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文檔簡介

《DNA的粗提取和物理性狀的觀察(選做)》教學(xué)設(shè)計教材分析:本實驗既是對組成細胞化合物的驗證,也是加強學(xué)生對細胞中化合物的提取原理、方法、技巧的理解掌握,同時還是歷年來各種考核的熱點。教材首先介紹了該實驗的“實驗原理”。教材接著說明了DNA的粗提取與鑒定的目的要求。

教學(xué)目標:1.知識與技能知道DNA粗提取的基本方法。知道動物材料和植物材料在處理上的差別。知道粗提取出的DNA的物理性狀。加深對DNA鑒定方法的印象。理解DNA粗提取的基本原理。2.過程與方法:體驗DNA粗提取和鑒定的實驗過程,提高實驗操作能力。能在實驗中發(fā)現(xiàn)實驗,提高創(chuàng)新能力。3.情感態(tài)度與價值觀:能感知自然科學(xué)實驗的嚴謹性和多元性,初步建立正確的科學(xué)觀。重點和難點:1.重點:

DNA粗提取的原理。DNA物理性狀的描述。DNA和蛋白質(zhì)的分離方法。2.難點:DNA和蛋白質(zhì)的分離方法。DNA和RNA的分離方法。教學(xué)思路簡述:本實驗是一個定性類的實驗,從知識角度看,雖然是生命科學(xué)實驗,但本實驗所牽涉的化學(xué)問題很多。要讓學(xué)生理解實驗內(nèi)容,必須結(jié)合生化,搞清試劑的選擇,使用順序和為什么要這么做。同時不能忽略與第一冊物質(zhì)鑒定的聯(lián)系。從技能角度看,本實驗對于攪拌和移液有一定要求,講解時要提醒學(xué)生。生化的結(jié)合,前后知識的結(jié)合,教師要在潛移默化中讓學(xué)生感受到自然科學(xué)之間的聯(lián)系。教學(xué)過程與設(shè)計:一、.引入:在黑板上畫一條染色體,從染色體的物質(zhì)組成引入這節(jié)課的內(nèi)容。DNA的粗提取和物理性狀的觀察(選做)(板書課題)二、.闡述這節(jié)課的實驗?zāi)康摹?、DNA從哪提?。?、怎樣將DNA與細胞中的其他物質(zhì)分離?3、怎樣鑒定我們提取的DNA?三、講授新課1、提問“DNA是單獨存在的嗎?”引出需要分離DNA和蛋白質(zhì)。2、從溶解性的角度引導(dǎo)學(xué)生考慮如果最快最簡單分離出DNA。3.講授實驗具體步驟:1)首先,我們應(yīng)該選取合適的實驗材料。選擇原則:凡是含有DNA的生物材料都可以考慮,但是,選用DNA含量相對較高的生物組織,成功的可能性更大。2)釋放核物質(zhì):我們通常通過研磨來破碎植物細胞的細胞壁。在研磨的過程中,一般還會加入洗滌劑和食鹽。洗滌劑的作用:洗滌劑也分為親水基團和親脂基團,可以與細胞膜中的蛋白質(zhì)結(jié)合,使之溶解,進而瓦解細胞膜。板書:破碎細胞,釋放DNA食鹽的作用:食鹽中主要含有NaCl,有利于DNA的溶解。我們需要去除濾液中的雜質(zhì)問題:這時的濾液可能含有哪些細胞成分?主要有RNA、核蛋白、多糖等3)分離DNA和蛋白質(zhì):那么我們應(yīng)該如何將DNA單獨分離出來?提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。對于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取DNA,去除其他成分。板書:去除濾液中的雜質(zhì)介紹方法:DNA的溶解性在NaCl溶液濃度低于mol/L時,DNA的溶解度隨NaCl溶液濃度的增加而逐漸降低;在mol/L時,DNA溶解度最??;當NaCl溶液濃度繼續(xù)增加時,DNA的溶解度又逐漸增大。當氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為2mol/L時,DNA的溶解度最大,濃度為0.14mol/L時,DNA的溶解度最低。利用這一原理,可以使DNA在鹽溶液中溶解或析出。4)進一步提純:如果提取的DNA量不夠且其中含有較多雜質(zhì),是無法用于其它操作的。所以我們必須對DNA進行進一步的純化。原理也是DNA的溶解性。介紹原理:DNA不溶于酒精溶液,但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。在實驗中,我們可以使用預(yù)冷的酒精,使DNA能夠更好地凝結(jié)方法:將DNA粘稠物再溶解,繼續(xù)用2mol/L的NaCl溶液20mL溶解DNA黏稠物,仍舊沿一個方向不停攪拌3min,使DNA充分溶解。過濾:用3~4層紗布進行過濾,濾去雜質(zhì),收集含有DNA的濾液。純化:向濾液中貼壁緩慢加入50mL預(yù)冷的體積份數(shù)為95%乙醇,并用玻璃棒朝一個方向緩慢、均勻地攪拌,溶液中會出現(xiàn)DNA絲狀物。板書:DNA的初步純化注意提醒學(xué)生移液和攪拌的正確方法。DNA的鑒定原理介紹:二苯胺法在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺變藍。溶解:在物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5mL,放入絲狀物,用玻璃棒攪拌,使之溶解。顯色:加入4mL的二苯胺試劑?;旌暇鶆蚝?,將試管置于沸水中加熱5min。問題:如果溶液變藍是否能說明DNA的存在?設(shè)置對照組:在5mL體積的2mol/L的NaCl溶液中加入4mL的二苯胺試劑,置于沸水中加熱5min。對比:除了可以使用二苯胺法,還有什么方法可以鑒定DNA?用甲基綠溶液直接滴在有DNA絲狀物的載玻片或玻棒上,呈藍綠色反應(yīng)。只用一種即可,不混合用。前者要加熱,后者不加熱。板書:DNA的鑒定4.總結(jié)實驗中的問題。然后針對DNA的物理性狀進行提問。5.復(fù)習(xí)各類物質(zhì)的鑒定方法,講述甲基綠為何能鑒定

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