cesi8000plus在疾病相關(guān)研究領(lǐng)域論證報(bào)告

CESI8000Plus簡(jiǎn)CESI8000Plus高效毛細(xì)管電泳分離與電噴霧離子化系統(tǒng)，是將具有高分離效率的毛細(xì)管電泳技術(shù)和高分辨能力的質(zhì)譜技術(shù)整合在一起聯(lián)用的分析平臺(tái)。CESI8000Plus不僅管電泳技術(shù)在極性物質(zhì)分離中的優(yōu)勢(shì)，有效的應(yīng)用于在疾相關(guān)研究中。毛細(xì)管泳技術(shù)（CE）及其在疾病相關(guān)研究中的優(yōu)

用的特點(diǎn)，成為目與液相色譜一樣，毛細(xì)管電泳可以用于各種化學(xué)和生物分析的分析，而毛細(xì)管電泳的分析范圍更為廣泛，從無(wú)機(jī)離子/有機(jī)酸，天然產(chǎn)物，酶，核酸到顆粒、細(xì)菌都可以進(jìn)行分離分析。和對(duì)比正常人和患者的血、尿蛋白組/多肽組來(lái)實(shí)現(xiàn)的。常用的方法有2D、HPLC/MS和CE/MS等。然而2D方法需復(fù)雜的人工操作及染色過(guò)程，并且無(wú)法對(duì)分子量較小的多肽進(jìn)行分離；HPLC/MS方法分析時(shí)間長(zhǎng)，分離效率低，對(duì)親水性的蛋白和多肽很難分離，另外色譜柱極容易被復(fù)雜的生物樣品污染，柱的使用縮短，對(duì)樣品毛細(xì)管電泳在蛋白質(zhì)和多肽方面具有相當(dāng)大的優(yōu)勢(shì)，凝膠電泳相比，毛細(xì)管電泳的蛋白分子量確定會(huì)更加準(zhǔn)確，蛋白/多肽的等電點(diǎn)確定可以精確到0.01pH確的等電點(diǎn)確定方法。此外，毛細(xì)管電泳在肽、蛋白和糖白的鑒別；蛋白的結(jié)構(gòu)分析，析的最佳，也是蛋白糖基化研究的有效。

1)得到4000多種多肽或蛋白。血、尿中的蛋白和多肽大多數(shù)是親水性的，毛細(xì)管電泳方法對(duì)水溶性和極性物質(zhì)的分離效果更好，而色譜的方法對(duì)水溶性及極性成分的分離是很的，毛細(xì)管電泳是更適合的分析；

分析速度快，毛細(xì)管電泳的分析時(shí)間通常是10-

清潔的分析方法，毛細(xì)管電泳分析中很少用到甲醇/乙腈等試劑，對(duì)儀器操作毛細(xì)管泳技術(shù)（CE）檢測(cè)的標(biāo)志物血紅蛋白蛋白A1、Alc和其他異構(gòu)體，對(duì)的具有指導(dǎo)價(jià)值。采用毛細(xì)管電泳方法一個(gè)樣品糖化血紅蛋白的分析過(guò)程僅需要4分鐘，速度非?？?，而且上樣、分離及數(shù)據(jù)分析均為自動(dòng)處理。毛細(xì)管電泳的方法和ESI-MS由于對(duì)HbA1C的定量準(zhǔn)確，所以被FICC定為糖化血紅蛋白測(cè)定的基準(zhǔn)方法。通常來(lái)說(shuō)，采用毛細(xì)管電泳方法測(cè)定血紅蛋白50ul的全血加150ul的蘋(píng)果酸溶液即可以上樣分析。HbA1cRBC內(nèi)葡萄糖有關(guān),6～8周體內(nèi)葡萄糖水平。此外,HbF增高所造成HbA1c假性升高作出解釋。在酸性條件下電泳,HbA1a,HbA1bHbA1c下圖為采用貝克曼庫(kù)爾特公司的全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀P/ACEMDQHbA1

is 應(yīng)用毛細(xì)管電泳法鑒別患者血液中Hb的類(lèi)型及含量對(duì)于貧血類(lèi)型的臨床診斷及治療具有重大意義。HbA2β2輕型地中海貧血的一個(gè)重要特征,HbA2減低見(jiàn)于缺鐵性貧血及其他Hb合成性疾病(常見(jiàn)如α2地中海貧血)。電泳發(fā)現(xiàn)異常Hb如HbC、HbD、HbE、HbKHbSHb分子病。在堿性條件下電泳,HbA2,HbAF等分離開(kāi)來(lái)，下圖為P/ACEMDQ及isHbA2試 目前核酸/核苷酸分析及分析大都采用毛細(xì)管電泳的方法，這是因?yàn)槊?xì)管電泳與傳統(tǒng)的平板凝膠電泳相比具有高分辨率，高速度，高自化的優(yōu)勢(shì)。100-2000bpDNAPCR擴(kuò)增產(chǎn)物毛細(xì)管電泳可實(shí)現(xiàn)3-6bp的分辨率，遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)的平板凝膠電泳。在傳統(tǒng)凝膠電泳上難以分離的DNA片斷在毛細(xì)管電泳是可

對(duì)于100個(gè)堿基以下的單鏈核酸，毛細(xì)管電泳可以做到單堿基的分辨率，國(guó)際上的QC的標(biāo)準(zhǔn)方法。反義核酸藥物的藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究也是用毛細(xì)管電泳的方法來(lái)做的。最著名的

適合用于藥（毒）物血藥濃度和分析速度。下圖顯示的是鹽酸克倫特羅（瘦肉精）在體存在不同時(shí)間下的濃度測(cè)定結(jié)ClenbuterolConc.3.01.51.00.5CESI-MSCESI-MS質(zhì)譜是生物樣品表征不可或缺的。如何提升質(zhì)譜的靈敏度，降低離子抑制效應(yīng)一直是人們關(guān)注的重點(diǎn)。BSiex公司推出了全新的質(zhì)譜前分離和離子化系統(tǒng)CESI8000lus，將毛細(xì)管電泳（CE）的高效分離和超低流速的特性與電噴霧離子源（SI）完美結(jié)合，從而顯著提升靈敏度，降低離子抑制效應(yīng)，我們稱這一無(wú)鞘液的、靈敏度的和MS聯(lián)用技術(shù)為CEI-MS技術(shù)。CESI-MSESI-MS來(lái)說(shuō)，流速越低，離子化效率越高，也越容易得到高的質(zhì)譜靈敏度。研究結(jié)果顯示：流速越低，質(zhì)譜上的響應(yīng)值越高，在CESI-MS（nL/min流速）上能夠得到比傳統(tǒng)LC-MS（mL～μL/min流速）更高的靈敏度結(jié)果。CESI-MS降低了離子抑制效應(yīng)。流速越低，ESI的離子抑制效應(yīng)越小，同時(shí)進(jìn)樣的不OptiMS1。OptiMSCESI8000PlusOptiMS技術(shù)。將分離離得到的分析物可以直接進(jìn)入ESI離子化源，沒(méi)有鞘液的稀釋和干擾作用，能夠保證分析方法（LC-MS）正交的分析結(jié)果。CESI8000Plus系統(tǒng)的OptiMS卡盒由分離毛細(xì)管，導(dǎo)電液輸送毛細(xì)管，冷卻液循環(huán)套管，電噴霧噴針保護(hù)裝置等幾部分組成。OptiMS卡盒帶有保護(hù)裝置，可以在、存儲(chǔ)和使用過(guò)程中有效保護(hù)內(nèi)部的毛細(xì)管。同時(shí)，采用即插用設(shè)計(jì)，安裝和使用十分簡(jiǎn)單。2。OptiMS3。CESI8000PlusTripleTOFCESI-MS疾病標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)是蛋白組學(xué)研究中的重要研究領(lǐng)域。CESI-MS用于疾病標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)研究中的優(yōu)勢(shì)為：(1)靈敏度：CESI-MS具有比nanoLC-ESI-MS具有更高的靈敏度；結(jié)合富集技術(shù)，可進(jìn)一步提高靈敏度；可分析低至幾 個(gè)細(xì)胞中的蛋白組；(2)適合極性物質(zhì)的分析：與nanoLC-ESI-MS互補(bǔ)，適于分析RPLC上無(wú)保留或無(wú)法洗脫的肽段；適合于分析蛋白質(zhì)的翻譯后修飾。(3)CESI-MS樣品需要量少，結(jié)合微量樣品瓶，最小樣品需要量?jī)H為1ul，可以實(shí)現(xiàn)珍貴的少量組織樣本的分析。（4）可診斷多肽標(biāo)記物。毛細(xì)管電泳方法克服了2D不宜分析低分子肽的缺點(diǎn)。 與MS 聯(lián)用后可直接測(cè)定肽段的分子量，該方法已登于著名醫(yī)學(xué)期柳葉刀Lancetoncology上，并已被德國(guó)漢諾威醫(yī)學(xué)院建立為尿發(fā)現(xiàn)多肽診斷標(biāo)志物的標(biāo)準(zhǔn)高速平臺(tái)，該CE-MS標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)平臺(tái)用于發(fā)現(xiàn)上皮細(xì)胞癌標(biāo)志物。以電泳遷移時(shí)間為橫的強(qiáng)度來(lái)進(jìn)行對(duì)比，結(jié)合質(zhì)譜鑒定來(lái)確認(rèn)標(biāo)志物。CE/MS