種子生活力軟X射線(xiàn)造影技術(shù)測(cè)定

種子生產(chǎn)與經(jīng)營(yíng)專(zhuān)業(yè)教學(xué)資源庫(kù)種子生活力軟X射線(xiàn)造影技術(shù)測(cè)定手冊(cè)2016.5.3一、應(yīng)用1、種子發(fā)芽試驗(yàn)中的檢查（區(qū)分新鮮為發(fā)芽種子和空粒、腐爛、死種子）2、檢查種子發(fā)育和成熟度3、檢查種子內(nèi)部構(gòu)造，隱匿害蟲(chóng)4、檢查種子機(jī)械損傷，尤其是細(xì)微損傷二、原理活細(xì)胞的原生質(zhì)膜具有選擇吸收功能，當(dāng)將種子浸入重金屬鹽溶液里，凡有生活力的細(xì)胞、組織或種子不吸收或很少吸收重金屬離子，無(wú)生活力的細(xì)胞、組織或種子因無(wú)選擇功能會(huì)自動(dòng)滲入重金屬離子。軟X射線(xiàn)造影時(shí)，由于重金屬離子能強(qiáng)烈吸收X射線(xiàn)，因此死組織呈不透明的暗影，或組織較為透明，經(jīng)顯影、定影后，在底片（負(fù)片）上死組織較為透明，而或組織較為黑暗，從而形成明暗襯比。故根據(jù)明暗強(qiáng)弱、面積大小及其位置決定種子有無(wú)生活力。三、造影技術(shù)（1）預(yù)濕

隨機(jī)從凈種子中取200粒種子，每次50粒，4個(gè)重復(fù)。將種子放入水中浸種2~16h，對(duì)一些直接浸在水中容易破裂的種子，可先在紙上或紙間吸脹后再在水中浸泡16h。三、造影技術(shù)（2）造影劑處理凡不能透過(guò)活細(xì)胞半透膜，但能滲入死細(xì)胞的重金屬鹽都可作為造影劑（襯比劑），如碘化鉀、氯化鋇，目前最常用的是氯化鋇。將浸潤(rùn)16h的種子放入10%~20%的氯化鋇溶液中，處理時(shí)間因不同作物而異。然后將滲鋇的種子取出，于流水中沖洗，以除去種子表面的造影劑。再用吸水紙吸干種子表面的水分，或?qū)⒎N子置于60~70℃恒溫箱內(nèi)干燥1.5~2.0h。若造影后種子還要進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)，則需把種子晾干。三、造影技術(shù)軟化種子清水12-24h沖洗涼干(50℃干燥)

照射造影鑒定

造影劑浸種20%BaCl21－2h四、軟X光攝影首先做好膠片的選用。在國(guó)外有專(zhuān)用X射線(xiàn)的膠片。我國(guó)主要采用SDIN文獻(xiàn)反拍黑白片，也有用照相紙直接造影的。裝片時(shí)要注意讓膠藥面向上，并防止漏光。將處理并干燥的種子放在大小適合的樣品托盤(pán)上，再將其放在感光膠片的暗袋上。然后放入X射線(xiàn)儀工作室內(nèi)曝光造影，其曝光造影技術(shù)因X射線(xiàn)儀的種類(lèi)而不同。目前我國(guó)主要應(yīng)用Hy-35型農(nóng)用X光機(jī)。五、鑒定方法類(lèi)似于四唑染色方法，凡是顯現(xiàn)出黑點(diǎn)的部位均為死傷組織，故出現(xiàn)在一些關(guān)鍵（胚、胚芽、胚根大部、胚乳有較大面積）部位