細(xì)胞生物學(xué)課程實驗教學(xué)大綱

細(xì)胞生物學(xué)課程實驗教學(xué)大綱課程代碼：z1201007

課程性質(zhì)：專業(yè)主干課課程名稱：細(xì)胞生物學(xué)英文名稱：CellBiology適用專業(yè)：生物科學(xué)、生物技術(shù)開設(shè)學(xué)期：第4學(xué)期實驗學(xué)時/總學(xué)時：24/64

實驗學(xué)分/總學(xué)分：1.5/4

一、課程實驗內(nèi)容簡介細(xì)胞生物學(xué)是生物科學(xué)專業(yè)的一門重要的必修專業(yè)主干課程，在生命學(xué)科的本科教學(xué)中有著十分重要的地位，該課程實驗為細(xì)胞生物學(xué)理論教學(xué)提供重要支持。實驗課程涉及特殊顯微鏡的使用、細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察、細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞生理、細(xì)胞融合等內(nèi)容，是為了強(qiáng)化實驗教學(xué)效果，提高學(xué)生的實驗動手能力而設(shè)置的一門重要的的生物實驗課程。二、實驗?zāi)康?、實驗方式及學(xué)生應(yīng)掌握的實驗技術(shù)及基本技能通過細(xì)胞生物學(xué)實驗課不僅加深對理論知識的理解和認(rèn)證，而且通過對細(xì)胞生命現(xiàn)象的觀察和親手操作，使學(xué)生獲得有關(guān)細(xì)胞生命活動的感性知識，有效地提高理論課的教學(xué)效果，并培養(yǎng)學(xué)生樹立獨(dú)立設(shè)計實驗的思考觀念和獨(dú)立處理問題、解決問題的能力，為以后從事生物學(xué)相關(guān)的科研和教學(xué)工作奠定堅實的研究基礎(chǔ)。1、熟悉并掌握細(xì)胞活體染色的方法及意義，了解光學(xué)顯微鏡下線粒體及液泡系的基本形態(tài)和結(jié)構(gòu),

掌握臨時裝片和細(xì)胞記數(shù)的技術(shù)和顯微鏡的使用方法。2、掌握原位顯示細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成分方法。熟悉細(xì)胞內(nèi)DNA、多糖的分布。3、掌握微絲的結(jié)構(gòu)及染色方法，了解光學(xué)顯微鏡下的微絲的形態(tài)。4、掌握細(xì)胞組分分級分離的原理和方法。熟悉勻漿器和冷凍離心機(jī)的使用。掌握細(xì)胞核與線粒體的分級分離方法。5、熟悉并理解細(xì)胞吞噬、細(xì)胞膜選擇通透性等基本生理活動。6、初步掌握聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)細(xì)胞融合原理及技術(shù)。熟悉熒光顯微鏡的使用。7、初步了解細(xì)胞培養(yǎng)的技術(shù)原理、方法。熟悉超凈工作臺、二氧化碳培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡的使用。本實驗課以技能訓(xùn)練為主。要求學(xué)生實驗課前認(rèn)真預(yù)習(xí)實驗指導(dǎo)書，理解實驗原理及實驗方案，在實驗過程中認(rèn)真操作，作好實驗記錄，實驗結(jié)束后詳細(xì)整理、分析實驗結(jié)果，寫出規(guī)范的實驗報告。指導(dǎo)教師概述實驗原理和方法及儀器使用等，并作針對性指導(dǎo)，具體實驗步驟由學(xué)生自行完成。二、實驗項目序號實驗項目名稱內(nèi)容提要實驗學(xué)時儀器套數(shù)每套人數(shù)實驗屬性開出要求1動植物細(xì)胞基本形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察及活體染色細(xì)胞的基本形態(tài)觀察；人血涂片、人口腔上皮細(xì)胞的制備與觀察；植物細(xì)胞液泡、線粒體的活體染色與觀察；顯微測微尺的使用。3202驗證型必做2DNA的Feulgen染色法和PAS反應(yīng)法顯示多糖臨時裝片與徒手切片操作；觀察洋蔥內(nèi)表皮細(xì)胞Feulgen染色后DNA的形態(tài)、分布；通過PAS反應(yīng)顯示土豆細(xì)胞中的多糖。4202驗證型必做3細(xì)胞核與線粒體的分級分離及觀察組織勻漿的方法；離心機(jī)的使用；細(xì)胞器的分離原理差速離心與密度梯度離心3202驗證型必做4細(xì)胞凝聚反應(yīng)、紅細(xì)胞膜通透性的觀察及死活細(xì)胞鑒別土豆凝集素制備與細(xì)胞凝集原理。研究不同因素對血紅細(xì)胞膜通透性的影響；

5202設(shè)計型必做5植物細(xì)胞骨架的光學(xué)顯微鏡觀察及細(xì)胞顯微測量掌握考馬斯亮藍(lán)R250染細(xì)胞胞質(zhì)微絲的操作方法。4202驗證型必做6植物原生質(zhì)體的分離與融合血細(xì)胞計數(shù)板的使用；利用PEG（聚乙二醇）、電場誘導(dǎo)細(xì)胞融合；計算細(xì)胞融合率。5252綜合型必做7細(xì)胞計數(shù)及活力測定掌握細(xì)胞計數(shù)的方法。了解區(qū)分細(xì)胞存活狀態(tài)的方法3252驗證型必做8小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬活動通過觀察小鼠巨噬細(xì)胞吞噬紅細(xì)胞的實驗，了解巨噬細(xì)胞對異物吞噬的原理和功能。了解吞噬在機(jī)體非特異免疫中的重要作用3202驗證型選做9動物細(xì)胞原代培養(yǎng)了解原代細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法和操作過程。熟悉原代培養(yǎng)細(xì)胞觀察方法。5202綜合型選做四、實驗所需重要儀器設(shè)備及臺（套）數(shù)雙目顯微鏡（25臺）、顯微鏡測微尺（25套）、細(xì)胞計數(shù)板（25套）、電熱恒溫培養(yǎng)箱（1臺）、電子天平（2臺）、高速冷凍離心機(jī)（2臺）、低速離心機(jī)（2臺）、水平離心機(jī)（2臺）、電動玻璃勻漿機(jī)（4臺）、微量移液器（5套）、恒溫磁力攪拌器（2臺）、解剖器（25套）、冰箱（1臺）、酸度計（2個）、熒光顯微鏡（1臺）、電子天平、電融合儀（2臺）、高壓滅菌鍋（2臺）、細(xì)菌過濾器（10套）、紫外可見分光光度計（2臺）、CO2培養(yǎng)箱（2臺）、倒置顯微鏡（1臺）、超凈工作臺（1臺）、恒溫水浴箱（2臺）、液氮罐（1個）。五、實驗成績評定方法1．教師根據(jù)每個學(xué)生實驗預(yù)習(xí)情況、實驗完成情況、實驗報告等方面進(jìn)行綜合評分，并將成績記錄在冊。實驗操作：50%實驗報告（含實驗結(jié)果）：50%2．將實驗成績以占課程總成績20%的比例納入課程的總成績。六、參考資料1．實驗教材：《細(xì)胞生物學(xué)實驗教程》，安利國邢維賢主編，高等教育出版社，2010，第2版2．參考書：《細(xì)胞生物學(xué)實驗》，翟中和，王喜忠，丁明孝.北京，高等教育出版社,2000《