造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座培訓(xùn)課件

造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座本章主要內(nèi)容：造血檢驗(yàn)的基本方法血象和骨髓像檢驗(yàn)

骨髓檢查的步驟與方法

有核細(xì)胞增生程度、分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)及粒紅比例細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)

常用的細(xì)胞化學(xué)染色及臨床應(yīng)用（POX、NAE、NAP、Fe、PAS）骨髓組織病理學(xué)檢驗(yàn)血細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)檢驗(yàn)造血檢驗(yàn)的臨床應(yīng)用其他自學(xué)

2造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座三、骨髓象檢驗(yàn)

普通顯微鏡檢查診斷：主要是血液疾病

內(nèi)容：

常規(guī)檢驗(yàn)特殊檢驗(yàn)3造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座三、骨髓象檢驗(yàn)

㈠臨床應(yīng)用

1．適應(yīng)癥血細(xì)胞減少或增多。各種急慢性白血病。各種類型的貧血。4造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座

不明原因的骨痛、骨質(zhì)破壞、腎功能異常、黃疸、紫癜；不明原因的長(zhǎng)期發(fā)熱，肝、脾、淋巴結(jié)腫大；出血；惡性血液病化療的療效觀察；5造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座禁忌癥：血友病、晚期妊娠6造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座主要作用：

輔助診斷（肯定性、支持性、可疑性、排除性診斷）

療效的觀察（完全緩解、部分緩解、未緩解）7造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座（二）骨髓穿刺

穿刺部位髂后上棘：第五腰椎向上3cm處。髂前上棘：頂端后約1-2cm處。胸骨：胸骨中線，相當(dāng)?shù)诙唛g水平的胸骨體上端。小于3歲的小兒選擇脛骨內(nèi)側(cè)8造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座標(biāo)本的采集骨髓取材的部位和方法部位：胸骨、棘突、髂骨等處方法：多用穿刺法吸取9造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座骨髓取材情況的判斷

⑴取材滿意：

①抽吸骨髓時(shí)病人有特殊的痛感；②骨髓液和涂片均有骨髓小粒和脂肪滴；③顯微鏡觀察涂片

骨髓特有細(xì)胞如：

巨核細(xì)胞、漿細(xì)胞、組織嗜堿細(xì)胞、成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞、網(wǎng)狀細(xì)胞、網(wǎng)狀纖維等。10造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座④細(xì)胞比值骨髓中性粒細(xì)胞桿狀核與分葉核＞外周血中性粒細(xì)胞桿狀核與分葉核骨髓有核細(xì)胞＞外周血有核細(xì)胞11造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座

二、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的

內(nèi)容與方法

一、骨髓涂片檢查低倍鏡檢查油鏡檢查檢查結(jié)果的臨床意義血涂片的觀察填寫檢查報(bào)告單12造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座1、低倍鏡檢查：（1）觀察骨髓涂片:

取材：骨髓小粒、脂肪小滴制片：厚薄，頭、體、尾分布染色：細(xì)胞著色情況13造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座取材、制片、染色14造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座2.判斷骨髓增生程度骨髓細(xì)胞增生分級(jí)(五級(jí))增生極度活躍增生明顯活躍增生活躍增生減低增生明顯減低15造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座骨髓增生程度分級(jí)(高倍鏡）極度減低1~5/HP增生減低5~20/HP增生活躍20~50/HP明顯活躍50~100/HP極度活躍>100/HP16造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座（二）、油鏡檢查：

（1）有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：

計(jì)數(shù)200-500個(gè)有核細(xì)胞，計(jì)算各系統(tǒng)各階段細(xì)胞百分率。（巨核細(xì)胞單獨(dú)計(jì)數(shù)）（2）計(jì)數(shù)粒紅比例（G∶E）（3）觀察細(xì)胞形態(tài)有無異常（4）觀察有無其他特殊細(xì)胞及寄生蟲。17造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座二、血象檢驗(yàn)：

1.低倍鏡檢查：（1）涂片、染色情況；（2）有無大的異常細(xì)胞；（3）寄生蟲；

18造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座2.油鏡檢查：

（1）分類計(jì)數(shù)100個(gè)WBC

（注意形態(tài)及有無異常細(xì)胞）；（2）注意成熟紅細(xì)胞的形態(tài)（如有幼稚紅細(xì)胞應(yīng)在計(jì)數(shù)100個(gè)WBC中記錄幼稚紅細(xì)胞的數(shù)目及其階段）；（3）粗略估計(jì)血小板數(shù)目或形態(tài);

（4）有無寄生蟲。19造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座血片檢查的重要性

1.不同疾病時(shí)，骨髓象相似而血象有區(qū)別

2.不同疾病時(shí)，骨髓象有區(qū)別而血象相似（傳淋和慢淋）

3.同一患者骨髓象變化不顯著，血象有異常（傳單）

4.同一患者骨髓象異常，血象無變化（MM）

5.骨髓象難辨認(rèn)，血象易辨認(rèn)20造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座細(xì)胞化學(xué)結(jié)果報(bào)告細(xì)胞化學(xué)結(jié)果（專門講述）21造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座填寫骨髓報(bào)告或打印骨髓報(bào)告保存好骨髓與血液片22造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座診斷意見綜合骨髓象、血象和細(xì)胞化學(xué)所見意見：肯定性診斷-----

各種白血病、巨幼細(xì)胞性貧血、MM、骨髓轉(zhuǎn)移癌、戈謝病、尼曼-匹克病等支持性診斷-----

缺鐵性貧血、再障、溶貧等可建議作相應(yīng)檢查

23造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座可疑性診斷--

難治性貧血等排除性診斷--ITP、類白血病形態(tài)學(xué)描寫--

骨髓象有改變，但提不出診斷性意見，建議動(dòng)態(tài)觀察對(duì)比意見---

幾次骨穿結(jié)果對(duì)比診斷意見24造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座骨髓象檢查的注意事項(xiàng)

正確認(rèn)識(shí)細(xì)胞是骨髓象檢查的前提，檢查者必須反復(fù)實(shí)踐，積累經(jīng)驗(yàn)，需經(jīng)較長(zhǎng)時(shí)間的鍛煉才能熟練掌握。不要根據(jù)一兩個(gè)特點(diǎn)就做出肯定或否定的判斷。寧可看得仔細(xì)而少看，不可貪多而馬虎25造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座

正常骨髓象報(bào)告：

1)增生活躍

2)粒紅比值正常（G∶E2～4：1）

3)粒系增生良好：

a.占有核細(xì)胞的40～60%；

b.各階段細(xì)胞比例適當(dāng)；

c.細(xì)胞形態(tài)無明顯異常。26造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座粒細(xì)胞各階段比例：

原粒<2%，早幼粒<5%，中性中幼粒約8%，嗜酸中幼粒約<1%；中性晚幼粒約10%，嗜酸晚幼粒<2%

桿狀核約20%，嗜酸桿狀核<3%，中性分葉核約12%，嗜酸分葉核<5%，嗜堿性中幼粒、晚幼粒細(xì)胞罕見，

桿狀核、分葉核<1%27造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座

4)

紅系增生良好：

a.占有核細(xì)胞的20-25%左右

b.各階段比例適當(dāng)；

原紅細(xì)胞<1%，

早幼紅細(xì)胞<5%，以中、晚幼紅細(xì)胞為主，各占10%；

c．形態(tài)無明顯異常或紅細(xì)胞形態(tài)大致正常。28造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座

5)淋巴細(xì)胞系統(tǒng)占20-25%；

（主要是成熟細(xì)胞）

6）單核細(xì)胞系統(tǒng)<4%

（主要是成熟細(xì)胞）

7）漿細(xì)胞系統(tǒng)<2%

（主要是成熟細(xì)胞）29造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座

7)巨核細(xì)胞

a.數(shù)量/全片：7-35個(gè)；

(1.5cm×3.0cm)

b.各階段情況正常；原巨核細(xì)胞不見或偶見，

幼巨核細(xì)胞0-5%，

顆粒巨核細(xì)胞10-27%，

產(chǎn)血小板巨核細(xì)胞44-60%，

裸核

8-30%，

血小板易見、成堆狀存在，形態(tài)正常。

30造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座

8)其他細(xì)胞:

組織細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、肥大細(xì)胞、網(wǎng)狀細(xì)胞及組織嗜堿細(xì)胞等歐間，未見異常。

9)無特殊細(xì)胞及寄生蟲。31造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座四、骨髓象分析

有核細(xì)胞增生程度

極度活躍：反映骨髓造血功能亢進(jìn)（白血?。┟黠@活躍：反映骨髓造血功能旺盛（貧血）

增生活躍：反映骨髓造血功能基本正常

（正常骨髓象）增生低下：反映骨髓造血功能減低（AA）增生重度低下：反映骨髓造血功能衰竭（重型AA）。32造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座血細(xì)胞數(shù)量改變

1、粒/紅比值⑴粒/紅比值增加：

>5：1，CML，感染⑵粒/紅比值正常：

2-4：1，兩系成比例增加或減少⑶粒/紅比值減少：

<2：1，粒系減少,紅系增加，增生貧血33造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座

粒細(xì)胞數(shù)量改變

1）粒系細(xì)胞增多原粒增多：M1、M2a、M4、CML（急變）早幼粒增多：M3，粒細(xì)胞缺乏，感染中幼粒增多：M2b，，CML，類白晚幼粒，桿狀核為主：CML、感染等。34造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座

嗜酸粒細(xì)胞增多：

變態(tài)反應(yīng)，寄生蟲，嗜酸粒細(xì)胞白血病，CML；

嗜堿粒細(xì)胞增多：嗜堿粒細(xì)胞白血病，CML等

粒細(xì)胞減少粒細(xì)胞缺乏癥、AA、急性造血停滯等35造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座

紅系細(xì)胞數(shù)量改變

紅系細(xì)胞增多

原紅及早幼紅增多：紅血病，M6

中紅及晚幼紅增多：增生性貧血（溶貧，缺鐵貧等）巨幼紅/巨幼樣變?cè)龆啵壕抻棕殹⒓t白血病、MDS等鐵粒幼紅細(xì)胞增多:

鐵粒幼紅細(xì)胞貧血、MDS36造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座巨核細(xì)胞數(shù)量改變

巨核細(xì)胞增多增殖性疾病、M7、ITP、脾亢

巨核細(xì)胞減少

AA、AML37造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座淋巴系細(xì)胞數(shù)量改變

原幼淋增多：

ALL、慢粒急變、淋巴瘤白血病等；

成熟淋巴細(xì)胞增多：

CLL、淋巴瘤白血病、再障、淋巴細(xì)胞性類白血病、傳淋、傳單等

38造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座單核細(xì)胞改變

原、幼單核細(xì)胞為主：急單，慢單急變、粒-單白血病等

成熟單核細(xì)胞為主：慢單、慢性粒--單細(xì)胞白血病、CML

39造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座其他細(xì)胞改變

漿細(xì)胞增多：惡性增多：漿白，MM等良性增多：AA，感染等

組織細(xì)胞增多：惡性增多：惡組，MM

良性增多：感染性疾病40造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座（三）、血細(xì)胞形態(tài)的改變

1.胞體異常大小異常：巨變，幼紅，小原粒形態(tài)異常：不規(guī)則，多形性，偽足狀突起成熟紅細(xì)胞橢圓形，口形，球形，淚滴形，靶形。41造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座成熟紅細(xì)胞的形態(tài)異常42造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座2.胞核異常

數(shù)目：雙核和多核形態(tài)異常：不規(guī)則形，凹陷，切跡，折疊，扭曲。核染色質(zhì)核仁異常異常核分裂43造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座3.胞質(zhì)量異常：增多或減少內(nèi)容物異常：Auer，中毒性顆粒，空泡變化著色異常：多嗜性紅細(xì)胞顆粒異常：增多或減少內(nèi)外質(zhì)異常：發(fā)育不平衡44造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座本節(jié)小結(jié)骨髓細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征；骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的步驟與方法；骨髓細(xì)胞的增生程度、粒紅比值；正常骨髓的特征；45造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座第二節(jié)、血細(xì)胞的細(xì)胞化學(xué)染色定義：血細(xì)胞化學(xué)染色是以形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，根據(jù)化學(xué)反應(yīng)原理,將骨髓片染色,觀察單個(gè)細(xì)胞內(nèi)在的生化特性，了解它們的代謝活動(dòng)，生理功能和病理變化.鑒別各種類型血液細(xì)胞46造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座（一）過氧化物酶染色

(Peroxidase,POX)）

[原理]

H2O2細(xì)胞內(nèi)

POX[O]↑

聯(lián)苯胺[O]聯(lián)苯胺藍(lán)+

亞硝基氰化鈉暗藍(lán)色顆粒(定位于胞漿內(nèi))

[結(jié)果]

粒系：強(qiáng)陽性單核系：弱陽性淋巴系：陰性

[臨床意義]

鑒別急粒和急淋47造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座（二）蘇丹黑B染色

(Sudanblack,SB)

[原理]

蘇丹黑B（脂溶性染料）細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含脂結(jié)構(gòu)

棕黑色或深黑色

[結(jié)果]

粒細(xì)胞系統(tǒng)：陽性（黑色粗大）單核細(xì)胞系統(tǒng)：陽性（黑色細(xì)小）其他細(xì)胞：陰性48造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座[臨床意義]

大致同POX;可用陳舊骨髓片49造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座（三）中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色

（neutrophilalkalinephosphataseNAP）

（偶氮偶聯(lián)法）

[原理]

磷酸萘酚鈉NAP萘酚+重氮鹽偶聯(lián)

PH9.6

（亮紅色沉著于胞漿中）

[結(jié)果]NAP主要存在于成熟中性粒細(xì)胞，其他血細(xì)胞均呈陰性反應(yīng)。50造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色

（neutrophilalkalinephosphataseNAP）

（鈣鈷法）

[原理]β-甘油磷酸鈉NAP甘油+磷酸鈉

NaHPO4+Ca（NO3)2+（NH4）

SCO↓

棕黑色（沉著于胞漿中

[結(jié)果]NAP主要存在于成熟中性粒細(xì)胞，其他血細(xì)胞均呈陰性反應(yīng)。51造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座1、胞漿中出現(xiàn)灰色到棕黑色沉淀者為陽性。2、反應(yīng)強(qiáng)度分為五級(jí)：

-++++++++++

淡紅淡灰灰黑淺棕黑深棕黑色3、百分率：計(jì)數(shù)100個(gè)成熟中性粒細(xì)胞，計(jì)算陽性率。4、積分法：計(jì)數(shù)100個(gè)成熟粒細(xì)胞，按反應(yīng)強(qiáng)度作出分級(jí)，將其百分率乘以級(jí)數(shù)，然后相加。52造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座53造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座54造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座類白血病反應(yīng)慢粒白血病反應(yīng)55造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座[參考值]

正常：百分率10-40%，

積分40-80分[臨床意義]1.區(qū)別CML

、類白血病反應(yīng)↓積分為0;↑積分>200分

2.急粒積分↓;急淋積分↑;急單N或↓

3.AA時(shí)↑PNH↓4.化膿性感染↑病毒性感染時(shí)↓56造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座慢性粒細(xì)胞性白血病

Chronicmyeloidleukemia57造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座慢粒陰性58造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座（四）、酸性磷酸酶

（acidphoshataseACP)原理：硫化鉛和偶帶偶聯(lián)法結(jié)果：胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黑色顆粒者為陽性（硫化鉛）

胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)亮紅色顆粒者為陽性（偶氮偶聯(lián)法）

59造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座臨床意義

鑒別多毛細(xì)胞白血病，不被L-酒石酸所抑制60造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座鑒別T細(xì)胞白血病與B細(xì)胞白血病陽性陰性鑒別Gaucher病與Nienann-Pick病陽性陰性61造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座（五）、氯醋酸AS-D萘酯酶染色

naphytholAS-Dchloroacetateesterase,AS-DNCE原理：

氯醋酸AS-D萘酚AS-DNCEAS-D萘酚

H2O不溶性紅色沉淀+堅(jiān)牢醬紫62造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座結(jié)果63造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座臨床評(píng)價(jià)

急性白血病的鑒別：1.急性粒白血病M31+～2+2+～3+2.急性單核細(xì)胞白血病原、幼單核細(xì)胞---陰性3.急性淋巴細(xì)胞白血病原、幼淋細(xì)胞----陰性

64造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座（六）α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)

(α-naphythyolacetateesterase）α-醋酸萘酚α–NAEα-萘酚+重氮鹽（堅(jiān)牢藍(lán)B）

棕黑或灰黑色（胞槳中）65造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座臨床評(píng)價(jià)鑒別白血病類型；同時(shí)必須做NaF抑制試驗(yàn)急性粒細(xì)胞白血病

---

原粒細(xì)胞弱陽性，不被NaF抑制；急性單核細(xì)胞白血病---

原單核細(xì)胞陽性，被NaF抑制；66造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座結(jié)果判斷陽性：胞槳中出現(xiàn)棕黑、灰黑色顆粒沉淀67造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座急性單核細(xì)胞白血病

acutemonocyticleukemia

68造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座非特異性酯酶+NaF69造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座（七）糖原染色（過碘酸-雪夫反應(yīng)）

(periodicacid–Schiff,PAS)【原理】

過碘酸細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化雙醛基+無色品紅（雪夫堿）紫紅色沉淀70造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座結(jié)果判斷

陽性：胞質(zhì)中紅色顆粒或彌漫狀物質(zhì)71造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座淋巴細(xì)胞判斷0無色1+一圈PAS顆粒2+兩圈PAS顆粒3+三圈PAS顆粒4+紅色大團(tuán)塊72造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座（八）、鐵染色原理：

4Fe3++3K4「Fe(CN)6」含鐵物質(zhì)亞鐵氰化鉀

Fe4「Fe(CN)6」3+12K+

亞鐵氰化鐵74造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座結(jié)果判斷細(xì)胞外鐵：存在于骨髓小粒的巨噬細(xì)胞中的藍(lán)色顆粒細(xì)胞內(nèi)鐵：存在于有核紅和成熟紅細(xì)胞內(nèi)的鐵；

75造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座細(xì)胞外鐵76造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座第三節(jié)、骨髓活檢觀察結(jié)構(gòu)和空間定位77造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座骨髓活檢的適應(yīng)癥骨髓穿刺失敗全血細(xì)胞減少白血病療效觀察78造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座臨床評(píng)價(jià)

血液病診斷金標(biāo)準(zhǔn)：骨髓活檢與穿刺涂片聯(lián)合檢測(cè)79造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座血細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)檢驗(yàn)定義：在電子顯微鏡下結(jié)合各種超微結(jié)構(gòu)技術(shù)，如酶細(xì)胞化學(xué)、放射自顯影和X光衍射等，所觀察到的血細(xì)胞微細(xì)結(jié)構(gòu)。80造血檢驗(yàn)專題知識(shí)講座第六節(jié)血細(xì)胞染色體技術(shù)在血液病領(lǐng)域廣泛應(yīng)用（1960年P(guān)h小體）81造血檢驗(yàn)專題