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全自動(dòng)生化分析儀基本知識(shí)與應(yīng)用1第一頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日一、自動(dòng)生化分析儀的分類根據(jù)反應(yīng)裝置:連續(xù)流動(dòng)式、離心式和分立式根據(jù)反應(yīng)介質(zhì):液相化學(xué)、干式化學(xué)根據(jù)反應(yīng)通道:?jiǎn)瓮ǖ?、多通道根?jù)自動(dòng)化程度:全自動(dòng)、半自動(dòng)根據(jù)儀器的復(fù)雜程度:小型、中型和大型根據(jù)分析系統(tǒng)試劑開放程度:封閉系統(tǒng)、開放系統(tǒng)2第二頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日1.連續(xù)流動(dòng)式生化分析儀比例泵空氣分段透析器管道式,攜帶污染3第三頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日4第四頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日2.離心式全自動(dòng)生化分析儀幾乎“同步分析”隨機(jī)任選式(早期的必須按項(xiàng)目順序)比色杯人工清洗?(一次性)5第五頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日3.分立式生化分析儀目前使用生化分析儀主要此種類型。比色杯袋式儀器可以自動(dòng)制作比色杯比色杯可以兼作反應(yīng)杯比色杯不能作流動(dòng)比色池(半自動(dòng))6第六頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日4.干式生化分析儀
干片分:擴(kuò)散層、試劑層、指示劑和支持層。利用“反射光度法”和“差式電位法”檢測(cè)。以液體樣品中的“水”為溶劑。理論基礎(chǔ):KubelkaMunk理論。7第七頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日5.半自動(dòng)生化分析儀光源(石英鹵素?zé)簦┏S谩案缮鏋V光片”分光微量流動(dòng)比色池。終點(diǎn)法項(xiàng)目通常在“儀器”外孵育,時(shí)間和溫度的準(zhǔn)確性常影響測(cè)定結(jié)果。8第八頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例1臨床上所指的封閉式全自動(dòng)生化分析儀主要是A質(zhì)控物封閉B試劑封閉C環(huán)境封閉D儀器封閉E技術(shù)人員封閉9第九頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例2全自動(dòng)生化分析儀可分為小型、中型、大型,其依據(jù)是:A單通道和多通道數(shù)量B儀器可測(cè)定項(xiàng)目的多少C測(cè)定程序可否改變D儀器的復(fù)雜程度、功能和單位時(shí)間測(cè)試數(shù)量E是否可以同步分析10第十頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例3全自動(dòng)與半自動(dòng)生化分析儀共同之處為A取樣B加試劑混合C檢測(cè)波長(zhǎng)D孵育反應(yīng)E清洗系統(tǒng)11第十一頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例4干化學(xué)式自動(dòng)生化分析儀所用的光學(xué)系統(tǒng)為A分光光度計(jì)B原子吸光儀C反射比色計(jì)D固定閃爍計(jì)數(shù)器E免疫比濁計(jì)12第十二頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例5關(guān)于分立式全自動(dòng)生化分析儀的比色杯的闡述,錯(cuò)誤的是:A比色杯可以是反應(yīng)杯B比色杯可以自動(dòng)制作C比色杯可以是流動(dòng)比色池D比色杯可以是石英玻璃E比色杯可以是硬質(zhì)塑料13第十三頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日二、自動(dòng)生化分析儀的安裝與準(zhǔn)備1.工作環(huán)境空間、電源(UPS)、避免直射陽(yáng)光、環(huán)境溫度和濕度、電磁輻射、化學(xué)品。2.水蒸餾水、去離子水、反滲透水。3.純水等級(jí):一般二級(jí)二級(jí)純水微生物含量:最大每毫升菌落數(shù)103。14第十四頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例6臨床生化實(shí)驗(yàn)室一般采用NCCLS所規(guī)定的二級(jí)純水,其微生物菌落(CFU/ml)應(yīng)低于A1B10C100D1000E10000015第十五頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例7臨床生化實(shí)驗(yàn)室用水一般采用:A一級(jí)水B二級(jí)水C三級(jí)水D次級(jí)水E自來(lái)水16第十六頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日三、全自動(dòng)生化分析儀
基本結(jié)構(gòu)及工作原理1.樣品系統(tǒng)專用樣品杯和直接用采血試管凝塊和氣泡檢出功能自動(dòng)沖洗功能樣品預(yù)稀釋、后稀釋、加倍、標(biāo)準(zhǔn)原液系列稀釋等不同的稀釋方式。17第十七頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日2.試劑系統(tǒng)冷藏功能液面感應(yīng)及氣泡檢出雙試劑與多試劑試劑瓶的防蒸發(fā)與死體積試劑條碼18第十八頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日3.條形碼系統(tǒng)三組成部分:掃描系統(tǒng)、信號(hào)整形、譯碼器黑條白空相間的條碼符號(hào)光電轉(zhuǎn)換元件常用條碼類型:Code39,Code128等19第十九頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日4.反應(yīng)系統(tǒng)4.1反應(yīng)盤4.2混合裝置多用特氟隆不沾涂層的攪拌棒4.3溫控裝置理想的溫度波動(dòng)應(yīng)小于±0.1℃3種方式:空氣浴、水浴、恒溫液間接加熱強(qiáng)生干化學(xué)儀用空氣浴恒溫20第二十頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日5.清洗系統(tǒng)一般先用堿性液沖洗、再用酸性液沖洗、最后用去離子水沖洗。6.管路系統(tǒng)管路系統(tǒng)的老化或長(zhǎng)期使用后反應(yīng)廢物的沉積阻塞常造成反應(yīng)結(jié)果的重復(fù)性差。21第二十一頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日7.比色系統(tǒng)7.1光源鹵素?zé)舨ㄩL(zhǎng)300~800nm
氙燈波長(zhǎng)285~750nm使用壽命1000h左右,光源能量對(duì)340nm影響最大。7.2比色杯常用石英、硬質(zhì)玻璃、優(yōu)質(zhì)塑料光徑0.5~0.7cm。22第二十二頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日7.3單色器朗伯比爾定律濾光片、棱鏡、光柵分光多采用光柵分光多采用后分光測(cè)量技術(shù)光源→比色杯→單色光器→檢測(cè)器7.4檢測(cè)器發(fā)光二極管8程序控制系統(tǒng)23第二十三頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日9.攜帶污染常規(guī)清洗不能完全消除攜帶污染9.1常見原因共用系統(tǒng)保養(yǎng)不當(dāng)(污垢、老化)清洗液使用不當(dāng)排列順序不合理9.2計(jì)算小于0.3%為正常9.3常見組合24第二十四頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例8自動(dòng)生化分析儀比色分析常用的檢測(cè)器是A固定閃爍計(jì)數(shù)器B硒電池C鎳氫電池D二極管E光電倍增管25第二十五頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例9自動(dòng)生化分析儀的光源能量降低對(duì)單色光影響最大的波長(zhǎng)是A340nmB405nmC450nmD500nmE630nm26第二十六頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例10自動(dòng)生化分析儀清洗加樣針主要為了A提高分析精密度B提高分析準(zhǔn)確度C防止交叉污染D提高反應(yīng)速度E提高分析的靈敏度27第二十七頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例11大多數(shù)全自動(dòng)生化分析儀比色杯的光徑是A0.5~0.7cmB0.8~1.0cmC1.1~1.9cmD2.0~3.9cmE≥4.0cm28第二十八頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例1229第二十九頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例1330第三十頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例14全自動(dòng)生化分析儀比色杯的材料常采用A光學(xué)玻璃或一般塑料B普通玻璃或硬質(zhì)塑料C隔熱玻璃或普通塑料D石英玻璃或優(yōu)質(zhì)塑料E優(yōu)質(zhì)塑料或普通玻璃31第三十一頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例15目前全自動(dòng)生化分析儀最常用的光柵分光方式為A前分光B中分光C后分光D前中后分光E前后分光32第三十二頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例16干式生化分析儀保持恒溫的方式是A空氣式恒溫器加熱B水浴式循環(huán)直接加熱C恒溫液循環(huán)間接加熱D金屬直接加熱E反應(yīng)液直接加熱33第三十三頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例17全自動(dòng)生化分析儀的試劑與樣品的混合裝置類型為A攪拌棒B加溫C機(jī)械振蕩D加樣針E加混合液34第三十四頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例18
某實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)生化分析儀近兩天發(fā)現(xiàn)部分結(jié)果明顯不穩(wěn)定,儀器自檢正常,測(cè)定過(guò)程沒有錯(cuò)誤報(bào)警,如果是交叉污染因素,首先應(yīng)考慮為A清洗劑的類型是否正確B
清洗用水是否符合要求C管路沖洗是否徹底D反應(yīng)杯是否需更新E用校準(zhǔn)品對(duì)儀器進(jìn)行重新校正。35第三十五頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例19340nm波長(zhǎng)屬于A可見光B紫外光C紅外光D近紅外光E遠(yuǎn)紅外光36第三十六頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例2037第三十七頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例2138第三十八頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日四、全自動(dòng)生化分析儀常用分析技術(shù)1.光譜分析技術(shù)單波長(zhǎng)、雙波長(zhǎng)甚至多波長(zhǎng)主波長(zhǎng),特有波長(zhǎng);副波長(zhǎng),為消除干擾而設(shè)單波長(zhǎng)易受溶血、黃疸、脂濁的干擾;雙波長(zhǎng)可消除上述干擾,減少雜散光、噪音干擾常用雙波長(zhǎng)比濁340/700nm;
Hb340/380;NADH340/380、340/405;
ALP405/476;Trinder520/600。39第三十九頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日1.1波長(zhǎng)選擇的三個(gè)條件待測(cè)物質(zhì)的光吸收最大吸收峰寬而鈍常見干擾物在該波長(zhǎng)下光吸收最小1.2吸收光譜分析
Lambert-Beer定律40第四十頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日1.3散射光譜分析散射光譜分析法光線通過(guò)溶液混懸顆粒后的光吸收或光散射程度的定律方法。透射比濁法散射比濁法目前,全自動(dòng)生化分析儀主要采用透射比濁法。41第四十一頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日2.電化學(xué)分析技術(shù)是利用物質(zhì)的電化學(xué)性質(zhì),測(cè)定化學(xué)電池的電位、電流或電量的變化的分析方法?;竟剑耗芩固兀∟ernst)方程。測(cè)量電極與參比電極K+電極頡氨霉素;Na+
玻璃電極;Cl-
銀-氯化銀電極;CO2
氣敏電極42第四十二頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例2243第四十三頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例2344第四十四頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例2445第四十五頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例2546第四十六頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例2647第四十七頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例2748第四十八頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例28鈉電極屬于A晶體電極B氣敏電極C玻璃電極D酶電極E膜電極49第四十九頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例29很多分析儀都采用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)的光路技術(shù),是為了減少A試劑的干擾B樣品中黃疸、溶血、脂血的干擾C儀器光源的波動(dòng)D批間差異E批內(nèi)差異50第五十頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例3051第五十一頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例3152第五十二頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例3253第五十三頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日五、全自動(dòng)生化分析儀常用測(cè)定項(xiàng)目
的反應(yīng)原理終點(diǎn)分析法連續(xù)監(jiān)測(cè)法干化學(xué)分析法電化學(xué)分析法54第五十四頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日1.常用分析方法連續(xù)監(jiān)測(cè)法的定義終點(diǎn)法定義零級(jí)反應(yīng)期一級(jí)反應(yīng)期55第五十五頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日2.NAD(P)H系統(tǒng)指示的反應(yīng)還原型NAD(P)H在340nm有吸收峰;氧化型NAD(P)則沒有。56第五十六頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日2.1利用NAD(P)H→NAD,吸光度下降的:
ALTASTLD-PUNK+酶法
TCO2酶法57第五十七頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日2.2利用NAD→NAD(P)H,吸光度升高的:CKCK-MBTBALD-LGlu-HKTBA58第五十八頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日3.Trinder反應(yīng)Glu-GOD肌苷-肌氨酸氧化酶法尿酸GPO-PAPT-Ch,HDL/LDL-Ch59第五十九頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日4.苯衍生物指示反應(yīng)ALPGGTNAG60第六十頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日5.免疫透射比濁法Ⅳ型膠原TnIHs-CRP,LP(a)尿微量白蛋白,前白蛋白胱抑素C載脂蛋白61第六十一頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日6.離子選擇電極法K+Na+Cl-TCO262第六十二頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日7.常見受溶血影響較大的項(xiàng)目K+LDHCKASTALTMg63第六十三頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日8.終點(diǎn)法反應(yīng)的項(xiàng)目Glu-GOD,肌苷-肌氨酸氧化酶法,尿酸,TG-GPO-PAP,T-Ch,9.速率法反應(yīng)的項(xiàng)目ALT,AST,ALP,GGT,TBA,CK,LD,Glu-HK,UN,NAG,64第六十四頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日9.其他9.1反應(yīng)底物ALTL丙氨酸+α-酮戊二酸
ALP磷酸苯二鈉9.2用全血標(biāo)本:糖化血紅蛋白65第六十五頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例3366第六十六頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例3467第六十七頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例3568第六十八頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例3669第六十九頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例3770第七十頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例3871第七十一頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例3972第七十二頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例4073第七十三頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例4174第七十四頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例4275第七十五頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例4376第七十六頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例4477第七十七頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例4578第七十八頁(yè),共八十五頁(yè),2022年,8月28日例4679第七十
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