實(shí)驗(yàn)五、培養(yǎng)基的配制,消毒與滅菌及實(shí)驗(yàn)基本技能

實(shí)驗(yàn)五

培養(yǎng)基的配制、滅菌及實(shí)驗(yàn)室基本技能1一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛢?nèi)容目的：1、學(xué)習(xí)和掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟。

2、了解消毒和滅菌的原理，并掌握幾種滅菌方法的操作步驟。內(nèi)容：1、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配制。

2、高氏1號(hào)培養(yǎng)基的配制。2二、基本原理

培養(yǎng)基是人工配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存各種微生物或積累代謝產(chǎn)物。培養(yǎng)基一般應(yīng)含有水分、碳源、氮源、能源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因素等。消毒與滅菌兩者的意義有所不同。消毒一般是指消滅病原菌和有害微生物的營(yíng)養(yǎng)體而言，滅菌則是指殺滅一切微生物的營(yíng)養(yǎng)體、芽孢和孢子。在微生物實(shí)驗(yàn)中，需要進(jìn)行純培養(yǎng)，不能有任何雜菌污染，因此對(duì)所用器材、培養(yǎng)基和工作場(chǎng)所都要進(jìn)行嚴(yán)格的消毒和滅菌。消毒與滅菌的方法有多種。3三、實(shí)驗(yàn)材料1、藥品或試劑牛肉膏，蛋白胨，NaCl，NaOH，HC1，瓊脂等；2、其他材料試管，三角瓶，燒杯，量筒，玻棒，培養(yǎng)基分裝器，天平，牛角匙、pH試紙、棉塞、高壓蒸氣滅菌鍋等。4四、實(shí)驗(yàn)設(shè)備的介紹滅菌鍋過(guò)濾除菌52023/1/146濕熱與干熱

濕熱—水蒸汽

干熱—熱空氣

蒸汽滅菌鍋烘箱121℃20～30min160～170℃2h滅菌（1）滅菌鍋的使用臥式滅菌鍋2023/1/1472023/1/148注意事項(xiàng)：排凈冷空氣；滅菌終了，緩慢降壓；滅菌結(jié)束，趁熱取出物品。高壓蒸汽滅菌鍋電烘箱的外觀和結(jié)構(gòu)2023/1/14910（2）過(guò)濾除菌

控制液體中微生物的群體可以通過(guò)將微生物從液體中移走而不是殺死的方法來(lái)實(shí)現(xiàn)。

（a）注射式微孔濾器（b）小型過(guò)濾裝置（c）層流生物安全柜

常用膜濾器11微孔濾膜阻擋微生物2023/1/1412五、操作步驟（一）固體培養(yǎng)基的配制稱量溶解調(diào)pH值加入瓊脂條加熱溶解分裝到500毫升三角瓶包扎滅菌。13放線菌篩選培養(yǎng)：六、實(shí)驗(yàn)基本操作技能1、培養(yǎng)皿過(guò)的包扎2、試管的包扎3、三