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全自動生化分析儀基本知識與應(yīng)用1第一頁,共八十五頁,2022年,8月28日一、自動生化分析儀的分類根據(jù)反應(yīng)裝置:連續(xù)流動式、離心式和分立式根據(jù)反應(yīng)介質(zhì):液相化學(xué)、干式化學(xué)根據(jù)反應(yīng)通道:單通道、多通道根據(jù)自動化程度:全自動、半自動根據(jù)儀器的復(fù)雜程度:小型、中型和大型根據(jù)分析系統(tǒng)試劑開放程度:封閉系統(tǒng)、開放系統(tǒng)2第二頁,共八十五頁,2022年,8月28日1.連續(xù)流動式生化分析儀比例泵空氣分段透析器管道式,攜帶污染3第三頁,共八十五頁,2022年,8月28日4第四頁,共八十五頁,2022年,8月28日2.離心式全自動生化分析儀幾乎“同步分析”隨機任選式(早期的必須按項目順序)比色杯人工清洗?(一次性)5第五頁,共八十五頁,2022年,8月28日3.分立式生化分析儀目前使用生化分析儀主要此種類型。比色杯袋式儀器可以自動制作比色杯比色杯可以兼作反應(yīng)杯比色杯不能作流動比色池(半自動)6第六頁,共八十五頁,2022年,8月28日4.干式生化分析儀
干片分:擴散層、試劑層、指示劑和支持層。利用“反射光度法”和“差式電位法”檢測。以液體樣品中的“水”為溶劑。理論基礎(chǔ):KubelkaMunk理論。7第七頁,共八十五頁,2022年,8月28日5.半自動生化分析儀光源(石英鹵素?zé)簦┏S谩案缮鏋V光片”分光微量流動比色池。終點法項目通常在“儀器”外孵育,時間和溫度的準(zhǔn)確性常影響測定結(jié)果。8第八頁,共八十五頁,2022年,8月28日例1臨床上所指的封閉式全自動生化分析儀主要是A質(zhì)控物封閉B試劑封閉C環(huán)境封閉D儀器封閉E技術(shù)人員封閉9第九頁,共八十五頁,2022年,8月28日例2全自動生化分析儀可分為小型、中型、大型,其依據(jù)是:A單通道和多通道數(shù)量B儀器可測定項目的多少C測定程序可否改變D儀器的復(fù)雜程度、功能和單位時間測試數(shù)量E是否可以同步分析10第十頁,共八十五頁,2022年,8月28日例3全自動與半自動生化分析儀共同之處為A取樣B加試劑混合C檢測波長D孵育反應(yīng)E清洗系統(tǒng)11第十一頁,共八十五頁,2022年,8月28日例4干化學(xué)式自動生化分析儀所用的光學(xué)系統(tǒng)為A分光光度計B原子吸光儀C反射比色計D固定閃爍計數(shù)器E免疫比濁計12第十二頁,共八十五頁,2022年,8月28日例5關(guān)于分立式全自動生化分析儀的比色杯的闡述,錯誤的是:A比色杯可以是反應(yīng)杯B比色杯可以自動制作C比色杯可以是流動比色池D比色杯可以是石英玻璃E比色杯可以是硬質(zhì)塑料13第十三頁,共八十五頁,2022年,8月28日二、自動生化分析儀的安裝與準(zhǔn)備1.工作環(huán)境空間、電源(UPS)、避免直射陽光、環(huán)境溫度和濕度、電磁輻射、化學(xué)品。2.水蒸餾水、去離子水、反滲透水。3.純水等級:一般二級二級純水微生物含量:最大每毫升菌落數(shù)103。14第十四頁,共八十五頁,2022年,8月28日例6臨床生化實驗室一般采用NCCLS所規(guī)定的二級純水,其微生物菌落(CFU/ml)應(yīng)低于A1B10C100D1000E10000015第十五頁,共八十五頁,2022年,8月28日例7臨床生化實驗室用水一般采用:A一級水B二級水C三級水D次級水E自來水16第十六頁,共八十五頁,2022年,8月28日三、全自動生化分析儀
基本結(jié)構(gòu)及工作原理1.樣品系統(tǒng)專用樣品杯和直接用采血試管凝塊和氣泡檢出功能自動沖洗功能樣品預(yù)稀釋、后稀釋、加倍、標(biāo)準(zhǔn)原液系列稀釋等不同的稀釋方式。17第十七頁,共八十五頁,2022年,8月28日2.試劑系統(tǒng)冷藏功能液面感應(yīng)及氣泡檢出雙試劑與多試劑試劑瓶的防蒸發(fā)與死體積試劑條碼18第十八頁,共八十五頁,2022年,8月28日3.條形碼系統(tǒng)三組成部分:掃描系統(tǒng)、信號整形、譯碼器黑條白空相間的條碼符號光電轉(zhuǎn)換元件常用條碼類型:Code39,Code128等19第十九頁,共八十五頁,2022年,8月28日4.反應(yīng)系統(tǒng)4.1反應(yīng)盤4.2混合裝置多用特氟隆不沾涂層的攪拌棒4.3溫控裝置理想的溫度波動應(yīng)小于±0.1℃3種方式:空氣浴、水浴、恒溫液間接加熱強生干化學(xué)儀用空氣浴恒溫20第二十頁,共八十五頁,2022年,8月28日5.清洗系統(tǒng)一般先用堿性液沖洗、再用酸性液沖洗、最后用去離子水沖洗。6.管路系統(tǒng)管路系統(tǒng)的老化或長期使用后反應(yīng)廢物的沉積阻塞常造成反應(yīng)結(jié)果的重復(fù)性差。21第二十一頁,共八十五頁,2022年,8月28日7.比色系統(tǒng)7.1光源鹵素?zé)舨ㄩL300~800nm
氙燈波長285~750nm使用壽命1000h左右,光源能量對340nm影響最大。7.2比色杯常用石英、硬質(zhì)玻璃、優(yōu)質(zhì)塑料光徑0.5~0.7cm。22第二十二頁,共八十五頁,2022年,8月28日7.3單色器朗伯比爾定律濾光片、棱鏡、光柵分光多采用光柵分光多采用后分光測量技術(shù)光源→比色杯→單色光器→檢測器7.4檢測器發(fā)光二極管8程序控制系統(tǒng)23第二十三頁,共八十五頁,2022年,8月28日9.攜帶污染常規(guī)清洗不能完全消除攜帶污染9.1常見原因共用系統(tǒng)保養(yǎng)不當(dāng)(污垢、老化)清洗液使用不當(dāng)排列順序不合理9.2計算小于0.3%為正常9.3常見組合24第二十四頁,共八十五頁,2022年,8月28日例8自動生化分析儀比色分析常用的檢測器是A固定閃爍計數(shù)器B硒電池C鎳氫電池D二極管E光電倍增管25第二十五頁,共八十五頁,2022年,8月28日例9自動生化分析儀的光源能量降低對單色光影響最大的波長是A340nmB405nmC450nmD500nmE630nm26第二十六頁,共八十五頁,2022年,8月28日例10自動生化分析儀清洗加樣針主要為了A提高分析精密度B提高分析準(zhǔn)確度C防止交叉污染D提高反應(yīng)速度E提高分析的靈敏度27第二十七頁,共八十五頁,2022年,8月28日例11大多數(shù)全自動生化分析儀比色杯的光徑是A0.5~0.7cmB0.8~1.0cmC1.1~1.9cmD2.0~3.9cmE≥4.0cm28第二十八頁,共八十五頁,2022年,8月28日例1229第二十九頁,共八十五頁,2022年,8月28日例1330第三十頁,共八十五頁,2022年,8月28日例14全自動生化分析儀比色杯的材料常采用A光學(xué)玻璃或一般塑料B普通玻璃或硬質(zhì)塑料C隔熱玻璃或普通塑料D石英玻璃或優(yōu)質(zhì)塑料E優(yōu)質(zhì)塑料或普通玻璃31第三十一頁,共八十五頁,2022年,8月28日例15目前全自動生化分析儀最常用的光柵分光方式為A前分光B中分光C后分光D前中后分光E前后分光32第三十二頁,共八十五頁,2022年,8月28日例16干式生化分析儀保持恒溫的方式是A空氣式恒溫器加熱B水浴式循環(huán)直接加熱C恒溫液循環(huán)間接加熱D金屬直接加熱E反應(yīng)液直接加熱33第三十三頁,共八十五頁,2022年,8月28日例17全自動生化分析儀的試劑與樣品的混合裝置類型為A攪拌棒B加溫C機械振蕩D加樣針E加混合液34第三十四頁,共八十五頁,2022年,8月28日例18
某實驗室全自動生化分析儀近兩天發(fā)現(xiàn)部分結(jié)果明顯不穩(wěn)定,儀器自檢正常,測定過程沒有錯誤報警,如果是交叉污染因素,首先應(yīng)考慮為A清洗劑的類型是否正確B
清洗用水是否符合要求C管路沖洗是否徹底D反應(yīng)杯是否需更新E用校準(zhǔn)品對儀器進行重新校正。35第三十五頁,共八十五頁,2022年,8月28日例19340nm波長屬于A可見光B紫外光C紅外光D近紅外光E遠紅外光36第三十六頁,共八十五頁,2022年,8月28日例2037第三十七頁,共八十五頁,2022年,8月28日例2138第三十八頁,共八十五頁,2022年,8月28日四、全自動生化分析儀常用分析技術(shù)1.光譜分析技術(shù)單波長、雙波長甚至多波長主波長,特有波長;副波長,為消除干擾而設(shè)單波長易受溶血、黃疸、脂濁的干擾;雙波長可消除上述干擾,減少雜散光、噪音干擾常用雙波長比濁340/700nm;
Hb340/380;NADH340/380、340/405;
ALP405/476;Trinder520/600。39第三十九頁,共八十五頁,2022年,8月28日1.1波長選擇的三個條件待測物質(zhì)的光吸收最大吸收峰寬而鈍常見干擾物在該波長下光吸收最小1.2吸收光譜分析
Lambert-Beer定律40第四十頁,共八十五頁,2022年,8月28日1.3散射光譜分析散射光譜分析法光線通過溶液混懸顆粒后的光吸收或光散射程度的定律方法。透射比濁法散射比濁法目前,全自動生化分析儀主要采用透射比濁法。41第四十一頁,共八十五頁,2022年,8月28日2.電化學(xué)分析技術(shù)是利用物質(zhì)的電化學(xué)性質(zhì),測定化學(xué)電池的電位、電流或電量的變化的分析方法。基本公式:能斯特(Nernst)方程。測量電極與參比電極K+電極頡氨霉素;Na+
玻璃電極;Cl-
銀-氯化銀電極;CO2
氣敏電極42第四十二頁,共八十五頁,2022年,8月28日例2243第四十三頁,共八十五頁,2022年,8月28日例2344第四十四頁,共八十五頁,2022年,8月28日例2445第四十五頁,共八十五頁,2022年,8月28日例2546第四十六頁,共八十五頁,2022年,8月28日例2647第四十七頁,共八十五頁,2022年,8月28日例2748第四十八頁,共八十五頁,2022年,8月28日例28鈉電極屬于A晶體電極B氣敏電極C玻璃電極D酶電極E膜電極49第四十九頁,共八十五頁,2022年,8月28日例29很多分析儀都采用雙波長或多波長的光路技術(shù),是為了減少A試劑的干擾B樣品中黃疸、溶血、脂血的干擾C儀器光源的波動D批間差異E批內(nèi)差異50第五十頁,共八十五頁,2022年,8月28日例3051第五十一頁,共八十五頁,2022年,8月28日例3152第五十二頁,共八十五頁,2022年,8月28日例3253第五十三頁,共八十五頁,2022年,8月28日五、全自動生化分析儀常用測定項目
的反應(yīng)原理終點分析法連續(xù)監(jiān)測法干化學(xué)分析法電化學(xué)分析法54第五十四頁,共八十五頁,2022年,8月28日1.常用分析方法連續(xù)監(jiān)測法的定義終點法定義零級反應(yīng)期一級反應(yīng)期55第五十五頁,共八十五頁,2022年,8月28日2.NAD(P)H系統(tǒng)指示的反應(yīng)還原型NAD(P)H在340nm有吸收峰;氧化型NAD(P)則沒有。56第五十六頁,共八十五頁,2022年,8月28日2.1利用NAD(P)H→NAD,吸光度下降的:
ALTASTLD-PUNK+酶法
TCO2酶法57第五十七頁,共八十五頁,2022年,8月28日2.2利用NAD→NAD(P)H,吸光度升高的:CKCK-MBTBALD-LGlu-HKTBA58第五十八頁,共八十五頁,2022年,8月28日3.Trinder反應(yīng)Glu-GOD肌苷-肌氨酸氧化酶法尿酸GPO-PAPT-Ch,HDL/LDL-Ch59第五十九頁,共八十五頁,2022年,8月28日4.苯衍生物指示反應(yīng)ALPGGTNAG60第六十頁,共八十五頁,2022年,8月28日5.免疫透射比濁法Ⅳ型膠原TnIHs-CRP,LP(a)尿微量白蛋白,前白蛋白胱抑素C載脂蛋白61第六十一頁,共八十五頁,2022年,8月28日6.離子選擇電極法K+Na+Cl-TCO262第六十二頁,共八十五頁,2022年,8月28日7.常見受溶血影響較大的項目K+LDHCKASTALTMg63第六十三頁,共八十五頁,2022年,8月28日8.終點法反應(yīng)的項目Glu-GOD,肌苷-肌氨酸氧化酶法,尿酸,TG-GPO-PAP,T-Ch,9.速率法反應(yīng)的項目ALT,AST,ALP,GGT,TBA,CK,LD,Glu-HK,UN,NAG,64第六十四頁,共八十五頁,2022年,8月28日9.其他9.1反應(yīng)底物ALTL丙氨酸+α-酮戊二酸
ALP磷酸苯二鈉9.2用全血標(biāo)本:糖化血紅蛋白65第六十五頁,共八十五頁,2022年,8月28日例3366第六十六頁,共八十五頁,2022年,8月28日例3467第六十七頁,共八十五頁,2022年,8月28日例3568第六十八頁,共八十五頁,2022年,8月28日例3669第六十九頁,共八十五頁,2022年,8月28日例3770第七十頁,共八十五頁,2022年,8月28日例3871第七十一頁,共八十五頁,2022年,8月28日例3972第七十二頁,共八十五頁,2022年,8月28日例4073第七十三頁,共八十五頁,2022年,8月28日例4174第七十四頁,共八十五頁,2022年,8月28日例4275第七十五頁,共八十五頁,2022年,8月28日例4376第七十六頁,共八十五頁,2022年,8月28日例4477第七十七頁,共八十五頁,2022年,8月28日例4578第七十八頁,共八十五頁,2022年,8月28日例4679第七十
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