【農(nóng)業(yè)種植技術】馬鈴薯莖尖脫毒及組培快繁技術

【農(nóng)業(yè)種植技術】馬鈴薯莖尖脫毒及組培快繁技術

我國是馬鈴薯生產(chǎn)第一大國，2008年種植面積達到573.33萬hm2,鮮薯總產(chǎn)達8800萬t,平均單產(chǎn)約15.45t/hm2,總產(chǎn)位居世界第一。馬鈴薯是無性繁殖作物，體內(nèi)病毒的積累可使品種種性退化、品質(zhì)和產(chǎn)量降低，對其生產(chǎn)造成嚴重危害。因為大部分病毒不能感染馬鈴薯莖尖組織，通過莖尖脫毒，生產(chǎn)脫毒種薯用于生產(chǎn)是防止馬鈴薯退化的切實可行的措施。馬鈴薯脫毒及組培快繁中所用基質(zhì)和培養(yǎng)條件等關鍵技術方面的報道較多，但對下寨65和青薯168報道較少，本文既通過對馬鈴薯下寨65和青薯168兩個品種進行脫毒及組培試驗研究，為西部高原地區(qū)當家品種脫毒種薯的工廠化生產(chǎn)提供幫助。1材料和方法1.1供試材料采用當家品種下寨65和青薯168.1.2試驗方法1.2.1催芽于11月中旬左右，挑揀表皮光滑、正常薯形、大小均勻、無病害和無損傷薯塊，放置在有供暖的房間，室內(nèi)溫度24℃左右進行催芽。在催芽前薯塊正處于休眠期，采用0.05~0.l0mg/L的GA3來處理薯塊，浸沒于GA3溶液中10~20min,以打破休眠[4].1.2.2種薯處理采用MS培養(yǎng)基，加入不同配比的激素，準備BA、NAA、GA3、IBA和IAA,由于激素在培養(yǎng)基中用量非常少，且不易溶于水，所以采用特殊的配置方法，配置成500mg/L的溶液待用。當兩個品種的種薯芽長到2~3cm時，挑選生長健壯的芽，用清水沖洗芽部表面污物，在無菌操作室采用12種不同的方法進行表面消毒，用最近制作的蒸餾水沖洗四五次，將表面消毒劑徹底清除，不同表面消毒劑處理時間見表1.1.2.3莖尖組織培養(yǎng)在解剖鏡下剝?nèi)〈笮?.30~0.50mm莖尖生長點，置于不同濃度生長調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，培養(yǎng)基編號為MS1~MS12,另設不加任何生長調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基作為對照（CK），植物生長調(diào)節(jié)劑配比見表2.1.2.4馬鈴薯脫毒苗培養(yǎng)在無菌條件下，將得到的無毒苗進行切段，每段帶一葉，置于不同種類、濃度的1/2MS培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，中國農(nóng)業(yè)網(wǎng)以不加任何生長調(diào)節(jié)劑的1/2MS培養(yǎng)基作為對照，編號為M1~M9,快繁培養(yǎng)基配比見表3.2結果與分析2.1不同表面消毒方法對莖尖成活率和污染的影響從表4可以看出，在莖尖組織培養(yǎng)過程中，外植體在清水沖洗后，直接采用0.1%升汞或5%次氯酸鈉消毒，都可以將污染控制在5%以下，但需時稍長，不同程度地影響到成活率。另外由于升汞的滲透性強，不宜徹底清洗，且對環(huán)境污染嚴重，建議盡量不要使用。2.2不同生長調(diào)節(jié)劑培養(yǎng)基配比對莖尖組織生長的影響從表5可以看出，不含生物調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基，馬鈴薯莖尖組織的生長非常緩慢，導致成苗率低下。在同等條件下，KT和6-BA對馬鈴薯莖尖組織的生長都具有促進作用，且效果顯著，就這兩種物質(zhì)而言，含有KT的培養(yǎng)基中成苗率較低。在同等條件下加入GA3,可明顯促進馬鈴薯莖尖組織分化，加快生長，提高成苗率。2.3不同生長調(diào)節(jié)劑配比對馬鈴薯脫毒苗快繁的影響經(jīng)過觀測表明，與對照培養(yǎng)基相比較，培養(yǎng)基中加入生長調(diào)節(jié)劑后，芽萌發(fā)推遲，有效促進幼根生長。生長調(diào)節(jié)劑濃度過大時，愈傷組織發(fā)達，生根受到抑制。在實驗中觀察到下寨65對NAA較為敏感，濃度稍大就會產(chǎn)生較大愈傷組織，生根較為緩慢，而青薯168反應較為遲鈍，結果見表6.3結論通過實驗發(fā)現(xiàn)，在馬鈴薯脫毒技術實施過程中，采用酒精與其他兩種表面消毒劑配合使用效果最好，能有效控制污染，降低對莖尖組織的影響。剝離的莖尖組織誘導成苗是脫毒快繁的關鍵技術，在實驗中，K