高正向表達技巧。2)PBL/案例教學(xué)教學(xué)的一般要求①學(xué)生必須主動、積極地投入課程的每個教學(xué)環(huán)節(jié)。教師在課程中只起輔導(dǎo)和咨詢作用，學(xué)生在教師給出案例和問題后，應(yīng)自行查閱文獻，認真研讀和分析，在此基礎(chǔ)上初步得出合理的結(jié)論，進而通過組間討論、交流，對某一問題有全面的、正確的理解。要求充分調(diào)動和發(fā)揮個人的主觀能動性，不依賴教師，不人云亦云，在學(xué)習(xí)中觀察問題，發(fā)現(xiàn)問題，思考問題，探究問題，并在課堂討論時大膽發(fā)表己見，虛心吸收同學(xué)、老師的觀點和意見，從中有效地取舍，拓展思路。②學(xué)生應(yīng)加強自學(xué)能力，包括獲取新信息、新知識的能力、分析、消化和利用信息的能力、對文獻的評判和取舍能力等。③學(xué)生在學(xué)習(xí)研究中要求發(fā)揚團隊協(xié)作精神，不僅保證自己有效地學(xué)習(xí)，且應(yīng)關(guān)心和幫助同伴，在組間和班級交流時認真聽取和吸納別人的意見，學(xué)會在堅持自己意見的同時尊重他人的學(xué)術(shù)觀點，并能通過交流揚長補短，充實和完善自己的知識。④通過學(xué)習(xí)學(xué)生應(yīng)具備：對自身學(xué)術(shù)上和情感上的優(yōu)勢和局限性有較清醒和理智的了解；責(zé)任心和可信任感；關(guān)心他人和與之溝通的能力；客觀評價自己和小組其他成員學(xué)業(yè)水平的能力。12(2)本課程教學(xué)的特殊目的和要求通過本課程的學(xué)習(xí)，學(xué)生應(yīng)該能夠：1)了解有關(guān)疾病中醫(yī)藥動物實驗開展的現(xiàn)狀和存在的問題、發(fā)展趨勢。由此涉及：大致了解我國某一常見病、難治病，例如原發(fā)性肝癌存在同病異證的現(xiàn)象，及其臨床表現(xiàn)，辨證標(biāo)準(zhǔn)和要點；大致了解有關(guān)疾病西醫(yī)、中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合治療的方法和特點，及其幾十年來所取得的進展；了解其療效的提高、機制的闡明有賴于開展大量的動物實驗。2)了解大鼠、小鼠標(biāo)準(zhǔn)化四診和辨證方法學(xué)探索和發(fā)展的現(xiàn)狀，以及個體化辨證論治和療效評價的現(xiàn)狀。由此涉及了解虛證動物模型的主要制作方法，及其證候表現(xiàn)、實驗室指標(biāo)的改變，治療與療效，存在問題和發(fā)展趨勢。3)能夠初步撰寫文獻綜述和口頭交流。4)充分挖掘案例中隱含的學(xué)術(shù)問題，依據(jù)有關(guān)研究背景和現(xiàn)狀，以及教學(xué)條件，提出假說、開展實驗設(shè)計。3.大體學(xué)習(xí)流程分4個教學(xué)單元：(1)第1個教學(xué)單元：介紹、分組；提交原發(fā)性肝癌等中醫(yī)動物實驗報道案例；課堂內(nèi)外的PBL。(2)第2個教學(xué)單元：小組舉薦代表介紹該組PBL結(jié)果；提交小鼠同病異證和異病同證的論文案例；課堂內(nèi)外的PBL。特點是從臨床需求出發(fā)，了解相應(yīng)疾病的療效評價和機制研究等動物實驗，進而引申到開展常見疾病模型實驗動物辨證論治的方法及重要性。(3)第3個教學(xué)單元：小組舉薦代表介紹該組PBL結(jié)果；案例教學(xué)，提交來自某班級有關(guān)乙酰苯肼小鼠血虛造模及不同中醫(yī)治法療效比較案例；課堂內(nèi)外的案例教學(xué)，以小組為單位開展實驗設(shè)計。(4)第4個教學(xué)單元：小組舉薦代表介紹該組案例教學(xué)結(jié)果，提交實驗設(shè)計，課堂充分討論存在的問題、假說和驗證假說的方法；對個人和他人做出評價。4.時間安排日期課堂教學(xué)課后學(xué)習(xí)2012/12/17本次主題如導(dǎo)學(xué)，分組。第一次討論課程。1學(xué)時2學(xué)時PBL4學(xué)時2012/12/24第二次討論課程3學(xué)時PBL4學(xué)時2012/12/31第三次討論課程及引入案例教學(xué)3學(xué)時案例學(xué)習(xí)4學(xué)時2013/01/07第四次案例教學(xué)討論課程，總結(jié)。3學(xué)時撰寫報告4學(xué)時*與以往PBL教學(xué)不同的是，2012年在第三次教學(xué)中引入案例教學(xué)，具體參見有關(guān)案例教學(xué)教師指導(dǎo)手冊和案例。PBL和案例教學(xué)的一般考核仍安排在第四次課中，包括案例教學(xué)的一般考核。二、教學(xué)內(nèi)容具體參見：“上海中醫(yī)藥大學(xué)PBL教案一一中醫(yī)學(xué)綜合實驗”在中醫(yī)學(xué)綜合實驗課程的前4周安排PBL教學(xué)，每次課堂討論133學(xué)時。該教案由系列案例構(gòu)成，主要內(nèi)容如下：第一次課程（1）案例：固本活血解毒法治療原發(fā)性肝癌的實驗研究。（2）問題：1）同病異證。①原發(fā)性肝癌的同病異證的表現(xiàn)是什么？②近年國內(nèi)中醫(yī)學(xué)者是怎樣認識的，辨證標(biāo)準(zhǔn)如何？請列表比較。重點在虛證（臟腑涉及脾、肺、腎）。2）國內(nèi)原發(fā)性肝癌的中醫(yī)藥動物實驗采用了哪些組方或方法，與臨床報道的異同，為什么？存在什么問題？發(fā)展趨勢如何？3）國內(nèi)原發(fā)性肝癌的中醫(yī)藥動物實驗有沒有采用辨證論治的，或近似的方法，采用了哪些方法，存在什么問題？4）①如何提高原發(fā)性肝癌的療效，②西醫(yī)是如何開展臨床療效評價的、③中醫(yī)是如何開展臨床療效評價的？④各自進展如何？請列表比較。第二次課程（1）案例：大鼠、小鼠常見證候計量化辨證方法的建立及其評價。（2）問題：1）虛證動物模型的制作方法有哪些，其證候表現(xiàn)如何？檢測了哪些實驗室指標(biāo)？采用了哪些動物、造模方法如何？2）虛證動物模型治療與療效如何？10年間每年文獻的數(shù)量情況、存在問題和發(fā)展趨勢如何？3）有關(guān)大鼠、小鼠四診和辨證方法學(xué)探索和發(fā)展的現(xiàn)狀如何？發(fā)展趨勢如何（近6年文獻）？4）不同疾病大鼠/小鼠辨證論治對疾病和證候的療效如何？存在什么問題，發(fā)展趨勢如何？第三次課程（1）案例：乙酰苯肼溶血性貧血造模小鼠證候?qū)傩?、演變，及不同治法方藥療效比較。（2）問題：學(xué)生依據(jù)案例方法、結(jié)果、對結(jié)果判斷的分歧、存在的問題等予以歸納，參考學(xué)術(shù)界研究背景和發(fā)展趨勢，提出實驗設(shè)計和撰寫案例報告。第四次課程（1）不同小組案例實驗設(shè)計介紹、評選。（2）實驗設(shè)計課堂交流與完善。（3）學(xué)生評價。（4）教師總結(jié)。14三、PBL教學(xué)評價原則和方法（一）原則.評價頻次PBL有多次評價（作為一門課程）和單次評價（作為課程的一個單元）兩種方式，本課程選擇后者一一在PBL和案例教學(xué)4個單元結(jié)束后集中進行。.參與評價者（1）教師對各個學(xué)生評價。（2）每個學(xué)生對本人及本小組內(nèi)其他學(xué)生評價。（3）學(xué)生對教學(xué)評價（含學(xué)生對教師評價）。.評價的內(nèi)容（1）普通PBL教學(xué)評價，重在PBL教學(xué)形式和理念貫徹的評價。（2）知識點的評價，重點評價個人的案例報告。（3）教學(xué)評價一一案例教學(xué)調(diào)查報告。.與綜合實驗考核的關(guān)系以上得到兩個分數(shù)，其與原先的綜合實驗評價分數(shù)的關(guān)系如下:《中醫(yī)學(xué)綜合實驗》成績由4部分構(gòu)成：PBL/案例教學(xué)占30%、案例報告占20%；實驗報告占40%,實驗態(tài)度占10%。（二）普通PBL教學(xué)評價指標(biāo)體系.在小組學(xué)習(xí)中組織、準(zhǔn)備、投入和貢獻（20/100分）.學(xué)習(xí)自主性、按時參加每次學(xué)習(xí)討論（20/100分）.表達與合作能力、信息獲取與自學(xué)能力、分析問題與總結(jié)歸納能力、知識面拓展等能力的評價（60/100分），具體為：（1）對教師所給案例和問題的理解程度（10/100分）（2）課堂表達的情況（邏輯性、系統(tǒng)性、清晰度和書記掌握，10/100分）（3）能否提出有價值的問題（20/100分）（4）文獻收集的針對性、數(shù)量和新近程度（10/100分）（5）文獻的研讀和分析情況（10/100分）.《中醫(yī)學(xué)綜合實驗》PBL課程學(xué)生評價量表學(xué)生姓名： 學(xué)號： 日期（年/月/日）：請按以下方法評價你本人和你小組各成員的成績。方法：以100分制分別評價各學(xué)生A、B、C三欄，總分一欄由老師統(tǒng)計。TOC\o"1-5"\h\zA.在小組中B.學(xué)習(xí)自主C.表達與合作能力、信息總分=學(xué)生組織、投入和性、按時參加獲取與自學(xué)能力、分析問題AX0.2 +姓名貢獻（?100每次討論與總結(jié)歸納能力、知識面拓Bx0-2 +分） （?100分） 展（?100分） Cx0.6155.《中醫(yī)學(xué)綜合實驗》PBL課程教師評價量表教師姓名： 日期（年/月/日）：請按以下方法評價每一位學(xué)生的成績。方法：以100分制分別評價各學(xué)生A、B、C三欄，總分一欄由專人統(tǒng)計。A.在小組中B.學(xué)習(xí)自主C.表達與合作能力、信息總分=學(xué)生組織、投入和性、按時參加獲取與自學(xué)能力、分析問題AX0.2+姓名貢獻（?100每次討論與總結(jié)歸納能力、知識面拓Bx0-2+分） （?100分） 展（?100分） Cx0.66.最終成績權(quán)重（1）自我評價占：30%（2）小組評價占:30%（3）教師評價占:40%（三）知識點的評價指標(biāo)體系——案例報告案例報告涉及：①從案例中所歸納出的問題；②與該問題有關(guān)研究背景和進展（文獻綜述）；③提煉出論據(jù)和論證；④得出結(jié)論和提出假說；⑤設(shè)計可行的實驗方案以驗證假說；⑥參考文獻。案例報告重點要回答3個問題：（1）是什么一一立場陳述/表明結(jié)論（從案例出發(fā)，問題的界定）。（2）為什么一一論證（結(jié)合文獻綜述，診斷、證明因果關(guān)系）。（3）怎么辦一一實驗設(shè)計（行動計劃：步驟、方法、風(fēng)險）。四、教材和教學(xué)條件.教材：方肇勤主編.中醫(yī)學(xué)綜合實驗上海中醫(yī)藥大學(xué)出版社，2004.教學(xué)條件（1）學(xué)校圖書館網(wǎng)一一CNKI、VIP等數(shù)據(jù)庫。（2）學(xué)校圖書館。（3）多媒體PBL小教室。五、參考材料.互聯(lián)網(wǎng)資訊（1）互聯(lián)網(wǎng)有關(guān)生物醫(yī)學(xué)全文數(shù)據(jù)庫、有關(guān)檢索引擎..主要參考書（1）方肇勤主編.實驗中醫(yī)學(xué).上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，第二版，2008.（2）方肇勤主編.中醫(yī)辨證論治學(xué).上海中醫(yī)藥大學(xué)出版社，第一版,2008.（3）方肇勤主編.辨證論治實驗方法學(xué)一一實驗小鼠診法和辨證.上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，第一版,2006.16(4)方肇勤主編.大鼠/小鼠辨證論治實驗方法學(xué).科學(xué)出版社,第一版,2009.(5)威廉.埃利特.案例學(xué)習(xí)指南一一閱讀、分析、討論案例和撰寫案例報告[M].劉剛，等譯.中國人民大學(xué)出版社,2009.(6)陳小野主編.實用中醫(yī)證候動物模型學(xué).北京醫(yī)科大學(xué)/北京協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社,1993.(7)鄭小偉主編.中醫(yī)實驗動物模型方法學(xué).上海中醫(yī)藥大學(xué)出版社,1999.(8)賁長恩主編.醫(yī)學(xué)科研思路方法與程序.人民衛(wèi)生出版社,2009.3.主要參考文獻[1]方肇勤.辨證標(biāo)準(zhǔn)的基本要素與構(gòu)成.上海中醫(yī)藥雜志,2004,38(1):3-6.[2]方肇勤.開拓證研究新途徑的思考.上海中醫(yī)藥雜志,2001,35(4):4-5.[3]方肇勤.中醫(yī)基礎(chǔ)證的一原三維研究.中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2002,(4):250-251.[4]陳德溯，陳曉，方肇勤.建立荷瘤小鼠分期辨證方法的初步研究.中國醫(yī)藥學(xué)報,2002,17(增刊):248-250.[5]陳曉,陳德溯,方肇勤.荷瘤小鼠非創(chuàng)傷性辨證指標(biāo)的對照研究.中醫(yī)雜志,2003,44(1):58-59.[6]潘志強，方肇勤,闞衛(wèi)兵，等.正常昆明種小鼠后爪圖譜及RGB值.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2003,17(3):46-47.[7]潘志強，方肇勤,闞衛(wèi)兵，等.荷瘤小鼠后爪部分證的標(biāo)志圖譜.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2004,10(2):27-29.[8]潘志強，方肇勤,付曉伶，等.荷瘤小鼠若干典型證的演變及其后爪圖像特征.上海中醫(yī)藥雜志,2004,10(6):62-64.[9]潘志強，方肇勤，章怡祎.行為學(xué)檢測在實驗小鼠辨證中的應(yīng)用.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2007,21(1):33-36.[10]潘志強，盧文麗，方肇勤.小鼠舌象的顯微拍攝.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2007,13(3):189-191.[11]潘志強，方肇勤.小鼠虛證模型實驗研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2003,17(4):60-63.[12]盧文麗，方肇勤.陽虛證動物模型的造模方法與評析.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2004,18(4):44-48.[13]盧文麗，方肇勤.陽虛證動物模型診斷指標(biāo)與評析.上海中醫(yī)藥雜志，2005,39(4):42-46.[14]付曉伶，方肇勤.陰虛證動物模型的造模方法及評析.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2004,18(2):51-54.[15]許敏,方肇勤.血虛證動物模型造模方法與評析.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2006.20(3):73-76.[16]李軍蘭，方肇勤.氣虛證動物模型造模方法綜述.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2004,18(3):56-60.[17]盧文麗，方肇勤,潘志強，等.小鼠氣、血、陰、陽虛等四種模型四診的比較和評價.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2006,12(6):433-438.[18]盧文麗，方肇勤,潘志強，等.四種不同品系小鼠氣虛血虛證候的比較與評價.遼寧中醫(yī)雜志,2007,34(4):519-522.[19]方肇勤，潘志強，陳曉.實驗小鼠四診方法學(xué)的創(chuàng)建和意義.上海中醫(yī)藥大學(xué)雜志,2006,40⑺:1-4，封3.17[20]方肇勤主編.辨證論治實驗方法學(xué)一一實驗小鼠診法和辨證.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2006.[21]方肇勤，潘志強，盧文麗，等.上海中醫(yī)藥大學(xué)實驗中醫(yī)學(xué)教研室證候及辨證論治研究的進展.中國科協(xié)第148次青年科學(xué)家論壇發(fā)言(北京,07/12/14-16).[22]方肇勤，潘志強，付曉伶，等.小鼠四診采集項目標(biāo)準(zhǔn)的建議.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2005,11(9):692-694.[23]方肇勤，潘志強,湯偉昌，等.小鼠四診工作站構(gòu)建與操作標(biāo)準(zhǔn)探討[J].上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2006,20(1):42-46.[24]方肇勤，潘志強，盧文麗，等.小鼠常見證候的辨證標(biāo)準(zhǔn).中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2006,12(7):508-510.[25]方肇勤，潘志強，盧文麗，等.大鼠、小鼠常見證候計量化辨證及方法的建立及其評價.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2007,13(7):502-505.[26]方肇勤，侯俐，盧文麗，等.荷瘤小鼠證候的發(fā)生、演變、兼證及預(yù)后.上海中醫(yī)藥雜志,2007,41(1):57-62.[27]潘志強，方肇勤，盧文麗.H22肝癌與Lewis肺癌荷瘤小鼠證候特征比較研究.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2008,31(3):184-188.[28]盧文麗，方肇勤,潘志強，等.6種胃潰瘍小鼠模型的證候特征及比較.上海中醫(yī)藥雜志,2007,41(8):63-68.[29]盧文麗，方肇勤,潘志強，等.不同方法致實驗性胃潰瘍小鼠的同病異證.湖南中醫(yī)雜志,2008,24(1):69-72.[30]盧文麗，方肇勤,潘志強，等.應(yīng)激等致大鼠實驗性胃潰瘍的征候特征及比較.福建中醫(yī)藥.2008,39(2):45-48.[31]盧文麗，方肇勤，潘志強,等.應(yīng)激等致大鼠實驗性胃潰瘍的同病異證和異病同證.浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報.2008,32(3):317-320.[32]劉小美，方肇勤,盧文麗，等.糖尿病模型大鼠證候的特征及演變.遼寧中醫(yī)雜志,2008,35(1):130-134.[33]劉小美，方肇勤，盧文麗，等.糖尿病大鼠的同病異證與異病同證.浙江中醫(yī)雜志,2008.43(1):10-13.[34]劉小美，方肇勤,潘志強，等.兩種不同配方高脂飼料致高脂血癥大鼠的證候比較.安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2008,27(2):33-37.[35]方肇勤，盧文麗，潘志強，等.不同證候荷瘤小鼠神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)基因轉(zhuǎn)錄的特征.中華中醫(yī)藥雜志,2007,22(增刊):8-14.[36]方肇勤，潘志強,盧文麗，等.不同證候荷瘤小鼠下丘腦、垂體基因表達與外顯子剪接的特征.第十一屆全國肝癌會議發(fā)言(南寧,07/10/25-27).[37]方肇勤，潘志強，盧文麗,等.不同證候荷瘤小鼠的情志與神經(jīng)內(nèi)分泌基因表達的特征.中華中醫(yī)藥學(xué)會情緒與健康和疾病及其中醫(yī)藥干預(yù)國際學(xué)術(shù)研討會發(fā)言(青島,8/24-27).[38]潘志強，付曉伶，方肇勤.荷瘤小鼠辨證論治的進一步研究.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2007,13(1):28-31.[39]潘志強，方肇勤,盧文麗，等.陽氣虛和氣陰陽虛證荷瘤小鼠腎上腺基因表達的差異性.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2008,22(3):45-50.[40]彭成，等.試論中醫(yī)證候動物模型的研究技術(shù)，成都中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,1989,12(3):44-46.[41]北京師范大學(xué)生物系消化生理科研組.中醫(yī)脾虛證動物模型的造型.中華醫(yī)學(xué)雜志,1980,60(2):83-86.[42]沈麗波，錢會南.脾虛模型實驗研究方法概述.中國中醫(yī)藥信息雜志,2005,12(1):93-95.[43]陳小野，周永生,樊雅莉，等.脾氣虛證動物模型規(guī)范化的初步研究.中國醫(yī)藥18學(xué)報,2001,16(4):52-58.[44]任平，劉芳，黃熙，等.脾虛大鼠生長抑素、胃動素、膽囊收縮素內(nèi)分泌細胞的變化.成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2001,24(1):35-37.[45]趙軍寧,王建華，黃衡,等.胃泌素受體在脾虛大鼠的異常表達與中藥調(diào)控作用研究.中國中醫(yī)基礎(chǔ)理論雜志,2000,6(5):36-39.[46]王艷杰.脾虛證的酶學(xué)研究進展.遼寧中醫(yī)雜志,2002,29(10):635-636.[47]陳永輝.脾虛證免疫學(xué)研究進展.安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2001,20(4):58-60.[48]王天芳,楊維益.脾主肌肉的實驗研究進展.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,1996,19(5):22-24.[49]孫福立，等.試用睡眠剝奪方法建立心虛證的動物模型 .中西醫(yī)結(jié)合雜志,1998,39(2):110.《中醫(yī)學(xué)綜合實驗》教學(xué)大綱方肇勤上海中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實驗中醫(yī)學(xué)教研室(2013/9/23)一、前言《中醫(yī)學(xué)綜合實驗》是培養(yǎng)學(xué)生獨立、綜合運用多種實驗方法研究中醫(yī)課題能力的一門課程，是中醫(yī)基礎(chǔ)學(xué)科的重要課程之一。幾十年的中醫(yī)現(xiàn)代實驗研究表明，如何把傳統(tǒng)的中醫(yī)理論與現(xiàn)代高科學(xué)技術(shù)結(jié)合起來，合理地運用后者來研究、發(fā)掘和發(fā)展前者，是中醫(yī)現(xiàn)代化過程中突出存在的問題，其中關(guān)鍵是人才。中醫(yī)現(xiàn)代化的實驗研究需要大量復(fù)合型人才。這樣的人才既要求對傳統(tǒng)中醫(yī)理論方法的了解，又要求對現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)有關(guān)原理、方法、技術(shù)、理論的掌握，并能夠把兩者合理有機地組合起來。在以往開展中醫(yī)研究、研究生培養(yǎng)中，明顯暴露出缺乏這樣的人才，大學(xué)本科教育階段缺乏相應(yīng)的教學(xué)手段和措施。因此，缺少這樣的教學(xué)形式和環(huán)節(jié)，已經(jīng)成為限制中醫(yī)藥迅速發(fā)展的一條重要因素?！吨嗅t(yī)學(xué)綜合實驗》即針對這樣的現(xiàn)狀和需求而開設(shè)，課程在《實驗中醫(yī)學(xué)》培訓(xùn)的基礎(chǔ)上，要求并指導(dǎo)學(xué)生在教師的指導(dǎo)下，綜合所學(xué)中、西醫(yī)學(xué)知識、現(xiàn)代研究技術(shù)，獨立自主地開展包括選題、課題設(shè)計、研究準(zhǔn)備、實驗實施、實驗數(shù)據(jù)分析，乃至撰寫實驗報告等系統(tǒng)的實踐，使學(xué)生在實踐中去進一步檢驗所學(xué)的知識，暴露其知識面的欠缺，主動去吸取有關(guān)知識，并綜合運用這些知識，在實踐中完成從學(xué)到用的能力培養(yǎng)和升華。針對學(xué)生對醫(yī)學(xué)文獻的檢索、評判性閱讀、分析歸納綜合，以及提出問題和解決問題等能力差；對新時期中醫(yī)學(xué)知識產(chǎn)生有賴于開展大量實驗研發(fā)的重要性認識不足，輕視中醫(yī)實驗研究等存在問題，19自2008年起，該課程引入了PBL教學(xué)，希望進一步提高教學(xué)效果。二、教學(xué)內(nèi)容和要求［目的要求］.目的《中醫(yī)學(xué)綜合實驗》的主要目的是培養(yǎng)學(xué)生獨立地、綜合運用多種實驗方法開展中醫(yī)實驗研究的能力。課程設(shè)計以充分調(diào)動學(xué)生的學(xué)習(xí)熱情，培養(yǎng)獨立研究的基本能力，及其綜合能力，并在教學(xué)形式上給予保證。在教學(xué)中要求學(xué)生綜合所學(xué)中、西醫(yī)學(xué)知識、現(xiàn)代研究技術(shù)，獨立自主地開展包括選題、課題設(shè)計、研究準(zhǔn)備、實驗實施、實驗數(shù)據(jù)分析，至撰寫實驗報告等系統(tǒng)的實踐，使學(xué)生在實踐中去檢驗所學(xué)的知識，暴露其知識面的欠缺，主動去吸取有關(guān)知識，并綜合運用這些知識，在實踐中完成從學(xué)到用的能力的培養(yǎng)和升華。.要求(1)明確學(xué)習(xí)目的：1)培養(yǎng)學(xué)生中醫(yī)藥學(xué)創(chuàng)新、創(chuàng)造、開拓的精神和能力，尤其注重能力的培養(yǎng)，學(xué)用結(jié)合；2)培養(yǎng)學(xué)生科研素質(zhì)，激勵學(xué)生發(fā)現(xiàn)知識的局限、主動自學(xué)，不斷補充完善其知識結(jié)構(gòu)；3)培養(yǎng)學(xué)生的科研思想素質(zhì)，包括對研究的興趣、實事求是的態(tài)度、尊重他人的學(xué)術(shù)見解和研究成果、團隊協(xié)作精神、主動精神。這些素質(zhì)、精神、能力對畢業(yè)后從事中醫(yī)醫(yī)療、科研、教學(xué)是十分必要的，是二十一世紀(jì)中醫(yī)藥人才的基本要求。4)培養(yǎng)批判性閱讀能力。(2)要求熱情、積極投入。最大程度地激發(fā)出潛能，最大程度地調(diào)動學(xué)習(xí)、研究、創(chuàng)造的積極性。投入愈多，收獲愈多。鼓勵勤思考、勤觀察、勤提問、勤動手。鼓勵加強交流，切磋利弊，獲得大量的書本上學(xué)不到、體會不深切的知識。(3)在教學(xué)形式上保證學(xué)生成為主角，輔以啟發(fā)教育，注意培養(yǎng)獨立科學(xué)研究的能力。充分調(diào)動和發(fā)揮個人的主觀能動性。要求學(xué)生親自動手，獨立、主動、認真地參與實驗研究的每一個過程，主動參與研究的所有環(huán)節(jié)，在研究中去觀察問題，發(fā)現(xiàn)問題，思考問題，探究問題，參考文獻，綜合分析，得出合理的研究結(jié)論。并在研究、討論中培養(yǎng)分析問題的能力、解決問題的能力、表達能力和取舍決策的能力、創(chuàng)新能力。課堂討論鼓勵學(xué)生大膽發(fā)表己見，虛心吸收同學(xué)、老師的觀點和意見，擴展分析思路，培養(yǎng)獨立分析問題的能力。從中有效地培養(yǎng)獨立開展實驗中醫(yī)學(xué)研究的能力、競爭和拼搏的精神、開拓創(chuàng)造的能力。增強科研的信心和勇氣，培養(yǎng)科學(xué)實驗思維能力。(4)要求在學(xué)習(xí)研究中要求發(fā)揚團隊協(xié)作精神。(5)要求培養(yǎng)和加強自學(xué)能力，獲取新知識的能力。(6)要求培養(yǎng)因時、因地、因人制宜的能力。課程開展過程中20要求處理好理想與現(xiàn)實的關(guān)系。由于受到教學(xué)經(jīng)費的限制、課時的限制、學(xué)生實驗研究技術(shù)的水準(zhǔn)、教學(xué)實施所在科室實驗條件的限制、帶教教師學(xué)術(shù)水平的限制等等，所開展的實驗往往會與部分，甚至多數(shù)學(xué)生所期望、理想的有一定的差距。在最終確定并開展的綜合實驗所采用的技術(shù)、方法、內(nèi)容往往不可能是最先進的、最激動、最系統(tǒng)、最周全的。為此，既要求學(xué)生培養(yǎng)準(zhǔn)確地了解環(huán)境、適應(yīng)環(huán)境，調(diào)整研究的思路、設(shè)想、方法的能力；同時要求學(xué)生從今后研究工作需要出發(fā)，高標(biāo)準(zhǔn)、嚴(yán)要求，在有限的條件下獲得最大的鍛煉和教益。使學(xué)生因人、因地、因時制宜的能力得到培訓(xùn)，增加今后研究的適應(yīng)力、應(yīng)變能力。同時，培養(yǎng)學(xué)生堅毅的心理素質(zhì)、毅力、自控能力和承受挫折的能力。學(xué)會尊重他人的觀點。（7）要求培養(yǎng)科學(xué)的實事求是學(xué)風(fēng)，客觀地進行實驗設(shè)計、分析報道實驗結(jié)果。（8）要求重視培養(yǎng)信息的收集、利用與交流的能力。［教學(xué)內(nèi)容］.首先介紹本課程的教學(xué)方式，要求學(xué)生課后自學(xué)《中醫(yī)學(xué)綜合實驗》教材，內(nèi)容包括：第一章緒論第二章選題第三章課題設(shè)計第四章研究準(zhǔn)備第五章實驗實施第六章實驗數(shù)據(jù)分析第七章撰寫實驗報告第八章綜合實驗實例附錄.學(xué)生自愿分組選題，分作4組。.PBL與案例教學(xué)（PBL與案例教學(xué)另有配套的教學(xué)大綱、教案和具體教學(xué)文件）。期間完成以小組為單位的選題。.選題課堂交流、提問、答疑，每組由第1人介紹。無記名投票確定選題。.任課教師與學(xué)生一道課堂商量具體實驗設(shè)計，明確各小組的研究內(nèi)容和分工。.學(xué)生預(yù)初實驗和技能培訓(xùn)，實驗準(zhǔn)備。.開展正式實驗和實驗數(shù)據(jù)分析。.課堂實驗結(jié)果交流和數(shù)據(jù)處理討論。.學(xué)生進一步完成數(shù)據(jù)處理和分析，獨立撰寫研究報告（該研究報告作為成績）。.課堂每組推薦1人模擬論文答辯。.教師進行課程總結(jié)。21

［教學(xué)方法］1.教學(xué)原則(1)加強批判性閱讀和思維能力的培養(yǎng)；加強拓展思維、分析問題、提出問題、解決問題能力的培養(yǎng)。(2)以學(xué)生自學(xué)和自己動手選題、設(shè)計、技術(shù)培訓(xùn)和實驗準(zhǔn)備與預(yù)實驗、實驗及撰寫研究報告為主，教師指導(dǎo)、分析為輔。2.教學(xué)安排(1)教師介紹課程及教學(xué)方案。(2)平行開課的3個班級，各班學(xué)生自愿分為4組；重組入6個PBL/案例教學(xué)小班，開展PBL/案例教學(xué)。PBL/案例教學(xué)參考相應(yīng)的PBL/案例教學(xué)大綱。(3)在PBL/案例教學(xué)期間，以小組為單位，利用計算機檢索等方法開展選題；并各自獨立撰寫文獻綜述。(4)PBL/案例教學(xué)結(jié)束后，各組回到各自原先的班級，開展選題的課堂交流、答疑，每組由第1人介紹。經(jīng)課堂選題分析與討論后，由學(xué)生以小組為單位，無記名投票決定最終選題。(5)在老師的指導(dǎo)下課題設(shè)計課堂討論與完善，明確研究內(nèi)容，及各小組承擔(dān)實驗工作。(6)學(xué)生在老師的指導(dǎo)下進行實驗技能培訓(xùn)、實驗準(zhǔn)備、預(yù)初實驗。(7)學(xué)生在導(dǎo)師指導(dǎo)下開展實驗研究工作。(8)各組學(xué)生推舉1名代表課堂PPT介紹實驗結(jié)果，及其初步的分析，開展課堂討論。(9)學(xué)生在老師的指導(dǎo)下完成數(shù)據(jù)處理、分析。學(xué)生獨立撰寫研究報告并上交，作為考試內(nèi)容之一。(10)各組推薦1名代表課堂PPT介紹研究報告，學(xué)生和教師提問，模擬答辯。(11)教師進行課程總結(jié)和點評。三、參考性教學(xué)時數(shù)分配本課程標(biāo)準(zhǔn)學(xué)時為70個學(xué)時。具體學(xué)時分配如下:周次課堂講授課程介紹；第一次PBL

周次課堂講授課程介紹；第一次PBL

簡介、分組，案例1、討論第二次PBL匯報，案例2、討論第一次案例教學(xué)

匯報，案例、討論實驗見習(xí)查閱資料、研讀、

發(fā)言準(zhǔn)備、撰寫綜述(圖書館等)

查閱資料、研讀、

發(fā)言準(zhǔn)備、撰寫綜述(圖書館等)

查閱資料、研讀、

發(fā)言準(zhǔn)備、撰寫綜述(圖書館等)22

22第二次案例教學(xué)

匯報，實驗設(shè)計交流

討論、評價查閱資料、研讀、第二次案例教學(xué)

匯報，實驗設(shè)計交流

討論、評價3發(fā)言準(zhǔn)備、撰寫綜述4確立和完善實驗設(shè)計、

觀看教學(xué)錄像8910各組實驗結(jié)果PPT

介紹和討論

研究結(jié)果模擬答辯

課程總結(jié)小鼠四診檢測訓(xùn)練實驗準(zhǔn)備、預(yù)實驗

繼續(xù)實驗準(zhǔn)備、預(yù)實驗

動物造模和用藥確立和完善實驗設(shè)計、

觀看教學(xué)錄像8910各組實驗結(jié)果PPT

介紹和討論

研究結(jié)果模擬答辯

課程總結(jié)小鼠四診檢測訓(xùn)練實驗準(zhǔn)備、預(yù)實驗

繼續(xù)實驗準(zhǔn)備、預(yù)實驗

動物造模和用藥四診檢測，處死動物、實驗展開

繼續(xù)實驗，準(zhǔn)備PPT

撰寫實驗報告，準(zhǔn)備答辯PPT47778合計2149四、考試和考核辦法課程成績由以下4個部分構(gòu)成：.PBL/案例教學(xué)評價占30%（其中，學(xué)生自我評價占30%、小組評價占30%、導(dǎo)師評價占40%）。.文獻綜述占20%。.研究報告占40%。.實驗研究態(tài)度和貢獻度占10%。五、大綱使用說明.本大綱供中醫(yī)基礎(chǔ)專業(yè)、七年制專業(yè)使用，亦適用于其它專業(yè)，包括研究生選修或輔修本課程的學(xué)生。.在教學(xué)過程中，任課教師可根據(jù)具體情況對大綱所規(guī)定的教學(xué)內(nèi)容和教學(xué)時數(shù)安排進行適當(dāng)調(diào)整，但不能影響課程的基本體系。六、主要參考書目.方肇勤主編.實驗中醫(yī)學(xué).第二版.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2008..方肇勤主編.中醫(yī)學(xué)綜合實驗.第一版.上海：上海中醫(yī)藥大學(xué)出版社,2004,第二次印刷..方肇勤主編.分子生物學(xué)技術(shù)在中醫(yī)藥研究中的應(yīng)用.第二版.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社,2008..賁長恩主編.醫(yī)學(xué)科研思路方法與程序.第一版.北京：人民衛(wèi)生出版社,2009..汪謙主編.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實驗方法.第一版.北京：人民衛(wèi)生出版社,1996..侯燦主編.醫(yī)學(xué)科學(xué)研究入門.第一版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1981..倪宗瓚.醫(yī)學(xué)統(tǒng)計學(xué).第二版.北京：人民衛(wèi)生出版社,1998.23.方喜業(yè).醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué).第一版.北京：人民衛(wèi)生出版社,1995..李儀奎.中藥藥理實驗方法學(xué).第一版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1990..史繼學(xué)，等.實用醫(yī)學(xué)論文寫作與技巧.第一版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社,1997.《分子生物學(xué)技術(shù)在中醫(yī)藥研究中的應(yīng)用》教學(xué)大綱方肇勤上海中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實驗中醫(yī)學(xué)教研室(2013/9/23)一、前言分子生物學(xué)實驗技術(shù)的發(fā)展日新月異，中醫(yī)藥的研發(fā)中已愈來愈廣泛地采用了分子生物學(xué)技術(shù)。然而，與國內(nèi)外西醫(yī)界相比，分子生物學(xué)技術(shù)在中醫(yī)藥研發(fā)中的應(yīng)用還存在很大的差距，突出表現(xiàn)在知識普及不夠、研發(fā)投入不足和技術(shù)使用不當(dāng)，該技術(shù)在中醫(yī)藥研發(fā)中能否用、為何用、如何用的問題還沒有得到根本的解決。為此，1996年，我們編寫了《分子生物學(xué)常用技術(shù)與方法》；2002年，我們編寫并正式出版了《分子生物學(xué)技術(shù)在中醫(yī)藥研究中的應(yīng)用》。鑒于近年來分子生物學(xué)技術(shù)又有了長足的發(fā)展，而中醫(yī)藥研發(fā)工作對該技術(shù)的需求日益增加，我們對原著進行了調(diào)整與充實。主要包括8個部分：.緒論。重點介紹分子生物學(xué)技術(shù)在中醫(yī)藥研發(fā)中應(yīng)用的現(xiàn)狀，深入淺出地介紹如何用和怎樣用，以及本著各章節(jié)的結(jié)構(gòu)與關(guān)系。.分子生物學(xué)常用基本技術(shù)。介紹重組質(zhì)粒、質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌、陽性單菌落擴增與小量DNA制備、酶切重組質(zhì)粒和電泳分離所插入的DNA、從凝膠中回收DNA、大量質(zhì)粒DNA制備、哺乳類動物細胞的培養(yǎng)、植物細胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)。.DNA的研究方法。介紹哺乳類動物基因組DNA的提取、植物基因組DNA的提取、基因組文庫的建立與篩選、Southernblot、PCR、DNA雙脫氧鏈終止法測序、動植物藥材的ISSR指紋圖譜技術(shù)、中藥RAPD指紋圖譜技術(shù)。.RNA的研究方法。介紹組織總RNA提取、mRNA的分離、Northernblot、RT-PCR、ABI熒光實時定量PCR、原位雜交、基因芯片、cDNAArray、DD-PCR、cDNA庫建立、基因全序列cDNA庫24篩選、RACE-PCRo.蛋白質(zhì)的研究方法。介紹哺乳類動物組織蛋白質(zhì)的提取、植物組織蛋白質(zhì)的提取、Westernblot、ELISA、免疫組織化學(xué)、單克隆抗體制備、蛋白質(zhì)雙向電泳。.基因功能與表達調(diào)控的研究方法。介紹RNAi、SmallRNA的提取與分析、報道基因與基因調(diào)控元件的檢測、點突變PCR、基因敲除技術(shù)、Footprint、凝膠阻滯分析、植物細胞的基因轉(zhuǎn)化。.分子生物學(xué)