埃博拉出血熱采樣及標(biāo)本運送課件

埃博拉出血熱的采樣與防護一、基本情況潛伏期2-21天,一般為5-12天。傳播途徑：接觸傳播、氣溶膠傳播。臨床表現(xiàn)：突然發(fā)病，各器官出血，肌肉疼痛，DIC（彌散性血管內(nèi)凝血）等90%的死亡患者在發(fā)病后12天內(nèi)死亡(7-14天)。病死率高，可達50%-90%。尚無特效藥和疫苗。埃博拉出血熱是最嚴(yán)重的出血熱一、基本情況型別⑴扎伊爾型（Ebola-Za?re）：毒力強，人感染后病死率高。⑵蘇丹型（Ebola-Sudan）：⑶科特迪瓦（Ebola-C?ted’Ivoire）：對黑猩猩有致死性,對人的毒力較弱。⑷雷斯頓型（Ebola-Reston）：在非人靈長類中有致死性,人感染不發(fā)病。抵抗力

埃博拉病毒在室溫下穩(wěn)定，60℃1小時大部分病毒被滅活,對紫外線、γ射線、甲醛、次氯酸、酚類等消毒劑和脂溶劑均敏感。二、臨床表現(xiàn)及診斷1、流行病學(xué)：來自疫區(qū)，或3周內(nèi)有疫區(qū)旅行史，或與患者、感染動物接觸。2、臨床表現(xiàn)：急性起病，發(fā)熱伴極度乏力、牙齦出血、鼻出血、黏膜出血、瘀點和紫斑、血便等及其他癥狀（頭痛、肌痛、咽痛、惡心、嘔吐)。3、實驗室檢測：

（1）病毒抗原陽性（2）血清特異性IgM抗體陽性（3）恢復(fù)期血清IgG比急性期有4倍升高（4）核酸陽性（5）分離到埃博拉病毒疑似病例：1+2確診病例：疑似病例+3中任一檢測陽性三、標(biāo)本采集-生物安全防護1、所有樣本的采集或處理應(yīng)遵守《醫(yī)院感染管理規(guī)范》和《病原微生物實驗室生物安全管理條例》等相關(guān)生物安全規(guī)定，在標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防的基礎(chǔ)上采用飛沫和接觸隔離的預(yù)防措施。2、樣本采集時，應(yīng)嚴(yán)格按照BSL-3級實驗室規(guī)定做好個人防護。應(yīng)穿戴醫(yī)用防護服、可遮蓋口鼻的醫(yī)用防護口罩(N95)、雙層乳膠手套、護目鏡、頭部面部保護罩、專用橡膠靴等。四、標(biāo)本采集與保存1、標(biāo)本采集時間初次送檢：目前檢測方法中主要是核酸檢測，埃博拉出血熱患者發(fā)病后3天內(nèi)的血標(biāo)本，病毒核酸陽性的可能性很小，因此建議采集發(fā)病72小時后的血標(biāo)本送檢。再次送檢：如果留觀/疑似病例發(fā)病72小時后血標(biāo)本實驗室檢測陰性，但臨床表現(xiàn)比較典型的患者，可在初次檢測24-48小時后再次采集血標(biāo)本送檢。解除隔離治療送檢：確診病例解除隔離治療前采集血標(biāo)本進行復(fù)檢。四、標(biāo)本采集與保存

2、標(biāo)本采集方法⑴.用分離膠無菌真空促凝管采集靜脈血，每管3mL，標(biāo)記后4℃保存。并填寫標(biāo)本采集登記表（附表1）⑵.

標(biāo)本采集數(shù)量留觀病例、疑似病例采集4管，其中2管送省疾控中心進行埃博拉病毒檢測，2管保存于本單位，待排除埃博拉病毒感染后用于其他病原體的篩查；

確診病例采集恢復(fù)期血標(biāo)本，送國家疾控中心病毒病所進行檢測。四、標(biāo)本采集與保存3、標(biāo)本保存方法

⑴.

未分離血清的全血標(biāo)本應(yīng)4℃保存，并盡快分離血清；⑵.血清標(biāo)本長期保存應(yīng)置于-70℃以下；⑶.標(biāo)本保存不超過1周可置-20℃。

4、標(biāo)本信息收集（填寫埃博拉出血熱流行病學(xué)個案調(diào)查表）病例一般信息：姓名、性別、年齡、國籍來自疫區(qū)國名、入境時間，發(fā)病日期，發(fā)病前21天的疫區(qū)居住史，旅行史、類似病例接觸史等。主要臨床癥狀：發(fā)熱、嚴(yán)重乏力、頭痛、肌痛、嘔吐、腹瀉、出血表現(xiàn)等標(biāo)本詳細信息：采樣時間、種類、標(biāo)本量等。送樣信息：負責(zé)送檢的聯(lián)系人姓名、聯(lián)系電話、送檢時間等標(biāo)本容器第一層2mL,可離心有墊圈第二層15mL,封口膜封口易標(biāo)記五、標(biāo)本包裝與運輸1、包裝方式：A類包裝（UN2814要求）按照三重包裝系統(tǒng)包裝：第一層包裝（可密封樣本袋、50mL離心管）；第二層安全殼容器（防水、防漏）；第三層外層運輸包裝。樣本袋放入防水防漏的第二層安全殼容器中，為降低破碎或泄漏的風(fēng)險，用吸水紙等填充物固定標(biāo)本袋。安全殼容器和外包裝放冰袋。五、標(biāo)本包裝與運輸2、運輸方式：全血采用冷藏運輸，血清可采用冷凍運輸不要打開采集管或分裝樣本。專人專車。六、實驗室檢測1、病原學(xué)檢測：⑴核酸檢測：主要檢測方法。發(fā)病后3天內(nèi)，血標(biāo)本中埃博拉病毒核酸檢出率低，檢測陰性不能排除埃博拉病毒感染。發(fā)病后3～10天血標(biāo)本病毒核酸檢出率高，檢測陰性可排除埃博拉病毒感染。⑵病毒抗原檢測：用酶聯(lián)免疫法檢測埃博拉病毒核蛋白抗原。病毒抗原檢測陽性可確診。發(fā)病后3天內(nèi)，血標(biāo)本中埃博拉病毒抗原檢出率低，檢測陰性不能排除埃博拉病毒感染，發(fā)病后3～10天血標(biāo)本病毒抗原檢出率高。六、實驗室檢測2.血清學(xué)檢測：⑴血清特異性IgM抗體：采用捕獲法ELISA方法檢測。IgM抗體陽性可確診。⑵血清特異性IgG抗體：目前采用間接法ELISA檢測IgG抗體。單份血清埃博拉病毒IgG抗體陽性提示曾感染埃博拉病毒，雙份血清埃博拉病毒IgG抗體陽轉(zhuǎn)或恢復(fù)期滴度較急性期4倍或者以