實驗三 經(jīng)口急性毒性實驗課件

院系：生化環(huán)院任課老師：吳雨龍任課班級：09食品、行09食品食品專業(yè)食品毒理學(xué)實驗

將外源化合物經(jīng)口染毒求出LD50是毒理學(xué)研究中重要的基本技術(shù)和基礎(chǔ)工作之一。通過試驗，學(xué)習(xí)外源化合物急性毒性試驗設(shè)計原則，掌握大、小鼠經(jīng)口灌胃技術(shù)和求算LD50的方法。急性毒性試驗的原理是動物一次或24h內(nèi)多次接觸外源化合物后，觀察急性毒性反應(yīng)及其程度，中毒死亡的原因及特征，了解受試動物毒性反應(yīng)的劑量-反應(yīng)關(guān)系，求出LD50。

實驗三經(jīng)口急性毒性實驗實驗?zāi)康?.1.實驗動物：實驗材料2.體重18-22g小鼠。實驗器材：灌胃針、注射器5套、容量瓶、小燒杯、移液管、飼養(yǎng)籠等。實驗試劑：HgCl2粉末、苦味酸酒精飽和液和中性紅染色液。3.實驗步驟2.灌胃液濃度和容量：相同劑量的受試化學(xué)物，若給以不同濃度可能會產(chǎn)生不同的死亡情況，已如前述。灌服體積大小亦可影響試驗結(jié)果，體積太小、太濃，可能產(chǎn)生局部刺激或其他損傷；體積太大，可能引起胃部機(jī)械性損傷，影響正常生理功能。經(jīng)口急性毒性試驗中，常常是固定受試化學(xué)物體積，根據(jù)試驗設(shè)計的劑量用1：K系列稀釋法將受試化學(xué)物配制成不同濃度的液體劑型灌胃。其灌胃體積以體重的1%-2%計算，最多不超過3%，即小鼠每10g體重灌胃0.1-0.2ml，最多不超過0.3ml。3.灌胃方法：以左手固定小鼠后，使其腹部朝上，頸部伸直。右手持配有灌胃針頭的注射器，自口角插入口腔，在用灌胃器壓向后方使動物口腔和食管成直線的同時，使灌胃器沿上顎滑入食道。如方法正確，應(yīng)無明顯障礙。若遇較大阻力或動物劇烈掙扎，必須退出重插，不得用蠻力強(qiáng)行插入灌胃器。否則會刺破食道或氣管，造成動物立即死亡。立即死亡的，要另補(bǔ)充動物。灌胃針插入深度，一般小鼠3-4cm，大鼠、豚鼠4-6cm。3.實驗步驟3.實驗步驟4.中毒癥狀：染毒后認(rèn)真觀察中毒發(fā)生、發(fā)展過程，中毒特點和毒作用靶器官。觀察期間每3d，稱重一次，對死亡動物和實驗結(jié)束時的存活動物全部稱重，作大體病理學(xué)檢查，取病變組織做病理組織學(xué)檢查，為亞慢性、慢性和其他毒性試驗劑量和觀察指標(biāo)選擇提供參考依據(jù)，并按表3-1做好記錄。表3-1急性毒性試驗觀察記錄表組別動物編號性別體重

（g）染毒劑量

（mg/kg）染毒時間癥狀及出現(xiàn)時間死亡時間體重記錄

4.實驗結(jié)果根據(jù)實驗動物的中毒癥狀、死亡時間、LD50及急性毒性實驗作用特點，按