免疫球蛋白的檢測(cè)與臨床應(yīng)用

免疫球蛋白的檢測(cè)與臨床應(yīng)用第一頁，共二十七頁，2022年，8月28日免疫球蛋白（Ig）是由漿細(xì)胞合成和分泌的一組具有抗體活性的蛋白質(zhì)。由兩條重鏈和兩條輕鏈通過二硫鍵連接而構(gòu)成。重鏈分為IgG,IgA,IgM,IgD,IgE.輕鏈分為κ(kappa),λ(Lambda)兩個(gè)類別什么是免疫球蛋白？第二頁，共二十七頁，2022年，8月28日免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)第三頁，共二十七頁，2022年，8月28日血清免疫球蛋白IgG,IgA,IgM,定量測(cè)定方法一般有單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法，火箭免疫電泳法，ELISA,免疫比濁法，放射免疫分析法等，但臨床常用單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法和免疫比濁法來測(cè)定血清免疫球蛋白含量。檢測(cè)方法第四頁，共二十七頁，2022年，8月28日作為血清中最主要的抗體成分，約占人體血清中總免疫球蛋白含量的75%。是唯一能通過胎盤的Ig，IgG是血液和細(xì)胞外液中的主要抗體，也是機(jī)體再次免疫應(yīng)答的主要抗體，大多數(shù)抗感染抗體與自身抗體都為IgG類。16歲以上成年人IgG臨床參考范圍為：6.0~16.0g/LIgG第五頁，共二十七頁，2022年，8月28日第六頁，共二十七頁，2022年，8月28日在正常人血清中的含量?jī)H次于IgG，占血清免疫球蛋白含量的10～20%。新生兒血清中無IgA抗體，但可從母乳中獲得分泌型IgA。分為血清型IgA和分泌型IgA：其中血清型IgA含量占總IgA的85%左右，雖然血清型IgA雖有IgG和IgM的某些功能，但在血清中并不顯示重要的免疫功能。分泌型IgA存在于分泌液中，如唾液、淚液、初乳、鼻和支氣管分泌液、胃腸液、尿液、汗液等。機(jī)體粘膜局部抗感染免疫的主要抗體。故又稱粘膜局部抗體。16歲以上成年人IgA臨床參考范圍為：0.76~3.9g/LIgA第七頁，共二十七頁，2022年，8月28日第八頁，共二十七頁，2022年，8月28日IgM是初次體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的抗體，是機(jī)體抗感染的先頭部隊(duì)，血清中檢出IgM，提示新近發(fā)生感染，可用于感染的早期診斷。分泌型IgM為五聚體，是分子量最大的Ig，沉降系數(shù)為19S，稱為巨球蛋白，一般不能通過血管壁，主要存在于血液中。16歲以上成年人IgG臨床參考范圍為：0.4~3.45g/LIgM第九頁，共二十七頁，2022年，8月28日第十頁，共二十七頁，2022年，8月28日。第十一頁，共二十七頁，2022年，8月28日慢性肝臟疾病如慢性活動(dòng)性肝炎，原發(fā)性膽汁性肝硬化，隱匿性肝硬化患者血清中可見三種免疫球蛋白均升高。慢性細(xì)菌感染如慢性支氣管炎，肺結(jié)核，血 IgG可升高，宮內(nèi)感染時(shí)臍血或出生的新生兒血清中IgM含量可增高。IgG、IgA、IgM均升高第十二頁，共二十七頁，2022年，8月28日有先天性和獲得性兩類，先天性低免疫球蛋白血癥，主要見于體液免疫缺陷病和聯(lián)合免疫缺陷病。另一種情況是3種Ig中缺1種或2種，如IgA缺乏患者，易發(fā)生反復(fù)呼吸道感染；IgG缺乏患者，易發(fā)生化膿性感染；IgM缺乏患者，易發(fā)生革蘭陰性菌敗血癥。獲得性低Ig血癥，血清中IgG常小于5g/L，引起原因較多，如大量蛋白流失的疾?。▌兠撔云ぱ住⒛c淋巴管擴(kuò)張癥和腎病綜合征）、淋巴系統(tǒng)腫瘤（淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤）、中毒性骨髓疾病、長(zhǎng)期使用免疫抑制劑等。IgG、IgA、IgM降低第十三頁，共二十七頁，2022年，8月28日正常人血清中IgD含量很低，僅占血清免疫球蛋白總量的0.2%。IgD可在個(gè)體發(fā)育的任何時(shí)間產(chǎn)生，半衰期2.8天。血清IgD的生物學(xué)功能尚不清楚，膜結(jié)合型IgD（mIgD）構(gòu)成BCR，是B細(xì)胞分化發(fā)育成熟的標(biāo)志，未成熟的B細(xì)胞僅表達(dá)mIgM，成熟B細(xì)胞可同時(shí)表達(dá)mIgM和mIgD，稱為初始B細(xì)胞（nativeBcell）；活化的B細(xì)胞或記憶B細(xì)胞其表面的mIgD逐漸消失。IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，主要由黏膜下淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌。其重要特征為糖含量高達(dá)12%。IgE為親細(xì)胞抗體，可引起I型超敏反應(yīng)。此外，IgE可能與機(jī)體抗寄生蟲免疫有關(guān)。血清IgD和IgE第十四頁，共二十七頁，2022年，8月28日（一）測(cè)定方法

IgD的測(cè)定方法有放射免疫分析法，乳膠顆粒免疫比濁分析法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。在臨床用得最多的是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定IgD。（二）臨床意義

目前IgD的生物功能尚未完全闡明，血清中IgD升高主要見于妊娠末期，IgD型骨髓瘤，甲狀腺炎和大量吸煙。IgD降低見于原發(fā)性無丙種球蛋白血癥、肺硅沉著?。ㄎ危⒓?xì)胞毒藥物治療后。IgD測(cè)定及臨床意義第十五頁，共二十七頁，2022年，8月28日（一）測(cè)定方法1.總IgE的測(cè)定方法

有化學(xué)發(fā)光免疫分析法、放射免疫分析法、乳膠顆粒免疫比濁法及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。在臨床上用化學(xué)發(fā)光免疫分析法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定總IgE較為常見。2.特異性IgE的檢測(cè)方法

主要有免疫斑點(diǎn)法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。商品化的試劑盒提供了多種特異性的變應(yīng)原，包括食物、吸入物以及藥物過敏原，利用這些特異性變應(yīng)原就可以檢測(cè)血清中特異性IgE。IgE測(cè)定及臨床意義第十六頁，共二十七頁，2022年，8月28日（二）臨床意義1.I型變態(tài)反應(yīng)性疾病，如特發(fā)性哮喘、特發(fā)性皮炎、過敏性鼻炎等IgE常升高。2.非變態(tài)反應(yīng)性疾病，如IgE骨髓瘤、寄生蟲感染等IgE升高。3.急性或慢性肝炎、SLE、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等疾病IgE可升高。4.IgE降低見于原發(fā)性無丙種球蛋白血癥、腫瘤及化療藥物應(yīng)用后。IgE測(cè)定及臨床意義第十七頁，共二十七頁，2022年，8月28日與重鏈結(jié)合成免疫球蛋白的輕鏈稱為結(jié)合輕鏈，未與重鏈結(jié)合的輕鏈稱為游離輕鏈。游離輕鏈的量最終取決于B細(xì)胞的合成分泌與腎臟清除的動(dòng)態(tài)平衡結(jié)果，臨床上多種疾病都可導(dǎo)致血清中游離輕鏈濃度異常，例如：免疫抑制，自身免疫，腎臟清除率降低及漿細(xì)胞病等。什么是游離輕鏈?第十八頁，共二十七頁，2022年，8月28日游離輕鏈通過腎小球?yàn)V過而從血液中快速清除，然后被近端腎小管重吸收和分解，因此游離輕鏈的檢測(cè)可以實(shí)時(shí)評(píng)估病情進(jìn)展，研究表明大量的游離輕鏈可以被腎臟吸收，所以只有非常少的游離輕鏈逃過近端腎小管的重吸收，在正常的尿中含有極少量的游離輕鏈。第十九頁，共二十七頁，2022年，8月28日本周氏蛋白血清蛋白電泳免疫固定電泳免疫比濁法檢測(cè)游離輕鏈游離輕鏈的檢測(cè)第二十頁，共二十七頁，2022年，8月28日高敏感性：可達(dá)到5-10mg/L高特于性高檢測(cè)速率定量檢測(cè)：可同時(shí)檢測(cè)κ型和λ型輕鏈的水平以及兩者的比值，有利于鑒別診斷和監(jiān)測(cè)病情的變化免疫比濁法檢測(cè)第二十一頁，共二十七頁，2022年，8月28日Κ型游離輕鏈或λ型游離輕鏈中某一個(gè)指標(biāo)濃度異常增高和比值異常，常提示有單克隆類疾病，如多發(fā)性骨髓瘤，巨球蛋白血癥，原發(fā)性淀粉樣變性，輕鏈沉積病等。Κ型或λ型游離輕鏈同時(shí)增高，可能原因有感染，腎功能受損或結(jié)締組織類疾病。第二十二頁，共二十七頁，2022年，8月28日多發(fā)性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)是一種漿細(xì)胞單克隆惡性增生性疾病,其特征為由晚期B細(xì)胞分化的腫瘤性漿細(xì)胞分泌單克隆免疫球蛋白或重鏈,并伴有溶骨性病變和/或骨質(zhì)疏松。多發(fā)性骨髓瘤第二十三頁，共二十七頁，2022年，8月28日血常規(guī)

大多數(shù)MM患者血紅蛋白(hemoglobin,Hb)含量和紅細(xì)胞(redbloodcell,RBC)計(jì)數(shù)會(huì)有一定范圍的降低,大多數(shù)患者表現(xiàn)為正細(xì)胞正色素性貧血,也有小部分出現(xiàn)小細(xì)胞低色素性貧血癥狀,貧血程度會(huì)隨著病情的進(jìn)展逐漸加重。白細(xì)胞計(jì)數(shù)多正常,但也可增高或降低。血小板計(jì)數(shù)早期正常或增高,病情進(jìn)展時(shí)可減少。外周血涂片成熟RBC的形態(tài)大致正常,常見RBC重疊排列呈緡線狀。多發(fā)性骨髓瘤實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢查項(xiàng)目第二十四頁，共二十七頁，2022年，8月28日白蛋白/球蛋白比值(A/G)

在疾病初期,大部分MM患者的球蛋白增高,直接導(dǎo)致總蛋白明顯增加,白蛋白水平正常或降低。隨著病情的進(jìn)展,肝細(xì)胞合成功能降低導(dǎo)致白蛋白生成降低,且MM患者蛋白丟失增加,攝入減少,也會(huì)使白蛋白降低,導(dǎo)致A/G倒置。多發(fā)性骨髓瘤實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢查項(xiàng)目第二十五頁，共二十七頁，2022年，8月28日腎功能檢測(cè)

MM患者腎臟損害的發(fā)生由多種因素導(dǎo)致,其中骨髓瘤細(xì)胞所分泌的單克隆免疫球蛋白輕鏈在腎臟的沉積是導(dǎo)致MM腎病的主要原因。實(shí)驗(yàn)室檢查特征表現(xiàn)為血尿素氮及肌酐水平增高、肌酐清除率降低等,晚期甚至可出現(xiàn)尿毒癥。多發(fā)性骨髓瘤實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢查項(xiàng)目第二十六頁，共二十七頁，2022年，8月28日免疫球蛋白檢測(cè)

IgG型MM患者64%~80%出現(xiàn)IgG含量增高而IgA和IgM含量降低,IgA型MM患者只有58%出現(xiàn)IgA含量增高,IgG和IgM含量減低的占75%~100%;100%IgM型MM患者的IgM含量都增高,其它2種免疫球蛋白降低的占61%~75%;71%~100%的輕鏈型MM患者IgA、IgG、I