實(shí)驗(yàn)四血球凝集和交叉配血實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)四

血球凝集反應(yīng)和交叉配血實(shí)驗(yàn)

指導(dǎo)老師：程燕實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、掌握凝集反應(yīng)和交叉配血實(shí)驗(yàn)的原理2、掌握玻片凝集試驗(yàn)的操作方法，了解其特點(diǎn)和用途3、學(xué)習(xí)玻片凝集試驗(yàn)結(jié)果的觀察方法實(shí)驗(yàn)原理凝集反應(yīng)：顆粒性抗原(細(xì)菌、細(xì)胞等)與其特異性抗體[直接凝集]或是可溶性抗原(亦可用抗體)吸附于與免疫無關(guān)的載體形成致敏顆粒(免疫微球)與相應(yīng)的抗體(或抗原)[間接凝集]在有適量電解質(zhì)存在下，形成肉眼可見的凝集小塊。注：顆粒性抗原稱為凝集原，特異性抗體稱為凝集素凝集反應(yīng)的特點(diǎn)顆粒性抗原致敏顆粒（可溶性抗原或抗體與載體顆粒結(jié)合）電解質(zhì)的存在肉眼可見的凝集現(xiàn)象凝集反應(yīng)的類型直接凝集試驗(yàn)玻片凝集試驗(yàn)：ABO血型試管凝集試驗(yàn)：外斐試驗(yàn)，肥達(dá)試驗(yàn)間接凝集試驗(yàn)正向間接凝集試驗(yàn)反向間接凝集試驗(yàn)間接凝集抑制試驗(yàn)協(xié)同凝集試驗(yàn)間接血凝試驗(yàn)?zāi)z乳凝集試驗(yàn)明膠凝集試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理直接凝集反應(yīng)：是顆粒性抗原又稱凝集原與相應(yīng)抗體直接結(jié)合所呈現(xiàn)的凝集現(xiàn)象，如紅細(xì)胞和細(xì)菌凝集試驗(yàn)。主要有玻片法、試管法。玻片法為定性試驗(yàn)，方法簡便快速，常用已知抗體檢測未知抗原，應(yīng)用于菌種鑒定，分型及人紅細(xì)胞ABO血型測定等；試管法通常為半定量試驗(yàn)，常用已知抗原檢測待檢血清中有無相應(yīng)抗體及其相對含量，以幫助臨床診斷和分析病情。常有肥達(dá)試驗(yàn)，外-斐試驗(yàn)，交叉配血試驗(yàn)等8血型抗原KDCCKBAD存在于紅細(xì)胞表面化學(xué)結(jié)構(gòu)：

蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)上的糖類抗原糖蛋白或脂類（糖脂）9ABO血型RBC上的抗原血清中的抗體基因型OHAnti-A,BO/OAAAnti-BA/AorA/OBBAnti-AB/BorB/OABA&BNoneA/BABO血型系統(tǒng)10ABO以外

重要的血型系統(tǒng)及其抗體2005年，29個(gè)紅細(xì)胞血型系統(tǒng)274個(gè)抗原11除ABO外與輸血有關(guān)的最重要的血型系統(tǒng)之一最重要的五種抗原C、c、D、E、e根據(jù)D抗原是否存在，一般將Rh系統(tǒng)定義為Rh陽性：D抗原陽性Rh陰性：D抗原陰性（熊貓血型：AB型、Rh陰性）Rh血型系統(tǒng)ABO血型的鑒定方法。

原理將標(biāo)準(zhǔn)抗A和抗B血型抗體分別與待測紅細(xì)胞混合。如果抗原與抗體相對應(yīng)，則引起紅細(xì)胞凝集，反之則不凝集，據(jù)其凝集現(xiàn)象可判斷血型。結(jié)果判讀：

1、如混合液由均勻紅色混濁狀逐漸變?yōu)橥该?，并出現(xiàn)大小不等的紅色凝集塊者，即為紅細(xì)胞凝集；

2、如混合液仍呈均勻混濁狀，則為不凝集。注：肉眼觀察難于判定是否凝集，可在顯微鏡下用低倍鏡觀察予以確認(rèn)。

交叉配血試驗(yàn)1.交叉配血實(shí)驗(yàn)在輸血過程中，要先分別將供血者的RBC與受血者的血清及供血者的血清與受血者的RBC進(jìn)行的配合試驗(yàn)，以免發(fā)生溶血。2.交叉配血實(shí)驗(yàn)的意義（1）檢驗(yàn)血型鑒定是否有誤。（2）檢驗(yàn)血清中是否有不規(guī)則抗體。3.交叉配血的方法供血者的紅細(xì)胞受血者血清受血者的紅細(xì)胞供血者血清（主側(cè)）（次側(cè)）均不凝集：配血相合主側(cè)凝集：絕對不可以有凝集或溶血現(xiàn)象主側(cè)不凝，次側(cè)凝集：供血者血清加受血者紅細(xì)胞在允許范圍內(nèi)，可以有凝集現(xiàn)象，但不可以有溶血。只在應(yīng)激情況下少量緩慢，或使用洗滌RBC。實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：豚鼠、兔實(shí)驗(yàn)試劑：血液抗凝劑（1:500u肝素鈉注射液）實(shí)驗(yàn)器材：注射器、一次性離心管普通吸管、尖吸管、1ml刻度吸管血球凝集板實(shí)驗(yàn)步驟1、分別制備兔血清、兔紅細(xì)胞、豚鼠血清、豚鼠紅細(xì)胞2、分別制備5％兔紅細(xì)胞懸液、5％豚鼠紅細(xì)胞懸液3、交叉配血與玻片凝集觀察取血清0.1ml放于玻片上，取5％紅細(xì)胞生理鹽水懸液0.1ml，加于血清中混勻并涂成直徑約1cm的圓形，立即記時(shí)3分鐘。觀察出現(xiàn)凝集的時(shí)間和凝集塊的大小。4、加樣方法兔1紅細(xì)胞兔2紅細(xì)胞豚鼠1紅細(xì)胞豚鼠2紅細(xì)胞兔1血清◆◆◆兔2血清◆◆◆豚鼠1血清◆◆◆豚鼠2血清◆◆◆實(shí)驗(yàn)作業(yè)1、什么叫直接凝集反應(yīng)