甲硝唑栓微生物限度檢查方法驗證課件

甲硝唑栓微生物限度檢查方法驗證薄膜過濾法甲硝唑栓介紹規(guī)格： 0.5g劑型： 栓劑批準(zhǔn)日期： 2010-5-21批準(zhǔn)文號： 國藥準(zhǔn)字H20058324藥品類型： 化學(xué)藥品英文名稱： Metronidazole+Suppositories甲硝唑栓介紹化學(xué)名稱：2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇化學(xué)成分：甲硝唑藥品類別：抗阿米巴病藥及抗滴蟲病藥適應(yīng)癥：本品用于治療陰道毛滴蟲病。性狀：本品為乳白色至淡黃色魚雷形栓劑。貯藏：遮光，密閉，在30℃以下陰涼處存放。2022/12/28陰道、尿道給藥制劑

細(xì)菌數(shù)每1g、1ml或10cm2不得過100cfu。霉菌和酵母菌數(shù)每1g、1ml或10cm2應(yīng)小于10cfu。金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、梭菌、白色念珠菌每1g、1ml或10cm2不得檢出。培養(yǎng)基pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基菌液制備(1)接種金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物至10ml營養(yǎng)肉湯中，35～37℃培養(yǎng)18～24小時，取此培養(yǎng)液1ml加0.9％無菌氯化鈉溶液9ml，采用10倍遞增稀釋法，稀釋至10-5～10-7，使菌數(shù)約為50～100cfu/ml菌液制備(2)接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至10ml改良馬丁培養(yǎng)基中，23～28℃培養(yǎng)18～24小時，取此培養(yǎng)液1ml加0.9％無菌氯化鈉溶液9ml，采用10倍遞增稀釋法，稀釋至10-5～10-7，使菌數(shù)約為50～100cfu/ml。供試液的制備取樣品10g,加至含無菌十四烷酸異丙酯20mL和無菌玻璃珠的適宜容器內(nèi),置45℃水浴保溫，充分振蕩使溶解，加入預(yù)熱45℃的pH7.0無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液至100mL,萃取5~10min，靜置，取水層作為1:10的供試品.取1：10供試液10mL，置無菌條件下500轉(zhuǎn)/min離心3min,留上清液菌液組50~100cfu/ml的菌液1ml過濾取濾膜菌面向上貼于凝固的培養(yǎng)基上（30~35℃72h)供試品對照組：上清液1ml加至100ml稀釋液過濾沖洗2次(每次100ml)菌面向上貼于凝固的培養(yǎng)基上（30~35℃72h)平均回收率結(jié)果結(jié)果判定

從表1可以看出，5株試驗菌的試驗組菌回收率與稀釋劑對照組的菌回收率均＞70%，因此，可采用該法測定樣品的細(xì)菌真菌及酵母菌數(shù)?？刂凭鷻z查方法的驗證

驗證試驗用菌種：a.梭菌b.金黃色葡萄球菌c.白色念珠菌d.銅綠假單胞菌菌液制備接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至10ml改良馬丁培養(yǎng)基中，23～28℃培養(yǎng)18～24小時，取此培養(yǎng)液1ml加0.9％無菌氯化鈉溶液9ml，采用10倍遞增稀釋法，稀釋至10-5～10-7，使菌數(shù)約為50～100cfu/ml。驗證方法試驗組：上清液1ml

加至100ml稀釋液中混勻過濾沖洗2次1ml菌液（白念）取濾膜于沙氏葡萄糖肉湯培養(yǎng)基中30～35℃培養(yǎng)18～24h。過濾過濾結(jié)果低速離心-薄膜過濾法,真菌及酵母菌計數(shù)采用薄膜過濾法,控制菌檢查采用薄膜過濾法與低速離心-薄膜過濾法.結(jié)果細(xì)菌、真菌及酵母菌的回收率均＞70.0