生物化學(xué)-第5講rna轉(zhuǎn)錄和加工

上節(jié)回半保原

從起點(diǎn)開(kāi)始雙半不連

滯后

前導(dǎo) 1上節(jié)回DNA聚合dNTP為底金屬離子以DNA為模需要引2上節(jié)回

大腸桿 原點(diǎn)

DNA結(jié)合蛋 13bp保守序

9bp保守序列，DnaA結(jié)合位

解旋3上節(jié)回

DNA聚合酶DNA

DNA裝配 5課程設(shè)蛋白蛋白核酸的結(jié)核酸研究的化學(xué)DNARNA蛋白質(zhì)翻核苷酸分解代謝及生物6核酸生物化第五RNA課后閱讀第32第5Lehninger第267通過(guò)聚合酶催化合成出與鏈的過(guò)程。起 終轉(zhuǎn)錄單

轉(zhuǎn)錄區(qū) 可包含多 傳信息，并以自

+催

蛋白行使功為模板合成蛋白 中接受、轉(zhuǎn)運(yùn)氨

核糖體中蛋白質(zhì)的生物8一、RNA聚合1959NobelSamWeissJamesBonner

SeveroOchoa(1905-AudreyStevens(1932–2010)

99RNA聚合酶基本特(NMP)n+ (NMP)n+1+利用NTP為底物，需要金屬離子以DNA為模板，不需要引編碼鏈和模板編碼

正義反義轉(zhuǎn)錄產(chǎn)R編碼鏈堿基順序相同，新生成的RNA中U替代了DNA中的T編碼鏈和模板鏈?zhǔn)窍鄬?duì)的，每 的模板鏈并同一條鏈上

RNA轉(zhuǎn)錄原核生物RNA聚合催化所有類型RNA的生物合轉(zhuǎn)錄速度

RNA:50~90nt/s肽鏈15個(gè)氨基酸/sDNA:800bp/s始表

蛋白出現(xiàn)蛋白出現(xiàn)亞基MW 亞基 功α2酶組裝，啟動(dòng)子識(shí)β1RNA合成的催化1RNA合成的催化σ1識(shí)別啟動(dòng)子，促進(jìn)轉(zhuǎn)錄起ω1輔助組裝，穩(wěn)定結(jié)酶不含σ亞基，能夠合成RNA鏈，真核生物RNA RNApolRNApolRNApol定細(xì)胞核核細(xì)胞核細(xì)胞核亞基產(chǎn)18S和28SrRNAmRNAtRNA,5S和小分子量真核RNA聚合酶II與原核RNA聚合酶同源真核：原核β和

2 2RNA聚合酶是一種廣譜抗菌素，它特異地抑制細(xì)菌A聚合酶β亞基活性，但對(duì)真核細(xì)胞的A聚合酶無(wú)作用。鬼筆鵝膏合成的鵝膏蕈堿抑制動(dòng)物RNA聚合酶II嵌入型抑制劑：放線菌素D和吖鄰制。臨 有廣泛應(yīng)，、。放線菌素吖 二、轉(zhuǎn)錄調(diào)控與啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄調(diào)

的轉(zhuǎn)錄具有選擇 適應(yīng)調(diào)細(xì)胞根據(jù)內(nèi)外條件不同表達(dá)不同的遺傳信息細(xì)胞嚴(yán)格控制表達(dá)。表達(dá)經(jīng)歷轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程，轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控是表達(dá)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，主啟動(dòng) RNA合成起始于啟動(dòng)啟動(dòng)子：RNA聚合酶識(shí)別、結(jié)合和開(kāi)始轉(zhuǎn)錄的DNA序列，位于結(jié) 5’端上游區(qū)。能活化聚合轉(zhuǎn)單 啟動(dòng) 一個(gè)或多 終止

序識(shí)別

Pribnow

編碼

-35

-10

轉(zhuǎn)錄…,-3,-2,-1,+1,+2,上游 下游 大腸桿菌啟動(dòng)子序列舉-35序能夠提供全酶的識(shí)別信

Pribnow含較多A-T，有利 具有很高的親和力原核生物轉(zhuǎn)錄起大腸桿菌σ因子舉不需要引不需要引~8bpRNA/DNA雙

閉合復(fù)延 轉(zhuǎn)錄新生鏈達(dá)到9-10nt時(shí)，abortiveinitiation

開(kāi)放復(fù) 轉(zhuǎn)錄起GC CAAT Hogness真 啟動(dòng)-80~-110 -70~-78 -25~-35

TATA區(qū)上游的保守序列稱為上游啟動(dòng)子元TATA區(qū):轉(zhuǎn)錄精確起始。刪除/突變，產(chǎn)物起點(diǎn)不固定 轉(zhuǎn)錄因真核生物轉(zhuǎn)錄起7種輔助因子參

轉(zhuǎn)錄因子識(shí)別啟動(dòng)預(yù)起始復(fù)合 增強(qiáng)

能強(qiáng)化轉(zhuǎn)錄起始的序遠(yuǎn)距離效應(yīng)：在上游200bp處，>10kb仍可增強(qiáng)遠(yuǎn)無(wú)方向性：在 的上下游或內(nèi)部都有增強(qiáng)功順式調(diào)節(jié)：只調(diào)節(jié)同 上的 ，對(duì)其上 無(wú)作 強(qiáng)化轉(zhuǎn)錄的原因易與模板結(jié)合，起始轉(zhuǎn)錄④ ④②終止因子：協(xié)助RNA依賴ρ因子的終窮追模ρ因相對(duì)分子量：280酶和依賴于RNA的NTP不依賴ρ因子的終個(gè)A，產(chǎn)物的3’端有寡聚U CG寡聚U使雜合鏈CG3’端出現(xiàn)不穩(wěn)定GC的rU-dA區(qū)域 AU發(fā)夾結(jié)構(gòu)GC酶暫停移動(dòng)，GC破壞雜合鏈5’CG端正常結(jié)構(gòu) 三、RNA的加原初轉(zhuǎn)錄物很大，大多 被內(nèi)含子分 前體往往很大轉(zhuǎn)錄后加工（RNA成熟拼接和編輯等加工過(guò)程，才能得到 RNA分5’

3’mRNA的5’-帽

結(jié)

鳥(niǎo)苷轉(zhuǎn)移甲基轉(zhuǎn)移甲基轉(zhuǎn)移

mRNA的剪真核生物RNA中的內(nèi)含啟動(dòng)子 內(nèi)含子 間隔排真斷

mRNA

5’先導(dǎo)

比例

轉(zhuǎn)非編碼成熟

GroupI反

3’-OH親核進(jìn)

GroupII

2’-OH親核進(jìn)套索結(jié)③④Spliceosome③④依靠剪切體進(jìn)行，大多intron按此方式剪①②①②mRNA的加工與轉(zhuǎn)錄過(guò)程加帽過(guò) 剪切過(guò)可變剪切舉可變剪切舉mRNA的3’-內(nèi)切多聚腺苷聚合rRNA與tRNA原核生物rRNA前體的加真核生物rRNA前體的轉(zhuǎn)錄后加前體的每個(gè)