中藥化學(xué)成分提取分離和鑒定的一般方法

中藥化學(xué)成分提取分離和鑒定的一般方法第一頁，共一百頁，2022年，8月28日目的要求了解中藥化學(xué)成分的類型及理化性質(zhì)。掌握中藥有效成分的提取、分離方法。了解中藥有效成分結(jié)構(gòu)鑒定的方法。第二頁，共一百頁，2022年，8月28日教學(xué)內(nèi)容第1節(jié)中藥中所含各類化學(xué)成分簡介第2節(jié)中藥化學(xué)成分預(yù)試驗(yàn)第3節(jié)提取、分離中藥有效成分常用的方法第4節(jié)中藥化學(xué)成分鑒定和結(jié)構(gòu)研究簡介第5節(jié)藥理供試樣品的配制第三頁，共一百頁，2022年，8月28日第1節(jié)中藥中所含各類化學(xué)成分簡介生物堿糖和苷醌類苯丙素類黃酮類強(qiáng)心苷皂苷萜類和揮發(fā)油其他成分第四頁，共一百頁，2022年，8月28日生物堿（alkaloids）生物體內(nèi)的含氮有機(jī)物，有似堿的性質(zhì)（能與酸成鹽），有生理活性。鹽酸小檗堿(Berberinehydrochloride)第五頁，共一百頁，2022年，8月28日苷類（glycosides）

苷元與糖或糖的衍生物通過苷鍵（縮醛鍵）連接而成的化合物。苷易水解成苷元和糖。人參皂苷Rb1

(ginsenosideRb1)水解第六頁，共一百頁，2022年，8月28日糖類（saccharides）單糖：無色晶體，味甜。易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑。低聚糖：2~10個(gè)單糖縮合而成。味甜，溶于水，難溶于有機(jī)溶劑。多糖：10個(gè)以上單糖脫水縮合而成。無甜味，大多不溶于水。

D-葡萄糖L－鼠李糖D－葡萄糖醛酸(D-glucose)(L-rhamnose)(D-glucuronicacid)α-D-Gal-(1→4)-β-D-Glc-[β-D-Fru-(1→6)]-(1→4)-β-D-Glc第七頁，共一百頁，2022年，8月28日醌類（quinones）具有醌式結(jié)構(gòu)化合物。分子中多有酚－OH，有一定酸性。

大黃酚大黃酚-D-葡萄糖苷

(chrysophanol)(chrysophanol-8-D-glucoside)第八頁，共一百頁，2022年，8月28日苯丙素類（phenylpropanoids）以苯丙基（C6-C3）為基本骨架的化合物。

香豆素：具有苯駢α-吡喃酮母核的一類天然化合物。

木脂素：有兩分子苯丙素衍生物聚合而成的天然化合物。

七葉內(nèi)酯五味子酯甲

(aesculetin)(schisantherinA)第九頁，共一百頁，2022年，8月28日黃酮類（flavonoids）兩個(gè)苯環(huán)通過三碳鏈連接而成（C6-C3-C6）的化合物。多有酚－OH，有一定酸性。

黃芩素黃芩苷

(baicalein)(baicalin)第十頁，共一百頁，2022年，8月28日萜類和揮發(fā)油（terpeonidsandvolatileoils）萜類：由甲戊二羥酸衍生、分子式符合（C5H8）n的衍生物。

揮發(fā)油（精油）：可隨水蒸氣蒸餾的與水不相混溶的無色或淡黃色透明油狀液體。

薄荷醇細(xì)辛醚

(menthol)(asarone)第十一頁，共一百頁，2022年，8月28日強(qiáng)心苷（cardicaglycosides）對心臟有顯著生理活性的甾體苷類。無色，有旋光性、對粘膜有刺激性。

洋地黃毒苷

(digitoxin)第十二頁，共一百頁，2022年，8月28日皂苷（saponins）由螺甾烷類或三萜類化合物與糖結(jié)合的低聚糖苷，前者為甾體皂苷，后者為三萜皂苷。無色，對粘膜有刺激性，有吸濕性、發(fā)泡性和溶血性。

薯蕷皂苷人參皂苷Rb1

(dioscin)(ginsenosideRb1)第十三頁，共一百頁，2022年，8月28日其他成分有機(jī)酸鞣質(zhì)氨基酸、蛋白質(zhì)和酶植物色素樹脂油脂和蠟無機(jī)成分微量元素第十四頁，共一百頁，2022年，8月28日第2節(jié)中藥化學(xué)成分預(yù)試驗(yàn)?zāi)康模撼醪脚卸ㄖ兴幹泻心男┗瘜W(xué)成分，為設(shè)計(jì)提取、分離方案奠定基礎(chǔ)。1.預(yù)試驗(yàn)的分類2.預(yù)試驗(yàn)的方法3.預(yù)試驗(yàn)供試液的制備第十五頁，共一百頁，2022年，8月28日1.預(yù)試驗(yàn)的分類單項(xiàng)預(yù)試：重點(diǎn)檢查某類成分。系統(tǒng)預(yù)試：全面檢查各類成分。第十六頁，共一百頁，2022年，8月28日2.預(yù)試驗(yàn)的方法試管法紙片法薄層及紙色譜法第十七頁，共一百頁，2022年，8月28日3.預(yù)試液的制備水浸液

5g/50ml水，浸泡過夜，過濾。濾液A用以檢查氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)；濾渣水浴60℃加熱10min，過濾。濾液B用以檢查糖、有機(jī)酸、苷、鞣質(zhì)、水溶性生物堿等。乙醇提取液中性醇提液：5g/50ml95%乙醇，水浴加熱回流20min，過濾。濾液用以檢查黃酮、蒽醌、香豆素、萜、苷等。酸性醇提液：2g/10ml0.5%鹽酸乙醇溶液，水浴加熱回流10min，過濾。濾液用以檢查生物堿等。石油醚提取液1g/10ml，浸泡2-3h，過濾。濾液用以檢查揮發(fā)油、萜類等。第十八頁，共一百頁，2022年，8月28日常用顯色劑：生物堿：碘化鉍鉀試劑棕紅色酚：三氯化鐵試劑藍(lán)色有機(jī)酸：溴酚藍(lán)試劑藍(lán)色背景黃色斑點(diǎn)皂苷：磷鉬酸試劑藍(lán)-藍(lán)紫色內(nèi)酯、香豆素：異羥肟酸鐵試劑藍(lán)-紫黃酮：三氯化鋁試劑、鹽酸-鎂粉、乙酸鎂試劑+蒽醌：氫氧化鉀試劑紅色強(qiáng)心苷：3,5-二硝基苯甲酸試劑紫紅色氨基酸：茚三酮試劑+揮發(fā)油：油斑試驗(yàn)無斑點(diǎn)有機(jī)化合物：硫酸試劑第十九頁，共一百頁，2022年，8月28日第3節(jié)提取分離中藥有效成分常用的方法概述提取方法分離純化方法影響因素第二十頁，共一百頁，2022年，8月28日1.概述（1）中藥化學(xué)成分的構(gòu)成特點(diǎn)同種植物含有多種結(jié)構(gòu)類型的化學(xué)成分總成分含量少而種類多有效成分含量低第二十一頁，共一百頁，2022年，8月28日（2）提取分離前進(jìn)行文獻(xiàn)調(diào)研研究進(jìn)展

a.做過否？

b.研究的深度和廣度如何？

c.如何開展？藥材鑒定

a.原植物的拉丁學(xué)名

b.采集地點(diǎn)和時(shí)間

c.藥及部位

d.民間藥用情況第二十二頁，共一百頁，2022年，8月28日（3）已知/未知成分研究策略已知成分：結(jié)構(gòu)類型，確定提取、分離路線；未知成分：系統(tǒng)預(yù)試驗(yàn)，活性跟蹤；

第二十三頁，共一百頁，2022年，8月28日2.提取方法溶劑提取法水蒸氣蒸餾法超臨界流體萃取法其他方法第二十四頁，共一百頁，2022年，8月28日（1）溶劑提取法

原理：相似相溶。溶劑穿透入藥材粉末的細(xì)胞膜，溶解溶質(zhì)，形成細(xì)胞內(nèi)外溶質(zhì)的濃度差，將溶質(zhì)滲出，進(jìn)行提取。

范圍：所有化學(xué)成分。第二十五頁，共一百頁，2022年，8月28日溶

劑沸點(diǎn)介電常數(shù)(20℃)溶解度溶劑/水%水/溶劑%石

油

醚環(huán)

己

烷30-12080.71.892.02苯乙

醚氯

仿乙酸乙酯正

丁

醇

803561771182.294.344.816.0217.8

0.1756.040.8156.077.45

0.0631.4650.0722.9820.5丙

酮乙

醇甲

醇水

567865100

20.724.332.680.4任意混合石油醚>環(huán)己烷>苯>氯仿>乙醚>乙酸乙酯>丙酮>乙醇>甲醇>水常用溶劑的性質(zhì)第二十六頁，共一百頁，2022年，8月28日中藥各類成分的極性與提取溶劑的關(guān)系

植物成分極性強(qiáng)弱植物成分結(jié)構(gòu)類型適于提取溶劑親脂性強(qiáng)葉綠素、脂肪油、揮發(fā)油石油醚親脂性較強(qiáng)游離生物堿、苷元、甾類、萜類、某些有機(jī)酸乙醚、氯仿中等極性中偏小某些苷類(如強(qiáng)心苷等)氯仿-乙醚(2:1)中等某些苷類(如黃酮苷類)乙酸乙酯中偏大某些苷類(如蒽醌苷、皂苷等)正丁醇親水性較強(qiáng)極性大的苷、糖類、氨基酸等丙酮、乙醇、甲醇親水性強(qiáng)蛋白質(zhì)、粘液汁、糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、苷類水第二十七頁，共一百頁，2022年，8月28日（1）溶劑提取法選擇溶劑注意點(diǎn)：

a.對有效成分溶解度大，對雜質(zhì)溶解度小

b.不與化學(xué)成分起化學(xué)變化

c.經(jīng)濟(jì)、易得、使用安全。常用操作方法：

浸漬法滲漉法煎煮法回流提取法連續(xù)回流提取法影響提取效率的

因

素原料粉碎度提取時(shí)間提取溫度設(shè)備條件第二十八頁，共一百頁，2022年，8月28日第二十九頁，共一百頁，2022年，8月28日第三十頁，共一百頁，2022年，8月28日回流提取裝置冷凝管通氣側(cè)管藥材虹吸管溶劑水浴索氏提取裝置第三十一頁，共一百頁，2022年，8月28日優(yōu)劣對比：浸漬：簡便，但效率低，用水時(shí)易發(fā)霉。滲漉：效率高，效果好（較澄清）；但溶劑消耗大，費(fèi)時(shí)。煎煮：簡便，但雜質(zhì)溶出多，難過濾?；亓魈崛。盒矢?，但溶劑消耗大，操作煩瑣。連續(xù)回流提?。盒矢?溶劑消耗少,但操作煩瑣。

*后三種不適宜加熱易分解成分的提取。第三十二頁，共一百頁，2022年，8月28日（2）水蒸氣蒸餾法原理：與水蒸氣產(chǎn)生共沸點(diǎn)。范圍：適用于具有揮發(fā)性的，能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞，與水不發(fā)生反應(yīng)，且難溶或不溶于水的成分的提取。如揮發(fā)油、小分子量的生物堿等。第三十三頁，共一百頁，2022年，8月28日第三十四頁，共一百頁，2022年，8月28日（3）超臨界流體提取法原理：用處于超臨界條件下的特殊流體（介于氣體和液體之間）為溶劑，具有更低的黏度和更高的擴(kuò)散速度，對許多物質(zhì)有很強(qiáng)的溶解能力。如CO2：Tc31.4℃，Pc7.37Mpa

范圍：適用于對熱及化學(xué)不穩(wěn)定的成分、低極性的成分的提取。第三十五頁，共一百頁，2022年，8月28日特點(diǎn)：接近室溫工作，適用對熱不穩(wěn)定的成分，無有機(jī)溶劑殘留，對環(huán)境無公害，提取效率高，節(jié)約能耗等。但對設(shè)備要求高。第三十六頁，共一百頁，2022年，8月28日（4）其他方法升華法樟腦（樟木）咖啡因（茶葉）壓榨法固相提取法超聲提取法微波提取法酶提取法第三十七頁，共一百頁，2022年，8月28日3.分離純化方法利用溶解度差異進(jìn)行分離利用分配系數(shù)差異進(jìn)行分離利用吸附性能差異進(jìn)行分離利用分子大小不同進(jìn)行分離其他方法第三十八頁，共一百頁，2022年，8月28日（1）溶解度差異原理：相似相溶。方法：重結(jié)晶法、沉淀法等。第三十九頁，共一百頁，2022年，8月28日溶解度差異第四十頁，共一百頁，2022年，8月28日原理：被分離組成在兩種互不相溶的溶劑中的分配系數(shù)（K）的不同達(dá)到分離。

K與萃取次數(shù)的關(guān)系：分離因子（b值）與分離難易的關(guān)系：方法：簡單萃取法、連續(xù)萃取法、液滴逆流法（DCCC）、高速逆流法（HSCCC）、氣相色譜法（GC）、液相色譜法（LC）等。b=KA/KBK值與萃取次數(shù)成反比。即K值越大，萃取次數(shù)越少，反之越多。b值越大，越易分離；b＝1時(shí)，無法分離（2）分配系數(shù)差異第四十一頁，共一百頁，2022年，8月28日

簡單萃取法第四十二頁，共一百頁，2022年，8月28日

用于比水輕的溶劑用于比水重的溶劑連續(xù)萃取器第四十三頁，共一百頁，2022年，8月28日液滴逆流分配裝置圖能在短時(shí)間內(nèi)分離成兩相，并可生成有效的液滴。由于流動相形成液滴，在較細(xì)的萃取管中與固定相有效接觸、不斷摩擦形成新的表面，促進(jìn)溶質(zhì)在兩相溶劑中的分配，且不會產(chǎn)生乳化現(xiàn)象。第四十四頁，共一百頁，2022年，8月28日（3）吸附性能差異物理吸附（表面吸附）規(guī)律：“相似者易于吸附”特點(diǎn)：無選擇性、可逆吸附、快速原理：吸附與解吸附的往復(fù)循環(huán)三要素：吸附劑（硅膠、氧化鋁、活性炭）、溶質(zhì)(被分離物)、溶劑極性強(qiáng)弱的判斷：

(1)親水性基團(tuán)與極性成正比，親脂性基團(tuán)成反比；

(2)游離型化合物親脂、極性弱，解離型親水、極性強(qiáng)。溶劑的極性：依據(jù)介電常數(shù)來決定極性吸附劑：吸附劑一定時(shí)，溶質(zhì)極性越強(qiáng)，洗脫劑極性也應(yīng)越強(qiáng)。非極性吸附劑：吸附劑一定時(shí)，溶質(zhì)極性越強(qiáng)，洗脫劑極性應(yīng)越弱。第四十五頁，共一百頁，2022年，8月28日第四十六頁，共一百頁，2022年，8月28日（3）吸附性能差異化學(xué)吸附：特點(diǎn)：有選擇性、不可逆吸附原理：產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)酸性物質(zhì)與氧化鋁發(fā)生化學(xué)反應(yīng)堿性物質(zhì)與硅膠發(fā)生化學(xué)反應(yīng)氧化鋁容易發(fā)生結(jié)構(gòu)的異構(gòu)化半化學(xué)吸附：特點(diǎn)：吸附力介于上述二者之間原理：氫鍵吸附，如聚酰胺、大孔樹脂等

第四十七頁，共一百頁，2022年，8月28日（4）分子大小差異原理透析法（半透膜膜孔的分子篩作用）凝膠濾過法(三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的分子篩作用)

超濾法(分子大小不同引起的擴(kuò)散速度的差別)

超速離心法(溶質(zhì)在超速離心作用下沉降性的差別）三要素載體(葡聚糖凝膠)、溶質(zhì)(被分離物)、洗脫劑應(yīng)用蛋白質(zhì)的脫鹽精制；蛋白、多糖的分離；大分子化合物如糖苷類成分的精制第四十八頁，共一百頁，2022年，8月28日第四十九頁，共一百頁，2022年，8月28日（5）離解度不同（離子交換樹脂）原理利用酸、堿化合物在解離狀態(tài)時(shí)與陰、陽離子樹脂產(chǎn)生離子交換的原理達(dá)到分離的方法。三要素固定相(離子交換樹脂)、溶質(zhì)(被分離物)、洗脫劑應(yīng)用酸、堿類化合物如氨基酸、生物堿、有機(jī)酸的分離第五十頁，共一百頁，2022年，8月28日常用色譜分離方法介紹：

吸附劑分離原理吸附規(guī)律應(yīng)用硅膠吸附原理弱酸性、極性吸附劑廣泛（酸、堿及化合物極性越大、中性成分均可）吸附能力強(qiáng)（難洗脫）溶劑極性越小，吸附力越強(qiáng)

氧化鋁吸附原理堿性、極性吸附劑堿性、中性成分吸附規(guī)律同上（酸性成分與鋁絡(luò)合）活性炭吸附原理非極性吸附劑從稀水溶液中富集微量物質(zhì)吸附規(guī)律與上相反脫色（脂溶性色素）聚酰胺氫鍵吸附形成氫鍵越多，吸附力越強(qiáng)黃酮、蒽醌的分離大孔吸附樹脂吸附原理非極性化合物易被非極性樹脂吸附糖與苷的分離

吸附色譜第五十一頁，共一百頁，2022年，8月28日類型固定相流動相應(yīng)用正相色譜水>BAW系統(tǒng)極性、中極性物質(zhì)分離（以PPC為例）反相色譜ODS<甲醇-水、乙腈-水最廣泛，非極性、中極性各類物質(zhì)的分離

加壓液相色譜類型壓力（Pa）分離規(guī)模分析用高壓液相色譜（HPLC）>20.2×1051mg左右制備用高壓液相色譜（HPLC）>5mg中壓液相色譜(MPLC)5.05~20.2×105>100mg低壓液相色譜(LPLC)<5.05×10510mg~1g快速色譜約2.02×105>10mg液-液分配色譜（分配原理）第五十二頁，共一百頁，2022年，8月28日葡聚糖凝膠色譜

類型原理溶脹溶劑應(yīng)用

葡聚糖凝膠分子篩（大→?。┧嗵?、多肽、（SephadexG）蛋白質(zhì)分離羥丙基葡聚糖凝膠分子篩（糖苷）水、極性有機(jī)溶劑不同類型（SephadexLH-20）吸附原理（苷元）或二者的混合溶劑化合物分離離子交換吸附樹脂樹脂類型原理應(yīng)用陽離子交換樹脂離子交換從酸水溶液中吸附堿性成分（生物堿）強(qiáng)酸性（R-SO3-H+）（陽離子）（除去酸性、中性成分）弱酸性（-COO-H+）陰離子交換樹脂離子交換從堿水溶液中吸附酸性成分（有機(jī)酸）強(qiáng)堿性（RN+(CH3)3CI-）（陰離子）（除去堿性、中性成分）弱堿性(伯、仲、叔胺)第五十三頁，共一百頁，2022年，8月28日（6）其他純化方法鹽析法中藥水提液，加無機(jī)鹽達(dá)到一定濃度（飽和），有些成分則分離。常用鹽：NaCl,Na2SO4,MgSO4,(NH4)2SO4等。例，三顆針提取小檗堿加NaCl。分餾法利用不同成分的沸點(diǎn)不同而分離。常用于揮發(fā)油、生物堿等。例，毒芹總堿中毒芹堿166-167℃，羥基毒芹堿226℃。第五十四頁，共一百頁，2022年，8月28日4.影響因素光照酸堿溫度溶劑層析過程第五十五頁，共一百頁，2022年，8月28日光照第五十六頁，共一百頁，2022年，8月28日酸堿第五十七頁，共一百頁，2022年，8月28日溶劑第五十八頁，共一百頁，2022年，8月28日層析過程第五十九頁，共一百頁，2022年，8月28日第4節(jié)中藥化學(xué)成分鑒定和結(jié)構(gòu)研究簡介化合物的純度測定結(jié)構(gòu)研究的主要程序結(jié)構(gòu)研究的主要方法結(jié)構(gòu)研究實(shí)例第六十頁，共一百頁，2022年，8月28日1.化合物的純度測定晶形

結(jié)晶均勻、一致熔點(diǎn)

熔點(diǎn)明確、敏銳，熔距0.5-1.0℃薄層色譜或紙色譜

三種以上不同展開劑展開，均呈現(xiàn)單一斑點(diǎn)HPLC、GC等色譜方法

呈現(xiàn)單一色譜峰第六十一頁，共一百頁，2022年，8月28日2.結(jié)構(gòu)研究的主要程序初步推斷化合物類型測定分子式，計(jì)算不飽和度確定官能團(tuán)、結(jié)構(gòu)片斷、骨架推斷平面結(jié)構(gòu)確定主體結(jié)構(gòu)1.觀察樣品在提取、分離過程中的行為2.測定理化常數(shù)，如溶解度、色譜行為、定性反應(yīng)等3.結(jié)合文獻(xiàn)調(diào)研1.高分辨質(zhì)譜（HR-MS）2.元素分析（EA）3.同位豐度比法1.測定解析波譜數(shù)據(jù)（UV,IR,NMR,MS）2.官能團(tuán)定性定量分析1.綜合分析譜學(xué)數(shù)據(jù)及定性、定量分析結(jié)果2.與已知化合物進(jìn)行比較1.測定CD或ORD2.測定NOE或2D－NMR3.X－射線衍射分析4.人工合成第六十二頁，共一百頁，2022年，8月28日3.結(jié)構(gòu)研究的主要方法（1）確定分子式、分子量，計(jì)算不飽和度分子式的確定元素分析法→實(shí)驗(yàn)式（結(jié)合分子量）→分子式同位素豐度比法（﹤500）↑

HR-MS→分子量、分子式

不飽和度的計(jì)算

U=1+n4-0.5(n1-n3)MS冰點(diǎn)下降法沸點(diǎn)上升法粘度法凝膠濾過法第六十三頁，共一百頁，2022年，8月28日3.結(jié)構(gòu)研究的主要方法（2）化學(xué)法確定化合物結(jié)構(gòu)骨架與官能團(tuán)顏色反應(yīng)化學(xué)反應(yīng)第六十四頁，共一百頁，2022年，8月28日3.結(jié)構(gòu)研究的主要方法（3）波譜法研究化合物結(jié)構(gòu)

UV

IR

NMR

MS

ORD

CD

X-射線單晶衍射第六十五頁，共一百頁，2022年，8月28日紫外－可見吸收光譜（UV-vis）定義分子中的電子可因光線照射從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)，其中π-π*、n-π*躍遷由吸收紫外光或可見光引起，此區(qū)域測得的光譜為紫外－可見光譜。測定樣品量很少。應(yīng)用已知化合物：化合物的初步鑒定及含量測定。未知化合物：推斷骨架，如含共軛雙鍵、α,β-不飽和羰基、芳香化合物等。第六十六頁，共一百頁，2022年，8月28日電子躍遷與UV-vis光譜第六十七頁，共一百頁，2022年，8月28日β－藏茴香酮的UV光譜第六十八頁，共一百頁，2022年，8月28日定義分子中價(jià)鍵的伸縮及彎曲振動在光的紅外區(qū)域（4000-500cm-1）引起吸收，測得的圖譜為紅外光譜。反映功能團(tuán)與波長的關(guān)系。只需5-10μg。4000-1500cm-1為特征區(qū)，1500-500cm-1為指紋區(qū)。應(yīng)用已知化合物：測定紅外光譜疊圖或檢索紅外光譜數(shù)據(jù)。未知化合物：用于確定官能團(tuán)以及芳環(huán)取代的判斷等。紅外光譜（IR）第六十九頁，共一百頁，2022年，8月28日s-(-)-藏茴香酮的IR光譜第七十頁，共一百頁，2022年，8月28日定義化合物分子在磁場中受電磁波的輻射，有磁距的1H原子核吸收一定能量產(chǎn)生能級的躍遷，即發(fā)生核磁共振，以吸收峰的頻率對吸收強(qiáng)度作圖所得。氫同位素中，1H豐度最大，信號靈敏，1H-NMR易測，應(yīng)用廣。應(yīng)用測定化學(xué)位移（δ0-20ppm）、譜線的積分面積及裂分情況（重峰數(shù)及偶合常數(shù)），提供分子中1H的類型、數(shù)目及相鄰原子或原子團(tuán)的信息。核磁共振氫譜（1H-NMR）第七十一頁，共一百頁，2022年，8月28日

化學(xué)位移（Chemicalshift,δ）

1H核因周圍化學(xué)環(huán)境不同，其外圍電子云密度以及繞核旋轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生的磁的屏蔽效應(yīng)也不同。不同類型的1H共振信號出現(xiàn)在不同的區(qū)域，可識別。峰面積由于1H譜上積分面積與分子中的總質(zhì)子數(shù)相當(dāng)，故如知分子式，可據(jù)此算出每個(gè)信號所相當(dāng)?shù)?H數(shù)。信號的裂分及偶合常數(shù)磁不等同的兩個(gè)或兩組1H核在一定距離內(nèi)會因相互自旋偶合干擾而使信號發(fā)生分裂，表現(xiàn)出不同的裂分，如singlet、doublet、triplet、quartet、multiple等。第七十二頁，共一百頁，2022年，8月28日不同類型氫核化學(xué)位移的大致范圍第七十三頁，共一百頁，2022年，8月28日NOE效應(yīng)當(dāng)兩個(gè)質(zhì)子HA和HB在空間非常接近時(shí)，對HA做飽和照射時(shí)，HB的信號強(qiáng)度會增加，這種現(xiàn)象稱為NOE效應(yīng)。當(dāng)照射3.84ppm（OCH3）信號時(shí)，6.88ppm處5-H的信號增強(qiáng)，判斷－OCH3應(yīng)處于6-C上。第七十四頁，共一百頁，2022年，8月28日2D－NMR

1H-1HCOSY：相鄰質(zhì)子間的偶合關(guān)系。

13C-1HCOSY：HMQC，1H和與其直接相連的13C的偶合關(guān)系。HMBC，1H和與其遠(yuǎn)程偶合的13C的關(guān)系。

第七十五頁，共一百頁，2022年，8月28日乙酸乙酯的1H-1HCOSY圖譜第七十六頁，共一百頁，2022年，8月28日定義化合物分子在磁場中受電磁波的輻射，有磁距的13C原子核吸收一定能量產(chǎn)生能級的躍遷，即發(fā)生核磁共振，以吸收峰的頻率對吸收強(qiáng)度作圖所得。應(yīng)用提供的結(jié)構(gòu)信息是分子中各種不同類型及化學(xué)環(huán)境的碳核化學(xué)位移（δ0-200ppm），異核偶合常數(shù)及弛豫時(shí)間，其中利用度最高的是化學(xué)位移。核磁共振碳譜（13C-NMR）第七十七頁，共一百頁，2022年，8月28日噪音去偶譜（全氫去偶譜COM或?qū)拵ヅ甲VBBD）

采用寬頻的電磁輻射照射所有1H使之飽和后測定13C-NMR譜。1H對13C的偶合全部消除，所有13C信號在圖譜上均作為單峰出現(xiàn)，無法確定連接的1H數(shù)，但對判斷13C信號的化學(xué)位移很方便。選擇氫核去偶譜（SPD）或遠(yuǎn)程選擇氫核去偶譜（LSPD）對某個(gè)或某幾個(gè)氫核進(jìn)行照射，以消除其偶合影響。此時(shí)峰形發(fā)生改變的信號只是與之有偶合關(guān)連的13C信號。

DEPT通過改變照射1H核的脈沖寬度（θ）或設(shè)定不同的馳豫時(shí)間，使不同類型的1H信號在譜圖上呈單峰并分別呈現(xiàn)正向峰或倒置峰，靈敏度高，信號間重疊少，一種常規(guī)測定方法。第七十八頁，共一百頁，2022年，8月28日β-紫羅蘭酮的質(zhì)子非去偶譜β-紫羅蘭酮的噪音去偶譜第七十九頁，共一百頁，2022年，8月28日β-紫羅蘭酮9位羰基的LSPD譜a.質(zhì)子非去偶譜b.照射7-H,8-Hc.照射7-H,10-Hd.質(zhì)子噪音去偶譜e.照射10-Hf.照射8-H,10-H第八十頁，共一百頁，2022年，8月28日β-紫羅蘭酮的DEPT譜第八十一頁，共一百頁，2022年，8月28日定義

MS是記錄分析樣品在質(zhì)譜儀中經(jīng)高溫氣化（300℃），在離子源受一定能量沖擊產(chǎn)生陽離子，同時(shí)發(fā)生某些化學(xué)鍵的有規(guī)律的斷裂，而后在穩(wěn)定磁場中按質(zhì)量和電荷之比（m/z）順序進(jìn)行分享并通過檢測器表達(dá)的圖譜。

應(yīng)用（測定分子式和分子量）已知化合物：通過比較質(zhì)譜圖進(jìn)行鑒定。未知化合物：由碎片峰及裂解特征推定或復(fù)核分子的部分結(jié)構(gòu)。質(zhì)譜（MS）第八十二頁，共一百頁，2022年，8月28日第八十三頁，共一百頁，2022年，8月28日EI-MS（電子轟擊電離,electronimpactionization）測定時(shí)需先加熱氣化再電離，故易熱分解或難氣化的化合物，測不到分子離子峰。

FD-MS（場解析電離,fielddesorptionionization）將試樣稀溶液涂在鎢絲發(fā)射極上，通過真空密封系統(tǒng)進(jìn)入離化室作為陽極，再安裝陰極，加10kV的高電壓使其電離。適用于熱不穩(wěn)定、極性大、難揮發(fā)的化合物。高質(zhì)量區(qū)的信息較為詳盡。

FAB-MS（快原子轟擊電離,fastatombombardment）從離子槍射出的一次離子經(jīng)加速后在碰撞室通過交換電荷，產(chǎn)生高速中性離子，該中性離子撞擊試樣即可使之電離，得到分子離子及進(jìn)一步裂解的碎片。碎片類型與FD-MS相同，但低質(zhì)量區(qū)的結(jié)構(gòu)信息也較為詳盡。第八十四頁，共一百頁，2022年，8月28日桂皮酸乙酯EI-MS圖第八十五頁，共一百頁，2022年，8月28日Balanitin-1的FD-MS圖第八十六頁，共一百頁，2022年，8月28日ORD（旋光譜，OpticalRotatoryDispersion）

定義用不同波長的偏振光照射光學(xué)活性化合物，并用波長對比旋光度或摩爾旋光度作圖所得的曲線。應(yīng)用推斷不對稱分子的構(gòu)型和構(gòu)象。第八十七頁，共一百頁，2022年，8月28日CD（圓二色譜，CircularDichroism）定義記錄化合物在紫外光與可見光區(qū)所產(chǎn)生的橢圓偏振光的橢圓度與波長的關(guān)系。CD譜是透過介質(zhì)后的光的吸收曲線，而ORD則是它的分散曲線。應(yīng)用測定手性化合物的構(gòu)型、構(gòu)象、確定某些官能團(tuán)在手性分子中的位置等。第八十八頁，共一百頁，2022年，8月28日X－射線單晶衍射定義通過測定化合物晶體對X射線的衍射譜，再通過計(jì)算機(jī)用數(shù)學(xué)方法解析衍射譜，再還原為分子中各原子的排列關(guān)系，最后獲得每個(gè)原子在某一坐標(biāo)系中的分布，給出化合物化學(xué)結(jié)構(gòu)，獲得分子的全貌，是一種很好的測定化合物分子結(jié)構(gòu)的方法。同時(shí)還能測定出化合物結(jié)構(gòu)中的鍵長、鍵角、構(gòu)象、絕對構(gòu)型等結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)。應(yīng)用測定大分子物質(zhì)結(jié)構(gòu)。第八十九頁，共一百頁，2022年，8月28日4.結(jié)構(gòu)研究舉例今由某藥材中分離得到一種成分A，測得下列數(shù)據(jù)：無色針晶，mp154-156℃，[a]–59°(EtOH)

易溶于MeOH,EtOH,H2O，難溶于CHCl3,Et2OMolish反應(yīng)（＋），F(xiàn)eCl3反應(yīng)（－）IR(cm-1):3250~3500,1610,1590,1575,1075,1045,1020,1010,860,830MS(m/z):286(M+),163,145,127,124(100%)；其乙酰物m/z496（M+）

苦杏仁酶水解后得一個(gè)溶于乙醚的針晶B及D-葡萄糖酶水解后所得針晶B，測得下列數(shù)據(jù)：mp112~115℃元素分析C67.4%H6.50%

Gibb’s反應(yīng)（－），F(xiàn)eCl3

反應(yīng)（+）MS(m/z):124(M+)

1H-NMR(d):3.97(1H,t,D2O交換消失)4.51(2H,d)6.78,7.18(4H,AA’,BB’系統(tǒng))8.20(1H,s,D2O交換消失)第九十頁，共一百頁，2022年，8月28日第九十一頁，共一百頁，2022年，8月28日第5節(jié)

中藥藥理供試樣品的配制常用制劑中藥制劑濃度表示法

第九十二頁，共一百頁，2022年，8月28日1.常用制劑（1）水溶液

易溶于水的成分用蒸餾水或生理鹽水配制,用稀酸或稀堿溶液時(shí)pH4-9為宜?？杉訜峄蚣釉鋈軇?。（2）低濃度有機(jī)溶劑

適用于易溶于有機(jī)溶劑