液質(zhì)使用操作規(guī)程

液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程CG-YF1358-2023操作前檢查檢查氮?dú)夂蜌鍤獾某隹趬毫Γ瑝毫Ψ謩e為0.5~0.6MPa和0.1~0.2MPa檢查洗針溶液和流淌相流淌相須現(xiàn)配并超聲，緩沖鹽溶液過0.22μm微孔濾膜〔或者使用色譜純的鹽溶液和酸溶液〕ESI探針尖端。檢查系統(tǒng)真空度，電離真空計讀數(shù)〔區(qū)域〕應(yīng)小于5×10-6Torr。檢查廢液液位，準(zhǔn)時清空廢液。操作步驟及留意事項開機(jī)翻開UPS電源翻開質(zhì)譜電源，即翻開質(zhì)譜主電源開關(guān)〔MainPowerSwitch〕至On〔/〕位置；翻開真〔VacuumSwitch〕Operational10小時后，翻開電子開關(guān)ElectronicsServiceSwitch〕Operational狀態(tài)；〔CPU1～2分鐘〕雙擊Quantumtune圖標(biāo)，進(jìn)入質(zhì)譜界面，點擊QuantumTuneMaster界面上圖ForePumpPressure1.0~1.5mTorr，IonGaugePressure小于6e-6Torr。翻開自動進(jìn)樣治理器和液相泵的電源化合物ESI/MS/MS質(zhì)譜條件優(yōu)化建立雙擊桌面 圖標(biāo)，翻開QuantumTuneMaster界面；在TuneMaster中界面上，選擇菜單Workspace，選擇CompoundOptimizationWorkspace按鈕，顯示CompoundOptimization工作界面；設(shè)置優(yōu)化參數(shù)：選擇OptimizationModes(優(yōu)化模式)：MSOnly按鈕；OptimizationMass列表中，輸入母離子質(zhì)量數(shù);在優(yōu)化參數(shù)列表中，選擇( )優(yōu)化的參數(shù)(SprayVoltage，Sheathgaspressure，Auxgaspressure，Tubelensoffset，Skimmeroffset)；Start按鈕，開頭優(yōu)化；優(yōu)化完畢后,選擇Accept按鈕；選擇OptimizationModes(優(yōu)化模式):MS+MS/MS按鈕；OptimizationMass列表Numproduct列中，輸入子離子個數(shù)(1~8)；在優(yōu)化參數(shù)列表中,選擇( )優(yōu)化的參數(shù)(Collisionenergy)；Start按鈕，開頭優(yōu)化；優(yōu)化完畢后，選擇Accept按鈕；參數(shù)優(yōu)化完成，保存質(zhì)譜方法：選擇Savetuneas按鈕，選擇保存位置，輸入文件名稱，保存質(zhì)譜方法(.TSQTune文件)；單擊定義掃描模式Definescan快捷圖標(biāo)，在掃描模式區(qū)單擊鼠標(biāo)右鍵,選擇Copyscanevent?；衔風(fēng)C/MS/MS方法建立雙擊桌面上LCQuan快捷圖標(biāo),點擊CreataNewWorkbook，輸入相應(yīng)StudyName〔爭論課題的名稱等〕Workbooknam〔試驗的名稱和日期nex，選擇同一文件夾里已存在的workbook〔首次編輯方法時不選擇該項Next，進(jìn)入LCquan主界面在LCquan主頁上，點擊InstrumentSetup按鈕，建立LC/MS/MS方法；設(shè)置液相色譜局部參數(shù)：Surveyor自動進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)置：點擊InstrumentSetup窗口中的SurveyorAS圖標(biāo)；輸入WashVolume(如400μl)，F(xiàn)lushVolume(如400μl)；InjectionVolume：進(jìn)樣量，假設(shè)定量環(huán)為25ｕL，PartialLoop10ｕL〔即小于定量環(huán)體積的1/〔建議使用PartialLoop局部進(jìn)樣FullLoop25ｕLNeedleHeightfrombottom：2.0mmSyringeSpee〔ｕL/：8.0FlushVolume：如400ｕLFlush/WashSource：BottleTrayTemperature：10℃左右〔視樣品性質(zhì)而定〕ColumnOvenControl：35℃左右〔視樣品性質(zhì)而定〕Surveyor液相泵的參數(shù)設(shè)置：點擊InstrumentSetup窗口中Surveyorpump圖標(biāo)；輸入A，B，C，D流淌相名稱，ColumnDescription(色譜柱標(biāo)注)；設(shè)置流淌相條件(流淌相比例，流速等)；點擊PumpGeneral，輸入A、B、C、D各相代表流淌泵中的流淌相溶液的名稱，最大柱壓設(shè)定為400.0Bar；點擊GradientProgram，設(shè)定流淌相梯度，可以使用等度洗脫或梯度洗脫。設(shè)置質(zhì)譜局部(TSQQuantum)參數(shù):點擊InstrumentSetup窗口中的TSQQuantum圖標(biāo);圖中第一欄Runsetting是設(shè)定樣品的運(yùn)行時間〔MSAcquireTime〕是否使用分段掃描〔Segments〕等MSAcquireTime：樣品的運(yùn)行時間Segments：假設(shè)被測化合物較多時，可設(shè)置此項ScanEvents：設(shè)定掃描大事TuneMethodQuantumTune軟件下優(yōu)化的目標(biāo)化合物的質(zhì)譜條件ScanEvents：對于定量分析來說我們常常使用的是SR〔選擇反響監(jiān)測定母離子和子離子，掃描時間和各子離子的碰撞能量。SamevalueforallSRMsScanWitdt〔m/0.002~5Scantime：0.5左右〔具體值是掃描點數(shù)而定〕2.7.1.點擊LCQuan界面下的Identification界面；PeakWidthQ〔FWH0.4或.點擊LCQuan界面下的Identification界面；Datatype：Centroidprofile，樣品分析時一般設(shè)置為CentroidSkimmerOffset：視化合物狀況打算是否需要設(shè)定Pastescanevent按鈕.點擊質(zhì)譜界面上的液相色譜掌握按鍵AS/LC/GCDirectControl觀看各管路中是否有氣泡，假設(shè)有氣泡，翻開purge閥，AccelaPump界面上的flow設(shè)定為100ｕL/mi100Applpurge閥，將與purge閥連接的注射器中的液體排出。觀看自動進(jìn)樣治理器掛壁上的注射器內(nèi)是否有氣泡，假設(shè)有氣泡，則點擊下拉菜單中100ｕL/minApply，完成后，假設(shè)還有氣泡則重復(fù)一次，直到?jīng)]有氣泡為止。設(shè)定進(jìn)樣方法所用流淌相的起始比例及對應(yīng)流速，平衡色譜柱至泵壓穩(wěn)定。樣品序列建立及樣品分析點擊菜單欄Acquisition中的Setup選擇樣品類型SampleType:Unknown,QC,Blank,輸入文件名稱FileName：可以手動輸入，也可點擊鼠標(biāo)右鍵掃瞄，選擇已經(jīng)存在的文件的文件名;SampleName：樣品名稱，一般設(shè)定為樣品編號Level：用于定量計算時設(shè)置的不同濃度點的代號F.VialPos：設(shè)定樣品瓶在進(jìn)樣器中的位置Position:A:1-A:40,B:1-B:40,C:1-C:40,D:1-D:40.E:1-E:40;G.InjVol：FromAS樣品分析運(yùn)行單個樣品，在Sequence列表中鼠標(biāo)點擊選擇需要運(yùn)行的樣品，單擊按鈕 ，設(shè)定樣品運(yùn)行完畢后儀器狀態(tài)AfterSequenceSetSystem(On，儀器仍在掃描狀態(tài)，Standby，儀器處在待機(jī)狀態(tài)，Off，儀器關(guān)機(jī))，單擊OK，開頭進(jìn)樣分析；運(yùn)行多個樣品:單擊按鈕，在RunRows空格中輸入要運(yùn)行的樣品范圍(在序列表中的行標(biāo),1-6)，設(shè)定樣品運(yùn)行完畢后儀器狀態(tài)AfterSequenceSetSystem(On，儀器仍在掃描狀態(tài)，Standby，儀器處在待機(jī)狀態(tài)，Off，儀器關(guān)機(jī))，單擊OK，開頭進(jìn)樣分析。通常需要將界面切換到在線監(jiān)測界面，即點擊Status完成界面切換定量數(shù)據(jù)處理方法建立2.7.2設(shè)置定量方法A定義定量方法(內(nèi)標(biāo)法，外標(biāo)法)：單擊Option菜單，單擊Calibrationby,選擇定量方法(內(nèi)標(biāo)法,InternalStandard,或者外標(biāo)法ExternalStandard),點擊OK;B.翻開一演示數(shù)據(jù)文件：左下角圖譜中右鍵鼠標(biāo)，openrawfiles，翻開一原始數(shù)據(jù)文件(在要作定量處理的數(shù)據(jù)中選擇一個,最好是翻開一個標(biāo)樣的數(shù)據(jù)文件)；設(shè)置定量方法(內(nèi)標(biāo)法)參數(shù):2.8.1點擊定量列表設(shè)置圖標(biāo)，點擊next，選擇Createnewsequence，從工程文件夾下2.8.2點擊Survey圖標(biāo)，查看Standards和QCs計算結(jié)果2.8.3點擊ReviewAll圖標(biāo)查看全部樣品計算結(jié)果2.8.4點擊Report圖標(biāo)，選擇相應(yīng)的報告模板，生成定量結(jié)果文件，保存并供打印使2.8.1點擊定量列表設(shè)置圖標(biāo)，點擊next，選擇Createnewsequence，從工程文件夾下2.8.2點擊Survey圖標(biāo)，查看Standards和QCs計算結(jié)果2.8.3點擊ReviewAll圖標(biāo)查看全部樣品計算結(jié)果2.8.4點擊Report圖標(biāo)，選擇相應(yīng)的報告模板，生成定量結(jié)果文件，保存并供打印使內(nèi)標(biāo)物的識別Identification參數(shù)：在component欄內(nèi)菜單，選擇add，直接輸入內(nèi)標(biāo)物名稱,掃描方法Filter(下拉菜單中選擇內(nèi)標(biāo)物對應(yīng)的掃描方法),點擊OK,輸入內(nèi)標(biāo)物保存時間Retentiontime,點擊OK；內(nèi)標(biāo)物積分參數(shù)設(shè)定PeakDetectionAlgorithmICIS或者Genesis，輸入內(nèi)標(biāo)物各積分參數(shù),點擊OK；定量組分積分參數(shù)設(shè)定PeakDetectionAlgorithm：積分方法，選擇ICIS或者Genesis，輸入該組分各積分參數(shù),點擊OK；校正曲線Calibration參數(shù)設(shè)定：單擊Calibration缺省菜單；點擊界面右上角組分(Components)列表欄內(nèi)內(nèi)標(biāo)物的名稱，定義其為內(nèi)標(biāo)物：在組分類型Componenttype欄內(nèi)選擇ISTD，點擊OK；點擊界面右上角組分(Components)列表欄內(nèi)定量組分的名稱，在Targetcompounds欄內(nèi),ISTD的下拉菜單中選中內(nèi)標(biāo)物,點擊OK；標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度Levels設(shè)定:單擊Level缺省菜單，在左側(cè)濃度列表內(nèi)，CalLevel列內(nèi)從上到下依次輸入每個濃度的代號(如1,2,3···,或cal-1,cal-2,cal-3···,或者A,B,C···等)，Amount列內(nèi)從上到下依次輸入各標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度值，單擊OK，定量方法(內(nèi)標(biāo)法)建立完成；保存方法設(shè)置定量方法(外標(biāo)法)參數(shù)：定量組分的識別Identification參數(shù)：設(shè)定定量組分的名稱Name(點擊界面右上角組分(Components)，直接輸入該組分名稱)，掃描方法Filter(下拉菜單中選擇該組分對應(yīng)的掃描方法)，點擊OK，輸入保存時間Retentiontime，點擊OK；(假設(shè)是多組分定量,點擊界面右上角組分(Components)，選擇add，輸入其次個組分名稱，其他參數(shù)設(shè)定一樣)；定量組分積分參數(shù)設(shè)定Detection：點擊界面右上角組分(Components)列表欄內(nèi)定量組分的名稱，輸入該組分各積分參數(shù)，點擊OK；校正曲線Calibration參數(shù)設(shè)定：單擊Calibration缺省菜單，設(shè)定各參數(shù)。LC/MS/MS方法保存，保存后，以后每次進(jìn)展同一爭論課題的樣品分析時可以在此根底上調(diào)用和修改定量數(shù)據(jù)處理及定量結(jié)果掃瞄的RawfilesSta