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文檔簡介
液相實(shí)驗(yàn)室相關(guān)知識(shí)培訓(xùn)目錄01.
儀器項(xiàng)目工作流程02.防腐劑色素喹諾酮瘦肉精毒素03.流動(dòng)相,建儀器方法排序列,建數(shù)據(jù)處理方法,處理數(shù)據(jù),導(dǎo)出圖譜,寫記錄04.
誤差的來源項(xiàng)目前處理影響檢測結(jié)果因素液相實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)上機(jī)檢測,處理數(shù)據(jù),寫記錄檢測設(shè)備儀器:液相/液質(zhì)檢測器DAD/PDA檢測器(紫外,二極管熒光檢測器(柱后衍生系統(tǒng))RI檢測器LC-MS-MS主要對(duì)應(yīng)項(xiàng)目防腐劑,農(nóng)殘,維生素,色素,毒素等毒素,農(nóng)殘,維生素等甜味劑等農(nóng)殘,獸殘等色譜法原理利用混合物中各組分在不同的兩相中溶解,分配,吸附等化學(xué)作用性能的差異,當(dāng)兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),使各組分在兩相中反復(fù)多次受上述各作用力而達(dá)到相互分離液相色譜基本原理Waters超高效液相色譜儀溶劑(流動(dòng)相)檢測器(檢測樣品)檢測器(檢測樣品)色譜柱(固定相)自動(dòng)進(jìn)樣器(進(jìn)樣)泵(提供動(dòng)力)1.基本原理——儀器介紹色譜柱2.檢測器2.1紫外檢測器2.2熒光檢測器2.3示差檢測器2.4蒸發(fā)光散射檢測器1紫外檢測器和二極管陣列檢測器紫外檢測器二極管陣列檢測器適用于大部分項(xiàng)目檢測:具有紫外吸收且在儀器檢測波長范圍內(nèi),例如:苯甲酸、山梨酸、糖精鈉等。2.2熒光檢測器可檢測具有熒光特性的物質(zhì),如:苯并芘,羅丹明等。不直接具備熒光特性的可以使用柱后衍生系統(tǒng)使其具備熒光特性后檢測,如:黃曲霉毒素,氨基甲酸酯類農(nóng)藥等。2.3示差檢測器測定流通池中溶液折射率來測定各組分濃度,例如各類糖類且無紫外吸收,如:三氯蔗糖4蒸發(fā)發(fā)射檢測器碳水化合物未衍生的氨基酸脂肪酸等色譜柱1.基本原理自動(dòng)進(jìn)樣器泵MS檢測器PEQsight220/A30超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀流動(dòng)相樣品引入1.液質(zhì)基本原理液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用基本原理液態(tài)樣品發(fā)生離子化及其碎片離子在電場和磁場中被篩選分離。其離子在檢測器上被檢測產(chǎn)生信號(hào),與其在樣品中濃度大小成正比,它通過測定分子質(zhì)量和相應(yīng)的離子電荷(質(zhì)荷比m/z)實(shí)現(xiàn)樣品中分子結(jié)構(gòu)的分析液相主要檢測項(xiàng)目防腐劑富馬酸二甲酯,過氧化苯甲酰,脫氫乙酸,苯甲酸,山梨酸,糖精鈉,納他霉素,丙酸,雙乙酸鈉抗氧化劑等酸/甜味劑甜菊糖苷,阿斯巴甜,阿力甜,蘋果酸,甜蜜素,安賽蜜,三氯蔗糖(HLB親水親酯),紐甜(C18),乳糖,蔗糖,麥芽糖,果糖,葡萄糖等毒素苯并芘(分子印跡柱),三聚氰胺,展青霉素,赭曲霉毒素,玉米赤霉烯酮,黃曲霉毒素,嘔吐毒素(免疫親和柱)農(nóng)殘氟蟲腈,吡蚜酮,克百威,滅線磷,氧樂果,茚蟲威,丙溴磷,涕滅威,滅多威,甲奈威,甲霜靈,多菌靈,氯唑林,硫線磷,烯草酮,氯吡脲,甲維鹽,氟蟲腈,啶蟲脒,草甘膦,唑螨酯,唑蟲酰胺,辛硫磷,烯酰嗎啉,嘧酶胺,噠螨靈,丙環(huán)唑,吡蟲啉,百草枯,敵草快阿維菌素滅蠅胺等獸殘磺胺,硝基咪唑,金剛烷胺,氟苯尼考,地西泮,呋喃類,土霉素,四環(huán)素,多西環(huán)素,金霉素,沙丁胺醇,萊克多巴胺,克倫特羅,氯霉素,喹諾酮,五氯酚那,替米考星,尼卡巴嗪,氯丙嗪,喹乙醇等等(乳蛋肉蜂蜜)(國標(biāo)農(nóng)業(yè)部出口標(biāo)準(zhǔn)BJS檢驗(yàn)檢測標(biāo)準(zhǔn)補(bǔ)充方法)色素姜黃素,胭脂紅(鹵肉),莧菜紅,新紅,檸檬黃,日落黃,亮藍(lán),羅丹明B,β胡蘿卜素,酸性橙,酸性紅,赤蘚紅,誘惑紅,蘇丹紅
甲醛次硫酸氫鈉等(5009.359695219161743聚酰胺粉吸附)其他添加劑香蘭素,乙基麥芽酚,?;撬?,維生素AB族CD(2.3)EK1,煙酸煙酰胺等其他游離棉酚,茶多酚,兒茶素,對(duì)氯苯,6BA,那非,西布曲明,罌粟堿,嗎啡,可待因,那可丁,蒂巴因等羥甲基糠醛,液相工作流程下發(fā)項(xiàng)目-統(tǒng)計(jì)項(xiàng)目-安排前處理-按項(xiàng)目02
前處理步驟及一些前處理設(shè)備
樣品前處理:對(duì)一系列經(jīng)前處理后的樣品進(jìn)行定性和定量分析,其結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性將取決于這些處理過程是否會(huì)將待測組分丟失或使待測組分發(fā)生一些不可預(yù)測的變化。進(jìn)行食品中殘留分析,面臨基質(zhì)復(fù)雜多樣,待測組分多為微量或痕量等問題,因此必須采取適當(dāng)?shù)那疤幚矸椒?,去除基質(zhì)干擾,分離富集待測組分,提高檢測靈敏度和準(zhǔn)確性。檢驗(yàn)項(xiàng)目多,食品基質(zhì)復(fù)雜多樣,同一標(biāo)準(zhǔn)因樣品基質(zhì)不同前處理也不同,同一個(gè)項(xiàng)目因基質(zhì)不同所以標(biāo)準(zhǔn)不同進(jìn)而前處理也不同,今天我給大家分享一些前處理步驟及用到的一些前處理設(shè)備,和幾個(gè)項(xiàng)目的前處理。食品殘留前處理一般包括:樣品提取,凈化,濃縮和衍生化樣品前處理稱取樣品:按國標(biāo),用天平準(zhǔn)確稱取所需質(zhì)量的樣品。前處理重點(diǎn)步驟提?。焊鶕?jù)檢測項(xiàng)目選擇合適的提取劑:提取劑水,酸(乙酸,鹽酸等),堿(NaOH溶液等),鹽(EDTA溶液,乙酸銨溶液等),有機(jī)溶劑(甲醇,乙腈,乙酸乙酯正己烷等注:特殊項(xiàng)目不能直接提取,需要衍生后才能提取,如喹乙醇,呋喃,β-受體激動(dòng)劑(俗稱瘦肉精),有些項(xiàng)目皂化酶解等。加提取劑后選擇渦旋混勻,超聲,震蕩等方式進(jìn)行充分提取。前處理重點(diǎn)步驟凈化:根據(jù)國標(biāo)常用的有幾種凈化方法凈化劑凈化:根據(jù)樣品機(jī)制選擇合適的QuEChERS試劑凈化液液萃取凈化:主要用分液漏斗SPE小柱凈化:根據(jù)目標(biāo)物選擇合適的SPE小柱,用固相萃取裝置凈化濃縮根據(jù)檢測濃度需求選擇濃縮或者稀釋。濃縮:液體量多的選擇減壓旋蒸,液體量少的選擇氮吹復(fù)溶過濾上機(jī)檢測數(shù)據(jù)處理建立標(biāo)準(zhǔn)曲線調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)曲線線性,一般線性相關(guān)系數(shù)要大于0.995.添加樣品數(shù)據(jù)對(duì)于檢出的樣品判斷是否為假陽性,根據(jù)出峰時(shí)間,吸收波長,離子峰度比,加標(biāo)樣品等判斷。陽性樣品檢出值計(jì)算是否超過限值,超過限值需要進(jìn)行復(fù)測。保存圖譜,寫原始記錄部分項(xiàng)目的一些危害及部分項(xiàng)目前處理步驟食品前處理是食品檢測的關(guān)鍵步驟,前處理步驟就是提取濃縮被測物質(zhì),消除基質(zhì)干擾,保護(hù)儀器,提高方法的準(zhǔn)確性,精密性。防腐劑(苯甲酸,山梨酸糖精鈉)是指天然或合成的化學(xué)成分,用于加入食品、藥品、顏料、生物標(biāo)本等,以延遲微生物生長或化學(xué)變化引起的腐敗。合成色素
人工合成色素是指用人工化學(xué)合成方法所制得的有機(jī)色素,主要是以煤焦油中分離出來的苯胺染料為原料制成的。危害包括一般毒性、致瀉性、致突性(基因突變)與致癌作用。特別是偶氮化合物類合成色素的致癌作用更明顯喹諾酮類1喹諾酮類藥物會(huì)引起患者腸胃不適(2)服用劑量過大、時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)頭暈、頭疼和四肢麻煩的癥狀(3)部分患者服用喹諾酮藥物后會(huì)出現(xiàn)過敏、皮疹、蕁麻疹(4)濫用喹諾酮類藥物也會(huì)產(chǎn)生耐藥性。(5)大量或是長期使用會(huì)造成肝臟損傷。黃曲霉毒素抑制蛋白質(zhì)合成損害肝臟等器官致使人體急性中毒(劇毒)誘發(fā)癌癥β-受體激動(dòng)劑人食用含瘦肉精的豬肉后會(huì)出現(xiàn)頭暈、惡心、手腳顫抖、心跳加速甚至心臟驟停致昏迷死亡,特別對(duì)心律失常、高血壓、青光眼、糖尿病和甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)等患者有極大危害。糕點(diǎn)
GB5009.28—2016
食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定1原理:樣品經(jīng)水提取,高脂肪樣品經(jīng)正己烷脫脂、高蛋白樣品經(jīng)蛋白沉淀劑沉淀蛋白,采用液相色譜分離、紫外檢測器檢測,外標(biāo)法定量。2試樣制備取多個(gè)預(yù)包裝的飲料、液態(tài)奶等均勻樣品直接混合;非均勻的液態(tài)、半固態(tài)樣品用組織勻漿機(jī)勻漿;固體樣品用研磨機(jī)充分粉碎并攪拌均勻;奶酪、黃油、巧克力等采用50℃~60℃加熱熔融,并趁熱充分?jǐn)嚢杈鶆?。取其中?00g裝入玻璃容器中,密封,液體試樣于4℃保存,其他試樣于-18℃保存。試樣提取1一般性試樣準(zhǔn)確稱取約2g(精確到0.001g)試樣于50mL具塞離心管中,加水約25mL,渦旋混勻,于50℃水浴超聲20min,冷卻至室溫后加亞鐵氰化鉀溶液2mL和乙酸鋅溶液2mL,混勻,于8000r/min離心5min,將水相轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中,于殘?jiān)屑铀?0mL,渦旋混勻后超聲5min,于8000r/min離心5min,將水相轉(zhuǎn)移到同一50mL容量瓶中,并用水定容至刻度,混勻。取適量上清液過0.22μm濾膜,待液相色譜測定。注:碳酸飲料、果酒、果汁、蒸餾酒等測定時(shí)可以不加蛋白沉淀劑。2含膠基的果凍、糖果等試樣準(zhǔn)確稱取約2g(精確到0.001g)試樣于50mL具塞離心管中,加水約25mL,渦旋混勻,于70℃水浴加熱溶解試樣,于50℃水浴超聲20min,之后的操作同1。3油脂、巧克力、奶油、油炸食品等高油脂試樣準(zhǔn)確稱取約2g(精確到0.001g)試樣于50mL具塞離心管中,加正己烷10mL,于60℃水浴加熱約5min,并不時(shí)輕搖以溶解脂肪,然后加氨水溶液(1+99)25mL,乙醇1mL,渦旋混勻,于50℃水浴超聲20min,冷卻至室溫后,加亞鐵氰化鉀溶液2mL和乙酸鋅溶液2mL,混勻,于8000r/min離心5min,棄去有機(jī)相,水相轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中,殘?jiān)?再提取一次后測定。3儀器參考條件色譜柱:C18柱,柱長250(150)mm,內(nèi)徑4.6mm,粒徑5μm,或等效色譜柱。2流動(dòng)相:甲醇+乙酸銨溶液=5+95。3流速:1mL/min。4檢測波長:230nm。5進(jìn)樣量:10μL飲料
GB5009.35—2016
食品中合成著色劑的測定原理:食品中人工合成著色劑用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取,制成水溶液,注入高效液相色譜儀,經(jīng)反相色譜分離,根據(jù)保留時(shí)間定性和與峰面積比較進(jìn)行定量。1試樣制備:.1果汁飲料及果汁、果味碳酸飲料等:稱取20g~40g(精確至0.001g),放入100mL燒杯中。含二氧化碳樣品加熱或超聲驅(qū)除二氧化碳。2配制酒類:稱取20g~40g(精確至0.001g),放入100mL燒杯中,加小碎瓷片數(shù)片,加熱驅(qū)除乙醇。3硬糖、蜜餞類、淀粉軟糖等:稱取5g~10g(精確至0.001g)粉碎樣品,放入100mL小燒杯中,加水30mL,溫?zé)崛芙?若樣品溶液pH較高,用檸檬酸溶液調(diào)pH到6左右。4巧克力豆及著色糖衣制品:稱取5g~10g(精確至0.001g),放入100mL小燒杯中,用水反復(fù)洗滌色素,到巧克力豆無色素為止,合并色素漂洗液為樣品溶液.2色素提取1聚酰胺吸附法:樣品溶液加檸檬酸溶液調(diào)pH到6,加熱至60℃,將1g聚酰胺粉加少許水調(diào)成粥狀,倒入樣品溶液中,攪拌片刻,以G3垂融漏斗抽濾,用60℃pH為4的水洗滌3次~5次,然后用甲醇-甲酸混合溶液洗滌3次~5次(含赤蘚紅的樣品用5.2.2法處理),再用水洗至中性,用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3次~5次,直至色素完全解吸,收集解吸液,加乙酸中和,蒸發(fā)至近干,加水溶解,定容至5mL。經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾,進(jìn)高效液相色譜儀分析。2:液-液分配法(適用于含赤蘚紅的樣品):將制備好的樣品溶液放入分液漏斗中,加2mL鹽酸、三正辛胺-正丁醇溶液(5%)10mL~20mL,振搖提取,分取有機(jī)相,重復(fù)提取,直至有機(jī)相無色,合并有機(jī)相,用飽和硫酸鈉溶液洗2次,每次10mL,分取有機(jī)相,放蒸發(fā)皿中,水浴加熱濃縮至10mL,轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,加10mL正己烷,混勻,加氨水溶液提取2次~3次,每次5mL,合并氨水溶液層(含水溶性酸性色素),用正己烷洗2次,氨水層加乙酸調(diào)成中性,水浴加熱蒸發(fā)至近干,加水定容至5mL。經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾,進(jìn)高效液相色譜儀分析。5.3儀器參考條件1色譜柱:C18柱,4.6mm×250mm,5μm。2進(jìn)樣量:10μL。.3柱溫:35℃。4二極管陣列檢測器波長范圍:400nm~800nm,或紫外檢測器檢測波長:254nm。5.3.5梯度洗脫表見表GB5009.35—2016
食品中合成著色劑的測定
CNWPoly-seryGB5009.35-2016食品中合成著色劑專用SPE小柱使用說明書樣品前處理果汁,果醬基質(zhì)1g試樣于50mL離心管中,加入6mL去離子水,渦旋30s,超聲振提取15min,4000rpm離心6min,取上清液。剩余殘?jiān)偌尤?mL去離子水,重復(fù)操作一次,合并兩次上清液。用20%檸檬酸溶液調(diào)節(jié)待凈化溶液至pH3~4.面粉,玉米粉基質(zhì):1g試樣于50mL離心管中,加入氨水:70%甲醇水(V/V=1:99)10mL作為提取劑提取,渦旋15s,超聲15min,4000r/min離心6min,再加入10mL,10mL提取劑重復(fù)2次;合并上清液離心,取上清液,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至約5mL,用20%檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH至3~4,待小柱凈化活化5mL甲醇平衡5mL去離子水上樣全部待凈化液過柱,流速控制在3-5mL/min,淋洗5mL甲醇甲酸水(4:2:4)洗脫10%氨水甲醇3mL*2次儀器分析氮吹近干,約200μL左右,50%流動(dòng)相A+50%流動(dòng)相B定容至1mL渦旋,過0.22μm濾膜,待上機(jī).雞肉雞蛋魚GB/T21312-2007動(dòng)物源性食品中14種喹諾酮藥物殘留檢測方法方法提要:用0.1mol/LEDTA-Mellvaine緩沖液(pH4.0)提取樣品中的喹諾酮類抗生素,經(jīng)過濾和離心后,上清液經(jīng)HLB周相萃取柱凈化。高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測定,用陰性樣品基質(zhì)加標(biāo)外標(biāo)法定量制樣方法:制樣操作過程中應(yīng)防止樣品受到污染或殘留物含量發(fā)生變化1動(dòng)物肌肉和動(dòng)物內(nèi)臟,將場采集的樣品放入小型冷凍箱中運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室,在一10℃以下保存,一周內(nèi)進(jìn)行處理。取適量新鮮或冷凍解凍動(dòng)物組織樣品去筋、搗碎均勻..2牛奶:將現(xiàn)場采集的樣品放人小型冷凍箱中運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室,在一10℃以下保存,一周內(nèi)進(jìn)行處理。取適量新鮮或冷凍解凍的樣品混合均勻。3雞蛋:將現(xiàn)場采集的樣品放人小型冷凍箱中運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室,在--10℃以下保存,一周內(nèi)進(jìn)行處理。取適量新鮮的樣品,去殼后混合均勻。提取與凈化1提取.1.1動(dòng)物肌肉姐織、肝臟,腎臟稱取均質(zhì)試樣5.0g(輛到0.1g),于50mL聚丙烯離心管中、加人20mL0.1mol/LEDTAMcllvaine緩沖溶液,.1000r/min渦旋混合11min.超聲提取10min,1000r/min離心5min(溫度低于5T),提取三次,合并上清液。
GB/T21312—2007動(dòng)物源性食品中14種喹諾酮藥物殘留檢測方法1.2牛奶和雞蛋稱取均質(zhì)試樣5.0g(精確到0.0lg),置于50mL.聚丙烯離心管中,用40mL0.1mol/LEDTA-Mellvaine緩沖溶液(5.12)溶解,1000r/min旋渦混合!min,超聲提取10min,10000r/min離心10min(溫度低于5℃),取上清液。2凈化HLB固相萃取柱(200mg;6mL),使用時(shí)用6mL甲醇洗滌、6mL水活化.將提取的溶液以2mLmin~3mL/ti的速度過柱,棄去濾液,用2mI.5%甲醇水溶液(5.13)淋洗,棄去淋洗液,將小柱抽干,再用6mL甲醇洗脫并收集洗脫液。洗脫液用氮?dú)獯蹈伞⒂?mL0.2%甲酸水溶液(5.14)溶解,1000r/min旋瀏混合1min,用于上機(jī)測定。3基質(zhì)加標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的制備將混合標(biāo)準(zhǔn)工作液用初始流動(dòng)相逐級(jí)稀釋成2.5μg/L~100.0μg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。稱取與試樣基質(zhì)相應(yīng)的陰性樣品5.0g,加人標(biāo)準(zhǔn)系列溶液1.0mL,按照與試樣同時(shí)進(jìn)行提取和凈化。8高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測定
GB/T21312—2007動(dòng)物源性食品中14種喹諾酮藥物殘留檢測方法1色譜柱:WatersACQUITYUPL.CTBEHC18柱100mmmn×2.1rnm,1.7yurn)或其他等效柱。2流動(dòng)相:A[40+60甲醇-乙腈溶液(5.5)];B[0.2%甲酸水溶液(5.14)]梯度淋洗3流速:0.2mL/min.4柱溫:40℃.5進(jìn)樣體積:20uL.2質(zhì)譜條件電離模式:電噴霧電離正離子模式(ESI+);質(zhì)譜掃描方式:多反應(yīng)監(jiān)測(MRM);分辨率:單位分辨率:其他參考質(zhì)譜條件見附錄A,定性定量分析導(dǎo)圖譜寫記錄GB/T21311-2007動(dòng)物源性食品中硝基呋類藥物代謝物殘留量檢測方法GB/T21311-2007動(dòng)物源性食品中硝基呋類藥物代謝物殘留量檢測方法GB/T21311-2007動(dòng)物源性食品中硝基呋類藥物代謝物殘留量檢測方法GB/T21311-2007動(dòng)物源性食品中硝基呋類藥物代謝物殘留量檢測方法GB5009.22-2016食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定
GB5009.22-2016食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定
GB5009.22-2016食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定
第三法高效液相色譜-柱后衍生法導(dǎo)語:下述方法的儀器檢測部分,包括碘或溴試劑衍生、光化學(xué)衍生、電化學(xué)衍生等柱后衍生方法,可根據(jù)實(shí)際情況,選擇其中一種方法即可。原理試樣中的黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2,用乙腈-水溶液或甲醇-水溶液的混合溶液提取,提取液經(jīng)免疫親和柱凈化和富集,凈化液濃縮、定容和過濾后經(jīng)液相色譜分離.柱后衍生(碘或溴試劑衍生、光化學(xué)衍生、電化學(xué)衍生等),經(jīng)熒光檢測器檢測,外標(biāo)法定量。免疫親和柱:AFTB柱容量≥200ng,AFTB,柱回收率≥80%,AFTG的交叉反應(yīng)率≥80%(驗(yàn)證方法參見附錄B)。注:對(duì)于每個(gè)批次的親和柱使用前需質(zhì)量驗(yàn)證。警示:整個(gè)分析操作過程應(yīng)在指定區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。該區(qū)域應(yīng)避光(直射陽光)、具備相對(duì)獨(dú)立的操作臺(tái)和廢棄物存放裝置。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,操作者應(yīng)按照接觸劇毒物的要求采取相應(yīng)的保護(hù)措施。黃曲霉毒素是黃曲霉菌和寄生曲霉菌的代謝產(chǎn)物。糧食未能及時(shí)曬干或儲(chǔ)藏不當(dāng)時(shí)往往被黃曲霉菌或容寄生曲霉菌污染而產(chǎn)生此類毒素。比較容易受污染的食物是玉米、花生、大米,其次是大麥、小麥,大豆一般不易受到污染。另外,黃曲霉毒素在熱帶和亞熱帶的核果類和谷類上也較為常見。是獨(dú)立致癌危險(xiǎn)因素之一。GB5009.22-2016食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定樣品提取及稀釋:大米、玉米、小麥、堅(jiān)果、調(diào)料、花生及其制品:19準(zhǔn)確稱取試樣25.0于250mL具塞錐形瓶中,加入5.0g氯化鈉及準(zhǔn)確加入125.0mL甲靜水(7+3),以均質(zhì)器高速攪拌提取2min。槽紋濾紙,準(zhǔn)確移取15.0mL濾液并加入30.0mL水稀釋,用玻璃纖維濾紙過濾,至濾液澄清,備用。植物油脂:準(zhǔn)確稱取試樣25.0g于250mL具塞錐形瓶中,加入5.0g氯化鈉及入125.0mL甲醇-水(7+3),以均質(zhì)器高速攪拌提取2min。槽紋濾紙過濾,準(zhǔn)確移取或15.0mL濾液并加入30.0mL水稀釋,用玻璃纖維濾紙過濾,至濾液澄清,備用。醬油:稱取試樣50.0g于250.0mL具塞錐形瓶中,加入2.5g氯化鈉及加入甲醇-水(8+2)至100.0mL,以均質(zhì)器高速攪拌提取1min。槽紋濾紙過濾,準(zhǔn)確移慮取10.0mL濾液并加人40.0mL水稀釋,用玻璃纖維濾紙過濾,至濾液澄清,備用。食醋:準(zhǔn)確稱取5.0g樣品,加入1.0g氯化鈉,以pH7.0磷酸鹽緩沖溶液稀釋至25.0mL,混勻,定量濾紙過濾。取10.0mL濾液加入10.0mLpH7.0磷酸鹽緩沖溶液,混勻。以玻璃纖維濾紙過濾,至濾液澄清,備用。GB5009.22-2016食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定樣品的凈化黃曲霉毒素B1免疫親和柱的柱容量(最大吸附黃曲霉毒素B1量)為300ng,當(dāng)樣品中黃曲霉毒素超過測定范圍時(shí),請(qǐng)適當(dāng)減小上柱體積,使其在檢測范圍內(nèi),計(jì)算出準(zhǔn)確含量。大米、玉米、小麥、堅(jiān)果、調(diào)料、花生及其制品、植物油脂:將免疫親和柱連接于20.0mL玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取15.0mL樣品提取液注入玻璃注射器中,將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約2mL/min(1滴/秒)流速緩慢通過免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過柱體。以2-3mL/min(1-2滴/秒)流速用10.0mL水淋洗柱子2次,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過柱體。準(zhǔn)確加入2.0mL色譜級(jí)甲醇洗脫,流速為1mL/min~2mL/min(1滴/秒),收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。醬油和食醋:將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取10mL樣品提取液注入玻璃注射器中,將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約2mL/min(1滴/秒)流速緩慢通過免疫親和柱。以2-3mL/min(1-2滴/秒)流速用10.0mL0.1%的吐溫/PBS清洗,再以10.0mL水清洗柱子2次,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過柱體。準(zhǔn)確加入2.0mL色譜級(jí)甲醇洗脫,流速為1mL/min~2mL/min(1滴/秒),收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。GB5009.22-2016食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定注意事項(xiàng)1)
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