色譜理論基礎(chǔ)課件

色譜分析的基本要求是實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離。色譜分離的首要條件是相鄰兩組分的保留值存在一定差別，兩組分的色譜峰間距足夠遠(yuǎn)。由各組分在兩相間的分配系數(shù)決定，即由色譜過程的熱力學(xué)性質(zhì)決定。另一條件是每個組分色譜峰區(qū)域?qū)挾茸銐蛘?。由組分在色譜柱中的傳質(zhì)和擴(kuò)散決定，即由色譜過程動力學(xué)性質(zhì)決定。因此，研究、解釋色譜分離行為應(yīng)從熱力學(xué)和動力學(xué)兩方面進(jìn)行?！?5-3色譜理論基礎(chǔ)色譜分析的基本要求是實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離。色譜分11952年，Martin等人提出的塔板理論將一根色譜柱當(dāng)作一個由許多塔板組成的精餾塔，用塔板概念來描述組分在柱中的分配行為。塔板是從精餾中借用的，是一種半經(jīng)驗(yàn)理論，但它成功地解釋了色譜流出曲線呈正態(tài)分布。一、塔板理論（Platetheory）1952年，Martin等人提出的塔板理論將一根色譜2塔板理論假定:①塔板之間不連續(xù)；②塔板之間無分子擴(kuò)散；③組分在各塔板內(nèi)兩相間的分配瞬間達(dá)至平衡，達(dá)一次平衡所需柱長為理論塔板高度H；④某組分在所有塔板上的分配系數(shù)K相同；⑤流動相以不連續(xù)方式加入，即以一個一個的塔板體積加入。當(dāng)塔板數(shù)n較少時(shí)，組分在柱內(nèi)達(dá)分配平衡的次數(shù)較少，流出曲線呈峰形，但不對稱；當(dāng)塔板數(shù)n>50時(shí)，峰形接近正態(tài)分布。塔板理論假定:3

根據(jù)呈正態(tài)分布的色譜流出曲線可以導(dǎo)出計(jì)算塔板數(shù)n的公式，用以評價(jià)一根柱子的柱效。由于色譜柱并無真正的塔板，故塔板數(shù)又稱理論塔板數(shù)：

上式中，tR為保留時(shí)間；W1/2為半峰寬（以時(shí)間為單位）；Wb為峰底寬度（以時(shí)間為單位）?？梢?，理論塔板數(shù)n由組分保留值和峰寬決定。

根據(jù)呈正態(tài)分布的色譜流出曲線可以導(dǎo)出計(jì)算塔板數(shù)n4若柱長為L，則每塊理論塔板高度H為：

由上述兩式知道，理論塔板數(shù)n越多、理論塔板高度H越小、色譜峰越窄，則柱效越高。上述兩式包含死時(shí)間t0，它與組分在柱內(nèi)的分配無關(guān)，因此不能真正反映色譜柱的柱效。通常以有效理論塔板數(shù)neff和有效理論塔板高度Heff表示：若柱長為L，則每塊理論塔板高度H為：5有關(guān)塔板理論的說明①說明柱效時(shí)，必須注明該柱效是針對何種物質(zhì)、固定液種類及其含量、流動相種類及流速、操作條件等；②應(yīng)定期對柱效進(jìn)行評價(jià)，以防柱效下降，延長柱壽命。③塔板理論描述了組分在柱內(nèi)的分配平衡和分離過程，導(dǎo)出流出曲線的數(shù)學(xué)模型，解釋了流出曲線形狀和位置，提出了計(jì)算和評價(jià)柱效的參數(shù)。有關(guān)塔板理論的說明6

但該理論是在理想情況下導(dǎo)出的，未考慮分子擴(kuò)散因素、其它動力學(xué)因素對柱內(nèi)傳質(zhì)的影響。因此它不能解釋：峰形為什么會擴(kuò)張？影響柱效的動力學(xué)因素是什么？但該理論是在理想情況下導(dǎo)出的，未考慮分子擴(kuò)散因素、其7

1956年，荷蘭化學(xué)工程師VanDeemter等在研究氣-液色譜時(shí)，提出了色譜過程動力學(xué)理論--速率理論。該理論吸收了塔板理論中的塔板高度H的概念，同時(shí)考慮了組分在兩相間的擴(kuò)散和傳質(zhì)過程，導(dǎo)出了速率理論方程式，較完善地解釋了影響塔板高度的各種因素。適用于氣相色譜和液相色譜。二、速率理論（Ratetheory）二、速率理論（Ratetheory）8VanDeemter方程：

式中，

u為流動相線速度；A、B、C為常數(shù)。

A—分別表示渦流擴(kuò)散項(xiàng)系數(shù)；B—分子擴(kuò)散項(xiàng)系數(shù)；C—傳質(zhì)阻力項(xiàng)系數(shù)（包括液相和固相傳質(zhì)阻力系數(shù)）該式從動力學(xué)角度很好地解釋了影響板高（柱效）的各種因素。任何減少方程右邊三項(xiàng)數(shù)值的方法，都可降低H，從而提高柱效。VanDeemter方程：9

1.渦流擴(kuò)散項(xiàng)A（Multipathterm）在填充柱中，由于受到固定相顆粒的阻礙，組分在遷移過程中隨流動相不斷改變方向，形成紊亂的“渦流”。從圖中可見，因填充物顆粒大小及填充的不均勻性——同一組分運(yùn)行路線長短不同——流出時(shí)間不同——峰形展寬。流動方向1.渦流擴(kuò)散項(xiàng)A（Multipathterm）流動方向10展寬程度以A表示：

A=2dp其中dp—填充物平均直徑；—填充不規(guī)則因子。

可見，使用細(xì)粒的固定相并填充均勻可減小A，提高柱效。對于空心毛細(xì)管柱，無渦流擴(kuò)散，即A=0。流動方向展寬程度以A表示：可見，使用細(xì)粒的固定相并11

2.縱向擴(kuò)散項(xiàng)B/u（Longitudinaldiffusionterm）縱向分子擴(kuò)散是由于濃度梯度引起的。當(dāng)樣品被注入色譜柱時(shí)，它呈“塞子”狀分布。隨著流動相的推進(jìn)，“塞子”因濃度梯度而向前后自發(fā)地?cái)U(kuò)散，使譜峰展寬。其大小B=2Dm—彎曲因子，表示固定相幾何形狀對自由分子擴(kuò)散的阻礙情況；Dm—組分在流動相中的擴(kuò)散系數(shù)。2.縱向擴(kuò)散項(xiàng)B/u（Longitudinaldiffu12討論流動相分子量大，Dg小，即B小Dg隨柱溫升高而增加，隨柱壓降低而減??；u增加，組分停留時(shí)間短，縱向擴(kuò)散??；（B/u）

對于液相色譜，因Dm較小，B

項(xiàng)可忽略。球狀顆粒大分子量流動相適當(dāng)增加流速短柱低溫B=2Dm討論球狀顆粒B=2Dm13

3.傳質(zhì)阻力項(xiàng)Cu（Mass-transferterm）因傳質(zhì)阻力的存在，使分配不能“瞬間”達(dá)至平衡，因此產(chǎn)生峰形展寬。氣相色譜以氣體為流動相，液相色譜以液體為流動相，二者傳質(zhì)過程不完全相同。傳質(zhì)阻力項(xiàng)C包括流動相傳質(zhì)阻力系數(shù)Cm和固定相傳質(zhì)阻力系數(shù)Cs。3.傳質(zhì)阻力項(xiàng)Cu（Mass-transferterm14討論減小填充顆粒直徑dp。采用分子量小的流動相，使組分在氣相中的擴(kuò)散系數(shù)Dg增加。減小液膜厚度df，液相傳質(zhì)阻力系數(shù)Cl下降。但此時(shí)k又減小。因此，當(dāng)保持固定液含量不變時(shí)，可通過增加固定液載體的比表面來降低df。但比表面過大又會因吸附過強(qiáng)使峰拖尾。增加柱溫，可增加組分在液相中的擴(kuò)散系數(shù)Dl，但k值也減小，為保持合適Cl值，應(yīng)控制柱溫。討論15當(dāng)u一定時(shí)，僅在A、B和C較小時(shí)，H較小，柱效較高；反之，則柱效較低，色譜峰將展寬。以u對H作圖，可得H-u曲線（如左圖），從該曲線得到：板高，H(cm)HminA+B/u+CuCmuCsuAB/u4.流速u由VanDeemter方程H=A+B/u+Cu可知當(dāng)u一定時(shí)，僅在A、B和C較小時(shí)，H較小，柱效較高；反之，16渦流擴(kuò)散項(xiàng)A與流速u無關(guān)；低流速區(qū)（u?。?，B/u大，分子擴(kuò)散項(xiàng)占主導(dǎo)，此時(shí)選擇分子量大的氣體如N2和Ar為載氣，可減小擴(kuò)散，提高柱效；高流速區(qū)（u大），Cu大，傳質(zhì)阻力項(xiàng)占主導(dǎo)，此時(shí)選擇分子量小的氣體如H2和He為載氣，可增加擴(kuò)散系數(shù)，提高柱效；曲線的最低點(diǎn)對應(yīng)最佳線速（uopt）下的最小板高Hmin。H=A+B/u+Cu渦流擴(kuò)散項(xiàng)A與流速u無關(guān)；H=A+B/u+Cu17

單獨(dú)用柱效或選擇性不能真實(shí)反映組分在色譜柱中的分離情況，需要引進(jìn)一個綜合指標(biāo)—分離度，作為色譜柱總分離效能的指標(biāo)。三、分離度（Resolution）R=1.5R=0.75R=1.0響應(yīng)信號保留時(shí)間t,min單獨(dú)用柱效或選擇性不能真實(shí)反映組分在色譜柱中的分離情況18是同時(shí)反映色譜柱效能和選擇性的綜合性指標(biāo)，也稱總分離效能指標(biāo)或分辨率。定義為：

利用此式，可直接從色譜流出曲線上求出分離度R越大，相鄰組分分離越好。當(dāng)R=1.5時(shí)，分離程度可達(dá)99.7%，R=1.5通常用作是否分開的判據(jù)。是同時(shí)反映色譜柱效能和選擇性的綜合性指標(biāo)，也稱總分離19R=1.5R=0.75R=1.0響應(yīng)信號保留時(shí)間t,minR=1.5R=0.75R=1.0響應(yīng)信號保留時(shí)間t,mi20分離度R是柱的總分離效能指標(biāo)，既反映兩組分保留值的差值，即固定液對兩組分的選擇性r2,1的大?。ㄓ晒潭ㄒ旱臒崃W(xué)性質(zhì)決定），又考慮到色譜峰寬度對分離的影響，即柱效能neff的高低（取決于色譜過程的動力學(xué)因素）。對于相鄰的兩組分，假設(shè)其色譜峰底寬相等，即Wb1=Wb2，可導(dǎo)出R與neff、和r2,1的關(guān)系式分離度R是柱的總分離效能指標(biāo)，既反映兩組分保留值的差21色譜基本分離方程色譜基本分離方程2270%CH3OH+30%H2O60%CH3OH+40%H2O50%CH3OH+50%H2O40%CH3OH+60%H2O溶劑(流動相)組成對色譜分離的影響1：9,10-蒽醌；2：2-甲基-9,10-蒽醌；3：2-乙基-9,10-蒽醌4：1,4-二甲基-9,10-蒽醌；5：2-特丁基甲基-9,10-蒽醌改變組成使k

最佳70%CH3OH60%CH3OH50%CH3OH40%CH323色譜分離中的問題由于分析物組成復(fù)雜，以某組成的流動相可能使部分待測物得到好的分離，但同時(shí)出使其它待測物的分離不令人滿意。實(shí)際工作中采用程序升溫（GC）和梯度淋洗（LC）來解決這個問題。色譜分離中的問題24§15-4色譜定性定量分析一、定性分析

色譜定性分析就是確定各色譜峰所代表的化合物。

1.利用保留值定性

（1）利用已知物保留值對照定性

當(dāng)有待測組分的純樣品時(shí)，用對照法進(jìn)行定性極為簡單。用已知物質(zhì)與未知樣對照定性，是色譜分析中最可靠的定性方法。定性依據(jù)是保留值。§15-4色譜定性定量分析一、定性分析色譜定性分析就25

（2）相對保留值法

由于絕對保留值受操作條件的影響較大，重復(fù)性較差?？刹捎孟鄬ΡＡ糁底鳛槎ㄐ灾笜?biāo)，消除操作條件的影響。相對保留值是某組分i與基準(zhǔn)物s的調(diào)整保留值的比值：（2）相對保留值法

由于絕對保留值受操作條26

（3）利用雙柱保留值法定性

雙柱定性是利用兩根極性差別較大的色譜柱對混合物進(jìn)行分離，然后用純物質(zhì)分別在兩根柱子上進(jìn)行保留值對照定性。如果得到的結(jié)果一致，即可確定該組分，結(jié)果較可靠。（3）利用雙柱保留值法定性

雙柱定性是利用272.利用文獻(xiàn)保留數(shù)據(jù)定性

在實(shí)際工作中遇到未知試樣時(shí)，利用文獻(xiàn)上的保留值定性是一種較為方便的方法。只要文獻(xiàn)中所用的固定相和柱溫相同，某一組分的相對保留值和保留指數(shù)都是基本不變的。目前，保留指數(shù)定性已成為廣泛應(yīng)用的一種色譜定性方法。2.利用文獻(xiàn)保留數(shù)據(jù)定性在實(shí)際工作中遇到未知試283.利用選擇性檢測器定性

各種類型的檢測器對不同類別的化合物有選擇性響應(yīng)?；鹧婀舛葯z測器—有機(jī)物。電子捕獲檢測器—含電負(fù)性強(qiáng)的原子或基團(tuán)。氮磷檢測器—含氮、磷的化合物。3.利用選擇性檢測器定性各種類型的檢測器對不同類別的化合物294.利用與其他儀器聯(lián)用定性

色譜與一些結(jié)構(gòu)分析儀器聯(lián)用，分離、定性分析。色譜-質(zhì)譜色譜-紅外4.利用與其他儀器聯(lián)用定性色譜與一些結(jié)構(gòu)分析儀器聯(lián)用，分離30色譜分析的基本要求是實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離。色譜分離的首要條件是相鄰兩組分的保留值存在一定差別，兩組分的色譜峰間距足夠遠(yuǎn)。由各組分在兩相間的分配系數(shù)決定，即由色譜過程的熱力學(xué)性質(zhì)決定。另一條件是每個組分色譜峰區(qū)域?qū)挾茸銐蛘?。由組分在色譜柱中的傳質(zhì)和擴(kuò)散決定，即由色譜過程動力學(xué)性質(zhì)決定。因此，研究、解釋色譜分離行為應(yīng)從熱力學(xué)和動力學(xué)兩方面進(jìn)行?！?5-3色譜理論基礎(chǔ)色譜分析的基本要求是實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離。色譜分311952年，Martin等人提出的塔板理論將一根色譜柱當(dāng)作一個由許多塔板組成的精餾塔，用塔板概念來描述組分在柱中的分配行為。塔板是從精餾中借用的，是一種半經(jīng)驗(yàn)理論，但它成功地解釋了色譜流出曲線呈正態(tài)分布。一、塔板理論（Platetheory）1952年，Martin等人提出的塔板理論將一根色譜32塔板理論假定:①塔板之間不連續(xù)；②塔板之間無分子擴(kuò)散；③組分在各塔板內(nèi)兩相間的分配瞬間達(dá)至平衡，達(dá)一次平衡所需柱長為理論塔板高度H；④某組分在所有塔板上的分配系數(shù)K相同；⑤流動相以不連續(xù)方式加入，即以一個一個的塔板體積加入。當(dāng)塔板數(shù)n較少時(shí)，組分在柱內(nèi)達(dá)分配平衡的次數(shù)較少，流出曲線呈峰形，但不對稱；當(dāng)塔板數(shù)n>50時(shí)，峰形接近正態(tài)分布。塔板理論假定:33

根據(jù)呈正態(tài)分布的色譜流出曲線可以導(dǎo)出計(jì)算塔板數(shù)n的公式，用以評價(jià)一根柱子的柱效。由于色譜柱并無真正的塔板，故塔板數(shù)又稱理論塔板數(shù)：

上式中，tR為保留時(shí)間；W1/2為半峰寬（以時(shí)間為單位）；Wb為峰底寬度（以時(shí)間為單位）。可見，理論塔板數(shù)n由組分保留值和峰寬決定。

根據(jù)呈正態(tài)分布的色譜流出曲線可以導(dǎo)出計(jì)算塔板數(shù)n34若柱長為L，則每塊理論塔板高度H為：

由上述兩式知道，理論塔板數(shù)n越多、理論塔板高度H越小、色譜峰越窄，則柱效越高。上述兩式包含死時(shí)間t0，它與組分在柱內(nèi)的分配無關(guān)，因此不能真正反映色譜柱的柱效。通常以有效理論塔板數(shù)neff和有效理論塔板高度Heff表示：若柱長為L，則每塊理論塔板高度H為：35有關(guān)塔板理論的說明①說明柱效時(shí)，必須注明該柱效是針對何種物質(zhì)、固定液種類及其含量、流動相種類及流速、操作條件等；②應(yīng)定期對柱效進(jìn)行評價(jià)，以防柱效下降，延長柱壽命。③塔板理論描述了組分在柱內(nèi)的分配平衡和分離過程，導(dǎo)出流出曲線的數(shù)學(xué)模型，解釋了流出曲線形狀和位置，提出了計(jì)算和評價(jià)柱效的參數(shù)。有關(guān)塔板理論的說明36

但該理論是在理想情況下導(dǎo)出的，未考慮分子擴(kuò)散因素、其它動力學(xué)因素對柱內(nèi)傳質(zhì)的影響。因此它不能解釋：峰形為什么會擴(kuò)張？影響柱效的動力學(xué)因素是什么？但該理論是在理想情況下導(dǎo)出的，未考慮分子擴(kuò)散因素、其37

1956年，荷蘭化學(xué)工程師VanDeemter等在研究氣-液色譜時(shí)，提出了色譜過程動力學(xué)理論--速率理論。該理論吸收了塔板理論中的塔板高度H的概念，同時(shí)考慮了組分在兩相間的擴(kuò)散和傳質(zhì)過程，導(dǎo)出了速率理論方程式，較完善地解釋了影響塔板高度的各種因素。適用于氣相色譜和液相色譜。二、速率理論（Ratetheory）二、速率理論（Ratetheory）38VanDeemter方程：

式中，

u為流動相線速度；A、B、C為常數(shù)。

A—分別表示渦流擴(kuò)散項(xiàng)系數(shù)；B—分子擴(kuò)散項(xiàng)系數(shù)；C—傳質(zhì)阻力項(xiàng)系數(shù)（包括液相和固相傳質(zhì)阻力系數(shù)）該式從動力學(xué)角度很好地解釋了影響板高（柱效）的各種因素。任何減少方程右邊三項(xiàng)數(shù)值的方法，都可降低H，從而提高柱效。VanDeemter方程：39

1.渦流擴(kuò)散項(xiàng)A（Multipathterm）在填充柱中，由于受到固定相顆粒的阻礙，組分在遷移過程中隨流動相不斷改變方向，形成紊亂的“渦流”。從圖中可見，因填充物顆粒大小及填充的不均勻性——同一組分運(yùn)行路線長短不同——流出時(shí)間不同——峰形展寬。流動方向1.渦流擴(kuò)散項(xiàng)A（Multipathterm）流動方向40展寬程度以A表示：

A=2dp其中dp—填充物平均直徑；—填充不規(guī)則因子。

可見，使用細(xì)粒的固定相并填充均勻可減小A，提高柱效。對于空心毛細(xì)管柱，無渦流擴(kuò)散，即A=0。流動方向展寬程度以A表示：可見，使用細(xì)粒的固定相并41

2.縱向擴(kuò)散項(xiàng)B/u（Longitudinaldiffusionterm）縱向分子擴(kuò)散是由于濃度梯度引起的。當(dāng)樣品被注入色譜柱時(shí)，它呈“塞子”狀分布。隨著流動相的推進(jìn)，“塞子”因濃度梯度而向前后自發(fā)地?cái)U(kuò)散，使譜峰展寬。其大小B=2Dm—彎曲因子，表示固定相幾何形狀對自由分子擴(kuò)散的阻礙情況；Dm—組分在流動相中的擴(kuò)散系數(shù)。2.縱向擴(kuò)散項(xiàng)B/u（Longitudinaldiffu42討論流動相分子量大，Dg小，即B小Dg隨柱溫升高而增加，隨柱壓降低而減小；u增加，組分停留時(shí)間短，縱向擴(kuò)散??；（B/u）

對于液相色譜，因Dm較小，B

項(xiàng)可忽略。球狀顆粒大分子量流動相適當(dāng)增加流速短柱低溫B=2Dm討論球狀顆粒B=2Dm43

3.傳質(zhì)阻力項(xiàng)Cu（Mass-transferterm）因傳質(zhì)阻力的存在，使分配不能“瞬間”達(dá)至平衡，因此產(chǎn)生峰形展寬。氣相色譜以氣體為流動相，液相色譜以液體為流動相，二者傳質(zhì)過程不完全相同。傳質(zhì)阻力項(xiàng)C包括流動相傳質(zhì)阻力系數(shù)Cm和固定相傳質(zhì)阻力系數(shù)Cs。3.傳質(zhì)阻力項(xiàng)Cu（Mass-transferterm44討論減小填充顆粒直徑dp。采用分子量小的流動相，使組分在氣相中的擴(kuò)散系數(shù)Dg增加。減小液膜厚度df，液相傳質(zhì)阻力系數(shù)Cl下降。但此時(shí)k又減小。因此，當(dāng)保持固定液含量不變時(shí)，可通過增加固定液載體的比表面來降低df。但比表面過大又會因吸附過強(qiáng)使峰拖尾。增加柱溫，可增加組分在液相中的擴(kuò)散系數(shù)Dl，但k值也減小，為保持合適Cl值，應(yīng)控制柱溫。討論45當(dāng)u一定時(shí)，僅在A、B和C較小時(shí)，H較小，柱效較高；反之，則柱效較低，色譜峰將展寬。以u對H作圖，可得H-u曲線（如左圖），從該曲線得到：板高，H(cm)HminA+B/u+CuCmuCsuAB/u4.流速u由VanDeemter方程H=A+B/u+Cu可知當(dāng)u一定時(shí)，僅在A、B和C較小時(shí)，H較小，柱效較高；反之，46渦流擴(kuò)散項(xiàng)A與流速u無關(guān)；低流速區(qū)（u?。?，B/u大，分子擴(kuò)散項(xiàng)占主導(dǎo)，此時(shí)選擇分子量大的氣體如N2和Ar為載氣，可減小擴(kuò)散，提高柱效；高流速區(qū)（u大），Cu大，傳質(zhì)阻力項(xiàng)占主導(dǎo)，此時(shí)選擇分子量小的氣體如H2和He為載氣，可增加擴(kuò)散系數(shù)，提高柱效；曲線的最低點(diǎn)對應(yīng)最佳線速（uopt）下的最小板高Hmin。H=A+B/u+Cu渦流擴(kuò)散項(xiàng)A與流速u無關(guān)；H=A+B/u+Cu47

單獨(dú)用柱效或選擇性不能真實(shí)反映組分在色譜柱中的分離情況，需要引進(jìn)一個綜合指標(biāo)—分離度，作為色譜柱總分離效能的指標(biāo)。三、分離度（Resolution）R=1.5R=0.75R=1.0響應(yīng)信號保留時(shí)間t,min單獨(dú)用柱效或選擇性不能真實(shí)反映組分在色譜柱中的分離情況48是同時(shí)反映色譜柱效能和選擇性的綜合性指標(biāo)，也稱總分離效能指標(biāo)或分辨率。定義為：

利用此式，可直接從色譜流出曲線上求出分離度R越大，相鄰組分分離越好。當(dāng)R=1.5時(shí)，分離程度可達(dá)99.7%，R=1.5通常用作是否分開的判據(jù)。是同時(shí)反映色譜柱效能和選擇性的綜合性指標(biāo)，也稱總分離49R=1.5R=0.75R=1.0響應(yīng)信號保留時(shí)間t,minR=1.5R=0.75R=1.0響應(yīng)信號保留時(shí)間t,mi50分離度R是柱的總分離效能指標(biāo)，既反映兩組分保留值的差值，即固定液對兩組分的選擇性r2,1的大?。ㄓ晒潭ㄒ旱臒崃W(xué)性質(zhì)決定），又考慮到色譜峰寬度對分離的影響，即柱效能neff的高低（取決于色譜過程的動力學(xué)因素）。對于相鄰的兩組分，假設(shè)其色譜峰底寬相等，即Wb1=Wb2，可導(dǎo)出R與neff、和r2,1的關(guān)系式分離度R是柱的總分離效能指標(biāo)，既反映兩組分保留值的差51色譜基本分離方程色譜基本分離方程5270%CH3OH+30%H2O60%CH3OH+40%H2O50%CH3OH+50%H2O40%CH3OH+60%H2O溶劑(流動相)組成對色譜分離的影響1：9,10-蒽醌；2：2-甲基-9,10-蒽醌；3：2-乙基-9,10-蒽醌4：1,4-二甲基-9,10-蒽醌；5：2-特丁基甲基-9,10-蒽