天然藥物化學-黃酮類

天然藥物化學-黃酮類第一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日黃酮與生物堿為來自于植物的兩大類天然產(chǎn)物。已知化學結構的黃酮類物質至少有4000余種，黃酮類化合物中有藥用價值的化合物很多，如槐米中的蘆丁和陳皮中的橙皮苷，能降低血管的脆性，及改善血管的通透性、降低血脂和膽固醇，用于防治老年高血壓和腦溢血。第二頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日由銀杏葉制成的舒血寧片含有黃酮和雙黃酮類，用于冠心病、心絞痛的治療。全合成的乙氧黃酮又名心脈舒通或立可定，有擴張冠狀血管、增加冠脈流量的作用。許多黃酮類成分具有止咳、祛痰、平喘、抗菌的活性。護肝，解肝毒、抗真菌、治療急、慢性肝炎，肝硬化。第三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日自然界中以黃酮醇類最為常見，約占總數(shù)的三分之一，其次為黃酮類，占總數(shù)的四分之一以上，其余則較少見。至于雙黃酮類多局限分布于裸子植物，尤其松柏綱，銀杏綱和鳳尾綱等植物中。第四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類一、基本母核結構

一、基本母核結構

泛指兩個苯環(huán)（A環(huán)與B環(huán)）通過中央三碳鏈相互連接而成的一系列化合物。

基本骨架：C6-C3-C6第五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日存在形式在植物體內大部分與糖結合成苷類或碳糖基的形式存在，也有以游離形式存在的。天然黃酮類化合物母核上常含有羥基、甲氧基、烴氧基、異戊烯氧基等取代基。由于這些助色團的存在，使該類化合物多顯黃色。第六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類二氫查耳酮類（Dihydrochalcones）黃烷-3，4-二醇類（Flavan-3,4-diols）查耳酮類（Chalcones）二氫黃酮醇類（Flavanonols）二氫異黃酮類（Isoflavanones）二氫黃酮類（Flavanones）異黃酮類（Isoflavones）黃酮醇類（Flavonol）黃酮類（Flavones）三碳鏈部分名稱名稱三碳鏈部分黃烷-3-醇類（Flavan-3-ols）橙酮類（Aurones)雙苯吡酮類（Xanthones)第七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類（一）黃酮類flavones

黃酮黃酮醇母核：第八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類木犀草素（luteolin）黃芩苷抗菌作用，存在于菊花等植物中（一）黃酮類flavones唇形科、爵床科、菊科等代表化合物：第九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日黃芩來源于唇形科植物黃芩ScutellariabaicalensisGeorgi的根。功能主治消熱燥濕，瀉火解毒，止血，安胎。用于濕溫、暑溫胸悶嘔惡，濕熱痞滿，瀉痢，黃疸，肺熱咳嗽，高熱煩渴，血熱吐衄，癰腫瘡毒，胎動不安。第十頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日黃芩苷（貝加靈）本品為中藥黃芩的主要有效成分，有消炎抗菌、退黃、降谷丙轉氨酶(ALT)及抗過敏的作用。臨床用于急性、慢性遷延性和慢性活動性肝炎，也可用于腎炎、腎盂腎炎及過敏性疾病。第十一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類（一）黃酮醇類（flavonol）存在于木本植物的花與葉中槲皮素用于治療氣管炎抗炎及止咳祛痰作用

用于治療毛細血管脆弱引起的出血病，并用作高血壓的輔助治療劑。

3—蕓香糖蘆?。≧utin）（蕓香苷）

第十二頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日槐米來源于豆科植物槐（SophorajaponicaL．）的干燥花蕾，有涼血止血、清熱瀉火之功能。其干燥成熟果實稱槐角，有潤腸通便、止血涼血的功能。第十三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日蘆丁具有抗炎作用；維生素P樣作用，具有維持血管抵抗力、降低其通透性、減少脆性等作用。主要用于脆性增加的毛細血管出血癥，也用于高血壓腦病、腦出血、視網(wǎng)膜出血、出血性紫癜、急性出血性腎炎、再發(fā)性鼻出血、創(chuàng)傷性肺出血、產(chǎn)后出血等的輔助治療。

第十四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類（二）二氫黃酮（醇）類

flavanoes（flavanononls）存在于蕓香科、豆科等二氫黃酮二氫黃酮醇第十五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類橙皮素橙皮苷二、結構分類（二）二氫黃酮（醇）類

flavanoes（flavanononls）

第十六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日

菊科水飛薊屬植物水飛薊CarduusmarianusL.]，的全草及瘦果。對急性或慢性肝炎、肝硬化、脂肪肝、膽管炎均有良好療效

水飛薊素第十七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類（三）異黃酮（isoflavones）、二氫異黃酮（isoflavanones)類母核：異黃酮二氫異黃酮第十八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類大豆素大豆苷葛根素（三）異黃酮（isoflavones）、二氫異黃酮（isoflavanones)類第十九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日大豆異黃酮大豆異黃酮是一種植物雌激素，系由大豆等豆類植物中提出.大豆異黃酮對低雌激素水平者，表現(xiàn)弱的雌激素樣作用，可防治一些和激素水平下降有關的疾病的病癥，如更年期綜合征、骨質疏松、血脂升高等；對于高雌激素水平者，表現(xiàn)為抗雌激素活性，可防治乳腺癌、子宮內膜炎，具有雙向調節(jié)平衡功能。第二十頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日葛根為豆科植物野葛Puerarialobata（Willd．）ohwi的根。解肌退熱，透發(fā)麻疹，生津止渴，升陽止瀉。１．用于外感表證。用治外感表證:發(fā)熱重，惡寒輕，頭痛鼻干，口微渴苔薄黃之證，２．用于麻疹不透。故可用治麻疹初起，表邪外束，疹出不暢。３．用于熱病口渴，陰虛消渴。本品甘涼，有生津止渴之功，用治熱病津傷口渴。

第二十一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日葛根素具有改善心腦血管循環(huán)、降低血糖、抗高血壓及動脈硬化、提高機體免疫力等多種生物活性，還具有提高視力、迅速醒酒及雌激素樣作用。作為新型的天然功效因子，葛根素在食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)、日用化工工業(yè)等方面具有重要的作用。我國于1993年批準葛根素注射液作為新藥用于臨床治療心腦血管疾病，商品名為普樂林。葛根素第二十二頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日葛根素獨特的植物雌激素功效能減輕因衰老和雌激素水平下降導致的各種癥狀，如乳房下垂、皮膚起皺、皮膚活力下降、白發(fā)等，因此被用于制造豐乳霜、眼霜、護膚霜等。第二十三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類（四）查耳酮（chalcones）、二氫查耳酮（dihydrochalcones）類母核：查耳酮

二氫查耳酮第二十四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類在酸性條件下，2’-OH查耳酮轉變?yōu)闊o色的二氫黃酮，堿化后，轉為深黃色的2’-OH查耳酮，二者可相互轉化。2'-OH查耳酮二氫黃酮（四）查耳酮、二氫查耳酮類第二十五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日紅花菊科植物紅花的花?！竟πА浚夯钛ń?jīng)，去瘀止痛。治經(jīng)閉，難產(chǎn)，死胎，產(chǎn)后惡露不行、瘀血作痛，癰腫，跌打損傷。第二十六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日紅花甙（Carthamin）活血化瘀。用于治療閉塞性腦血管疾病，冠心病，脈管炎。第二十七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類（五）雙黃酮（二分子黃酮衍生物聚合生成的二聚物），多分布于裸子植物，尤以松柏綱、銀杏綱和鳳尾綱等植物中最普遍。

C-C連結C5’-C8、C8’-C8連接方式醚鏈連結C4’-O-C6第二十八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類（五）雙黃酮銀杏葉中銀杏素（gikgetin）具有解痙、降壓、擴冠作用。第二十九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日銀杏銀杏樹是一種古老的植物，約二億年前即已開始出現(xiàn)于地球上，是現(xiàn)存種子植物中最古老的植物，第四世紀冰川以后成為我國獨特的樹種，在學術界一直被譽為“活化石”。“植物界大熊貓”。銀杏葉具有顯著的藥理活性,僅是黃酮類成分就有20多種。第三十頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日銀杏對血液循環(huán)的作用；通過降低血小板(一個形成動脈硬化的關鍵因素)粘度、保持其分布均勻，從而直接促進血液循環(huán)。對血管的作用能增強動脈、靜脈和毛細血管的強度和彈性。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的保護作用。腦和神經(jīng)系統(tǒng)中自由基被廣泛認為是加速衰老的主要原因。銀杏促進血液循環(huán)，以及對細胞的氧氣和葡萄糖的輸送；銀杏保護細胞免受傷害，并將自由基清除出體外。

第三十一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日目前，對銀杏葉重點開發(fā)的產(chǎn)品有三類：第一，藥品：銀杏注射劑及片劑及膠囊、銀杏葉口服液等。用于冠心病心絞痛、腦出血痙攣、高血壓、高脂血癥、抗衰老等。第二，化妝品：已開發(fā)成洗發(fā)香波、護發(fā)劑、護膚霜等，用于治療粉刺、痤瘡及減肥。第三，保健食品：有巧克力糖、口香糖、米酒、飲料等，具有預防和治療老年性癡呆、腦中風等作用。第三十二頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類（六）花色素類（anthocyanidins）

第三十三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類（六）花色素類（anthocyanidins）天竺葵素

矢車菊素

飛燕草素第三十四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類（七）黃烷醇類黃烷—3—醇類（flavan—3—ols）黃烷—3、4—二醇類（flavan—3、4—diols）

3醇3、4二醇類第三十五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類（七）黃烷醇類

兒茶素抗脂肪肝作用抗癌和Vp樣作用第三十六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類（八）雙苯吡酮類（Xanthones）蕓果香葉中異芒果素（isomengiferin）具有止咳祛痰第三十七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)基本結構和分類二、結構分類二、結構分類（九）橙酮類（奧弄）（aurones）植物硫磺菊中硫磺菊素（Sulphuretin）第三十八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日三、黃酮苷天然黃酮類化合物多以苷類形式存在，組成黃酮苷的糖類主要有單糖、雙糖、參糖、?；恰＃ㄒ唬┏Ｓ玫奶菃翁穷悾篋—Glu，D—半乳糖，D—木糖，L—Rha，L—阿拉伯糖，D—葡萄糖酸。第一節(jié)基本結構和分類三、黃酮苷第三十九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日三、黃酮苷

雙糖類：槐糖類（glcβ1-2glu）龍膽二糖(gluβ1-6glu)

蕓香糖(rhaα1-6glu)新橙皮糖(rhaα1-2glu)

刺槐二糖(rhaα1-6gal)三糖類：龍膽三糖(gluβ1-6gluβ1-2fru)槐三糖(gluβ1-2gluβ1-2glu)酰化糖：2—2酰葡萄糖咖啡?；咸烟堑谝还?jié)基本結構和分類三、黃酮苷第四十頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日三、黃酮苷（二）連接位置

黃酮苷中糖的連接位置與苷元的結構類型有關，黃酮醇類:常形成3-、7-、3’-、4’-單糖苷，或3、7-，3’、4’-及7、4’-雙糖苷等.花色苷類:多在3—OH連糖或形成3、5—二糖苷第一節(jié)基本結構和分類三、黃酮苷第四十一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日三、黃酮苷第一節(jié)基本結構和分類三、黃酮苷（三）除O苷外還有C苷牡荊素（Vitexin）

R=H

葛根素R=Xylose葛根黃素木糖苷第四十二頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日二、生理活性對心血管系統(tǒng)的作用降低毛細血管脆性及異常通透性：蘆丁、橙皮苷擴張冠狀動脈，治療冠心病：葛根素降壓銀杏素抑制血小板聚集及血栓形成紅花/銀杏素第四十三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日二、生理活性

二、生理活性

2、抗肝臟毒作用水飛薊素、（+）-兒茶素3、抗炎作用二氫槲皮素4、雌性激素樣作用大豆素等5、抗菌及抗病毒作用木樨草素、黃芩苷、黃芩素、槲皮素。第四十四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日6、瀉下作用營石苷A7、解痙作用異甘草素、大豆素8、止咳，平喘作用第四十五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質一、性狀一、性狀1、游離黃酮類化合物：完好的晶型黃酮苷類：無定形粉末

游離黃酮：除二氫黃酮（醇）、黃烷（醇）有旋光性，其余則無；苷類：因引入糖，分子故均有旋光性。且多為左旋。2、旋光性：第四十六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質一、性狀一、性狀3、顏色1）呈色因素：結構中有無交叉共軛體系，助色團（-OH，-OCH3）數(shù)目及位置。第四十七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質一、性狀一、性狀3、顏色2）呈色規(guī)律（1）一般情況下：黃酮醇及其苷類灰黃色到黃色查耳酮

二氫黃酮（醇）無色異黃酮微顯黃色（3）花色苷及苷元顏色因pH不同而改變：

pH＜7

紅色；

pH=8.5

紫色；

pH＞8.5

藍色黃色到橙黃色（2）7、4’位引入助色團后顏色加深，其它位引入助色團影響較少。

第四十八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質二、溶解性二、溶解性

1、游離黃酮：有極性（含氧基團）；難溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有機溶劑以及稀堿液（具有酸性）

不溶于石油醚。

第四十九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質二、溶解性二、溶解性2、黃酮苷類

水溶性增加，易溶于水、甲醇、乙醇等強極性溶劑中，難溶或不溶苯、三氯甲烷等有機溶劑。水溶性規(guī)律：糖鏈越長，則水溶度越大糖連接位置不同，水溶性不同

可利用此性質，用熱水重結晶蘆丁。蘆丁熱水1︰200冷水1︰8000第五十頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日二、溶解性

H2OMeOHEtOHEt2OCHCl3游離黃酮-++++黃酮苷+（熱）++--第五十一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日與分子平面性有關：平面性越強，水溶性越差(水溶性)黃酮（醇）、查爾酮二氫黃酮、二氫黃酮醇花色素

<<第五十二頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質三、酸性與堿性三、酸性與堿性2、酸性羥基的數(shù)目、位置綜合起作用結論:7、4’-二OH>7或4’-OH>一般Ar-OH>5-OH5%NaHCO35%Na2CO30.2%NaOH5%NaOHPH≌8PH≌10pH

≌11~12

pH≌

13～14

應用于提取、分離及鑒定工作中?！狿H梯度萃取————————第五十三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質三、酸性與堿性三、酸性與堿性2、酸性比較下列化合物的酸性大?。篈B>第五十四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質四、顯色反應四、顯色反應一〉還原反應1、鹽酸鎂粉反應1）方法：樣品溶于1ml甲醇或乙醇，加鎂粉少許，振搖，滴加幾滴濃鹽酸，1-2分鐘內（必要時微熱）即可顯色。多數(shù)黃酮（醇），二氫黃酮（醇）：顯橙色—紫紅色反應少數(shù)黃酮（醇），二氫黃酮（醇）：顯紫---藍色

B環(huán)引入-OH,-OCH3，顏色隨之加深。2）對象：第五十五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質四、顯色反應四、顯色反應一〉還原反應2、NaBH4反應NaBH4是對二氫黃酮類化合物專屬性較高的一種還原劑，與二氫黃酮類化合物產(chǎn)生紅～紫色。第五十六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質四、顯色反應四、顯色反應二〉金屬鹽類試劑的絡合反應

黃酮類化合物分子中具有下列這些結構5-OH-4-酮基3-OH-4-酮基鄰二酚羥基常與鋁鹽(Al3+)，鉛鹽(Pb2+)，鎂鹽(Mg2+),鋯鹽(Zr2+)等試劑反應，生成有色絡合物。第五十七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日反應官能團：3-OH，4-C=O

5-OH，4-C=O

鄰二酚羥基第五十八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第三節(jié)理化性質四、顯色反應四、顯色反應二〉金屬鹽類試劑的絡合反應1、鋁鹽：試劑：1%AlCl3

或硝酸鋁溶液現(xiàn)象：絡合物為黃色，UV（λ415nm)燈下有熒光。可用于定性及定量分析。第五十九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日2．鎂鹽：試劑：醋酸鎂甲醇液（Mg(OAC)2)一般在濾紙上進行，噴Mg(OAC)2的甲醇液，加熱干燥，在UV燈下觀察。二氫黃酮（醇）:天藍色熒光,具C5—OH色澤更明顯。黃酮醇，異黃酮:顯黃—橙黃—褐色。第六十頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質四、顯色反應四、顯色反應二〉金屬鹽類試劑的絡合反應3．鉛鹽:試劑：1%Pb(OAC)2

及堿式Pb(OAC)2水溶液現(xiàn)象：絡合物為黃—紅色沉淀。中性Pb(OAC)2可與分子中具鄰二酚羥基或兼有3-OH-4C=O或5-OH-4C=O化合物作用。堿式Pb(OAC)2

一般酚羥基均可沉淀，用于提取分離鑒定工作。第六十一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第三節(jié)理化性質四、顯色反應四、顯色反應二〉金屬鹽類試劑的絡合反應4．鋯鹽：（鋯—枸櫞酸反應）用來檢查和區(qū)分黃酮分子中3、5-二OH（1）2%二氯氧鋯甲醇液（ZrOCl2）（2）2%枸櫞酸甲醇液

試劑樣品+試劑（1）鮮黃色絡合物試劑（2）褪色：含5-OH不褪色:含3-OH第六十二頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日有游離的3-或5-OH存在時，均可反應生成黃色的鋯絡合物.3-OH，4-酮基絡合物的穩(wěn)定性5-OH，4-酮基絡合物（僅二氫黃酮醇除外）。

當反應液中接著加入枸櫞酸后，5-羥基黃酮的黃色溶液顯著褪色，而3-羥基黃酮溶液仍呈鮮黃色（鋯—枸櫞酸反應）。第六十三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質四、顯色反應四、顯色反應二〉金屬鹽類試劑的絡合反應5.氯化鍶（SrCl2）反應

在氨性甲醇溶液中，可與生成綠色-棕色-黑色6.FeCl3反應：Ar-OH顯色劑

綠色～墨綠～黑色沉淀第六十四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質四、顯色反應四、顯色反應三〉硼酸顯色反應凡具有結構，在無機酸或有機酸條件下與硼酸反應生成亮黃色H+H3BO4亮黃色第六十五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質四、顯色反應四、顯色反應四〉堿性試劑顯色反應1、日光及UV下，通過紙斑反應，樣品用堿性試劑處理后顏色變化來鑒定黃酮類化合物。常用堿性試劑：氨蒸汽，Na2CO3水溶液氨蒸汽處理后的色變，置空氣中隨即褪去，Na2CO3水溶液則不褪色

第六十六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)理化性質四、顯色反應四、顯色反應四〉堿性試劑顯色反應2、利用堿性試劑反應鑒別分子中某些結構特征2）黃酮醇類在堿液中呈黃色，通人空氣變?yōu)樽厣?可與其他黃酮類區(qū)別3）黃酮類有或3，4’－二OH，

堿液黃色-深紅色-綠棕色↓1）二氫黃酮在堿性中開環(huán)轉為異構體-查耳酮，顯橙～黃色橙皮素橙皮查耳酮第六十七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日黃酮類日光下顯黃色或黃色加深UV下顯熒光或熒光增強黃酮醇類二氫黃酮類OH-顯橙～黃色OH-NaOH引起的色變不退NH4OH引起的色變退去空氣OH-呈黃色空氣棕色第六十八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日用化學方法鑒別A-G第六十九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第四節(jié)提取分離一、提取方法

一、提取方法存在形式:花、葉、果：黃酮苷木部堅硬組織：游離黃酮一般用溶劑提取法：

1、黃酮苷類、極性稍大的苷元：丙酮、乙酸乙酯、乙醇、甲醇提取。2、多糖苷類：沸水提取。3、大多數(shù)黃酮苷元：宜用極性較小的溶劑，如：氯仿、乙醚、乙酸乙酯、苯。選擇溶劑：第七十頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日醇提法熱水提取法堿溶酸沉法系統(tǒng)溶劑提取法第七十一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日1、醇提法根據(jù)苷的溶解特性：（１）極性大的苷類或苷元：選用含水乙醇、甲醇（１：１）。（２）極性小的苷元：氯仿、乙醚、乙酸乙酯等，用95%乙醇；選用不同溶劑進行萃取可達到精制純化的目的。例如：1、植物葉子的醇浸液---石油醚處理，除去葉綠素、胡蘿卜素等脂溶性色素。2、藥材水溶液---加入多倍量濃醇，以沉淀除去蛋白質、多糖類等水溶性雜質。注意事項：避免苷水解，應先破壞酶的活性。

第七十二頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第四節(jié)提取分離一、提取方法

一、提取方法2、熱水提取法主要是苷類，如槐花米中蘆丁的提取，利用蘆丁的溶解度在沸水（1:200）和冷水（1:10000）中的顯著不同。缺點：水中雜質多

第七十三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第四節(jié)提取分離一、提取方法

（二）堿提取酸沉淀法原理：黃酮類有酚ＯＨ，具有酸性，可溶于堿水溶液，酸化后可析出；飽和石灰水Ca(OH)2，稀Na2CO3，NaOH等。藥材堿水液H+

OH-

沉淀（黃酮苷，苷元）

水（水雜，M+）第七十四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日例：槐花米提取蘆丁第七十五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第四節(jié)提取分離一、提取方法

4、系統(tǒng)溶劑提取法Pet：色素、油脂等；C6H6：提取多甲氧基黃酮、含異戊烯基等；CHCl3,EtOAc：可提取大多數(shù)游離黃酮；EtOH,MeOH：提取多羥基黃酮、雙黃酮、查耳酮等；稀醇、沸水：苷類；１％HCl：提取花色素類。第七十六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日（一）柱色譜法（二）pH梯度萃取法（三）利用特殊官能團的性質分離二、分離第七十七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第四節(jié)提取分離二、分離二、分離分離依據(jù)1、酸性不同，pH梯度萃取法2、含特殊官能團，COOH,鄰二酚羥基,可用Pb(OAC)23、分子大小不同，葡聚糖凝膠4．極性不同溶劑層析（吸附、分配）第七十八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第四節(jié)提取分離二、分離二、分離<一>層析法

1、硅膠吸附：主要適于分離異黃酮、二氫黃酮（醇）及高度甲基化或乙?；狞S酮（醇）。分配：少數(shù)情況下，用于極性較大的化合物、多羥基黃酮醇及其苷類。（1）分離苷元時：用氯仿-甲醇混合溶劑洗脫。（2）分離苷時：用氯仿-甲醇-水或乙酸乙酯-丙酮-水洗脫。

第七十九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日二、分離<一>層析法

2、聚酰胺柱層析原理：通過聚酰胺分子上的酰胺基（）與黃酮分子上的Ar-OH形成氫鍵締合而產(chǎn)生吸附。第四節(jié)提取分離二、分離適用于分離酚類、醌類化合物，各種類型的黃酮類化合物（苷及苷元、查耳酮與二氫黃酮），蒽醌類化合物。第八十頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第四節(jié)提取分離二、分離二、分離<一>層析法

2、聚酰胺柱層析吸附力大小Ar-OH數(shù)目Ar-OH位置溶劑情況形成氫鍵能力（分子平面性情況）第八十一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日吸附規(guī)律：（１）黃酮類化合物酚ＯＨ越多，易吸附，洗脫慢；（２）分子中芳香核、共軛雙鍵多，吸附力強；查耳酮＞二氫黃酮；（３）苷元相同時，三糖苷＜雙糖苷＜單糖苷＜苷元（４）易形成分子內氫鍵，吸附減弱：間位或對位＞鄰位ＯＨ黃酮；（５）結構類型不同，黃酮醇＞黃酮＞二氫黃酮＞異黃酮（６）洗脫溶劑對吸附的影響：水＞甲醇、乙醇＞丙酮＞?。危幔希然虬彼炯柞０罚径谆柞０罚灸蛩厮芤旱诎耸?，共一百七十一頁，2022年，8月28日

黃酮類化合物從聚酰胺柱上洗脫時大體有下列規(guī)律：（1）甙元相同，洗脫先后順序一般是：參糖甙雙糖甙單糖甙甙元（2）母核上增加羥基，洗脫速度即相應減緩.（3）不同類型黃酮化合物，先后流出順序一般是：異黃酮二氫黃酮醇黃酮黃酮醇（4）分子中芳香核、共軛雙鍵多者則吸附力強，故查耳酮往往比相應的二氫黃酮難于洗脫。上述規(guī)律也適用于黃酮類化合物在聚酰胺薄層上的行為。第八十三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日

中藥粗粉｜７０－９０％乙醇提取乙醇｜回收｜―――――――――｜不溶物溶液（樹脂、游離黃酮）｜聚酰胺柱，水、９５％洗脫｜―――――――｜乙醇液水洗液｜回收（糖等）

總黃酮

第八十四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日聚酰胺的雙重色譜性

以含水流動相（如甲醇一水）作洗脫劑，苷比苷元先洗下來。以有機溶劑作洗脫劑（如氯仿一甲醇）苷元比苷先洗脫下來。第四節(jié)提取分離二、分離二、分離<一>層析法

2、聚酰胺柱層析第八十五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日3、葡聚糖凝膠（Sephadexgel）柱層析第四節(jié)提取分離二、分離二、分離<一>層析法

（1）用Sephadex

LH-20分離游離的黃酮，主要是靠吸附作用，Ar--OH多的化合物極性強，吸附力強，難洗脫。

（2）分離黃酮苷，分子篩起主導作用，按分子量由大到小的順序流出柱體。糖數(shù)量多，分子量大，分子篩時，先洗脫下來。

分離黃酮類化合物的機理：雙重性

第八十六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日黃酮類化合物在Sephadex-LH20柱上的分離（甲醇為洗脫劑）黃酮類化合物取代情況Ve/VoA芹菜素5,7,4'-三OH5.3B木犀草素5,7,3',4'-四OH6.3C槲皮素3,5,7,3',4'-五OH8.3D楊梅素3,5,7,3',4',5'-六OH9.2E山萘酚-3-半乳鼠李糖基-7-鼠李糖苷三糖苷3.3F槲皮素-3-蕓香糖苷雙糖苷4.0G槲皮素-3-屬李糖苷單糖苷4.93、葡聚糖凝膠（Sephadexgel）柱層析Ve為洗脫樣品時需要溶劑總量或洗脫體積，Vo為柱子空體積，Ve/Vo越小，化合物越容易洗脫。從表中可以看出，首先洗脫下來的是苷類成分，按照分子篩原理分離，然后是游離黃酮類成分，按照吸附原理分離。第八十七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日3、葡聚糖凝膠（Sephadexgel）柱層析第四節(jié)提取分離二、分離二、分離<一>層析法

常用洗脫劑。①堿性水溶液0.1mol/LNH4OH②鹽水溶液0.5mol/LNaCl③醇及含水醇甲醇，甲醇—水（不同比例）正丁醇---甲醇3：1乙醇④丙酮—甲醇—水2：1：1氯仿—甲醇9：1適用于SephadexLH-20凝膠，羥丙基化的葡聚糖凝膠。第八十八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第四節(jié)提取分離二、分離二、分離<二>pH梯度萃取法適合于酸性強弱不同的黃酮苷元的分離。根據(jù)Ar-OH數(shù)目，位置不同酸性強弱不同而分離

混合物醚層乙醚依次用5%NaHCO37,4’二OH5%Na2CO37或4’-OH0.2%NaOH一般Ar-OH5%NaOH5-OH萃取第八十九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第四節(jié)提取分離二、分離二、分離<三>官能團不同1、Pb(AC)2沉淀法具鄰二Ar—OH：中性Pb(AC)2可沉淀不具鄰二Ar—OH：堿式Pb(AC)2可沉淀第九十頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日應用：除去雜質。分子中有COOH（樹膠粘液，果膠，有機酸，蛋白質，氨基酸）或鄰二Ar--OH（如鞣質等），可用Pb(AC)2去除。脫鉛方法硫化氫（PbS具吸附性，現(xiàn)在多不用）硫酸鹽或磷酸鹽陽離子交換樹脂第九十一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第四節(jié)提取分離二、分離二、分離<三>官能團不同2、硼酸絡合法具鄰二Ar—OH的黃酮可與硼酸絡合，生成物溶于水，借此可與之不具有這種結構的化合物分離。實際中，常將各種柱層析法與各種經(jīng)典方法相互配合應用。第九十二頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日結構測定一般步驟1、色嗅味：黃，橙黃，二氫黃酮，異黃酮無色2、植物來源：豆科，蕓香科，菊科，唇形科3、旋光性：二氫黃酮(醇),黃烷醇，苷元有旋光性，苷均有旋光性4、熔點：層析Rf與文獻對照5、檢識反應6、光譜分析第五節(jié)結構鑒定第九十三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構鑒定一、色譜法

適用于分離各種天然黃酮類化合物及其苷類的混合物。紙層析在本質上是液液分配層析，利用不同的物質在固定相與流動相之間的分配系數(shù)不同而進行分離。固定相：水。流動相：與水不相混溶的有機溶劑。載體：濾紙(一)、紙層析（PC）法第九十四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日1、常用的溶劑系統(tǒng)1）醇性溶劑。（主要依分配作用原理）主要適用于苷元n-BuOH-HOAC-H2O4:1:5上層BAWt-BuOH-HOAC-H2O3:1:1TAW第五節(jié)結構鑒定一、色譜法(一)、紙層析（PC）法2）水性溶劑（主要依吸附作用原理）主要適用于苷2-6%HOAC3%NaClHOAC:H2O=60:402、檢測：1）UV燈檢查：有色斑點，氨蒸汽處理后產(chǎn)生明顯顏色變化。2）噴顯色劑：2％AlCl3甲醇液（UV燈下檢查）；1％FeCl3-1%K3Fe(CN)6水溶液第九十五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日3、吸附規(guī)律1）非平面性分子，二氫黃酮(醇)，二氫查耳酮親水性強，用3-5%HAC展開時,Rf=0.1-0.3。第五節(jié)結構鑒定一、色譜法(一)、紙層析（PC）法2）平面性分子，黃酮(醇)、查耳酮用3-5%HAC，展開時，Rf<0.02幾乎停留原點不動。3)-OH糖苷化后極性增大，故在醇性展開劑中，Rf值相應降低。同一類型苷元，Rf

值：苷元〉單糖苷〉雙糖苷

以BAW系統(tǒng)為例：苷元Rf值0.7以上，苷小于0.7

第九十六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日3、吸附規(guī)律第五節(jié)結構鑒定一、色譜法(一)、紙層析（PC）法在水或2-8%HOAC，3％NaCl或1％HCl展開時則順序顛倒。Rf值：苷元<單糖苷<雙糖苷Rf值：苷0.5以上，糖鏈越長，Rf值越大。苷元Rf小，幾乎原點不動。第九十七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構鑒定一、色譜法（二）、薄層層析（TLC）法一般采用吸附薄層層析。常用吸附劑：硅膠、聚酰胺硅膠：游離黃酮展開劑：甲苯－甲酸甲酯－甲酸（5：4：1）

CHCl3-MeOH聚酰胺：適用范圍較廣。展開劑：EtOH-H2O,MeOH-H2O,乙腈－H2O,丙酮－H2O第九十八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構鑒定二、光譜法（一）、UV程序

1、測定單純樣品在甲醇溶液中的UV光譜----骨架2、加入一些診斷試劑后測UV光譜常用的診斷試劑：甲醇鈉NaOMe

醋酸鈉NaOAc

醋酸鈉/硼酸NaOAc/H3BO3

三氯化鋁AlCl3三氯化鋁/鹽酸AlCl3/HCl3、若樣品為苷，可進行水解，水解后測苷元UV第九十九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構鑒定二、光譜法（一）、UV1、黃酮類化合物在甲醇中的紫外光譜圖特征B環(huán)桂皮酰系統(tǒng)(cinnamoyl)

帶Ⅰ300-400nmA環(huán)苯甲酰系統(tǒng)(benzoyl)

帶Ⅱ240-280nm第一百頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構鑒定二、光譜法（一）、UV1、黃酮類化合物在甲醇中的紫外光譜圖特征

220-270

帶II(240-285nm)（苯甲酰系統(tǒng)）帶I(300-400nm)桂皮酰系統(tǒng)類型說明

250-285304-350黃酮類

-OH越多，帶I帶II越紅移

B環(huán)3’,4’有-OH，帶II為雙峰（主峰伴肩峰）328-357黃酮醇類(3-OR)

352-385黃酮醇類(3-OH)

245-270270-295300-340異黃酮類二氫黃酮（醇）B環(huán)上有-OH,OCH3對帶I影響不大340-390或340-390(Ia)300-320(Ib)查耳酮類查耳酮2’-OH使帶I紅移的影響最大370-430(3-4個小峰)橙酮類第一百零一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日3、診斷試劑與吸收帶的關系診斷試劑：能使黃酮類的酚ＯＨ離解或形成絡合物，導致光譜發(fā)生變化，對結構具有診斷意義的的試劑。（１）加入各種診斷試劑后，帶Ⅱ的位置基本不動，強度有變化；（２）加入各種診斷試劑后,帶Ⅰ的位置移動有一定的規(guī)律：第一百零二頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日一、黃酮和黃酮醇類1、在甲醇中的ＵＶ光譜特征基本特征：帶Ⅰ不同，黃酮位于304-350nm；黃酮醇位于358-385nm；作用：區(qū)別黃酮和黃酮醇在黃酮或黃酮醇母核上，有羥基，甲氧基等供電子基取代，可引起吸收帶紅移。B環(huán)氧取代程度越高，帶Ⅰ越向長波方向移動。A環(huán)氧取代，則使帶Ⅰ、帶Ⅱ紅移6-17nm。但如果羥基甲基化或苷化，則相應的吸收峰向紫移，帶Ⅰ更明顯。第一百零三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一百零四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日

（2）查耳酮及橙酮：帶Ⅰ為主峰，帶Ⅱ吸收弱。第一百零五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日3）異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇

都有苯甲酰系統(tǒng)，而無桂皮酰系統(tǒng)。紫外吸收峰都是帶Ⅱ為強峰，帶Ⅰ為弱峰。

異黃酮：245～270nm；二氫黃酮及二氫黃酮醇：270～295nm。第一百零六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日3、利用診斷試劑檢出ＯＨ位置（１）甲醇鈉：強堿性，使所有酚羥基解離，紅移。ａ．４＇－ＯＨ：帶Ⅰ紅移４０～６５ｎｍ，強度稍有增強；ｂ．３－ＯＨ，無４＇－ＯＨ：帶Ⅰ紅移５０～６０ｎｍ，強度減弱；ｃ．游離７－ＯＨ：在３２０～３３０ｎｍ處，有吸收峰存在，成苷后消失；ｄ．３，４‘－二ＯＨ及其他位置的鄰位三ＯＨ，不穩(wěn)定，在甲醇鈉存在下，易氧化分解，故吸收帶會隨時間的延長而衰退。第一百零七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日（2）乙酸鈉（NaOAc）：使可使7-或4‘-羥基解離，影響相應吸收帶紅移。

ａ．７－ＯＨ：帶Ⅱ向紅移５～２０ｎｍ（酸性減弱，位移?。?；ｂ．４＇－ＯＨ：７－ＯＨ被取代時，帶Ⅰ與甲醇鈉引起的位移值相同或較大；（用于區(qū)別）ｃ．鄰位ＯＨ不穩(wěn)定，吸收峰會逐漸衰退。第一百零八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日（3）乙酸鈉／硼酸：使鄰二酚ＯＨ形成絡合物．（５，６鄰位除外）ａ．Ａ環(huán)有鄰二酚ＯＨ時，帶Ⅱ紅移５～１０ｎｍｂ．Ｂ環(huán)有鄰二酚ＯＨ時，帶Ⅰ紅移１２～３０ｎｍ

第一百零九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日4）AlCl3

和AlCl3／HCl原理：使鄰二酚ＯＨ，３－ＯＨ、５－ＯＨ與４－羰基生成絡合物，紅移；鄰二酚ＯＨ加酸后絡合物分解，紫移；第一百一十頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日A：樣品+AICI3/HCl光譜等于樣品+CH3OH光譜。表示無3-OH或5-OH或兩者被取代。如樣品甲醇液在加入AICI3/HCl后，①帶Ⅰ紅移35～55nm則示有5-OH而無3-OH；②只紅移17～20nm時，示有6-氧取代；

③帶Ⅰ紅移約60nm，示有3-OH而無5-OH；

④帶Ⅰ紅移50-60nm，示同時有3-OH，5-OH。第一百一十一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日B：①樣品+AICI3與樣品+AICI3/HCl光譜一樣，則表示無鄰二酚羥基樣品+AICI3與樣品+AICI3/HCl光譜不同；Ｂ環(huán)有鄰二ＯＨ時，加鹽酸后向紫移３０～４０ｎｍ；Ｂ環(huán)有鄰三ＯＨ時，加鹽酸后向紫移２０ｎｍ若紫移在50～65nm，則A及B環(huán)均有鄰二酚羥基。第一百一十二頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日二、異黃酮、二氫黃酮和二氫黃酮醇類結構特點：有苯甲酰系統(tǒng),無桂皮酰系統(tǒng)，帶Ⅱ明顯

第一百一十三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日1、在甲醇中的ＵＶ特征（１）異黃酮：帶Ⅱ在２４５～２７０ｎｍ，隨Ａ環(huán)含氧基的增多紅移；（2）二氫黃酮（醇）：帶Ⅱ在２７０～２９５ｎｍ，受Ａ環(huán)取代基影響；第一百一十四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日2、利用診斷試劑檢出ＯＨ位置（１）甲醇鈉ａ、Ａ環(huán)有ＯＨ，帶Ⅱ紅移；ｂ、鄰二（三）ＯＨ，不穩(wěn)定；ｃ、５，７－二ＯＨ二氫黃酮（醇），帶Ⅱ紅移３５～４０ｎｍ，強度增加；７－ＯＨ――――――，――――５５～６０ｎｍ，――――；第一百一十五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日（2）乙酸鈉ａ．７－ＯＨ異黃酮：帶Ⅱ紅移６～２０ｎｍ；６，７－ＯＨ異黃酮：帶Ⅱ不移動；５，６，７，４＇－四ＯＨ異黃酮：不穩(wěn)定；ｂ．５，７－二ＯＨ二氫黃酮（醇）：帶Ⅱ紅移３４～３７ｎｍ；７－ＯＨ二氫黃酮（醇）：帶Ⅱ紅移５１～５８ｎｍ；５，６，７－三ＯＨ二氫黃酮（醇）：不穩(wěn)定．第一百一十六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日（3）乙酸鈉／硼酸７－二ＯＨ：帶Ⅱ紅移１０～１５ｎｍ．

第一百一十七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日（4）AlCl3

ＡlCl3/HClａ．6,7-和7,8－二ＯＨ異黃酮，二氫黃酮（醇）：帶Ⅱ紅移11-30nm（AlCl3－ＡlCl3/HCl）ｂ．５－ＯＨ異黃酮：帶Ⅱ紅移１０～１４ｎｍ（AlCl3/HCl-MeOH）５－ＯＨ二氫黃酮（醇）：帶Ⅱ紅移２０～２６（AlCl3－ＡlCl3/HCl）第一百一十八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一百一十九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第一百二十頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR沒有制成衍生物的黃酮類化合物，常用無水DMSO-D6

對鑒別Ar-OH數(shù)量有用。例：3，5，7-三羥基黃酮1H-NMR譜上Ar-OH質子信號：12.40(5-OH)10.93(7-OH)9.7(3-OH)這些信號在向樣品中加重水(D2O）后即可消失。內標物：四甲基硅烷（TMS）第一百二十一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR各種類型質子1H-NMR譜規(guī)律：1、A環(huán)質子：δ5.7—8.01）5,7-二羥基黃酮類化合物A環(huán)上的芳氫：6－H：δ5.7-6.9(d,J=2.5)8－H：δ5.7-6.9(d,J=2.5)H6較H8高場一些當7-OH成苷后，H6及H8均向低場位移第一百二十二頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR1、A環(huán)質子：δ5.7-8.02）7-羥基黃酮類化合物A環(huán)上的芳氫：5-H：δ7.9－8.2（d,J=9.0），（4位C=O強烈的負屏蔽效應）6-H：δ6.7－7.1（dd,J=9.0,2.5）8-H：δ6.7－7.0（d,J=2.5）第一百二十三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR2、B環(huán)質子：δ6.5～7.9,較A環(huán)稍低場1)4'-氧取代黃酮類化合物（H-3’,5’較為高場）：H-3’,5’：δ6.5－7.1（d,J≈8.5）H-2’,6’：δ6.5－7.9（d,J≈8.5）B環(huán)上的芳氫有兩組信號：H-3’,5’,H-2’,6’構成AA'BB'系統(tǒng)，可簡單看成AB系統(tǒng)。第一百二十四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR2、B環(huán)質子：δ6.5～7.9,較A環(huán)稍低場2)3’,4’-二氧黃酮類化合物B環(huán)上的芳氫：H-5’：δ6.7－7.1（d,J≈8.5）H-2’：δ7.2－7.9（d,J≈2.5）H-6’：δ7.2－7.9（dd,J≈8.5,2.5）第一百二十五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR３、C環(huán)質子：可區(qū)別不同類型黃酮類化合物的骨架。H-3（黃酮）:δ6.3(1H,s)，尖銳單峰信號1）黃酮易與5，6，7或5，7，8三O取代A環(huán)H-8或H-6單峰信號相混。對5-OH進行選擇性氘代甲基硅烷化時，對H-8，H-6，H-3會產(chǎn)生程度不同的影響：

H-3低場位移0.15，H-8高場位移0.15。H-6基本保持不變第一百二十六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR３、C環(huán)質子：2）異黃酮

H-2（異黃酮）:位于C=O的β位，且連在與氧相連的C上，故位于較低場。

δ7.6－7.8(1H,s，CDCl3);δ8.5－8.7(1H,s,DMSO-d6)第一百二十七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR３、C環(huán)質子：3）二氫黃酮（醇）（1）二氫黃酮第一百二十八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR3）二氫黃酮（醇）（2）二氫黃酮醇３、C環(huán)質子：H-2,H-3為反式直立鍵系統(tǒng)3-OH成苷時，H-2及H-3均向低場移動可用以判斷糖的位置第一百二十九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR３、C環(huán)質子：4）查耳酮H-α：δ6.50-6.70(1H,d,J=Ca.17.0)H-β：δ7.30-7.70(1H,d,J=Ca.17.0)第一百三十頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR３、C環(huán)質子：5）橙酮芐氫:δ6.50-6.70(1H,s)

δ6.37-6.94(1H,s,DMSO-d6)第一百三十一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR4、糖上質子：1)單糖苷可以通過糖上端基質子（H-1〃）的化學位移值判斷糖連接位置及糖的種類，見下表。糖與苷元相連時，糖上端基質子（H-1〃）與其他H比較，一般位于較低場（）

。第一百三十二頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日提示:（1）黃酮C3-OH的Glu苷與4’，5，7-OH糖苷很易區(qū)別（2）黃酮醇3-O-Glu與3-O-Rha亦可區(qū)分（3）二氫黃酮醇3-O-Glu與3-O-Rha不易區(qū)分但可借助Rha上的CH30.8-1.2,J=6.5Hz(d)第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR4、糖上質子：1)單糖苷第一百三十三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR4、糖上質子：2)雙糖苷黃酮類化合物雙糖苷中，末端糖上的C-1’’’-H因離黃酮母核較遠，受到其負屏蔽影響相對較小，故其吸收峰將移至比H-1’’較高場區(qū)第一百三十四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（二）、1H-NMR5、苯環(huán)上其他質子：：

取代基 δ

甲基（－CH3）2.04-2.45(3H,s)

乙酰氧基（CH3COO－）2.30-2.45(3H,s)

甲氧基（－OCH3）3.45-4.10(3H,s)

第一百三十五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（三）、13C-NMR主要用在以下三個方面:1、黃酮類化合物骨架類型的判斷2、黃酮類化合物取代基位置的判斷3、黃酮類化合物苷的確定a、了解苷中糖的連接位置b、了解苷鍵構型c、了解糖糖連接順序

第一百三十六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（三）、13C-NMR1、判斷黃酮類化合物骨架類型（15個C）

可以根據(jù)中央三個碳信號的位置及C6-C3-C6中的C2-C3系統(tǒng)及其裂分情況推斷黃酮類化合物的骨架類型判斷依據(jù)：1）C=O的位移：170-2002）C2(β)C3(α)δ100-165αβ第一百三十七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日C=OC-2（或C-β）C-3（或C-α）歸屬

174.5~184.0160.5~163.2104.7~111.8黃酮類149.8~155.4122.3~125.9異黃酮類147.9136.0黃酮醇類182.5~182.7146.1~147.7111.6~111.9(=CH-)橙酮類

188.0~197.0

136.9~145.4116.6~128.1查耳酮類75.0~80.342.8~44.6二氫黃酮類82.771.2二氫黃酮醇類第一百三十八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日2、確定黃酮類化合物取代圖式第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（三）、13C-NMR1）取代基位移效應A或B環(huán)上引入取代基時，引起的位移大致可以用簡單苯衍生物的位移效應計算：取代基 Zi Zo Zm ZpOH 26.6 -12.8 1.6 -7.1OCH3 31.4 -14.4 1.0 -7.8第一百三十九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日2、確定黃酮類化合物取代圖式第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（三）、13C-NMR1）取代基位移效應規(guī)律：（1）-OH，-OCH3的引入使：

ipso-C原子向低場大幅度位移

鄰位C原子向高場位移

對位C原子向高場位移

間位C原子向低場位移幅度小（2）A環(huán)上引入取代基，位移效應只影響A環(huán)，B環(huán)只影響B(tài)環(huán)，如果一個環(huán)上引入多個取代基，位移效應具有加和性。第一百四十頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日2、確定黃酮類化合物取代圖式第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（三）、13C-NMR1）取代基位移效應（3）A環(huán)上引入5-OH時,不僅影響A環(huán)，由于5-OH與4-C=O形成氫鍵，使C4、C2δ上升（+4.5，+0.87），

C3δ下降（-1.99）。C5-OH甲基化影響消失。第一百四十一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日3、黃酮類化合物O-糖苷中糖的連接位置第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（三）、13C-NMR黃酮類等酚性化合物在形成O-糖苷后，苷元以及糖均產(chǎn)生相應的苷化位移，但因苷元上成苷位置不同以及糖的種類不同，苷化位移幅度也不同，因此可以判定糖在苷元上的連接位置。苷化位移(GS)：糖與苷元成苷后，苷元的α-C、β-C和糖的端基碳的化學位移值均發(fā)生了改變，這種改變成為苷化位移。苷化位移值與苷元的結構有關，與糖的種類關系不大。通過苷化位移可以推測糖與苷元、糖與糖的連接位置。

第一百四十二頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日3、黃酮類化合物O-糖苷中糖的連接位置第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（三）、13C-NMR

1）糖的苷化位移和端基碳信號酚性苷中糖的端基碳的苷化位移為:。

7,2’,3'或4’-O-糖苷，糖的端基碳信號,C-1：δ100.0-102.5

5-O-葡萄糖苷，C-1：δ

104.37-O-鼠李糖苷，C-1：δ99.0

因此，可以通過糖端基碳的化學位移確定糖的連接位置。第一百四十三頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日3、黃酮類化合物O-糖苷中糖的連接位置第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（三）、13C-NMR

2）苷元的苷化位移規(guī)律：苷化后苷元的ispo-C向高場位移，δ↓

鄰位、對位向低場位移，δ↑

對位位移幅度大且穩(wěn)定第一百四十四頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日4、雙糖及低聚糖苷中糖一糖的連結順序第五節(jié)結構 鑒定二、光譜法（三）、13C-NMR雙糖苷及低聚糖苷的光譜可分解成相應的單糖苷或雙糖苷的光譜進行比較。當糖上-OH被苷化后，將使糖上該-OH所在C向低場位移，鄰C稍向高場位移

。第一百四十五頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日質譜MS特點：１．黃酮苷元――直接測定，分子離子峰（Ｍ＋）較強，為基峰；２．黃酮苷―――全乙酰化，全甲基化后再測定；主要碎片峰：［Ｍ－Ｈ］＋，［Ｍ－ＣＨ３］＋，［Ｍ－ＣＯ］，［Ｍ－ＣＨＯ］＋

第一百四十六頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日裂解途經(jīng)

1、RDA裂解

1、RDA裂解第一百四十七頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日2、C環(huán)斷裂

第一百四十八頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日實例：黃酮類化合物的分類依據(jù)有：Ａ．三碳鏈是否成環(huán)Ｂ．三碳鏈的氧化程度Ｃ．Ｃ３位是否有羥基Ｄ．B環(huán)的連接位置Ｅ．A環(huán)的連接位置第一百四十九頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日母核結構中無C＝O的黃酮類是：A．黃酮Ｂ．二氫黃酮Ｃ．黃酮醇Ｄ．花色素Ｅ．黃烷醇第一百五十頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日水溶性最大的黃酮類化合物是：A．黃酮B．查耳酮C．二氫黃酮D．花色素E．異黃酮第一百五十一頁，共一百七十一頁，2022年，8月28日酸性最強的黃酮是：A．5，8—二OH黃酮B．7，4’—二OH黃酮C．3，5—二OH黃酮D．3’，4’—二OH黃酮E．2’，4’—二OH黃酮第一百五十二頁，共一百七十一頁，20