同型半胱氨酸測(cè)定試劑注冊(cè)

附件3同型半胱氨酸測(cè)定試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)同型半胱氨酸測(cè)定試劑資料的技術(shù)審評(píng)提供參考。指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。一、適用范圍同型半胱氨酸測(cè)定試劑用于體外定量測(cè)定人血清或血漿中在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室采用酶循環(huán)法進(jìn)行同型半胱氨酸定量檢驗(yàn)所使用1（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局令第號(hào)知（2013242號(hào)，同型半胱氨酸測(cè)定試劑管理類6840。二、注冊(cè)申報(bào)資料要求（一）綜述資料（國(guó)家食品藥品監(jiān)督5（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局公201444體內(nèi)的同型半胱氨酸（HCY）來(lái)源于蛋氨酸，蛋氨酸主要來(lái)ATPS-腺苷蛋氨50Bouskey274666HCY5膽固醇增加587649mol/Lmol/L能的影響因素（年齡、性別、吸煙史和高膽固醇血癥等9—mol/L患者病死率是血清水平9mol/L患者的倍p；而同型半胱氨酸水平為1—mol/L患者病死率則是血清水平9mol/L（p為20mol/L患者病死率則是血清水平9mol/L（p險(xiǎn)預(yù)測(cè)因子。（二）主要原材料研究資料（如需提供）主要原材料（例如酶及其他主要原料）試驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計(jì)分析等詳細(xì)資料。（三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）1.主要生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡(jiǎn)要說(shuō)明主量的生產(chǎn)工藝。2長(zhǎng)等條件的確認(rèn)資料及試驗(yàn)數(shù)據(jù)，校準(zhǔn)方法、質(zhì)控方法等。（四）分析性能評(píng)估資料究方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、試驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)方法（如有、研究結(jié)論3臨床樣本來(lái)源等。1.準(zhǔn)確度對(duì)測(cè)量準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)依次包括：與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品（和/或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品）根據(jù)實(shí)際情況選擇以下方法的一項(xiàng)或幾項(xiàng)進(jìn)行研究。與國(guó)家（國(guó)際）標(biāo)準(zhǔn)品的相對(duì)偏差如果研究項(xiàng)目有相應(yīng)國(guó)（國(guó)際（國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行驗(yàn)證，重點(diǎn)觀察對(duì)相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)結(jié)果的偏差情況?；厥赵囼?yàn)用于評(píng)估定量檢測(cè)方法準(zhǔn)確測(cè)定加入純品（或標(biāo)準(zhǔn)溶液）3—5回收試驗(yàn)注意事項(xiàng)：（或標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)生基質(zhì)的變化；水平（10~20μmol/L；③純品（或標(biāo)準(zhǔn)溶液的回收樣本。方法學(xué)比對(duì)采用參考方法或國(guó)內(nèi)/國(guó)際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已上市同類（40），從測(cè)定結(jié)果間的差異了解擬申報(bào)試劑與參比方法擬申報(bào)試劑與對(duì)比方法相比不會(huì)產(chǎn)生差異結(jié)果。濃度分布范圍并對(duì)結(jié)果進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。2.空白吸光度完成后的吸光度值，測(cè)試結(jié)果即為試劑空白吸光度測(cè)定值。3.空白吸光度變化率（如適用）差值，空白吸光度變化率（ΔA/min）應(yīng)不大于企業(yè)規(guī)定值。分析靈敏度用試劑測(cè)試同型半胱氨酸已知濃度在（5—15）μmol/L樣本，記錄在試劑規(guī)定參數(shù)下的吸光度差值。對(duì)于終點(diǎn)法測(cè)試的試劑，μmol/L樣本的吸光度變化（ΔA）應(yīng)不小于。對(duì)于速率法測(cè)試的試劑，μmol/L樣本的吸光度變化率（ΔA/min）應(yīng)不小于。重復(fù)性C）應(yīng)不大于5%（±）μmol/L5所得結(jié)果的變異系數(shù)（CV）36.批間差3（±）μmol/L

樣本，每個(gè)批號(hào)測(cè)試337.線性建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)與臨床實(shí)際檢測(cè)的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度達(dá)到預(yù)期測(cè)定上限的混合人血清（或其他人源樣本，制備低濃度樣本時(shí)應(yīng)充分考慮稀釋對(duì)樣本基質(zhì)的影響，建議稀釋液盡量采用陰性血清。建立線性范圍時(shí)，需在預(yù)期測(cè)定范圍內(nèi)選擇7—11130%，在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果逐漸減少數(shù)據(jù)點(diǎn)（最終不得少于7直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，可發(fā)現(xiàn)最寬的線性范圍。驗(yàn)證線性范圍5—7必要時(shí)應(yīng)提供基質(zhì)效應(yīng)研究有關(guān)的資料。干擾試驗(yàn)考察樣本中常見干擾物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響（如））何種藥物及其濃度進(jìn)行。校準(zhǔn)品、質(zhì)控品賦值（如適用）應(yīng)參照GB/T21415—2008《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測(cè)量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》的要求，提供企業(yè)（工作）度計(jì)算記錄，提供質(zhì)控品定值及其靶值范圍確定的記錄。均一性取同批號(hào)的一定數(shù)量最小包裝單元的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，每包裝單元測(cè)試1次，按下面的公式計(jì)算測(cè)試結(jié)果的平均值（X ）1和標(biāo)準(zhǔn)差S1

；另用一個(gè)上述校準(zhǔn)品最小包裝單元連續(xù)測(cè)試相同（

2

；按下列各公式2計(jì)算瓶間重復(fù)性CV%，所有參數(shù)的瓶間重復(fù)性結(jié)果均應(yīng)符合要求。公式1公式2公式1公式2公式3公式4iXi1Xi(2n1X)2inSS2S2S122瓶間CV (%)S /X 100瓶間 瓶間 1當(dāng)S<S時(shí)，令CV =01 2 瓶間式中：X 平均值；S 標(biāo)準(zhǔn)差；7n 測(cè)量次數(shù)；x----指定參數(shù)第i次測(cè)量值。i其他需注意問(wèn)題項(xiàng)中所列的所有型號(hào)儀器的性能評(píng)估資料。具體說(shuō)明不同包裝規(guī)格之間的差別及可能產(chǎn)生的影響。相關(guān)性研究以確認(rèn)二者檢測(cè)結(jié)果是否完全一致或存在某種相關(guān)性（如系數(shù)關(guān)系。對(duì)于血漿樣本，申請(qǐng)人應(yīng)對(duì)不同的抗凝劑進(jìn)行研究以確認(rèn)最適的抗凝條件以及是否會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果。（五）參考區(qū)間確定資料計(jì)方法等。數(shù)均應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。相應(yīng)說(shuō)明。（六）穩(wěn)定性研究資料穩(wěn)定性研究主要包括效期穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性、開瓶（復(fù)溶）3（注：若有相關(guān)文獻(xiàn)中已明確說(shuō)明，亦）（七）臨床評(píng)價(jià)資料（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告201416）的要求，同時(shí)研究資料的形式應(yīng)符合《關(guān)于公布體外診（201444規(guī)定。下面僅對(duì)臨床試驗(yàn)中的基本問(wèn)題進(jìn)行闡述。研究方法選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市的性能不低于擬申報(bào)產(chǎn)品的同類產(chǎn)品作為對(duì)比試劑，采用試驗(yàn)用體外診斷試劑（以下稱考核試劑之進(jìn)行比較研究試驗(yàn)，證明本品與已上市產(chǎn)品等效。臨床研究單位的選擇應(yīng)在至少兩家經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局備案的臨床試量控制下，最大限度保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。倫理要求臨床試驗(yàn)必須符合赫爾辛基宣言的倫理學(xué)準(zhǔn)則，必須獲得臨9床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)倫理委員會(huì)的同意。研究者應(yīng)考慮臨床試驗(yàn)用樣本，如血清、血漿等的獲得或試驗(yàn)結(jié)果對(duì)受試者的風(fēng)險(xiǎn)性，應(yīng)提交倫理委員會(huì)的審查意見及受試者的知情同意書。對(duì)于例外情況，如客觀上不可能獲得受試者的知情同意或該臨床試驗(yàn)對(duì)受試者幾乎沒(méi)有風(fēng)險(xiǎn)，可經(jīng)倫理委員會(huì)審查和批準(zhǔn)后免于受試者的知情同意。臨床試驗(yàn)方案試驗(yàn)方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入則應(yīng)對(duì)額外的樣本類型進(jìn)行驗(yàn)證。研究對(duì)象選擇臨床試驗(yàn)應(yīng)選擇具有特定癥狀/體征人群作為研究對(duì)象。申研究總體樣本數(shù)不少于200例，并覆蓋線性范圍，應(yīng)充分考80如果聲稱同時(shí)適用于血清和血漿樣本，那么血清（或血漿的試驗(yàn)例數(shù)參照上述要求，并采用考核試劑同時(shí)驗(yàn)證其中至少100（或血清樣本測(cè)試結(jié)果100具體變更情況，酌情增加臨床試驗(yàn)總樣本數(shù)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析/偏態(tài)分布等情況，建議統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人選擇合理的統(tǒng)/偏差及相對(duì)偏倚/t）11判定系數(shù)（R、回歸擬合方程（斜率和y軸截距）核試劑與對(duì)比試劑是否等效的標(biāo)準(zhǔn)。t臨床試驗(yàn)總結(jié)報(bào)告撰寫根據(jù)《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通（201416臨床試驗(yàn)總體設(shè)計(jì)及方案描述研究人員簡(jiǎn)介等基本情況介紹。②病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)、不同人群的預(yù)期選擇例數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)。③樣本類型，樣本的收集、處理及保存等。④統(tǒng)計(jì)學(xué)方法、統(tǒng)計(jì)軟件、評(píng)價(jià)統(tǒng)計(jì)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)。具體的臨床試驗(yàn)情況信息。列表或圖示方式給出具體例數(shù)及百分比?？仄愤\(yùn)行情況，對(duì)檢測(cè)精密度、質(zhì)控品回收（或測(cè)量值、抽查結(jié)果評(píng)估。④具體試驗(yàn)過(guò)程，樣本檢測(cè)、數(shù)據(jù)收集、樣本長(zhǎng)期保存等。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析涉及對(duì)方案的修改。②定量值相關(guān)性和一致性分析y=a+bxrR2是對(duì)比試劑結(jié)果，bayr（要求r＞，如r＜，應(yīng)適當(dāng)擴(kuò)大樣本量以擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍，是判定系數(shù)（通常要求2≥，計(jì)算回歸系數(shù)及截距的95%可信區(qū)間。分別計(jì)算醫(yī)學(xué)決定水平處（或正常參考區(qū)間上限）相對(duì)偏倚/95%置信區(qū)間。醫(yī)學(xué)決定水平處（或正常參考區(qū)間上限）相對(duì)偏倚應(yīng)不大于允許誤差（建議參照1/2CLIA’88、1/2。應(yīng)給出考核試劑與對(duì)比試劑之間的差值（絕對(duì)偏倚/偏差或比值（相對(duì)偏倚/偏差）散點(diǎn)圖，觀察并分析各點(diǎn)的偏倚分布情況。t試劑與對(duì)比試劑等效性。討論和結(jié)論床研究有無(wú)特別說(shuō)明，最后得出臨床試驗(yàn)結(jié)論。（八）產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)分析資料申請(qǐng)人應(yīng)考慮產(chǎn)品壽命周期的各個(gè)環(huán)節(jié)，從預(yù)期用途、可13能的使用錯(cuò)誤、與安全性有關(guān)的特征、已知及可預(yù)見的危害等0316—2016《醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)醫(yī)療器械的應(yīng)用》的要求。（九）產(chǎn)品技術(shù)要求（5（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告20149）的相關(guān)規(guī)定。1產(chǎn)品適用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)GB/T191—2008GB/T21415—2008YY/T 0316—2016YY/T—2009YY/T 1258—2015

包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測(cè)量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)醫(yī)療器械的應(yīng)用醫(yī)療器械用于醫(yī)療器械標(biāo)簽、標(biāo)記和提供信息的符號(hào)第1部分：通用要求同型半胱氨酸測(cè)定試劑（盒（酶循環(huán)法）試劑空白、分析靈敏度、線性、精密度、準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性等。各性能指標(biāo)應(yīng)不低于YY/T1258—2015《同型半胱氨酸檢測(cè)試劑（盒（酶循環(huán)法》的要求，如有相應(yīng)的國(guó)家/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布或情況增加下列檢驗(yàn)項(xiàng)目：試劑空白吸光度變化率（如適用）度差值（ΔA，計(jì)算空白樣本的吸光度變化率（ΔA/min）應(yīng)不大于企業(yè)規(guī)定值。準(zhǔn)確度（方法學(xué)比對(duì)）用待測(cè)試劑盒與申請(qǐng)人選定分析系統(tǒng)（參考方法或國(guó)內(nèi)/國(guó)際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已上市同類試劑）40r（區(qū)間上限）相對(duì)偏倚應(yīng)不大于企業(yè)規(guī)定值。復(fù)溶穩(wěn)定性（干粉或凍干試劑適用（復(fù)溶后至少符合線性范圍、準(zhǔn)確度和重復(fù)性。校準(zhǔn)品和質(zhì)控品（如適用）21415—2008《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測(cè)量校準(zhǔn)品②性能要求：外觀、裝量、均一性（瓶間差準(zhǔn)品和定值質(zhì)控品為單獨(dú)注冊(cè)單元應(yīng)考察賦值的準(zhǔn)確性。附錄品、質(zhì)控品的賦值程序。（十）產(chǎn)品注冊(cè)檢驗(yàn)報(bào)告15（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管5（十一）產(chǎn)品說(shuō)明書（201417（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局令6結(jié)合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說(shuō)明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（201417指導(dǎo)注冊(cè)申報(bào)人員更合理地完成說(shuō)明書編制。于確實(shí)無(wú)適當(dāng)中文表述的詞語(yǔ)，可使用相應(yīng)英文或其縮寫?！绢A(yù)期用途】應(yīng)包括以下幾部分內(nèi)容：說(shuō)明試劑用于體外定量測(cè)定人血清和/或血漿中同型臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法等?！緳z驗(yàn)原理】2HCYHCYHCYHCY-S腺苷同型半胱氨酸（SAH，SAH被SAH-水解酶水解生成腺苷和HCYHCYHCYNADHNADHNADH（或量）成正比。HCYHCY（CBS）催化下和絲氨酸反應(yīng)生成L-β-分解酶（CBL）HCYNH3HCY（LDH）的催化下將NADH轉(zhuǎn)變?yōu)镹AD+HCY濃度與NADH（或量成正比?！局饕M成成分】試劑內(nèi)如包含校準(zhǔn)品和/17【儲(chǔ)存條件及有效期】息作詳細(xì)介紹。包括環(huán)境溫濕度、避光條件等。品總有效期以其中效期最短的為準(zhǔn)。12【適用儀器】便用戶能夠做出最好的選擇。6.【樣本要求】重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：應(yīng)注明對(duì)抗凝劑的要求。盡可避免此類樣本。樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件及期限、/對(duì)儲(chǔ)存樣本的添加劑要求等。（運(yùn)輸，并應(yīng)及時(shí)分離出血漿（或血清）樣本。最大可稀釋倍數(shù)、稀釋溶液等信息?！緳z驗(yàn)方法】詳細(xì)說(shuō)明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟，包括：試驗(yàn)具體操作步驟。試劑配制方法、注意事項(xiàng)。的注意事項(xiàng)。制。應(yīng)注明推薦的校準(zhǔn)周期。以及推薦的質(zhì)控周期等，如質(zhì)控不合格應(yīng)提供相關(guān)的解決方案?！緟⒖紖^(qū)間】間確定的方法。簡(jiǎn)單介紹設(shè)定該參考區(qū)間所選健康人群的區(qū)域特征，各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考區(qū)間”?！緳z驗(yàn)結(jié)果的解釋】說(shuō)明可能對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響的因素。10.【檢驗(yàn)方法的局限性】除病例的依據(jù)。說(shuō)明該檢驗(yàn)方法由于哪些原因會(huì)使測(cè)量結(jié)果產(chǎn)生偏離，19或測(cè)量結(jié)果還不能完全滿足臨床需要。如：干擾（蛋白、甘油三酯等）等?！井a(chǎn)品性能指標(biāo)】空白吸光度、試劑空白吸光度變化率（如適用、分析靈敏度、簡(jiǎn)要總結(jié)?！咀⒁馐马?xiàng)】應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，對(duì)患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/況綜合考慮。操作者采取必要的防護(hù)措施。是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響，如S-甲硫氨酸