細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件

超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)第十八章超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)第十八章1超敏反應(yīng)（hypersensitivity）

指機(jī)體對某些抗原進(jìn)行初次應(yīng)答后，再次接受相同抗原刺激時，出現(xiàn)以生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷的異常適應(yīng)性免疫應(yīng)答。超敏反應(yīng)亦稱變態(tài)反應(yīng)（allergy）/過敏反應(yīng)（anaphylaxis）超敏反應(yīng)（hypersensitivity）指機(jī)體2分類:I型超敏反應(yīng)/速發(fā)型超敏反應(yīng)Ⅱ型超敏反應(yīng)/細(xì)胞毒型或細(xì)胞溶解型超敏反應(yīng)Ⅲ型超敏反應(yīng)/免疫復(fù)合物型或血管炎型超敏反應(yīng)Ⅳ型超敏反應(yīng)/遲發(fā)型超敏反應(yīng)分類:I型超敏反應(yīng)/速發(fā)型超敏反應(yīng)Ⅱ型超敏反應(yīng)/細(xì)胞毒型3㈠致敏階段一、I型超敏反應(yīng)的發(fā)生過程和機(jī)制㈢效應(yīng)階段㈡激發(fā)階段第一節(jié)

I型超敏反應(yīng)(過敏反應(yīng)/速發(fā)型超敏反應(yīng))㈠致敏階段一、I型超敏反應(yīng)的發(fā)生過程和機(jī)制㈢效應(yīng)階段㈡4變應(yīng)原初次刺激特應(yīng)性個體產(chǎn)生特異性IgE與肥大細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞表面FcεRI結(jié)合與致敏肥大細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞表面IgE特異性結(jié)合再次接觸FcεRI交聯(lián)啟動并轉(zhuǎn)導(dǎo)信號，胞內(nèi)酶活化，Ca2＋內(nèi)流細(xì)胞活化，脫顆粒和分泌活性介質(zhì)變應(yīng)原初次刺激特應(yīng)性個體產(chǎn)生特異性IgE與肥大細(xì)胞和嗜堿粒與5組胺激肽原酶緩激肽平滑肌收縮，毛細(xì)血管擴(kuò)張、通透性增加，腺體分泌增加LTsPAFPGD2LTs：白三烯

PAF：血小板活化因子

PGD2：前列腺素D2預(yù)先儲備的介質(zhì)新合成的介質(zhì)組胺激肽原酶緩激肽平滑肌收縮，毛細(xì)血管擴(kuò)張6

全身性(過敏性休克)呼吸道(過敏性鼻炎、哮喘)消化道(過敏性胃腸炎)皮膚蕁麻疹平滑肌收縮，毛細(xì)血管擴(kuò)張、通透性增加，腺體分泌增加全身性呼吸道消化道皮膚平滑肌7細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件8二、I型超敏反應(yīng)的特點(diǎn)：反應(yīng)發(fā)生快、消退快；常引起生理功能紊亂，幾乎不發(fā)生嚴(yán)重組織細(xì)胞損傷；具有個體差異和遺傳背景；由IgE抗體介導(dǎo)；

無補(bǔ)體參與。二、I型超敏反應(yīng)的特點(diǎn)：反應(yīng)發(fā)生快、消退快；常引起生理功能9

花粉癥的發(fā)生機(jī)制花粉癥的發(fā)生機(jī)制10

皮膚過敏癥眼瞼水腫蕁麻疹皮膚過敏癥眼瞼水腫蕁麻疹11IgG或IgM類抗體與靶細(xì)胞表面相應(yīng)抗原結(jié)合，在補(bǔ)體、吞噬細(xì)胞和NK細(xì)胞參與作用下，引起以細(xì)胞溶解或組織損傷為主的病理性免疫反應(yīng)。第二節(jié)

Ⅱ型超敏反應(yīng)又稱細(xì)胞毒型或細(xì)胞溶解型超敏反應(yīng)IgG或IgM類抗體與靶細(xì)胞表面相應(yīng)抗原結(jié)合，在補(bǔ)體、吞噬細(xì)12細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件13細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件14

新生兒溶血癥新生兒溶血癥15

肺—腎綜合（Goodpasture綜合征）病毒(A2型流感病毒)、有機(jī)溶劑肺組織損傷吸入自身抗體腎小球損傷產(chǎn)生肺泡壁與腎小球基底膜為共同抗原交叉反應(yīng)肺—腎綜合（Goodpasture綜合征）病16

甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)（刺激型超敏反應(yīng)）長效甲狀腺刺激素(LATS)（longactingthyroidstimulator)自身抗體甲狀腺細(xì)胞表面的促甲狀腺激素受體結(jié)合甲狀腺激素分泌↑甲狀腺功能亢進(jìn)刺激甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)（刺激型超敏反應(yīng)）17第三節(jié)Ⅲ型超敏反應(yīng)又稱免疫復(fù)合物型或血管炎型超敏反應(yīng)

中等大小可溶性免疫復(fù)合物沉積于局部或全身毛細(xì)血管基底膜，通過激活補(bǔ)體并在血小板、嗜堿性/中性粒細(xì)胞參與下，引起以充血水腫、局部壞死和中性粒細(xì)胞浸潤為主要特征的炎癥反應(yīng)和組織損傷。

第三節(jié)Ⅲ型超敏反應(yīng)又稱免疫復(fù)合物型或血管炎型超敏反應(yīng)中18細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件19第四節(jié)IV型超敏反應(yīng)

效應(yīng)T細(xì)胞與相應(yīng)抗原作用，引起的以單個核細(xì)胞浸潤和組織細(xì)胞損傷為主要特征的炎癥反應(yīng)。由于免疫細(xì)胞激活、增殖、分化及炎癥細(xì)胞的聚集需較長時間,炎癥反應(yīng)發(fā)生較遲,持續(xù)時間較長,故稱為遲發(fā)型超敏反應(yīng)（delayedtypehypersensitivity,DTH）。又稱遲發(fā)型超敏反應(yīng)第四節(jié)IV型超敏反應(yīng)效應(yīng)T細(xì)胞與相應(yīng)抗原作用，引起的20主要由T細(xì)胞介導(dǎo)；無抗體和補(bǔ)體參與發(fā)生慢慢性炎癥損傷：以單個核細(xì)胞浸潤和組織細(xì)胞壞死為主要特征特點(diǎn)主要由T細(xì)胞介導(dǎo)；特點(diǎn)21細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件22細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件23細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件24第五節(jié)超敏反應(yīng)的免疫學(xué)檢測一、變應(yīng)原皮膚試驗(yàn)－－皮試主要用于檢測Ⅰ型和Ⅳ型超敏反應(yīng)過敏原的檢測。（一）原理：體內(nèi)試驗(yàn)第五節(jié)超敏反應(yīng)的免疫學(xué)檢測一、變應(yīng)原皮膚試驗(yàn)－－皮試25

（二）方法：（1）皮內(nèi)試驗(yàn)青霉素皮試（I型）：15～25min觀察有無風(fēng)團(tuán)（蕁麻疹）和紅暈結(jié)核菌素皮試（IV型）：48～72h觀察有無紅腫硬結(jié)。（2）挑刺試驗(yàn)（I型）：（3）斑貼試驗(yàn)（IV型）：尋找接觸性皮炎過敏原。（二）方法：26Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型超敏反應(yīng)皮膚實(shí)驗(yàn)

1：15分鐘出現(xiàn)1cm的界限清晰的風(fēng)團(tuán)2：5-12小時出現(xiàn)超過5cm的紅腫、出血、壞死3：24-48小時出現(xiàn)的1cm的紅腫、硬結(jié)（三）結(jié)果判定及分析Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型超敏反應(yīng)皮膚實(shí)驗(yàn)（三）結(jié)果判定及分析27

超敏反應(yīng)防治—皮試超敏反應(yīng)防治—皮試28Ⅰ型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)：20-30min內(nèi)觀察Ⅰ型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)：20-30min內(nèi)觀察29ⅠV型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)：48-72h內(nèi)觀察ⅠV型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)：48-72h內(nèi)觀察30

假陽性常見原因：①試驗(yàn)溶液配制不當(dāng)，過酸或過堿都會對皮膚產(chǎn)生非特異性刺激；②被試者皮膚反應(yīng)過強(qiáng)；③變質(zhì)或不純。假陽性常見原因：①試驗(yàn)抗原濃度過低，或因各種原因失效；②被試者皮膚反應(yīng)較低；③患者近期內(nèi)使用過大量抗組胺類藥物或正使用免疫抑制劑等藥物。假陽性常見原因：31（四）應(yīng)用與評價尋找變應(yīng)原預(yù)防藥物或疫苗過敏評價機(jī)體細(xì)胞免疫功能狀態(tài)傳染病的診斷（四）應(yīng)用與評價尋找變應(yīng)原32血清IgE檢測：I型超敏反應(yīng)抗血細(xì)胞抗體的檢測：II型超敏反應(yīng)循環(huán)免疫復(fù)合物的檢測：III型超敏反應(yīng)嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)：I型超敏反應(yīng)時可增多某些疾病時可增多血清IgE檢測：I型超敏反應(yīng)33二、血清IgE檢測（一）血清總IgE的測定1、放射免疫吸附試驗(yàn)2、酶聯(lián)免疫測定法3、化學(xué)發(fā)光法（二）特異性IgE的測定1、放射變應(yīng)原吸附試驗(yàn)2、酶聯(lián)免疫測定法3、CAP變應(yīng)原檢測系統(tǒng)二、血清IgE檢測（一）血清總IgE的測定34三、免疫復(fù)合物的檢測﹡immunecomplex，IC：即抗原抗體復(fù)合物﹡分類：

?局部免疫復(fù)合物：

?可溶性免疫復(fù)合物：

?循環(huán)免疫復(fù)合物(circulatingimmunecomplex，CIC)：主要指血液中免疫復(fù)合物。三、免疫復(fù)合物的檢測﹡immunecomplex，IC：即35

根據(jù)形成免疫復(fù)合物Ag-Ab是已知或未知的，將CIC分為兩大類：

?特異性免疫復(fù)合物:如乙型肝炎的HBsAg-抗-HBs，甲狀腺球蛋白抗原-抗甲狀腺球蛋白抗體形成的免疫復(fù)合物；

?非特異性免疫復(fù)合物:如腎小球腎炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等。

根據(jù)形成免疫復(fù)合物Ag-Ab是已知或未知的，將CI36（一）抗原非特異性CIC的檢測﹡非抗原特異性循環(huán)免疫復(fù)合物的檢測不考慮免疫復(fù)合物中抗原性質(zhì)，只檢測免疫復(fù)合物的總量。﹡檢測非抗原特異CIC的方法應(yīng)用較多，建立的檢測方法也比較多，根據(jù)檢測原理不同，將其檢測技術(shù)大致歸納為物理學(xué)測定法、補(bǔ)體相關(guān)測定法、抗球蛋白測定法和細(xì)胞技術(shù)測定法等。（一）抗原非特異性CIC的檢測37細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件381、物理學(xué)測定法（1）分子大小特性：超速離心、分子超濾、凝膠過濾等（2）聚乙二醇（PEG）沉淀法：原理：PEG是一種無電荷的線形分子結(jié)構(gòu)的多糖，為乙二醇的聚合物，有較強(qiáng)脫水作用，利用2%~4%濃度的PEG6000可以選擇性地將大分子免疫復(fù)合物沉淀下來，將此沉淀定量溶解，測其A值。CIC相對分子質(zhì)量較大，相互結(jié)合的抗原抗體的構(gòu)象發(fā)生改變，易被低濃度PEG自液相析出。PEG還可抑制CIC解離，促進(jìn)CIC進(jìn)一步聚合成更大的凝聚物而被沉淀。利用透射比濁或散射比濁法可測出CIC的存在與含量。方法：按試劑盒說明書操作。1、物理學(xué)測定法391、物理學(xué)測定法（2）聚乙二醇（PEG）沉淀法：注意事項(xiàng)：1）PEG濃度超過5%，可使IgM等其他血清蛋白質(zhì)同時沉淀，導(dǎo)致假陽性結(jié)果2）如需定量測定，可用熱變性IgG制備標(biāo)準(zhǔn)曲線3）溫度：4℃最佳。4）空腹采血：低密度脂蛋白可引起濁度增加。5）自行制定正常值：6）高γ球蛋白血癥以及血清標(biāo)本反復(fù)凍融，均易造成假陽性7）此法快速、簡便，但特異性較差，僅適于篩查。1、物理學(xué)測定法402、補(bǔ)體相關(guān)測定法：C1q結(jié)合試驗(yàn)：原理：待檢血清加入包被有C1q的微量反應(yīng)板，免疫復(fù)合物和C1q結(jié)合，再與酶標(biāo)記抗抗體反應(yīng)，在固相上反應(yīng)生成Clq-CIC-酶標(biāo)記抗人IgG復(fù)合物，通過底物顏色的深淺判斷免疫復(fù)合物的存在及數(shù)量。方法：注意事項(xiàng)：1）C1q制品不易精制且純品不穩(wěn)定，所以測定結(jié)果的穩(wěn)定性較差2）SLE患者血清中抗C1q抗體能產(chǎn)生假陽性3）此法靈敏度優(yōu)于PEG沉淀比濁法，可達(dá)0.1μg/ml熱聚合IgG。2、補(bǔ)體相關(guān)測定法：41抗補(bǔ)體試驗(yàn)原理類似補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。膠固素結(jié)合試驗(yàn)?zāi)z固素是牛血清中的一種正常蛋白，能與C3d特異性結(jié)合?？寡a(bǔ)體試驗(yàn)423、抗球蛋白測定法mRF凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)：原理：mRF具有與變性IgG和免疫復(fù)合物中IgG結(jié)合而不與游離的IgG結(jié)合的特性，其中mRF與免疫復(fù)合物的親和力更強(qiáng)。該方法是將mRF和免疫復(fù)合物在瓊脂糖凝膠中擴(kuò)散，結(jié)合形成沉淀，進(jìn)行定性或定量測定。3、抗球蛋白測定法434、細(xì)胞技術(shù)測定法：Raji細(xì)胞試驗(yàn)原理：Raji細(xì)胞是有Burkitt淋巴瘤患者分離建立的B細(xì)胞株，其表面有大量C3b、C1q和C3d受體，無SmIg，利用這些受體與結(jié)合補(bǔ)體的CIC結(jié)合，加入放射性核素標(biāo)記的抗人IgG，反應(yīng)層次為Raji細(xì)胞-CIC-放射性核素標(biāo)記抗人IgG復(fù)合物。評價：敏感性高、特異性強(qiáng)、實(shí)用性強(qiáng)；

Raji細(xì)胞培養(yǎng)較困難；有時需封閉，操作繁瑣。4、細(xì)胞技術(shù)測定法：Raji細(xì)胞試驗(yàn)44（二）抗原特異性CIC檢測技術(shù)：主要檢測抗原抗體復(fù)合物的性質(zhì)。?單特異性循環(huán)免疫復(fù)合物的檢測方法：

胰蛋白酶解離法：檢測HBsAg-CIC，PEG沉淀免疫復(fù)合物胰蛋白酶消化沉淀物中的抗體蛋白游離出抗原部分用反向間接血凝試驗(yàn)檢測HBsAg滴度?雙特異性循環(huán)免疫復(fù)合物的檢測方法：

捕獲法ELISA：檢測腎綜合征出血熱Ag/IgE和Ag/IgD-CIC，抗原抗體雙特異性循環(huán)免疫復(fù)合物是同一抗原與Ig類型，如IgD或IgE抗體形成免疫復(fù)合物。

另外可用包被抗C3抗體法。（二）抗原特異性CIC檢測技術(shù)：45（三）CIC檢測方法評價及應(yīng)用﹡主要存在的問題：①目前尚無一種對所有種類的循環(huán)免疫復(fù)合物均能有效檢測的方法；②不同方法檢測循環(huán)免疫復(fù)合物原理各異，檢測結(jié)果有時不相關(guān)；③大多數(shù)方法易受非特異性原因造成的Ig聚合物或非免疫因素抵抗補(bǔ)體活性等各種因素的干擾；④目前尚無理想的標(biāo)準(zhǔn)化措施，大多以HAHG為標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。﹡臨床應(yīng)用：自身免疫性疾病、腎臟疾病、肝臟疾病、皮膚疾病、腫瘤等其它疾病的診斷。（三）CIC檢測方法評價及應(yīng)用46CIC的消長一般可反映病情的嚴(yán)重性和監(jiān)測治療效果。但一次測定意義不大，世界衛(wèi)生組織(WHO)建議，首次檢測后數(shù)周必須復(fù)測才能證實(shí)其與疾病的相關(guān)性。ELISA(CIq結(jié)合法)所測CIC陽性率在系統(tǒng)性紅斑狼瘡為75%~80%；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎為80%~85%；血管炎為73%~78%。

PEG沉淀比濁法與ELISA類似但檢出率稍低，兩法結(jié)果不一定完全一致。CIC的消長一般可反映病情的嚴(yán)重性和監(jiān)測治療效果。但一次測47

超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)第十八章超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)第十八章48超敏反應(yīng)（hypersensitivity）

指機(jī)體對某些抗原進(jìn)行初次應(yīng)答后，再次接受相同抗原刺激時，出現(xiàn)以生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷的異常適應(yīng)性免疫應(yīng)答。超敏反應(yīng)亦稱變態(tài)反應(yīng)（allergy）/過敏反應(yīng)（anaphylaxis）超敏反應(yīng)（hypersensitivity）指機(jī)體49分類:I型超敏反應(yīng)/速發(fā)型超敏反應(yīng)Ⅱ型超敏反應(yīng)/細(xì)胞毒型或細(xì)胞溶解型超敏反應(yīng)Ⅲ型超敏反應(yīng)/免疫復(fù)合物型或血管炎型超敏反應(yīng)Ⅳ型超敏反應(yīng)/遲發(fā)型超敏反應(yīng)分類:I型超敏反應(yīng)/速發(fā)型超敏反應(yīng)Ⅱ型超敏反應(yīng)/細(xì)胞毒型50㈠致敏階段一、I型超敏反應(yīng)的發(fā)生過程和機(jī)制㈢效應(yīng)階段㈡激發(fā)階段第一節(jié)

I型超敏反應(yīng)(過敏反應(yīng)/速發(fā)型超敏反應(yīng))㈠致敏階段一、I型超敏反應(yīng)的發(fā)生過程和機(jī)制㈢效應(yīng)階段㈡51變應(yīng)原初次刺激特應(yīng)性個體產(chǎn)生特異性IgE與肥大細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞表面FcεRI結(jié)合與致敏肥大細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞表面IgE特異性結(jié)合再次接觸FcεRI交聯(lián)啟動并轉(zhuǎn)導(dǎo)信號，胞內(nèi)酶活化，Ca2＋內(nèi)流細(xì)胞活化，脫顆粒和分泌活性介質(zhì)變應(yīng)原初次刺激特應(yīng)性個體產(chǎn)生特異性IgE與肥大細(xì)胞和嗜堿粒與52組胺激肽原酶緩激肽平滑肌收縮，毛細(xì)血管擴(kuò)張、通透性增加，腺體分泌增加LTsPAFPGD2LTs：白三烯

PAF：血小板活化因子

PGD2：前列腺素D2預(yù)先儲備的介質(zhì)新合成的介質(zhì)組胺激肽原酶緩激肽平滑肌收縮，毛細(xì)血管擴(kuò)張53

全身性(過敏性休克)呼吸道(過敏性鼻炎、哮喘)消化道(過敏性胃腸炎)皮膚蕁麻疹平滑肌收縮，毛細(xì)血管擴(kuò)張、通透性增加，腺體分泌增加全身性呼吸道消化道皮膚平滑肌54細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件55二、I型超敏反應(yīng)的特點(diǎn)：反應(yīng)發(fā)生快、消退快；常引起生理功能紊亂，幾乎不發(fā)生嚴(yán)重組織細(xì)胞損傷；具有個體差異和遺傳背景；由IgE抗體介導(dǎo)；

無補(bǔ)體參與。二、I型超敏反應(yīng)的特點(diǎn)：反應(yīng)發(fā)生快、消退快；常引起生理功能56

花粉癥的發(fā)生機(jī)制花粉癥的發(fā)生機(jī)制57

皮膚過敏癥眼瞼水腫蕁麻疹皮膚過敏癥眼瞼水腫蕁麻疹58IgG或IgM類抗體與靶細(xì)胞表面相應(yīng)抗原結(jié)合，在補(bǔ)體、吞噬細(xì)胞和NK細(xì)胞參與作用下，引起以細(xì)胞溶解或組織損傷為主的病理性免疫反應(yīng)。第二節(jié)

Ⅱ型超敏反應(yīng)又稱細(xì)胞毒型或細(xì)胞溶解型超敏反應(yīng)IgG或IgM類抗體與靶細(xì)胞表面相應(yīng)抗原結(jié)合，在補(bǔ)體、吞噬細(xì)59細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件60細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件61

新生兒溶血癥新生兒溶血癥62

肺—腎綜合（Goodpasture綜合征）病毒(A2型流感病毒)、有機(jī)溶劑肺組織損傷吸入自身抗體腎小球損傷產(chǎn)生肺泡壁與腎小球基底膜為共同抗原交叉反應(yīng)肺—腎綜合（Goodpasture綜合征）病63

甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)（刺激型超敏反應(yīng)）長效甲狀腺刺激素(LATS)（longactingthyroidstimulator)自身抗體甲狀腺細(xì)胞表面的促甲狀腺激素受體結(jié)合甲狀腺激素分泌↑甲狀腺功能亢進(jìn)刺激甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)（刺激型超敏反應(yīng)）64第三節(jié)Ⅲ型超敏反應(yīng)又稱免疫復(fù)合物型或血管炎型超敏反應(yīng)

中等大小可溶性免疫復(fù)合物沉積于局部或全身毛細(xì)血管基底膜，通過激活補(bǔ)體并在血小板、嗜堿性/中性粒細(xì)胞參與下，引起以充血水腫、局部壞死和中性粒細(xì)胞浸潤為主要特征的炎癥反應(yīng)和組織損傷。

第三節(jié)Ⅲ型超敏反應(yīng)又稱免疫復(fù)合物型或血管炎型超敏反應(yīng)中65細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件66第四節(jié)IV型超敏反應(yīng)

效應(yīng)T細(xì)胞與相應(yīng)抗原作用，引起的以單個核細(xì)胞浸潤和組織細(xì)胞損傷為主要特征的炎癥反應(yīng)。由于免疫細(xì)胞激活、增殖、分化及炎癥細(xì)胞的聚集需較長時間,炎癥反應(yīng)發(fā)生較遲,持續(xù)時間較長,故稱為遲發(fā)型超敏反應(yīng)（delayedtypehypersensitivity,DTH）。又稱遲發(fā)型超敏反應(yīng)第四節(jié)IV型超敏反應(yīng)效應(yīng)T細(xì)胞與相應(yīng)抗原作用，引起的67主要由T細(xì)胞介導(dǎo)；無抗體和補(bǔ)體參與發(fā)生慢慢性炎癥損傷：以單個核細(xì)胞浸潤和組織細(xì)胞壞死為主要特征特點(diǎn)主要由T細(xì)胞介導(dǎo)；特點(diǎn)68細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件69細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件70細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件71第五節(jié)超敏反應(yīng)的免疫學(xué)檢測一、變應(yīng)原皮膚試驗(yàn)－－皮試主要用于檢測Ⅰ型和Ⅳ型超敏反應(yīng)過敏原的檢測。（一）原理：體內(nèi)試驗(yàn)第五節(jié)超敏反應(yīng)的免疫學(xué)檢測一、變應(yīng)原皮膚試驗(yàn)－－皮試72

（二）方法：（1）皮內(nèi)試驗(yàn)青霉素皮試（I型）：15～25min觀察有無風(fēng)團(tuán)（蕁麻疹）和紅暈結(jié)核菌素皮試（IV型）：48～72h觀察有無紅腫硬結(jié)。（2）挑刺試驗(yàn)（I型）：（3）斑貼試驗(yàn)（IV型）：尋找接觸性皮炎過敏原。（二）方法：73Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型超敏反應(yīng)皮膚實(shí)驗(yàn)

1：15分鐘出現(xiàn)1cm的界限清晰的風(fēng)團(tuán)2：5-12小時出現(xiàn)超過5cm的紅腫、出血、壞死3：24-48小時出現(xiàn)的1cm的紅腫、硬結(jié)（三）結(jié)果判定及分析Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型超敏反應(yīng)皮膚實(shí)驗(yàn)（三）結(jié)果判定及分析74

超敏反應(yīng)防治—皮試超敏反應(yīng)防治—皮試75Ⅰ型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)：20-30min內(nèi)觀察Ⅰ型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)：20-30min內(nèi)觀察76ⅠV型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)：48-72h內(nèi)觀察ⅠV型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)：48-72h內(nèi)觀察77

假陽性常見原因：①試驗(yàn)溶液配制不當(dāng)，過酸或過堿都會對皮膚產(chǎn)生非特異性刺激；②被試者皮膚反應(yīng)過強(qiáng)；③變質(zhì)或不純。假陽性常見原因：①試驗(yàn)抗原濃度過低，或因各種原因失效；②被試者皮膚反應(yīng)較低；③患者近期內(nèi)使用過大量抗組胺類藥物或正使用免疫抑制劑等藥物。假陽性常見原因：78（四）應(yīng)用與評價尋找變應(yīng)原預(yù)防藥物或疫苗過敏評價機(jī)體細(xì)胞免疫功能狀態(tài)傳染病的診斷（四）應(yīng)用與評價尋找變應(yīng)原79血清IgE檢測：I型超敏反應(yīng)抗血細(xì)胞抗體的檢測：II型超敏反應(yīng)循環(huán)免疫復(fù)合物的檢測：III型超敏反應(yīng)嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)：I型超敏反應(yīng)時可增多某些疾病時可增多血清IgE檢測：I型超敏反應(yīng)80二、血清IgE檢測（一）血清總IgE的測定1、放射免疫吸附試驗(yàn)2、酶聯(lián)免疫測定法3、化學(xué)發(fā)光法（二）特異性IgE的測定1、放射變應(yīng)原吸附試驗(yàn)2、酶聯(lián)免疫測定法3、CAP變應(yīng)原檢測系統(tǒng)二、血清IgE檢測（一）血清總IgE的測定81三、免疫復(fù)合物的檢測﹡immunecomplex，IC：即抗原抗體復(fù)合物﹡分類：

?局部免疫復(fù)合物：

?可溶性免疫復(fù)合物：

?循環(huán)免疫復(fù)合物(circulatingimmunecomplex，CIC)：主要指血液中免疫復(fù)合物。三、免疫復(fù)合物的檢測﹡immunecomplex，IC：即82

根據(jù)形成免疫復(fù)合物Ag-Ab是已知或未知的，將CIC分為兩大類：

?特異性免疫復(fù)合物:如乙型肝炎的HBsAg-抗-HBs，甲狀腺球蛋白抗原-抗甲狀腺球蛋白抗體形成的免疫復(fù)合物；

?非特異性免疫復(fù)合物:如腎小球腎炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等。

根據(jù)形成免疫復(fù)合物Ag-Ab是已知或未知的，將CI83（一）抗原非特異性CIC的檢測﹡非抗原特異性循環(huán)免疫復(fù)合物的檢測不考慮免疫復(fù)合物中抗原性質(zhì)，只檢測免疫復(fù)合物的總量。﹡檢測非抗原特異CIC的方法應(yīng)用較多，建立的檢測方法也比較多，根據(jù)檢測原理不同，將其檢測技術(shù)大致歸納為物理學(xué)測定法、補(bǔ)體相關(guān)測定法、抗球蛋白測定法和細(xì)胞技術(shù)測定法等。（一）抗原非特異性CIC的檢測84細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)-18-超敏反應(yīng)及其檢驗(yàn)課件851、物理學(xué)測定法（1）分子大小特性：超速離心、分子超濾、凝膠過濾等（2）聚乙二醇（PEG）沉淀法：原理：PEG是一種無電荷的線形分子結(jié)構(gòu)的多糖，為乙二醇的聚合物，有較強(qiáng)脫水作用，利用2%~4%濃度的PEG6000可以選擇性地將大分子免疫復(fù)合物沉淀下來，將此沉淀定量溶解，測其A值。CIC相對分子質(zhì)量較大，相互結(jié)合的抗原抗體的構(gòu)象發(fā)生改變，易被低濃度PEG自液相析出。PEG還可抑制CIC解離，促進(jìn)CIC進(jìn)一步聚合成更大的凝聚物而被沉淀。利用透射比濁或散射比濁法可測出CIC的存在與含量。方法：按試劑盒說明書操作。1、物理學(xué)測定法861、物理學(xué)測定法（2）聚乙二醇（PEG）沉淀法：注意事項(xiàng)：1）PEG濃度超過5%，可使IgM等其他血清蛋白質(zhì)同時沉淀，導(dǎo)致假陽性結(jié)果2）如需定量測定，可用熱變性IgG制備標(biāo)準(zhǔn)曲線3）溫度：4℃最佳。4）空腹采血：低密度脂蛋白可引起濁度增加。5）自行制定正常值：6）高γ球蛋白血癥以及血清標(biāo)本反復(fù)凍融，均易造成假陽性7）此法快速、簡便，但特異性較差，僅適于篩查。1、物理學(xué)測定法872、補(bǔ)體相關(guān)測定法：C1q結(jié)合試驗(yàn)：原理：待檢血清加入包被有C1q的微量反應(yīng)板，免疫復(fù)合物和C1q結(jié)合，再與酶標(biāo)記抗抗體反應(yīng)，在固相上反應(yīng)生成Clq-CIC-酶標(biāo)記抗人IgG復(fù)合物，通過底物顏色的深淺判斷免疫復(fù)合物的存在及數(shù)量。方法：注意事項(xiàng)：1）C1q制品不易精制且純品不穩(wěn)定，所以測定結(jié)果的穩(wěn)定性較差2）SLE患者血清中抗C1q抗體能產(chǎn)生假陽性3）此法靈敏度優(yōu)于PEG沉淀比濁法，可達(dá)0.1μg/ml熱聚合IgG。2、補(bǔ)體相關(guān)測定法：88抗補(bǔ)體試驗(yàn)原理類似補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。膠固素結(jié)合試驗(yàn)?zāi)z固素是牛血清中的一種正常蛋白，能與C3d特異性結(jié)合。抗補(bǔ)體試驗(yàn)893、抗球蛋白測定法mRF凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)：原理：mRF具有與變性I