生物化學(xué)第3章-氨基酸分析課件

生物化學(xué)第三章氨基酸(aminoacid)生物化學(xué)一、氨基酸——蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子氨基酸(aminoacid)：α-氨基酸是一切蛋白質(zhì)的組成單位。氨基酸是與羧酸相鄰α-碳原子上連有一個氨基，故稱α-氨基酸。利用酸水解、堿水解、酶解可把蛋白質(zhì)分子水解釋放氨基酸。L型α-氨基酸不變部分（除脯氨酸）可變部分180多種天然氨基酸；20種蛋白質(zhì)氨基酸

氨基酸首尾脫水聚合成肽鍵。一、氨基酸——蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子氨基酸(aminoacid)各種氨基酸的區(qū)別在于側(cè)鏈R基的不同20種蛋白質(zhì)氨基酸按R的極性可分為非極性氨基酸、不帶電荷極性氨基酸、帶正電R基氨基酸和帶負(fù)電R基氨基酸按R基的結(jié)構(gòu)可分為脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸及雜環(huán)氨基酸3大類除甘氨酸外，氨基酸均含有一個手性-碳原子，因此都具有旋光性。氨基酸的名稱常用三個字母的縮寫，或單個字母表示長的肽鏈。二、氨基酸的分類、性質(zhì)各種氨基酸的區(qū)別在于側(cè)鏈R基的不同二、氨基酸的分類、性質(zhì)氨基酸脂肪族氨基酸芳香族氨基酸雜環(huán)氨基酸一氨基一羧基（中性氨基酸）Gly、Ala、Val、Lue、Ile、Ser、Thr、Cys、Met一氨基二羧基（酸性氨基酸）及其酰胺Asp、Asn、Glu、Gln二氨基一羧基（堿性氨基酸）Arg、LysPhe、Tyr、TrpHis、Pro2.1氨基酸的分類——按照R化學(xué)結(jié)構(gòu)分類氨基酸脂肪族芳香族氨基酸雜環(huán)氨基酸一氨基一羧基（中性氨基酸）甘氨酸丙氨酸纈氨酸亮氨酸異亮氨酸脂肪族氨基酸：一氨基一羧基（中性氨基酸）甘氨酸丙氨酸纈氨酸亮氨酸脂肪族氨基酸：一氨基一羧基（中性氨基酸）:含有羥基絲氨酸Ser的-OH在生理條件下不解離，但是個極性基團，能與其他基團形成氫鍵，常出現(xiàn)在酶的活性中心；蘇氨酸Thr的-OH是仲醇，具有親水性；脂肪族氨基酸：一氨基一羧基（中性氨基酸）:含有羥基絲氨酸Se脂肪族氨基酸：一氨基一羧基（中性氨基酸）:含有硫Methionine(Met，M)Cysteine(Cys，C)兩個半胱氨酸的巰基氧化生成二硫鍵，生成胱氨酸，Cys-S-S-Cys

蛋氨酸的甲硫基的硫原子有親核性，容易發(fā)生極化，在生物合成中是重要的甲基供體脂肪族氨基酸：一氨基一羧基（中性氨基酸）:含有硫Methio脂肪族氨基酸：一氨基二羧基（酸性氨基酸）天冬氨酸谷氨酸天冬酰胺谷氨酰胺脂肪族氨基酸：一氨基二羧基（酸性氨基酸）天冬氨酸脂肪族氨基酸：二氨基一羧基（堿性氨基酸）賴氨酸Lys側(cè)鏈氨基生理條件下帶有一個正電荷精氨酸Arg是堿性最強的氨基酸，側(cè)鏈的胍基pKa=12.48，生理條件下完全質(zhì)子化組氨酸His含有咪唑環(huán)，是20種氨基酸中側(cè)鏈pK值最接近pH的一種，生理pH條件下具有緩沖能力的一種氨基酸。脂肪族氨基酸：二氨基一羧基（堿性氨基酸）賴氨酸Lys側(cè)鏈氨基芳香族氨基酸苯丙氨酸酪氨酸色氨酸這三種氨基酸在紫外280nm具有特殊吸收峰，蛋白質(zhì)的紫外吸收主要來自這三種氨基酸苯丙氨酸疏水性最強酪氨酸的-OH發(fā)生磷酸化在生物體內(nèi)是十分普遍的調(diào)控機制芳香族氨基酸苯丙氨酸酪氨酸色氨酸這三雜環(huán)氨基酸脯氨酸組氨酸組氨酸是堿性氨基酸的一種脯氨酸的α-亞氨基是環(huán)的一部分，因此具有特殊的剛性結(jié)構(gòu)，在蛋白質(zhì)中一般出現(xiàn)在α-螺旋轉(zhuǎn)角處。Pro殘基出現(xiàn)的位置必然發(fā)生蛋白估計方向的改變。雜環(huán)氨基酸脯氨酸組氨酸組氨酸是堿性氨基酸的一種2.2氨基酸的分類——按照R基極性分類疏水性氨基酸親水性氨基酸1.非極性氨基酸：8種Ala,Val,Leu,Ile脂肪族側(cè)鏈Pro亞氨基雜環(huán)Phe，Trp芳香環(huán)Met含硫2.不帶電荷的極性氨基酸：7種Ser,Thr,Tyr羥基-OHGln,Asn酰胺基Cys巰基Gly極性/非極性3.帶正電荷的氨基酸：3種Lysε-位氨基Arg胍基His咪唑基4.帶負(fù)電荷的氨基酸：2種Glu兩個羧基Asp2.2氨基酸的分類——按照R基極性分類疏水性氨基酸1.非極非極性氨基酸在維持蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)中其重要作用（蛋白質(zhì)的疏水中心）極性氨基酸側(cè)鏈能與水形成氫鍵，易溶于水帶電荷和極性氨基酸一般位于蛋白表面蛋白的活性中心：His，Ser，Cys非極性氨基酸在維持蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)中其重要作用（蛋白質(zhì)的疏水2.3氨基酸的分類——不常見蛋白質(zhì)氨基酸2.3氨基酸的分類——不常見蛋白質(zhì)氨基酸2.4氨基酸的分類——非蛋白質(zhì)氨基酸150多種，不是蛋白質(zhì)組成，但是有特定生理功能（1）大多是L型α氨基酸衍生物（2）有D型氨基酸（3）還有β-、γ-、δ-氨基酸2.4氨基酸的分類——非蛋白質(zhì)氨基酸150多種，不是蛋白質(zhì)氨基酸在結(jié)晶形態(tài)或在水溶液中，并不是以游離的羧基或氨基形式存在，而是離解成兩性離子。在兩性離子中，氨基是以質(zhì)子化(-NH3+)形式存在，羧基是以離解狀態(tài)(-COO-)存在。氨基酸晶體是由離子晶格組成，靠異性電荷之間的靜電引力維持晶格中質(zhì)點的作用力，因此氨基酸熔點高。不同氨基酸有特殊的晶體形狀，基于此可對氨基酸進行鑒別。

氨基酸的兼性離子形式三、氨基酸的酸堿化學(xué)氨基酸在結(jié)晶形態(tài)或在水溶液中，并不是以游離的羧基或氨基形式存陽離子A+兼性離子A0陰離子A-Ka1=[H+][A0]/[A+]當(dāng)溶液中[A0]=[A+]時，Ka1=[H+]；兩邊取對數(shù)pKa1=pH=2.34Ka2=[H+][A-]/[A0]當(dāng)溶液中[A0]=[A-]時，Ka2=[H+]；兩邊取對數(shù)pKa2=pH=9.6用Ka1,Ka2

表示氨基酸α-碳原子的-COOH與-NH3+的解離常數(shù)

氨基酸的解離性質(zhì)pH=pKa+lg[質(zhì)子受體][質(zhì)子供體]陽離子兼性離子陰離子Ka1=[H+][A0]/[A+]Ka2氨基酸的等電點當(dāng)溶液濃度為某一pH值時，氨基酸分子中所含的-NH3+和-COO-數(shù)目正好相等，凈電荷為0。這一pH值即為氨基酸的等電點，簡稱pI。在等電點時，氨基酸既不向正極也不向負(fù)極移動，即氨基酸處于兩性離子狀態(tài)。側(cè)鏈不含離解基團的中性氨基酸，其等電點是它的pKa1和pKa2的算術(shù)平均值：pI=(pKa1+pKa2)/2對于側(cè)鏈含有可解離基團的氨基酸，其pI值也決定于兩性離子兩邊的pKa值的算術(shù)平均值。酸性氨基酸：pI=(pKa1+pKaR-COO-

)/2堿性氨基酸：pI=(pKa2+pKaR-NH2)/2氨基酸的等電點當(dāng)溶液濃度為某一pH值時，氨基酸分子中所含的-四、氨基酸的化學(xué)反應(yīng)氨基酸的化學(xué)反應(yīng)ɑ-氨基參與的反應(yīng):亞硝酸、?；噭?、烴基、醛基氧化酶ɑ-羧基參與的反應(yīng)：成鹽、成酯、成酰氯、脫羧、疊氮側(cè)鏈R基參與的反應(yīng)：取決于R側(cè)鏈的官能團茚三酮、肽鍵形成!四、氨基酸的化學(xué)反應(yīng)氨基酸的ɑ-氨基參與的反應(yīng):ɑ-羧基參ɑ-氨基參與的反應(yīng):與亞硝酸反應(yīng)：通過測定N2的量而計算氨基酸的量，可衡量蛋白質(zhì)的水解程度與?；噭┓磻?yīng)：X=Cl,OH,-OCOR;可多肽合成中保護氨基；丹磺酰氯可以與肽的N-端氨基酸反應(yīng)，生成丹磺酰-肽，水解得到有強烈熒光的丹磺酰-氨基酸，用電泳法或?qū)游龇ǚ治黾纯傻弥狽-端是何種氨基酸，被廣泛用于蛋白質(zhì)N端測定。烴基化反應(yīng)：2，4-二硝基氟苯在弱堿條件下親核芳環(huán)取代生成DNP-氨基酸。首次被英國Sanger用來鑒定多肽、蛋白的N末端氨基酸黃色ɑ-氨基參與的反應(yīng):與亞硝酸反應(yīng)：通過測定N2的量而計算氨基與烴反應(yīng)continue：苯異硫氰酸酯(PITC)與ɑ-氨基生成苯氨基硫甲酰衍生物(PTC-aa)，再在硝基甲烷中與酸發(fā)生環(huán)化成苯乙內(nèi)酰硫脲(PTH-aa)——Edman測序原理。西佛堿反應(yīng)：ɑ-氨基與醛類反應(yīng)生成西佛堿。脫氨基反應(yīng)：在生物體內(nèi)，氨基酸經(jīng)氨基酸氧化酶催化脫去氨基成酮酸。與烴反應(yīng)continue：苯異硫氰酸酯(PITC)與ɑ-氨ɑ-羧基參與的反應(yīng):成鹽、成酯反應(yīng)：干燥，HCl回流成酯：被醇酯化，形成酯,羧基得以保護，氨基相對被活化，易?；?、羥基化；成鹽：氨基酸與堿作用生成相應(yīng)的鹽。氨基酸的堿金屬鹽能溶于水,而重金屬鹽則不溶于水。Q:為什么氨基酸的?；捄蜔N基化在堿性中進行？成酰氯反應(yīng)：與PCl5,PCl3,SOCl2,生成酰氯后，使羧基活化，以便更易與另一氨基酸氨基結(jié)合成肽鍵。脫羧基反應(yīng)、疊氮反應(yīng)ɑ-羧基參與的反應(yīng):成鹽、成酯反應(yīng)：干燥，HCl回流成酯：α-氨基和α-羧基共同參與的反應(yīng):脯氨酸、羥脯氨酸無NH3釋放，生成黃色物質(zhì)，λmax=440nm茚三酮顯色還原茚三酮茚三酮第二個茚三酮紫色復(fù)合物H+釋放的CO2可以用測壓法測量計算參加反應(yīng)的氨基酸的量α-氨基和α-羧基共同參與的反應(yīng):脯氨酸、羥脯氨酸茚三酮顯是多肽和蛋白質(zhì)生物合成的基本反應(yīng)。α-氨基和α-羧基共同參與的反應(yīng):成肽反應(yīng)：是多肽和蛋白質(zhì)生物合成的基本反應(yīng)。α-氨基和α-羧基共同參側(cè)鏈R基參與的反應(yīng):

酪氨酸堿性氨基酸半胱氨酸用于蛋白質(zhì)的化學(xué)修飾功能團有：羥基、酚基、巰基、吲哚基、咪唑基、胍基、甲硫基、非α-氨基和非α-羧基等。側(cè)鏈R基參與的反應(yīng):酪氨酸用于蛋白質(zhì)的化學(xué)修飾酪氨酸側(cè)鏈反應(yīng)——酚基碘化或硝化酪氨酸側(cè)鏈反應(yīng)——酚基碘化或硝化Pauly反應(yīng)Pauly反應(yīng)這些反應(yīng)可用于巰基的保護；可用于檢測蛋白中的半胱氨酸殘基；把其他分子與目標(biāo)多肽、蛋白進行偶聯(lián)半胱氨酸側(cè)鏈巰基的反應(yīng):烷基化這些反應(yīng)可用于巰基的保護；可用于檢測蛋白中的半胱氨酸殘基；半二硫鍵與金屬離子的螯合性質(zhì)可用于體內(nèi)解毒。二硫鍵對維持蛋白結(jié)構(gòu)很重要，氧化劑和還原劑都可打開二硫鍵，最常用還原劑β-巰基乙醇和二硫蘇糖醇半胱氨酸側(cè)鏈巰基的反應(yīng)（p142）:二硫鍵與金屬離子的螯合性質(zhì)可用于體內(nèi)解毒。二硫鍵對維持蛋白結(jié)五、氨基酸的分離分析分配柱層析：支持劑是一些具有親水性的不溶性物質(zhì)，如纖維素、淀粉、硅膠等。濾紙層析：薄層層析：離子交換層析：陰離子交換樹脂-N(CH3)3OH或-NH3OH，陽離子交換樹脂-SO3H支持物不同最常用：高效液相色譜（HPLC）、氣相色譜(GC)五、氨基酸的分離分析分配柱層析：支持劑是一些具有親水性的不紙層析紙層析把支持劑涂布在玻璃板上使成為一個均勻的薄層薄層層析把支持劑涂布在玻璃板上使成為一個均勻的薄層薄層層析離子交換層析/view/e845c4c8a1c7aa00b52acb47.html離子交換層析/v/view/e845c4c8a1c7aa00b52acb47.html/view/e8生物化學(xué)第3章-氨基酸分析課件用強酸型陽離子交換樹脂分離氨基酸氨基酸與樹脂的親和力取決于：用強酸型陽離子交換樹脂分離氨基酸氨基酸與樹脂的親和力取決于：氣液層析氣液層析高效液相層析高效液相層析蛋白質(zhì)的水解條件及優(yōu)缺點蛋白質(zhì)的水解條件及優(yōu)缺點高碘酸及其鹽可以定量的氧化斷裂鄰二羥基、α-羥基醛等的碳碳鍵，產(chǎn)生相應(yīng)的羰基化合物。該反應(yīng)可以用來區(qū)分糖苷是呋喃還是吡喃型的。側(cè)翼測定直連多糖的相對分子量和支鏈淀粉的非還原末端殘基數(shù)，即分支數(shù)目。第一章糖課后題第6題高碘酸及其鹽可以定量的氧化斷裂鄰二羥基、α-羥基醛等的碳碳鍵糖原分子量糖原中葡萄糖殘基的相對分子質(zhì)量為180-18（水的相對分子質(zhì)量）=162一分子非還原末端的葡萄糖殘基被高碘酸鉀氫化生成一分子的甲酸，因此，500mg糖原中非還原性末端殘基的摩爾質(zhì)量分?jǐn)?shù)與新生成的甲酸的摩爾質(zhì)量分?jǐn)?shù)相等。n個分支點含有n+1個殘基間的差別可忽略，所以可假設(shè)分支點的物質(zhì)的量=非還原端物質(zhì)的量。非還原端末端殘基的質(zhì)量數(shù)為：0.347mmol×162(mg/mmol)=56.214mg，因此，出現(xiàn)在1-6分支點上葡萄糖殘基的百分?jǐn)?shù)為：(56.214/500)×100%=11.24%糖原分子量糖原中葡萄糖殘基的相對分子質(zhì)量為180-18（水的生物化學(xué)第三章氨基酸(aminoacid)生物化學(xué)一、氨基酸——蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子氨基酸(aminoacid)：α-氨基酸是一切蛋白質(zhì)的組成單位。氨基酸是與羧酸相鄰α-碳原子上連有一個氨基，故稱α-氨基酸。利用酸水解、堿水解、酶解可把蛋白質(zhì)分子水解釋放氨基酸。L型α-氨基酸不變部分（除脯氨酸）可變部分180多種天然氨基酸；20種蛋白質(zhì)氨基酸

氨基酸首尾脫水聚合成肽鍵。一、氨基酸——蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子氨基酸(aminoacid)各種氨基酸的區(qū)別在于側(cè)鏈R基的不同20種蛋白質(zhì)氨基酸按R的極性可分為非極性氨基酸、不帶電荷極性氨基酸、帶正電R基氨基酸和帶負(fù)電R基氨基酸按R基的結(jié)構(gòu)可分為脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸及雜環(huán)氨基酸3大類除甘氨酸外，氨基酸均含有一個手性-碳原子，因此都具有旋光性。氨基酸的名稱常用三個字母的縮寫，或單個字母表示長的肽鏈。二、氨基酸的分類、性質(zhì)各種氨基酸的區(qū)別在于側(cè)鏈R基的不同二、氨基酸的分類、性質(zhì)氨基酸脂肪族氨基酸芳香族氨基酸雜環(huán)氨基酸一氨基一羧基（中性氨基酸）Gly、Ala、Val、Lue、Ile、Ser、Thr、Cys、Met一氨基二羧基（酸性氨基酸）及其酰胺Asp、Asn、Glu、Gln二氨基一羧基（堿性氨基酸）Arg、LysPhe、Tyr、TrpHis、Pro2.1氨基酸的分類——按照R化學(xué)結(jié)構(gòu)分類氨基酸脂肪族芳香族氨基酸雜環(huán)氨基酸一氨基一羧基（中性氨基酸）甘氨酸丙氨酸纈氨酸亮氨酸異亮氨酸脂肪族氨基酸：一氨基一羧基（中性氨基酸）甘氨酸丙氨酸纈氨酸亮氨酸脂肪族氨基酸：一氨基一羧基（中性氨基酸）:含有羥基絲氨酸Ser的-OH在生理條件下不解離，但是個極性基團，能與其他基團形成氫鍵，常出現(xiàn)在酶的活性中心；蘇氨酸Thr的-OH是仲醇，具有親水性；脂肪族氨基酸：一氨基一羧基（中性氨基酸）:含有羥基絲氨酸Se脂肪族氨基酸：一氨基一羧基（中性氨基酸）:含有硫Methionine(Met，M)Cysteine(Cys，C)兩個半胱氨酸的巰基氧化生成二硫鍵，生成胱氨酸，Cys-S-S-Cys

蛋氨酸的甲硫基的硫原子有親核性，容易發(fā)生極化，在生物合成中是重要的甲基供體脂肪族氨基酸：一氨基一羧基（中性氨基酸）:含有硫Methio脂肪族氨基酸：一氨基二羧基（酸性氨基酸）天冬氨酸谷氨酸天冬酰胺谷氨酰胺脂肪族氨基酸：一氨基二羧基（酸性氨基酸）天冬氨酸脂肪族氨基酸：二氨基一羧基（堿性氨基酸）賴氨酸Lys側(cè)鏈氨基生理條件下帶有一個正電荷精氨酸Arg是堿性最強的氨基酸，側(cè)鏈的胍基pKa=12.48，生理條件下完全質(zhì)子化組氨酸His含有咪唑環(huán)，是20種氨基酸中側(cè)鏈pK值最接近pH的一種，生理pH條件下具有緩沖能力的一種氨基酸。脂肪族氨基酸：二氨基一羧基（堿性氨基酸）賴氨酸Lys側(cè)鏈氨基芳香族氨基酸苯丙氨酸酪氨酸色氨酸這三種氨基酸在紫外280nm具有特殊吸收峰，蛋白質(zhì)的紫外吸收主要來自這三種氨基酸苯丙氨酸疏水性最強酪氨酸的-OH發(fā)生磷酸化在生物體內(nèi)是十分普遍的調(diào)控機制芳香族氨基酸苯丙氨酸酪氨酸色氨酸這三雜環(huán)氨基酸脯氨酸組氨酸組氨酸是堿性氨基酸的一種脯氨酸的α-亞氨基是環(huán)的一部分，因此具有特殊的剛性結(jié)構(gòu)，在蛋白質(zhì)中一般出現(xiàn)在α-螺旋轉(zhuǎn)角處。Pro殘基出現(xiàn)的位置必然發(fā)生蛋白估計方向的改變。雜環(huán)氨基酸脯氨酸組氨酸組氨酸是堿性氨基酸的一種2.2氨基酸的分類——按照R基極性分類疏水性氨基酸親水性氨基酸1.非極性氨基酸：8種Ala,Val,Leu,Ile脂肪族側(cè)鏈Pro亞氨基雜環(huán)Phe，Trp芳香環(huán)Met含硫2.不帶電荷的極性氨基酸：7種Ser,Thr,Tyr羥基-OHGln,Asn酰胺基Cys巰基Gly極性/非極性3.帶正電荷的氨基酸：3種Lysε-位氨基Arg胍基His咪唑基4.帶負(fù)電荷的氨基酸：2種Glu兩個羧基Asp2.2氨基酸的分類——按照R基極性分類疏水性氨基酸1.非極非極性氨基酸在維持蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)中其重要作用（蛋白質(zhì)的疏水中心）極性氨基酸側(cè)鏈能與水形成氫鍵，易溶于水帶電荷和極性氨基酸一般位于蛋白表面蛋白的活性中心：His，Ser，Cys非極性氨基酸在維持蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)中其重要作用（蛋白質(zhì)的疏水2.3氨基酸的分類——不常見蛋白質(zhì)氨基酸2.3氨基酸的分類——不常見蛋白質(zhì)氨基酸2.4氨基酸的分類——非蛋白質(zhì)氨基酸150多種，不是蛋白質(zhì)組成，但是有特定生理功能（1）大多是L型α氨基酸衍生物（2）有D型氨基酸（3）還有β-、γ-、δ-氨基酸2.4氨基酸的分類——非蛋白質(zhì)氨基酸150多種，不是蛋白質(zhì)氨基酸在結(jié)晶形態(tài)或在水溶液中，并不是以游離的羧基或氨基形式存在，而是離解成兩性離子。在兩性離子中，氨基是以質(zhì)子化(-NH3+)形式存在，羧基是以離解狀態(tài)(-COO-)存在。氨基酸晶體是由離子晶格組成，靠異性電荷之間的靜電引力維持晶格中質(zhì)點的作用力，因此氨基酸熔點高。不同氨基酸有特殊的晶體形狀，基于此可對氨基酸進行鑒別。

氨基酸的兼性離子形式三、氨基酸的酸堿化學(xué)氨基酸在結(jié)晶形態(tài)或在水溶液中，并不是以游離的羧基或氨基形式存陽離子A+兼性離子A0陰離子A-Ka1=[H+][A0]/[A+]當(dāng)溶液中[A0]=[A+]時，Ka1=[H+]；兩邊取對數(shù)pKa1=pH=2.34Ka2=[H+][A-]/[A0]當(dāng)溶液中[A0]=[A-]時，Ka2=[H+]；兩邊取對數(shù)pKa2=pH=9.6用Ka1,Ka2

表示氨基酸α-碳原子的-COOH與-NH3+的解離常數(shù)

氨基酸的解離性質(zhì)pH=pKa+lg[質(zhì)子受體][質(zhì)子供體]陽離子兼性離子陰離子Ka1=[H+][A0]/[A+]Ka2氨基酸的等電點當(dāng)溶液濃度為某一pH值時，氨基酸分子中所含的-NH3+和-COO-數(shù)目正好相等，凈電荷為0。這一pH值即為氨基酸的等電點，簡稱pI。在等電點時，氨基酸既不向正極也不向負(fù)極移動，即氨基酸處于兩性離子狀態(tài)。側(cè)鏈不含離解基團的中性氨基酸，其等電點是它的pKa1和pKa2的算術(shù)平均值：pI=(pKa1+pKa2)/2對于側(cè)鏈含有可解離基團的氨基酸，其pI值也決定于兩性離子兩邊的pKa值的算術(shù)平均值。酸性氨基酸：pI=(pKa1+pKaR-COO-

)/2堿性氨基酸：pI=(pKa2+pKaR-NH2)/2氨基酸的等電點當(dāng)溶液濃度為某一pH值時，氨基酸分子中所含的-四、氨基酸的化學(xué)反應(yīng)氨基酸的化學(xué)反應(yīng)ɑ-氨基參與的反應(yīng):亞硝酸、?；噭?、烴基、醛基氧化酶ɑ-羧基參與的反應(yīng)：成鹽、成酯、成酰氯、脫羧、疊氮側(cè)鏈R基參與的反應(yīng)：取決于R側(cè)鏈的官能團茚三酮、肽鍵形成!四、氨基酸的化學(xué)反應(yīng)氨基酸的ɑ-氨基參與的反應(yīng):ɑ-羧基參ɑ-氨基參與的反應(yīng):與亞硝酸反應(yīng)：通過測定N2的量而計算氨基酸的量，可衡量蛋白質(zhì)的水解程度與?；噭┓磻?yīng)：X=Cl,OH,-OCOR;可多肽合成中保護氨基；丹磺酰氯可以與肽的N-端氨基酸反應(yīng)，生成丹磺酰-肽，水解得到有強烈熒光的丹磺酰-氨基酸，用電泳法或?qū)游龇ǚ治黾纯傻弥狽-端是何種氨基酸，被廣泛用于蛋白質(zhì)N端測定。烴基化反應(yīng)：2，4-二硝基氟苯在弱堿條件下親核芳環(huán)取代生成DNP-氨基酸。首次被英國Sanger用來鑒定多肽、蛋白的N末端氨基酸黃色ɑ-氨基參與的反應(yīng):與亞硝酸反應(yīng)：通過測定N2的量而計算氨基與烴反應(yīng)continue：苯異硫氰酸酯(PITC)與ɑ-氨基生成苯氨基硫甲酰衍生物(PTC-aa)，再在硝基甲烷中與酸發(fā)生環(huán)化成苯乙內(nèi)酰硫脲(PTH-aa)——Edman測序原理。西佛堿反應(yīng)：ɑ-氨基與醛類反應(yīng)生成西佛堿。脫氨基反應(yīng)：在生物體內(nèi)，氨基酸經(jīng)氨基酸氧化酶催化脫去氨基成酮酸。與烴反應(yīng)continue：苯異硫氰酸酯(PITC)與ɑ-氨ɑ-羧基參與的反應(yīng):成鹽、成酯反應(yīng)：干燥，HCl回流成酯：被醇酯化，形成酯,羧基得以保護，氨基相對被活化，易?；⒘u基化；成鹽：氨基酸與堿作用生成相應(yīng)的鹽。氨基酸的堿金屬鹽能溶于水,而重金屬鹽則不溶于水。Q:為什么氨基酸的?；捄蜔N基化在堿性中進行？成酰氯反應(yīng)：與PCl5,PCl3,SOCl2,生成酰氯后，使羧基活化，以便更易與另一氨基酸氨基結(jié)合成肽鍵。脫羧基反應(yīng)、疊氮反應(yīng)ɑ-羧基參與的反應(yīng):成鹽、成酯反應(yīng)：干燥，HCl回流成酯：α-氨基和α-羧基共同參與的反應(yīng):脯氨酸、羥脯氨酸無NH3釋放，生成黃色物質(zhì)，λmax=440nm茚三酮顯色還原茚三酮茚三酮第二個茚三酮紫色復(fù)合物H+釋放的CO2可以用測壓法測量計算參加反應(yīng)的氨基酸的量α-氨基和α-羧基共同參與的反應(yīng):脯氨酸、羥脯氨酸茚三酮顯是多肽和蛋白質(zhì)生物合成的基本反應(yīng)。α-氨基和α-羧基共同參與的反應(yīng):成肽反應(yīng)：是多肽和蛋白質(zhì)生物合成的基本反應(yīng)。α-氨基和α-羧基共同參側(cè)鏈R基參與的反應(yīng):

酪氨酸堿性氨基酸半胱氨酸用于蛋白質(zhì)的化學(xué)修飾功能團有：羥基、酚基、巰基、吲哚基、咪唑基、胍基、甲硫基、非α-氨基和非α-羧基等。側(cè)鏈R基參與的反應(yīng):酪氨酸用于蛋白質(zhì)的化學(xué)修飾酪氨酸側(cè)鏈反應(yīng)——酚基碘化或硝化酪氨酸側(cè)鏈反應(yīng)——酚基碘化或硝化Pauly反應(yīng)Pauly反應(yīng)