實驗混合色素溶液中檸檬黃和日落黃濃度的測定雙組分分光

實驗混合色素溶液中檸檬黃和日落黃濃度的測定雙組分分光光度分析法231實驗原理實驗內(nèi)容實驗?zāi)康?

實驗準(zhǔn)備567

實驗步驟

實驗數(shù)據(jù)及處理

思考題

1.實驗?zāi)康?、了解吸光度的加和性，掌握用分光光度法測定混合組分的原理及方法。2、進一步熟悉UNICO2100型分光光度計的使用方法。

2.實驗原理試液中含有多種吸光物質(zhì)時，如果混合液中各組分最大吸收峰重疊不嚴(yán)重，在一定條件下可以用分光光度法同時測定而不需分離。例如，在本實驗的乙酸銨介質(zhì)中檸檬黃和日落黃色素的吸收曲線相互重疊，如下圖所示：圖在乙酸銨介質(zhì)中檸檬黃與日落黃色素的吸收曲線可以根據(jù)吸光度的加和性原理，分別測定檸檬黃和日落黃在最大吸收波長426nm和482nm處的吸光度。然后用解聯(lián)立方程式的方法，求出試液中檸檬黃與日落黃的含量。A426nm(總)=A426nm(檸檬黃)+A426nm(日落黃)(1)

A482nm(總)=A482nm(檸檬黃)+A482nm(日落黃)

(2)A=?bc(3)

3.實驗內(nèi)容1．通過測定，計算出檸檬黃和日落黃在最大吸收波長426nm和482nm處的摩爾吸光系數(shù)。

2.測定求出混合液中檸檬黃與日落黃的濃度。

4.實驗準(zhǔn)備1、兩人一組，借7只50ml容量瓶和2支5ml刻度吸管。2、每組交1只50ml容量瓶（洗凈、貼標(biāo)簽），發(fā)未知樣。（以5ml計） 3、每組準(zhǔn)備2只100ml燒杯，洗凈、擦干，盛檸檬黃與日落黃標(biāo)準(zhǔn)溶液。

5.實驗步驟1、檸檬黃在426nm和482nm處?的測定

分別吸取1，3，5ml檸檬黃儲備溶液(0.2g·L-1)于三

只50mL容量瓶中，用1.5g·L-1乙酸銨溶液稀釋至刻度，搖勻，用1cm比色皿，以試劑空白為參比，測定各濃度的檸檬黃溶液于426nm和482nm處的吸光度，按式ε=A/bc=A/c（b=1cm）分別計算不同濃度檸檬黃溶液在426nm和482nm處的摩爾吸光系數(shù)?，將接近數(shù)據(jù)取平均值。2、日落黃在426nm和482nm處?的測定

用日落黃儲備溶液(0.2g·L-1)代替檸檬黃，用上述方法測定各濃度日落黃溶液于426nm和482nm處的吸光度，計算其在此兩波長處的摩爾吸光系數(shù)?。

3、混合溶液中檸檬黃和日落黃濃度的測定

用50ml容量瓶向教師領(lǐng)取未知濃度的混合溶液一份，用1.5g·L-1乙酸銨溶液稀釋至刻度搖勻，并用試劑空白為參比，在1cm比色皿內(nèi)分別測出在426nm和482nm處的吸光度。重復(fù)測定三次，取平均值，然后列出二元聯(lián)立方程，即可求出混合液中檸檬黃和日落黃的濃度。

6.實驗數(shù)據(jù)及處理混合液中各組分濃度計算摩爾吸光系數(shù)：ελ=Aλ/c和b=1cm代入式（1）和（2）式得式中：ε為摩爾吸光系數(shù)，可分別用已知濃度的檸檬黃和日落黃在波長為426nm和482nm時的標(biāo)準(zhǔn)曲線求得（標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率即為ε）。

實驗數(shù)據(jù)記錄格式：溶液檸檬黃日落黃未知溶液體積1.003.005.001.003.005.005.00溶液濃度

xA426nm

ε426nm

ε426nm

A482nm

ε482nm

ε482nm

注意事項：采用累加法測定試樣在不同λ時的ε時,只能應(yīng)用于待測組分為有色物質(zhì)或加入顯色試劑次序無關(guān)的顯色反應(yīng)，若顯色反應(yīng)與加入試劑