總論2-病毒感染與免疫

1復習：病毒的基本性狀(第23、24章）病毒的形態(tài)與結(jié)構(gòu)病毒的化學組成病毒的復制病毒的遺傳與變異病毒的理化特性病毒的分類2病毒的大小與形態(tài)病毒個體微小，以nm為測量單位在電鏡下方可看見不同的病毒大小差異懸殊病毒的形態(tài)多種多樣3病毒的結(jié)構(gòu)核心:核酸,DNA或RNA衣殼：殼微粒,protein脂質(zhì)膜：宿主細胞膜核衣殼裸病毒包膜病毒包膜刺突：包膜蛋白質(zhì)4核酸：病毒的基因組，DNA或是RNA蛋白質(zhì)：結(jié)構(gòu)蛋白、非結(jié)構(gòu)蛋白脂類、糖病毒的化學組成5吸附穿入、脫殼早期：病毒特異性酶的合成病毒核酸復制病毒結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)合成裝配釋放生物合成6病毒的變異突變基因重組與重配基因整合病毒基因產(chǎn)物的相互作用表型互補與增強作用表型混合與表型交換基因型混合基因型變異可遺傳表型變異，不可遺傳7第二節(jié)病毒的感染與免疫

第三節(jié)病毒感染的檢查方法與防治原則8第二節(jié)病毒的感染與免疫9

病毒通過一定的方式侵入機體，并在易感細胞內(nèi)復制增殖，與機體發(fā)生相互作用的過程，稱為病毒感染。病毒感染的概念：10一、病毒感染的途徑和類型11（一）病毒感染的傳播途徑水平傳播（horizontaltransmission）

病毒在人群個體之間的傳播垂直傳播（verticaltransmission）

病毒從親代直接傳給子代12水平傳播（horizontaltransmission）1.通過粘膜表面?zhèn)鞑ズ粑?、消化道、泌尿生殖道直接接觸粘膜（角膜）2.通過皮膚傳播創(chuàng)口，蚊蟲叮咬：狂犬、蟲媒、出血熱病毒3.醫(yī)源性傳播輸血、注射、拔牙、手術(shù)拔牙輸血13

通過宮內(nèi)、胎盤或產(chǎn)道，病毒直接由親代傳給子代的方式?？梢鹚捞ァ⒃绠a(chǎn)、畸形等先天感染。垂直傳播（verticaltransmission）常見病毒：風疹病毒巨細胞病毒

HIVHBV

14

人類病毒的感染途徑主要感染途徑傳播方式及途徑病毒種類呼吸道空氣、飛沫或皮屑流感病毒、鼻病毒消化道污染水或食品脊髓灰質(zhì)炎病毒輸血、注射或器官移植污染血或血制品污染注射器HIV、乙肝病毒眼或泌尿生殖道接觸、游泳池、性交HIV、皰疹病毒經(jīng)胎盤、圍產(chǎn)期宮內(nèi)、分娩產(chǎn)道、哺乳等麻疹、乙肝病毒破損皮膚昆蟲叮咬、狂犬、鼠類腦炎病毒、出血熱病毒等（二）病毒在體內(nèi)的播散方式1516病原體不同的個體相同個體不同生理狀態(tài)不同的結(jié)果?（三）病毒感染的類型數(shù)量種類毒力

免疫力遺傳背景

17根據(jù)有無臨床癥狀

隱性病毒感染顯性病毒感染根據(jù)病毒在體內(nèi)感染的過程、滯留時間

急性病毒感染（病原消滅型感染）

持續(xù)性病毒感染

潛伏感染

慢性感染

慢發(fā)病毒感染18（1）隱性感染（Inapparentinfection）病毒進入機體后不引起臨床癥狀的感染，對組織和細胞的損傷不明顯。隱性感染者雖不出現(xiàn)臨床癥狀，但仍可獲得免疫力而終止感染。病毒攜帶者：有部分隱性感染者一直不產(chǎn)生對此種病毒的免疫力叫病毒攜帶者，無癥狀，但病毒可在體內(nèi)增殖并向外界播散，也是重要的傳染源。隱性病毒感染&顯性病毒感染19（2）顯性感染（apparentinfection）

隱性病毒感染&顯性病毒感染20（3）持續(xù)性感染（PersistentInfection）慢性感染潛伏感染慢發(fā)病毒感染

某些病毒感染機體后，可在受染細胞內(nèi)長期存在或終身攜帶，且反復間斷地向外界排出病毒，但常缺乏臨床癥狀，成為重要的傳染源。急性病毒感染與持續(xù)性病毒感染21機體免疫功能低下，無力完全清除病毒；病毒存在于受保護的部位或病毒發(fā)生突變,可以逃避宿主免疫作用；某些病毒的抗原性弱，難以產(chǎn)生免疫應答；有些病毒在感染過程中產(chǎn)生DIP，干擾病毒的增殖，因而改變病毒的感染過程，形成持續(xù)性感染；病毒基因整合在宿主細胞的基因組中，長期與宿主細胞共存。持續(xù)性病毒感染有病毒和機體兩方面的因素：22

急性或隱性感染后，病毒未能完全清除，仍繼續(xù)存在于血液或組織中，可經(jīng)?；蜷g歇地增殖并排出體外，病程很長。a.慢性感染（Chronicinfection）嬰兒期感染HBV常表現(xiàn)為慢性感染持續(xù)性病毒感染23

原發(fā)感染后，病毒長期潛伏在組織內(nèi)，即病毒基因組存在于組織細胞內(nèi)，不產(chǎn)生感染性病毒，也不出現(xiàn)臨床癥狀，但在某些條件下，病毒被激活而出現(xiàn)急性發(fā)作。b.潛伏感染（Latentinfection）持續(xù)性病毒感染24

潛伏期長，可達數(shù)年或者數(shù)十年，呈慢性進行性加重。一旦出現(xiàn)癥狀，其疾病后果嚴重。c.慢發(fā)病毒感染（slowviralinfection）朊病毒：Kuru病持續(xù)性病毒感染兒童期感染，經(jīng)過5-10年后發(fā)病，總的特點是隱襲起病，亞急性或慢性進展，最后死亡。總病程多為1-3年。3個月內(nèi)死亡與存活4年以上者各約占10%。

麻疹病毒：亞急性硬化性全腦炎（SSPE)KULU病是在新幾內(nèi)亞的部落里發(fā)現(xiàn)的，因為當?shù)厝擞惺秤靡压视H人腦組織的習俗，因而引起感染。KULU病潛伏期長，4-30年不等，隱匿發(fā)病，患者多在發(fā)病后3個月-2年之內(nèi)死亡。25d.病毒感染與腫瘤：26部分病毒可通過垂直傳播引起畸胎。e.病毒感染與畸胎：如孕前檢查中的臨床Torch實驗

To-弓形蟲（toxoplasma）

R-風疹病毒（rubeellavirus）

C-巨細胞病毒（cytomegalovirus）

H-單純皰疹病毒（herpessimplexvirus）27二、病毒感染的致病機制281.溶細胞感染（cytocidalinfection）細胞病變作用（cytopathiceffect,CPE）

在體外實驗中，通過細胞培養(yǎng)和接種殺細胞性病毒后，可用顯微鏡觀察到細胞變圓、壞死，從瓶壁脫落等現(xiàn)象。（一）對宿主細胞的直接損傷29體外培養(yǎng)細胞受病毒感染之后產(chǎn)生的CPE302.穩(wěn)定狀態(tài)感染

某些病毒進入細胞之后以“出芽”方式釋放子代病毒，不引起細胞立即裂解、死亡，常見于有包膜病毒，如單純皰疹病毒、腦炎病毒、麻疹病毒等。感染宿主細胞后出現(xiàn)：多核巨細胞或融合細胞313.基因整合與細胞轉(zhuǎn)化

某些DNA病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒在感染中可將基因整合于宿主細胞基因組中，導致細胞轉(zhuǎn)化，增殖變快，失去細胞間接觸抑制，細胞轉(zhuǎn)化也可由病毒蛋白誘導發(fā)生。細胞轉(zhuǎn)化與腫瘤形成密切相關(guān)。324.細胞凋亡（Apoptosis）病毒本身或病毒編碼蛋白誘發(fā)宿主細胞發(fā)生的程序性死亡。

感染早期的凋亡：感染流產(chǎn)感染晚期的凋亡：促進感染擴散33（二）病毒感染的免疫病理作用

抗體介導的免疫病理作用

細胞介導的免疫病理作用致炎性細胞因子的病理作用

免疫抑制作用34（三）病毒的免疫逃逸（Viralmechanismsofescapeofimmuneresponses）反映病毒毒力的另一重要因素。病毒通過逃避免疫監(jiān)視、防止免疫激活或阻止免疫反應發(fā)生等方式來逃脫免疫應答。35

免疫逃逸機制作用方式細胞內(nèi)寄生逃避抗體、補體及藥物作用抗原變異病毒高頻率的抗原變異使得免疫應答滯后抗原結(jié)構(gòu)復雜病毒型別多，抗原多態(tài)性致使免疫應答不利損傷免疫細胞病毒可在T或B細胞內(nèi)寄生并導致宿主細胞死亡降低抗原表達病毒可抑制MHC-Ⅰ轉(zhuǎn)錄、表達

病毒的免疫增強作用病毒再次感染時，因機體內(nèi)預先存在或經(jīng)胎盤獲得中和抗體能促進游離的病毒進入單核細胞內(nèi)，并大量增殖，導致病毒血癥及病毒-抗體復合物形成，繼之大量細胞因子及血管活性因子釋放36

非特異性免疫

干擾素

NK細胞特異性免疫

體液免疫

病毒中和抗體

血凝抑制抗體

補體結(jié)合抗體

細胞免疫

細胞毒性T細胞

CD4+Th1三、抗病毒免疫37（一）非特異性天然免疫1.干擾素（interferon，IFN）概念：由病毒或其它誘生劑誘發(fā)人或動物機體巨噬細胞、淋巴細胞以及體細胞等多種細胞所產(chǎn)生的一組具有抑制病毒、抑制腫瘤和免疫調(diào)節(jié)作用的蛋白質(zhì)。38天然干擾素α、β、γ三型的特性比較型別誘生劑產(chǎn)生細胞類型作用IFN-α病毒主要為白細胞I型

抗病毒IFN-β有機聚合物主要為成纖維細胞I型抗病毒IFN-γT細胞促分裂劑，抗原主要為致敏淋巴細胞II型免疫調(diào)節(jié)39干擾素抗病毒的作用機制

抗病毒蛋白（AVP,antiviralprotein）主要的兩種AVP，活化均依賴dsRNA腺苷合成酶降解mRNA蛋白激酶R(PKR）抑制蛋白合成40

基因工程生產(chǎn)的干擾素稱為重組干擾素，具有與天然干擾素相同的抗原性，目前已經(jīng)用于臨床上治療病毒性疾病和腫瘤。41（二）特異性免疫體液免疫的保護作用細胞免疫的保護作用42第三節(jié)病毒感染的檢查方法與防治原則43一、病毒感染的檢查方法標本采集查病毒

查特異性抗體

病毒顆粒

病毒抗原

病毒核酸

病毒酶類：如逆轉(zhuǎn)錄酶

電鏡直接觀察光鏡檢查包涵體

分離培養(yǎng)

44（一）病毒的分離培養(yǎng)與鑒定1、標本的采集與送檢

（1）

時間：急性期標本（2）部位：根據(jù)不同病毒的感染選擇部位（3）標本處理及運送：加抗生素抑菌；冷藏速送；雙份血清的采集452、病毒的分離培養(yǎng)

細胞培養(yǎng)（cell

culture）

雞胚接種（egginoculation）

動物接種（animalinoculation）46

細胞培養(yǎng)原代和次代細胞：

對多種病毒敏感，生長能力有限,獲取成本高，可攜帶潛伏病毒二倍體細胞：對多種病毒敏感，無致瘤潛能，可傳50代左右，用于疫苗生產(chǎn)。傳代細胞系：

對多種病毒敏感性高，繁殖能力高，傳代時間長，有致癌危險，不能用于疫苗生產(chǎn)47細胞培養(yǎng)是目前分離病毒的主要方法4849

雞胚培養(yǎng)指標陽性指標陰性

病毒鑒定

盲傳2～3代指標陰性病毒陰性50痘苗病毒、人類皰疹病毒嗜神經(jīng)病毒流感病毒的初次分離絨毛尿囊膜接種尿囊腔接種流感病毒，腮腺炎病毒5152病毒增殖，雞胚發(fā)生異常變化或羊水、尿囊液出現(xiàn)紅細胞凝集現(xiàn)象53動物接種

應用：尚無敏感細胞的病毒培養(yǎng)動物：兔、鼠、黑猩猩、猴等優(yōu)點：結(jié)果易觀察，可建立動物模型缺點：有飼養(yǎng)條件要求，費用高，動物體內(nèi)常帶有潛伏病毒54乳鼠腦內(nèi)接種方法55細胞吸附：血凝試驗、血凝抑制試驗細胞代謝改變：培養(yǎng)液pH變化3.病毒在細胞內(nèi)增殖的指征

細胞的變化：細胞病變效應(CPE)

（1）細胞病變效應(CPE)有些病毒在細胞內(nèi)增殖可引起特有的細胞病變，稱為細胞病變效應(CPE)。常見的變化有細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落。多核巨細胞；包涵體。56腮腺炎病毒感染細胞

（2）紅細胞吸附（hemadsorption）流感或副流感病毒等感染細胞后，由于細胞膜上出現(xiàn)了血凝素(haemagglutinin,HA)，具有吸附脊椎動物(豚鼠、雞、猴等)紅細胞的能力，這一現(xiàn)象稱紅細胞吸附（血凝試驗）。若有相應的抗血清，則能中和細胞膜上的HA，細胞吸附現(xiàn)象不再發(fā)生，稱紅細胞吸附抑制試驗（血凝抑制試驗）。57若標本經(jīng)過適當稀釋進行接種并輔以染色處理，病毒可在培養(yǎng)的細胞單層上形成肉眼可見的局部病損區(qū)域，即蝕斑（plaque）或稱空斑。（3）空斑形成試驗5859（二）病毒的快速診斷1.形態(tài)學檢查電鏡和免疫電鏡檢查病毒

普通光學顯微鏡檢查包涵體HIV狂犬病病毒包涵體60包涵體（inclusionbody）：有些病毒感染細胞，在普通顯微鏡下觀察到胞漿或胞核內(nèi)出現(xiàn)嗜酸性或嗜堿性的圓形、橢圓形不規(guī)則的斑塊結(jié)構(gòu)稱為～。病毒包涵體由病毒顆粒聚集體、裝配剩余的病毒成分、病毒感染導致的細胞反應物組成。包涵體的酸堿性及其在細胞內(nèi)的位置會因病毒種類的不同而異，因此可作為病毒感染的診斷依據(jù)。61免疫熒光和免疫組化技術(shù)酶聯(lián)免疫法(ELISA)Western印跡實驗2.標本中病毒抗原的檢測62免疫熒光技術(shù)633.病毒特異性抗體的檢測中和試驗血凝抑制試驗補體結(jié)合實驗間接血凝實驗ELISA64（1）中和試驗（neutralizingtest）病毒＋中和抗體病毒失去感染性

特點：特異性高，抗體維持時間長應用：人群免疫情況的調(diào)查臨床診斷少用65（2）血凝抑制試驗

病毒＋雞紅細胞＝凝集（血凝試驗）

病毒＋特異性抗體＋雞紅細胞＝不凝集

（血凝抑制試驗）

66（3）補體結(jié)合試驗

（complementfixationtest）

用已知病毒可溶性補體抗原檢測病人血清中相應的補體抗體

特點：特異性低，抗體出現(xiàn)早，消失快

應用：近期感染指標674.病毒核酸的檢測

核酸擴增技術(shù)核酸雜交技術(shù)基因芯片技術(shù)

基因測序68二、病毒感染的治療6970核苷類藥物作用機制

HSV/VZV

無環(huán)鳥苷（NA）病毒胸苷激酶NA一磷酸宿主細胞激酶

NA三磷酸

（缺乏糖環(huán)3’-OH基）病毒DNA聚合酶核酸鏈延伸被迫終止71成藥的大青葉和大青葉植株（二）中草藥7273

微生物及其代謝產(chǎn)物生物制品動物免疫血清（biologicalproducts）

免疫細胞細胞因子

防治和診斷感染性疾病三、病毒感染的特異性預防74（一）人工主動免疫滅活疫苗、減毒活疫苗亞單位疫苗、基因工程疫苗（二）人工被動免疫免疫血