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獸醫(yī)臨床診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)第一頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)血液樣本的采取與抗凝血液樣本的采取
采血的部位和方法,根據(jù)檢驗(yàn)的項(xiàng)目、所需血量和動(dòng)物種類的不同,可分為毛細(xì)血管采血、靜脈采血和心臟采血。毛細(xì)血管采血法除血沉測定和紅細(xì)胞壓積測定需較多量血液外,其他各項(xiàng)測定均可在耳尖、耳緣及耳靜脈處按毛細(xì)血管采血。采血前先剪毛,酒精棉球消毒,待酒精揮發(fā)后,用消毒的干燥的針頭迅速刺入2~3mm深,讓血液自然流出,且勿擠壓以免混入過多組織液。流出的第一滴血,可用于制作血片,然后用干棉球擦去局部的剩余血液,用流出的第二滴血液作紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測定,若利用第三滴血時(shí),仍要將第二滴血擦干,否則流出的血不能形成滴狀,不易吸取。靜脈采血法馬、牛、羊可由頸靜脈采血。雞可由翼下靜脈采血,即用細(xì)針頭刺入翼下靜脈后,任血液自行流出并接入試管中。犬、貓可于小腿外側(cè)跖背外側(cè)靜脈或前臂內(nèi)側(cè)皮下靜脈采血。局部剪毛消毒,用止血帶扎住采血部上端,使靜脈怒張,用消毒、干燥的注射器接上針頭,針頭斜上面刺入靜脈采血,待抽至所需量后,先放松止血帶,再用消毒棉球按住傷口,拔出針頭。除去針頭,將血液緩緩注入清潔的試管內(nèi)。需抗凝血液時(shí),試管內(nèi)加抗凝劑,并立即混勻,以免凝固。心臟采血法多用于雞及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物多量血液時(shí),雞可由胸腔入口處向心臟刺入由于心腔壓力較靜脈高,血液自然涌入注射器,兔及雞亦可在左側(cè)胸部第1、2肋間,心搏動(dòng)明顯處,針頭與胸壁呈垂直方向緩緩刺入。第二頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)血液的抗凝草酸鈉是常用的抗凝劑,每1.5~2.0mg可抗凝1.0ml血液,可用于血液常規(guī)檢驗(yàn)。因?qū)t細(xì)胞大小有影響,故不能用紅細(xì)胞壓積測定,如測定紅細(xì)胞壓積時(shí),可用雙草酸鹽抗凝劑或乙二胺四乙酸二鈉。雙草酸鹽抗凝劑
草酸鈉0.8g草酸銨1.2g蒸餾水加至100ml溶解后吸取0.5ml,加入供采血試管或小瓶中,置干燥箱內(nèi)(溫度不超過80℃)烘干備用,可供5ml全血抗凝。第三頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na2)每10mg可使5ml全血抗凝;或配成10%的溶液,每2滴可使5ml全血抗凝??蛇m用于一般的血液學(xué)檢查,特別是血小板計(jì)數(shù),但因?yàn)橛绊懷“寰奂桶准?xì)胞吞噬功能,不適合于血象及血小板功能檢查。3.8%枸櫞酸鈉溶液每0.5ml可使5ml全血抗凝。常用于血沉、凝血因子和血小板功能檢查。因其毒性小又可作為血液保養(yǎng)液。但不適用于血液化學(xué)檢驗(yàn)。由于抗凝劑溶解緩慢,故只能配成溶液,不能用粉劑。血液的抗凝第四頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)肝素肝素價(jià)格最貴,其優(yōu)點(diǎn)是抗凝作用強(qiáng),不影響血細(xì)胞的體積,不致溶血等,可用于多種血液生物化學(xué)分析和紅細(xì)胞壓積測定。但過量的肝素可引起白細(xì)胞聚集和血小板減少,故不適用于白細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù),也不適用于血涂片檢查,因其在瑞氏染色時(shí)會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色背景,更不能用于凝血象的檢查。血液的抗凝通常用肝素粉劑配成1g/L水溶液。取0.5ml置小瓶內(nèi),放于37~50℃中烘干后貯于冰箱內(nèi)保存。能使5ml血液不凝固,肝素抗凝劑應(yīng)及時(shí)使用,放置過久易失效。懷疑傳染病時(shí),采血應(yīng)防止到處流散,檢后殘余血液及所用器皿應(yīng)進(jìn)行消毒處理。第五頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)紅細(xì)胞沉降率測定魏氏法魏氏血沉管長30cm,內(nèi)徑2.5mm管上有0~200的刻度,每一刻度的距離為1mm,其溶積為1ml。先向10ml刻度試管中加入3.8%枸櫞酸1ml,再自靜脈采血4ml,顛倒混合數(shù)次,然后用魏氏血沉管吸取抗凝劑至刻度0處,擦去管外血液,在室溫條件下,垂直放于血沉管架上,經(jīng)15、30、45、60min,分別觀察并記錄細(xì)胞沉降數(shù)值。第六頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)紅細(xì)胞沉降率測定“六五”型血沉管法“六五”型血沉管法內(nèi)徑0.9cm,全長17~20cm,管上有100個(gè)刻度容積為10ml。于血沉管中加入抗凝劑(草酸鈉0.015~0.02g,枸櫞酸鈉粉末0.04~0.05g),自頸靜脈直接采血至刻度“0”處,立即充分混合,于室溫垂直立于試管架上,鏡15、30、45、60min各觀察一次,并記錄紅細(xì)胞沉降的數(shù)值。第七頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)紅細(xì)胞沉降率測定各種動(dòng)物的正常血沉值動(dòng)物種類15分30分45分60分測定方法馬驢黃牛水牛奶牛山羊豬31329.80.33497530.80.785396.7650.752055110.70.891.61.20.630六五型法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法六五型法①測定血沉?xí)r必須用新配制的抗凝血;②血液與抗凝劑混合要充分,柱面上不應(yīng)有氣泡,它可使血沉變慢;③用魏氏法測定時(shí),事先應(yīng)檢查血沉架是否好用,以防漏用;④測定時(shí)室溫以20℃左右為宜,溫度過低可以減慢血沉。血沉加快,見于馬傳染性貧血、梨形蟲病、結(jié)核、鼻疽、豬瘟、化膿性炎癥、風(fēng)濕癥等。血沉減慢,見于大出汗、多尿、劇烈腹瀉、馬流行性腦脊髓炎、破傷風(fēng)、牛瓣胃阻塞、腹痛癥等。第八頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)血紅蛋白測定紅細(xì)胞遇酸溶解,游離出血紅蛋白,并被酸化為褐色的酸性血紅素,稀釋后與標(biāo)準(zhǔn)色柱比色,即可求得血紅蛋白的含量。血紅蛋白試紙測定法器材應(yīng)備有測定血紅蛋白試紙和4g%~15g%血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)比色板。測定時(shí),取試紙一條,吸附被檢血液一小滴,待血完全浸透后,立即置于所附標(biāo)準(zhǔn)色板的小孔下,肉眼與色板色澤進(jìn)行比較,選擇顏色相同或近似者,即得100ml血液所含血紅蛋白的克數(shù)。沙利氏血紅蛋白測定法沙利氏血紅蛋白計(jì)由比色架、標(biāo)準(zhǔn)比色柱、血紅蛋白測定管及血紅蛋白吸管組成。測定管有兩個(gè)刻度標(biāo)志,一側(cè)的2~24刻度表示100ml血液中含有的血紅蛋白克數(shù);另一側(cè)有20~160刻度,表示100ml血液中所含血紅蛋白的百分?jǐn)?shù)。第九頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)血紅蛋白測定動(dòng)物種類血紅蛋白值(克/100毫升)馬、騾11.0(9.0~13.0)牛10.0(9.0~11.0)水牛8.3(8.0~9.0)羊9.8(7.8~11.6)豬10.5(9.5~12.0)雞12.5(10.0~14.5)血紅蛋白增高見于各種原因引起的血液濃縮,如腹瀉、嘔吐、大汗、多尿及腸梗阻等。血紅蛋白減少見于各種貧血,如馬鼻疽、牛結(jié)核、牛羊肝片吸蟲病、仔豬蛔蟲等。第十頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是將一定量的供檢血液經(jīng)一定倍數(shù)稀釋后,計(jì)數(shù)一定容積的紅細(xì)胞數(shù),并換算為每立方毫米血液內(nèi)含量。第十一頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)健康動(dòng)物紅細(xì)胞數(shù)(萬/立方毫米)動(dòng)物種類平均數(shù)值變動(dòng)范圍馬650600~700牛(包括水牛)600550~700綿羊900800~1100山羊13001000~1600豬600500~700雞350250~500紅細(xì)胞增多可見于因各種原因引起的血液濃縮,如大出汗、胸膜炎和腹膜炎的滲出期等。紅細(xì)胞減少多見于各種類型貧血,如馬傳染性貧血、牛梨形蟲病、仔豬營養(yǎng)性貧血、新生幼畜溶血病、牛血紅蛋白尿病等。第十二頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)白細(xì)胞計(jì)數(shù)用冰醋酸將紅細(xì)胞破壞后,計(jì)算每立方毫米內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)。健康動(dòng)物白細(xì)胞數(shù)(個(gè)/立方毫米)動(dòng)物種類平均數(shù)值變動(dòng)范圍馬80007000~9000黃牛、奶牛75007000~8000水牛88008000~9000綿羊85008000~9500山羊100007000~13000豬1300011000~16000雞2000018000~30000白細(xì)胞增多可見于多數(shù)細(xì)菌性感染和炎癥,如豬丹毒、豬肺疫、結(jié)核、馬鼻疽、馬腺疫、肺炎、胸膜炎、腹膜炎等。白血病時(shí)以白細(xì)胞的顯著增多為特征。白細(xì)胞減少主要見于某些病毒性傳染病,如豬瘟、流感等;某些重度疾病的后期;長期應(yīng)用某些藥物(如氯霉素等);梨形蟲病等。第十三頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)以百分率表示各種類型白細(xì)胞間的數(shù)量關(guān)系,稱為白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。健康動(dòng)物各類白細(xì)胞分類數(shù)值(%)動(dòng)物種類嗜堿性細(xì)胞嗜酸性細(xì)胞嗜中性細(xì)胞淋巴細(xì)胞大單核細(xì)胞幼稚型桿狀核分葉核馬牛水牛豬羊0.50.50.50.50.54.54.010.02.55.50.51.04.04.04.55.01.053.033.035.035.033.035.056.047.053.057.03.02.03.03.03.0第十四頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)臨床意義白細(xì)胞增多嗜中性白細(xì)胞增多:見于豬、牛巴氏桿菌病、馬腺疫、肺炎及化膿性感染等。嗜酸性白細(xì)胞增多:見于某些蠕蟲病、過敏性疾病及濕疹等。淋巴細(xì)胞增多:見于結(jié)核、鼻疽、布氏桿菌病、豬瘟及牛梨形蟲病。單核細(xì)胞增多:見于敗血性疾病,某些梨形蟲病及李氏桿菌等。白細(xì)胞減少嗜中性白細(xì)胞減少:見于病毒性傳染病、藥物中毒(如長期服用抗生素)、各種疾病的垂危期。嗜酸性白細(xì)胞減少:見于敗血癥、某些病毒病及牛梨形蟲病等。淋巴細(xì)胞減少:多為嗜中性白細(xì)胞增多而造成的相對性變化。第十五頁,共二十九頁,2022年,8月28日獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)在分析嗜中性白細(xì)胞增、減變化時(shí),還應(yīng)注意嗜中性白細(xì)胞的成熟情況。若未成熟的嗜中性白細(xì)胞增多,即出現(xiàn)嗜中性髓樣細(xì)胞、幼稚型和桿狀核嗜中性白細(xì)胞的比例增多,則稱為核左移。若血液內(nèi)分葉核嗜中性白細(xì)胞大量增多,而且核的分葉數(shù)目也增多,則稱為核右移。白細(xì)胞總數(shù)增多的同時(shí),出現(xiàn)核左移,表示骨髓造血機(jī)能加強(qiáng),機(jī)體處于積極防御階段;而白細(xì)胞總數(shù)減少時(shí)見有核左移,則表示骨髓造血機(jī)能減退,機(jī)體的抗病力降低。至于核右移,乃骨髓造血功能衰退的標(biāo)志,多因機(jī)體高度衰竭而引起,常提示預(yù)后慎重。臨床意義第十六頁,共二十九頁,2022年,8月28日尿液檢驗(yàn)?zāi)蛞簷z驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿尿液常規(guī)檢查注意事項(xiàng)1.供檢尿應(yīng)在清晨空腹采取的新鮮尿液為佳。因?yàn)檫@種尿液是在夜間形成的,受外界因素影響少。2.供檢尿液最好是導(dǎo)尿管采集的尿液。因?yàn)檫@種尿液沒有尿道、陰道污染物污染。3.采集尿液后,應(yīng)立即檢查,若不能及時(shí)檢驗(yàn),可加防腐劑,即每100ml尿液中加入福爾馬林3~4滴或麝香草酚0.1g。第十七頁,共二十九頁,2022年,8月28日尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿尿常規(guī)檢查內(nèi)容尿液一般物理性狀的檢查,包括透明度、尿色及氣味等。尿液一般化學(xué)性狀的檢查,包括酸堿度、尿蛋白質(zhì)、血液、血紅蛋白的檢查。透明度盛尿液于玻璃容器內(nèi),透光觀察。正常的馬尿因含有碳酸鈣及不溶性堿性鹽,故馬尿混濁不清;牛及其他家畜因碳酸鈣及不溶性鹽很少,故澄清透明。如馬尿透明時(shí),是喂精飼料過多或骨軟癥、胃腸炎的象征;牛尿變?yōu)榛鞚釙r(shí),常是腎炎、尿路炎癥的表現(xiàn)。第十八頁,共二十九頁,2022年,8月28日尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿尿常規(guī)檢查內(nèi)容尿色正常尿?yàn)樯铧S色或淡黃色。病理情況下有紅尿,是泌尿系統(tǒng)出血、肌紅蛋白尿或血紅蛋白尿;尿呈黃綠褐色是膽紅質(zhì)尿、尿膽素原尿的特征。尿氣味尿發(fā)氨臭,是膀胱炎、膀胱麻痹的表現(xiàn),是由于細(xì)菌作用,使尿液分解產(chǎn)生氨的結(jié)果;尿發(fā)腐敗臭,是膀胱、尿道有潰瘍、壞死或化膿性炎癥,由于蛋白質(zhì)腐敗分解而發(fā)生;尿發(fā)大蒜臭,見于牛酮血病、綿羊妊娠病,由于尿中含大量酮體的結(jié)果。第十九頁,共二十九頁,2022年,8月28日尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿尿酸堿度
草食動(dòng)物尿呈堿性反應(yīng),若尿呈酸性反應(yīng)時(shí),是軟骨癥或胃腸炎的象征。酸性尿液透明。尿蛋白質(zhì)正常尿含微量蛋白質(zhì),但用一般方法檢查不出來,若尿中證明含有蛋白質(zhì)時(shí)稱為蛋白尿。見于泌尿系統(tǒng)炎癥及熱性病。尿中血液尿中含有血液或血紅蛋白,稱為血尿。尿液中含有多量紅細(xì)胞時(shí),見于腎及尿路出血;含多量血紅蛋白,見于新生幼畜溶血病、犢牛水中毒、焦蟲病等。尿常規(guī)檢查內(nèi)容第二十頁,共二十九頁,2022年,8月28日尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿尿沉渣檢驗(yàn)
尿沉渣檢查,在臨床上很重要,故一般住院病畜應(yīng)作此項(xiàng)檢查。檢查時(shí)應(yīng)特別注意識(shí)別尿液中各種有形成分,各種上皮細(xì)胞、膿球、細(xì)菌及無機(jī)鹽等。尿常規(guī)檢查內(nèi)容尿中有機(jī)沉渣檢查無機(jī)鹽沉渣檢查
第二十一頁,共二十九頁,2022年,8月28日尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿有機(jī)沉渣檢查紅細(xì)胞:尿中出現(xiàn)紅細(xì)胞,是泌尿系統(tǒng)出血的特征。紅細(xì)胞的形態(tài),在新鮮尿液呈圓形淡紅綠色;酸性尿中,則紅細(xì)胞皺縮,邊緣呈鋸齒狀;堿性尿中,紅細(xì)胞膨脹或破壞,呈現(xiàn)陰影。白細(xì)胞:正常尿中僅有白細(xì)胞,尿液中最常見的是中性白細(xì)胞,而淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞均少見。尿中出現(xiàn)白細(xì)胞是腎、膀胱的炎癥。在新鮮尿中其形態(tài)比紅細(xì)胞大有核,易識(shí)別;酸性尿中其形態(tài)比較完整,加稀醋酸后其核更明顯;堿性尿中則膨脹而清晰。腎上皮細(xì)胞:比白細(xì)胞約大1/3,呈圓形,有一個(gè)較大的核,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有小顆粒,易識(shí)別。若尿中出現(xiàn)多量腎上皮細(xì)胞時(shí),是腎實(shí)質(zhì)性炎癥。尾狀上皮細(xì)胞:呈梨形或梭形,比白細(xì)胞大2—4倍。有一個(gè)圓形或橢圓形的核,這種細(xì)胞,來自腎盂、膀胱、尿道粘膜的深層,尿中出現(xiàn)時(shí)是重劇炎癥,尿道炎的居多。
尿中的上皮細(xì)胞1.腎上皮細(xì)胞2.腎盂及尿路上皮細(xì)胞3.膀胱上皮細(xì)胞第二十二頁,共二十九頁,2022年,8月28日尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿扁平上皮細(xì)胞:細(xì)胞大而扁平,核小而圓,細(xì)胞邊緣稍卷起,或幾個(gè)在一起,容易與其他細(xì)胞區(qū)別。它來自膀胱、尿道的表層,出現(xiàn)時(shí)膀胱、尿道的炎癥,但膀胱炎居多。管型:管型是腎有炎癥的標(biāo)志。當(dāng)腎患病時(shí),由腎小球?yàn)V出的蛋白質(zhì)在腎小管內(nèi)變性凝固或蛋白質(zhì)與其他成分相結(jié)合形成管型。尿中出現(xiàn)管型時(shí),是腎病的特征。有機(jī)沉渣檢查第二十三頁,共二十九頁,2022年,8月28日尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿管型為直的或稍彎曲的柱狀物,兩端鈍圓或呈拆斷樣,長短和寬窄不一樣,管型比蛋白質(zhì)出現(xiàn)為早,故對早期診斷有重要意義。臨床上常見的管型有以下幾種。有機(jī)沉渣檢查透明管型(玻璃樣管型):是其他管型的基礎(chǔ),其特征是結(jié)構(gòu)均勻,無色半透明,一般認(rèn)為是由蛋白質(zhì)凝固而來,或各種實(shí)質(zhì)細(xì)胞變性形成,是輕度腎炎,也見于熱性病及腎充血。若尿中長期少量出現(xiàn),是慢性間質(zhì)性腎炎的特征,這在診斷上很有價(jià)值。上皮細(xì)胞管型;是蛋白質(zhì)與腎小球脫落的上皮細(xì)胞粘集而成。尿中出現(xiàn)時(shí),是急性腎炎的特征。第二十四頁,共二十九頁,2022年,8月28日尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿有機(jī)沉渣檢查顆粒管型:是在透明管型內(nèi)含有粗大的或細(xì)小的顆粒,這種顆粒是腎小球上皮變性崩解的顆?;虻鞍踪|(zhì)凝固的顆粒,其與透明管型不同的是表面有顆粒,但較透明管型而短,因混有血液的色素,故呈黃色或褐色,出現(xiàn)顆粒管型時(shí),表現(xiàn)腎小球有嚴(yán)重的損害,見于重劇性腎炎。蠟樣管型:一般較粗,末端往往折斷,邊緣往往有缺口,結(jié)構(gòu)均勻,輪廓明顯,有玻璃樣閃光,表面類似蠟塊,長而直,很少有彎曲,比透明管型寬,色較灰暗,是腎小管上皮淀粉樣變性的結(jié)果,表示腎小管有嚴(yán)重變性或壞死。是重劇性腎炎之癥,予后多不良。第二十五頁,共二十九頁,2022年,8月28日尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿有機(jī)沉渣檢查脂肪管型:為上皮管型和顆粒管型中的脂肪性產(chǎn)物所形成,是一種較大的管型,表面蓋以脂肪滴和脂肪酸結(jié)晶,根據(jù)其強(qiáng)屈光的化學(xué)性質(zhì),不難區(qū)別,它不溶于酸和堿,而可溶于醚中見于腎脂肪變性性炎癥。紅細(xì)胞管型:是在透明或顆粒管型內(nèi)有多量紅細(xì)胞的一種管型,見于腎出血性炎癥。第二十六頁,共二十九頁,2022年,8月28日尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿尿中無機(jī)鹽,主要指各種無機(jī)鹽結(jié)晶及一些無機(jī)結(jié)晶物。馬正常尿中含有大量無機(jī)鹽,而且都在膀胱中形成結(jié)晶,其他家畜尿中如出現(xiàn)大量無機(jī)鹽沉渣,則是病理現(xiàn)象。尿中無機(jī)鹽沉渣,隨著尿酸堿度不同
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