病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全

病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全湖南省疾病預(yù)防控制中心微生物檢驗(yàn)科黃一偉2012-3-14

內(nèi)容病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全概述病原微生物危害評(píng)估生物安全實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施和設(shè)備要求生物安全實(shí)驗(yàn)室的使用病原微生物生物安全實(shí)驗(yàn)室的管理病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全概述實(shí)驗(yàn)室生物安全概述-定義《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全》中的實(shí)驗(yàn)室，主要是指與病原微生物相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室，即是具有傳染性物質(zhì)操作活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)室。為了避免微生物和醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中有害或有潛在危害的生物因子對(duì)人、環(huán)境和社會(huì)造成的危害或潛在危害，而采取的防護(hù)措施（硬件）和管理措施（軟件），達(dá)到對(duì)人、環(huán)境和社會(huì)的安全防護(hù)目的。實(shí)驗(yàn)室的生物安全要素操作者、合作者操作對(duì)象環(huán)境實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備材料實(shí)驗(yàn)者管理者維護(hù)者相關(guān)者樣本菌（毒）種廢棄物廢氣廢水廢物人員動(dòng)物器械、試劑、耗材圍護(hù)結(jié)構(gòu)桌椅板凳水電通訊溫濕光風(fēng)安全設(shè)備檢驗(yàn)設(shè)備實(shí)驗(yàn)室生物安全概述-發(fā)展和現(xiàn)狀1二十世紀(jì)五十年代，美國(guó)在開(kāi)展生物武器、化學(xué)武器的實(shí)驗(yàn)室研究中，為了防止病原微生物和化學(xué)毒劑泄漏逃逸到實(shí)驗(yàn)室外環(huán)境，研制了一系列的防護(hù)裝備和設(shè)備，如高效粒子空氣過(guò)濾器、生物安全柜等；建設(shè)了BSL-3實(shí)驗(yàn)室和BSL-4實(shí)驗(yàn)室等。1983年WHO第一版《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》（LaboratoryBiosafetyManual），1993年第二版，2002年第二版的修訂版，2004年正式發(fā)布了第三版，該手冊(cè)鼓勵(lì)各國(guó)接受和執(zhí)行生物安全的基本概念，并鼓勵(lì)針對(duì)本國(guó)實(shí)驗(yàn)室如何安全處理致病微生物制訂操作規(guī)范。在2004年的第三版中，在下列幾個(gè)方面增加了新的內(nèi)容：危險(xiǎn)度評(píng)估、重組DNA技術(shù)的安全利用以及感染性物質(zhì)運(yùn)輸以及生物安全保障。實(shí)驗(yàn)室生物安全概述-發(fā)展和現(xiàn)狀2關(guān)于實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范化管理，美國(guó)、歐洲、加拿大等國(guó)家做得都比較好。由美國(guó)疾病預(yù)防控制中心/國(guó)立衛(wèi)生研究院（CDC/NIH）發(fā)布了《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》（BiosafetyintheMicrobiologicalandBiomedicalLaboratoriesManual,3theditionCDC/NIH）1983第一版，1999年發(fā)布第四版，目前已被國(guó)際公認(rèn)為“金標(biāo)準(zhǔn)”。/biosafety/publications/bmbl5/BMBL.pdf（2009年12月第5（2009年12月第5版本）加拿大的《實(shí)驗(yàn)室生物安全指南》2004年第三版《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》在1983年第一版的《微生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的生物安全》(BMBL)中，最早提出了把病原微生物和實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)分為四級(jí)的概念。1993年由CDC/NIH有關(guān)專家編寫(xiě)的《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的生物安全》的第三版著重描述了微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)和安全設(shè)備的不同組合，形成1～4級(jí)的實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)等級(jí)，并依據(jù)微生物對(duì)人的危險(xiǎn)程度分為四級(jí)危險(xiǎn)組，在實(shí)驗(yàn)室實(shí)際操作中加以應(yīng)用。1999年美國(guó)生物安全協(xié)會(huì)、CDC和NIH的生物安全專家，根據(jù)近年發(fā)生的一些新情況，如新出現(xiàn)的傳染病、生物恐怖活動(dòng)、BSL-3和BSL-4實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)、病原微生物的國(guó)際運(yùn)輸?shù)葐?wèn)題，在第三版的基礎(chǔ)上進(jìn)行了必要的修改和新的補(bǔ)充，出版了第四版。實(shí)驗(yàn)室生物安全概述-國(guó)內(nèi)情況1進(jìn)口少數(shù)BSL-3實(shí)驗(yàn)室。20世紀(jì)80年代我國(guó)自己研制第一個(gè)國(guó)產(chǎn)三級(jí)生物安全防護(hù)水平（biosafetylevel3,BSL-3）實(shí)驗(yàn)室誕生。我國(guó)也建造了一批此種防護(hù)水平或接近BSL-3水平的生物安全實(shí)驗(yàn)室。2002年頒布了《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》（WS233－2002），這是一個(gè)開(kāi)創(chuàng)性工作。該通用準(zhǔn)則是以美國(guó)CDC/NIH《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的生物安全》第四版為藍(lán)本制定的。2003年《獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用標(biāo)準(zhǔn)》并已頒布實(shí)施。實(shí)驗(yàn)室生物安全概述-國(guó)內(nèi)情況2SARS期間，2003年5月6日科技部、衛(wèi)生部、國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局和國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局聯(lián)合發(fā)布了關(guān)于印發(fā)《傳染性非典型肺炎病毒研究實(shí)驗(yàn)室暫行管理辦法》的通知。其內(nèi)容包括《傳染性非典型肺炎病毒研究實(shí)驗(yàn)室暫行管理辦法》和《傳染性非典型肺炎病毒的毒種保存、使用和感染動(dòng)物模型的暫行管理辦法》。實(shí)驗(yàn)室生物安全概述-國(guó)內(nèi)情況3《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489-2004）。2004年5月，中華人民共和國(guó)質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局和中華人民共和國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)正式頒布了該標(biāo)準(zhǔn)。2004年9月1日中華人民共和國(guó)建設(shè)部與國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局又聯(lián)合發(fā)布了《生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)規(guī)范》(GB50346-2004）。2004年11月12日，由溫家寶總理簽發(fā)中華人民共和國(guó)國(guó)務(wù)院令（第424號(hào)）公布施行《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》（簡(jiǎn)稱《條例》）。該《條例》規(guī)定了在病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員和公眾健康的宗旨，從而使我國(guó)病原微生物實(shí)驗(yàn)室的管理工作步入法制化管理軌道?！吨腥A人民共和國(guó)傳染病防治法》（2004年8月28日修訂版）第二十二條、第二十六條、第六章監(jiān)督管理《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》

（GB19489－2004）《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489－2004）是國(guó)家實(shí)驗(yàn)室生物安全強(qiáng)制執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)，是生物安全實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證認(rèn)可的唯一國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。該通用準(zhǔn)則是在參考了WHO、美國(guó)、加拿大和衛(wèi)生部的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，結(jié)合我國(guó)的實(shí)際情況編寫(xiě)而成的，內(nèi)容包括20節(jié)，主要包括：實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)屏障和水平分級(jí)、生物安全實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施、生物安全動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施、生物安全實(shí)驗(yàn)室的個(gè)人防護(hù)、生物安全動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的個(gè)人防護(hù)、管理要求、事故處理、感染性樣品的標(biāo)志和運(yùn)輸、廢物處理、生物安全柜的性能、分類、選擇和使用、化學(xué)品安全、放射品安全、實(shí)驗(yàn)室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程等?！秾?shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》

（GB19489－2008）GB19489-2008與GB19489-2004相比，主要變化如下：對(duì)標(biāo)準(zhǔn)要素的劃分進(jìn)行了調(diào)整，明確區(qū)分了技術(shù)要素和管理要素。

2004版第6章至第20章為技術(shù)要素和管理要素，兩類要素交織在一起。

2008版第5章、第6章為技術(shù)要素，第7章為管理要素。調(diào)整了名詞術(shù)語(yǔ)刪除了危害程度分級(jí)（2004版的第3章）修訂和增加了風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和風(fēng)險(xiǎn)控制的要求（2004版的第4章，本版的第3章）修訂了對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)原則、設(shè)施和設(shè)備的部分要求（2004版的第6章、第7章和9.3節(jié)，本版的第5章和第6章）增加了對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)施自控系統(tǒng)的要求（本版的6.3.8）增加了對(duì)從事無(wú)脊椎動(dòng)物操作實(shí)驗(yàn)室設(shè)施的要求（本版的6.5.5）增加了管理的要求（本版的7.4、7.5、7.8～7、13）刪除了部分與GB19781-2005《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全要求》重復(fù)的內(nèi)容（2004版的第3章、第12章～第15章、第17章）增加了附錄A、附錄B、附錄C，本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B、附錄C均為資料性附錄附錄A:實(shí)驗(yàn)室圍護(hù)結(jié)構(gòu)嚴(yán)密性檢測(cè)和排風(fēng)HEPA過(guò)濾器檢漏方法指南附錄B:生物安全實(shí)驗(yàn)室良好工作行為指南附錄C:實(shí)驗(yàn)室生物危險(xiǎn)物質(zhì)溢灑處理指南本標(biāo)準(zhǔn)的第3.1.10、、、、和條為推薦性條款其余均為強(qiáng)制性條款GB19489-2008與GB19489-2004比較普通實(shí)驗(yàn)室P1實(shí)驗(yàn)室P3實(shí)驗(yàn)室P4實(shí)驗(yàn)室P2實(shí)驗(yàn)室19條要求2008版22條要求8條要求76條要求2004版P1實(shí)驗(yàn)室P3實(shí)驗(yàn)室P4實(shí)驗(yàn)室P2實(shí)驗(yàn)室9條要求11條要求38條要求《生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)規(guī)范》（GB50346－2004）由中華人民共和國(guó)建設(shè)部制定頒布的《生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)規(guī)范》（GB50346-2004）共九章，包括總則、術(shù)語(yǔ)、生物安全實(shí)驗(yàn)室分級(jí)和技術(shù)指標(biāo)、建筑和裝修、暖通空調(diào)和空氣凈化、給水排水與氣體供應(yīng)、電氣和自控、安全和消防、施工驗(yàn)收九章組成。該規(guī)范將用于指導(dǎo)生物安全實(shí)驗(yàn)室的建造、系統(tǒng)和設(shè)備安裝、裝飾、空調(diào)凈化、電氣和自控要求、檢測(cè)驗(yàn)收等過(guò)程。實(shí)驗(yàn)室生物安全概述-有關(guān)概念1污染

(contamination)：是指物質(zhì)或事物由外來(lái)的物質(zhì)或因子的混入，而造成的不希望的影響。例如空氣、水體和固體受到物理的(灰塵)、氣體的(有害氣體)、生物(氣溶膠微生物)的污染。在生物安全實(shí)驗(yàn)室里的空氣、水體和固體都視為被實(shí)驗(yàn)生物因子的污染。去除污染

(decontamination)：即為了安全，去除或減少污染物（原）或其影響的過(guò)程或方法。去除生物污染不一定殺滅微生物。所以：（1）安全柜內(nèi)操作（2）向室外排放的空氣要用高效空氣顆粒(high-efficiencyparticulateair,HEPA)濾器過(guò)濾（3）排出的廢水和廢物要進(jìn)行高壓滅菌,對(duì)傳出的儀器和樣本容器表面進(jìn)行消毒實(shí)驗(yàn)室生物安全概述-有關(guān)概念2生物安全防護(hù)：是指避免生物危險(xiǎn)因子，特別是偶然的和有意利用的生物因子，對(duì)生物體包括實(shí)驗(yàn)室工作者在內(nèi)的傷害和對(duì)環(huán)境的污染的意識(shí)和措施。實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)分為一級(jí)防護(hù)（屏障）和二級(jí)防護(hù)（屏障）。一級(jí)屏障：包括兩方面內(nèi)容，（1）生物安全柜和類似的設(shè)備等，分成三個(gè)級(jí)別；（2）個(gè)人防護(hù)裝備，也分成三個(gè)級(jí)別。二級(jí)屏障：是指實(shí)驗(yàn)室屏障設(shè)施，其建設(shè)有4種不同的結(jié)構(gòu)。（1）實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施結(jié)構(gòu)（2）通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)（3）給水排水（4）電氣和控制系統(tǒng)各種一級(jí)屏障和二級(jí)屏障的組合構(gòu)成不同防護(hù)水平級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室（BSL-1?4）。概念的區(qū)別潔凈實(shí)驗(yàn)室與生物安全實(shí)驗(yàn)室一些健康相關(guān)產(chǎn)品的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)提出了100級(jí)潔凈度的要求，100級(jí)潔凈實(shí)驗(yàn)室是必需的潔凈實(shí)驗(yàn)室不能代替生物安全實(shí)驗(yàn)室生物安全實(shí)驗(yàn)室不允許正壓潔凈實(shí)驗(yàn)室僅提供了對(duì)樣品的保護(hù)生物安全實(shí)驗(yàn)室有潔凈度的要求，但要求不高實(shí)驗(yàn)室生物安全概述-病原微生物實(shí)驗(yàn)室的生物危害生物危害：由生物因子形成的傷害。生物因子：一切微生物和生物活性物質(zhì)?！恫≡⑸飳?shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》按危害程度將病原微生物分為四類：第四類危險(xiǎn)程度最低，第一類危險(xiǎn)程度最高第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為“高致病性病原微生物”?！秾?shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489-2004）對(duì)微生物的危害進(jìn)行分類，評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和等級(jí)劃分與WHO《生物安全手冊(cè)》第三版（2004）基本一致，但危害程度由4級(jí)至1級(jí)遞減。國(guó)內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》(GB19489-2008)WHO《生物安全手冊(cè)》（第三版，2004）四類在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物。

Ⅰ級(jí)（低個(gè)體危害，低群體危害）不會(huì)導(dǎo)致健康工作者和動(dòng)物致病的細(xì)菌、真菌、病毒和寄生蟲(chóng)等生物因子。Ⅰ級(jí)（無(wú)或極低的個(gè)體和群體危險(xiǎn)）不太可能引起人或動(dòng)物致病的微生物。

國(guó)內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較管理?xiàng)l例 通用要求 WHO安全手冊(cè)三類能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。

Ⅱ級(jí)

(中等個(gè)體危害，有限群體危害)能引起人或動(dòng)物發(fā)病，但一般情況下對(duì)健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會(huì)引起嚴(yán)重危害的病原微生物。實(shí)驗(yàn)室感染不導(dǎo)致嚴(yán)重疾病，具備有效治療和預(yù)防措施，并且傳播風(fēng)險(xiǎn)有限。Ⅱ級(jí)（個(gè)體危險(xiǎn)中等，群體危險(xiǎn)低）病原微生物能夠?qū)θ嘶騽?dòng)物致病，但對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導(dǎo)致嚴(yán)重危害。實(shí)驗(yàn)室暴露也許會(huì)引起嚴(yán)重感染，但對(duì)感染有有效的預(yù)防和治療措施，并且疾病傳播的危險(xiǎn)有限。國(guó)內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較二類能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。Ⅲ級(jí)（高個(gè)體危害，低群體危害）能引起人類或動(dòng)物嚴(yán)重疾病，或造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，但通常不能因偶然接觸而在個(gè)體間傳播，或能使用抗生素、抗寄生蟲(chóng)藥治療的病原微生物。Ⅲ級(jí)（個(gè)體危險(xiǎn)高，群體危險(xiǎn)低）病原微生物通常能引起人或動(dòng)物的嚴(yán)重疾病，但一般不會(huì)發(fā)生感染個(gè)體向其他個(gè)體的傳播，并且對(duì)感染有有效的預(yù)防和治療措施。國(guó)內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較一類能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。

Ⅳ級(jí)(高個(gè)體危害，高群體危害)能引起人類或動(dòng)物非常嚴(yán)重的疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或因偶然接觸在人與人，或動(dòng)物與人，或人與動(dòng)物，或動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的病原微生物。Ⅳ級(jí)（個(gè)體和群體的危險(xiǎn)均高）病原微生物通常能引起人或動(dòng)物的嚴(yán)重疾病，并且很容易發(fā)生個(gè)體之間的直接或間接傳播，對(duì)感染一般沒(méi)有有效的預(yù)防和治療措施。病原微生物實(shí)驗(yàn)室等級(jí)一類微生物（國(guó)際四級(jí)）二類微生物（國(guó)際三級(jí)）三類微生物（國(guó)際二級(jí)）四類微生物（國(guó)際一級(jí)）四級(jí)生物安全（高度防護(hù)）實(shí)驗(yàn)室（BSL-4，P4）三級(jí)生物安全（防護(hù)）實(shí)驗(yàn)室（BSL-3，P3)二級(jí)生物安全（基礎(chǔ)）實(shí)驗(yàn)室（BSL-2，P3)一級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-1，P1)生物因子危害分級(jí)與實(shí)驗(yàn)室生物安全級(jí)別、操作及所用設(shè)備的關(guān)系危害分級(jí)生物安全防護(hù)水平實(shí)驗(yàn)室操作安全設(shè)備I級(jí)四類BSL-1標(biāo)準(zhǔn)的微生物操作技術(shù)開(kāi)放式工作臺(tái)、洗手池Ⅱ級(jí)三類BSL-21、標(biāo)準(zhǔn)的微生物操作技術(shù)以及防護(hù)服、手套，若需要?jiǎng)t采取面部保護(hù)措施2、限制進(jìn)入、生物危險(xiǎn)警告標(biāo)志、“銳器”安全措施、生物安全手冊(cè)等開(kāi)放式工作臺(tái)、洗手池以及高壓滅菌器、I級(jí)或II級(jí)生物安全柜、沖洗眼裝置Ⅲ級(jí)二類BSL-3同BSL-2，加：1、專用的防護(hù)服，若需要?jiǎng)t采取呼吸保護(hù)措施2、受控的入口、定向的氣流II級(jí)或III級(jí)生物安全柜，不排蒸汽的高壓蒸汽滅菌器、緊急消毒淋浴裝置Ⅳ級(jí)一類BSL-4同BSL-3，加：入口氣閘室、出口淋浴室及專門的廢棄物處理III級(jí)生物安全柜，或II級(jí)生物安全柜與正壓防護(hù)服配合BSL-4BSL-3BSL-2病原微生物危害評(píng)估病原微生物危害評(píng)估1、為什么要進(jìn)行危害評(píng)估2、什么時(shí)候進(jìn)行危害評(píng)估3、怎樣進(jìn)行危害評(píng)估4、如何書(shū)寫(xiě)危害評(píng)估報(bào)告為什么要進(jìn)行微生物危害評(píng)估1.確定生物安全防護(hù)水平：根據(jù)評(píng)估的結(jié)果，確保實(shí)驗(yàn)室的空間、設(shè)施與設(shè)備能滿足所從事工作的需要。2.依據(jù)病原微生物危害評(píng)估結(jié)果制定微生物操作、儀器設(shè)備使用的操作程序與管理規(guī)程：微生物保藏、運(yùn)輸、滅活、銷毀程序；潛在危害分析與意外事故處理程序；人員培訓(xùn)、個(gè)人防護(hù)及健康保障與監(jiān)督程序。3.生物危害評(píng)估中包含大量相關(guān)微生物以及引起相關(guān)疾病的背景信息，是所有工作人員必須學(xué)習(xí)的參考資料。4.是評(píng)價(jià)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全狀況的依據(jù)。什么時(shí)候進(jìn)行危害評(píng)估微生物的危害評(píng)估是生物安全的核心工作，規(guī)范的危害評(píng)估工作應(yīng)始于實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)改造和實(shí)驗(yàn)研究之前；危害評(píng)估是一種動(dòng)態(tài)發(fā)展的工作，它必須考慮到科學(xué)的最新進(jìn)展，實(shí)時(shí)評(píng)估于實(shí)驗(yàn)活動(dòng)之中，定期階段性再評(píng)估于使用之后。怎樣進(jìn)行微生物危害評(píng)估病原微生物危害評(píng)估的要素一、一般生物學(xué)特性：起源、基因組及編碼產(chǎn)物、形態(tài)特征、培養(yǎng)特性、流行特征等。二、致病性和感染劑量：是評(píng)估病原微生物引起人類感染輕重程度的重要參考依據(jù)。致病性主要是闡述病原微生物引發(fā)疾病的過(guò)程或者發(fā)病機(jī)制，感染劑量是給出引起人類或動(dòng)物模型發(fā)病的劑量范圍或者最低閾值。不同病原微生物的致病力強(qiáng)弱不同，即使同類病原微生物不同菌、毒株也還可以有不同強(qiáng)度的致病力。判斷病原微生物的致病性應(yīng)考慮宿主類型、病原微生物的種、型、株、入侵的部位、體內(nèi)的定位、是否產(chǎn)生特異性毒素等。病原微生物危害評(píng)估的要素三、感染途徑及潛在暴露結(jié)果：空氣傳播途徑要比其他感染途徑更容易引起實(shí)驗(yàn)室感染的發(fā)生。病原微生物的致病力和機(jī)體的抵抗能力決定了機(jī)體暴露后產(chǎn)生的后果。同時(shí)還取決于所感染病原微生物的數(shù)量，當(dāng)大量病原微生物侵襲人體時(shí)，潛伏期一般較短，而病情則較為嚴(yán)重；反之，則潛伏期較長(zhǎng)而病情較輕，或不發(fā)病。不同個(gè)體被傳染后，可產(chǎn)生各種不同的結(jié)局，最輕的不出現(xiàn)任何癥狀、最重的發(fā)生嚴(yán)重型臨床疾病而死亡。病原微生物危害評(píng)估的要素四、環(huán)境中的穩(wěn)定性：指其抵抗外界環(huán)境的存活能力。在自然界中的穩(wěn)定性；對(duì)物理因素、化學(xué)消毒劑的敏感性。五、被操作微生物的濃度和劑量的影響六、自然宿主和易感人群七、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究、實(shí)驗(yàn)室感染或院內(nèi)感染信息病原微生物危害評(píng)估的要素八、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)評(píng)估因?qū)嶒?yàn)操作造成非自然途徑感染的機(jī)會(huì)是很多：清除和處理感染性材料時(shí)可能導(dǎo)致手污染；微生物操作中釋放的較大粒子和液滴（直徑大于5μm）會(huì)迅速沉降到工作臺(tái)面和操作者的手上，可以引起經(jīng)消化道、皮膚和眼睛的感染；破損玻璃器皿刺傷，或注射器扎傷可以引起經(jīng)血液的感染；血清樣本采集時(shí)可能經(jīng)噴濺和氣溶膠引起呼吸道感染或眼結(jié)膜感染；進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)被動(dòng)物咬傷、抓傷可導(dǎo)致感染。應(yīng)預(yù)先確定擬進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目；應(yīng)預(yù)先確定實(shí)驗(yàn)操作中可能產(chǎn)生氣溶膠的實(shí)驗(yàn)步驟：如攪拌機(jī)、離心機(jī)、勻漿機(jī)、振蕩機(jī)、超聲波粉碎儀和混合儀等設(shè)備的使用。病原微生物危害評(píng)估的要素九、重組DNA操作和可能擴(kuò)大的宿主范圍十、預(yù)防和治療措施是否有有效的治療藥物或其他有效的治療措施；是否有針對(duì)該傳染病的疫苗；是否有可靠的診斷措施，以便在查出感染時(shí)能及時(shí)進(jìn)行有效的隔離與預(yù)防。此外，還應(yīng)考慮“當(dāng)?shù)亍笔欠裼袟l件進(jìn)行上述有效的預(yù)防或治療。十一、人員安全狀況評(píng)估應(yīng)對(duì)所有涉及病原微生物操作的工作人員進(jìn)行評(píng)估:

知識(shí)背景 工作經(jīng)驗(yàn) 工作能力 個(gè)人心理素質(zhì) 健康狀態(tài)對(duì)實(shí)驗(yàn)室管理者還應(yīng)評(píng)估：管理能力處理緊急事故能力病原微生物危害評(píng)估的要素十二、評(píng)估結(jié)論1.病原微生物分類分級(jí)。我國(guó)對(duì)具體病原微生物的分類詳見(jiàn)衛(wèi)生部頒布的《人間傳染的病原微生物名錄》。該名錄不僅對(duì)病原微生物的危害程度進(jìn)行了分類，而且還規(guī)定了其不同實(shí)驗(yàn)操作的防護(hù)水平以及運(yùn)輸?shù)陌b要求。病原微生物危害程度分類與實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平的關(guān)系是相對(duì)應(yīng)而非“等同”。在確定所從事特定工作的生物安全水平時(shí)，應(yīng)根據(jù)危害評(píng)估結(jié)果來(lái)進(jìn)行專業(yè)判斷，而不應(yīng)單純根據(jù)所使用病原微生物所屬的某一危害程度分類來(lái)機(jī)械地確定所需的實(shí)驗(yàn)室生物安全水平。衛(wèi)生部頒布的《人間傳染的病原微生物名錄》列出的微生物實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)采取的最低防護(hù)水平。病原微生物危害評(píng)估的要素十二、評(píng)估結(jié)論2.實(shí)驗(yàn)活動(dòng)、實(shí)驗(yàn)室級(jí)別以及個(gè)人防護(hù)要求。3.人員健康和素質(zhì)要求。4.預(yù)防和治療措施要求。5.菌（毒）種和實(shí)驗(yàn)活動(dòng)管理要求。6.應(yīng)急預(yù)案和措施要求。病原微生物危害評(píng)估實(shí)例SARS甲型H1N1流感含未知的病原微生物的物質(zhì)

在待檢樣品信息不足時(shí)，可以利用病人的醫(yī)學(xué)資料、流行病學(xué)資料（發(fā)病率和病死率資料、可疑的傳播途徑、其他有關(guān)暴發(fā)的調(diào)查資料）以及有關(guān)標(biāo)本來(lái)源地的信息，幫助確定處理這些樣本的危害程度。處理這類標(biāo)本時(shí)應(yīng)當(dāng)謹(jǐn)慎：對(duì)于取自病人的標(biāo)本，均應(yīng)當(dāng)遵循標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)方法，并采用隔離防護(hù)措施（如手套、防護(hù)服、眼睛保護(hù)等）；處理這類標(biāo)本時(shí)最低需要二級(jí)生物安全水平；標(biāo)本的運(yùn)送應(yīng)當(dāng)遵循國(guó)家和／或國(guó)際的規(guī)章和規(guī)定。生物安全實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施和設(shè)備要求BSL-1實(shí)驗(yàn)室1.1實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)有可視窗并可鎖閉，門鎖及門的開(kāi)啟方向應(yīng)不妨礙室內(nèi)人員逃生。1.2

應(yīng)設(shè)洗手池，宜設(shè)置在靠近實(shí)驗(yàn)室的出口處。1.3在實(shí)驗(yàn)室門口處應(yīng)設(shè)存衣或掛衣裝置，可將個(gè)人服裝與實(shí)驗(yàn)室工作服分開(kāi)放置。1.4實(shí)驗(yàn)室的墻壁、天花板和地面應(yīng)易清潔、不滲水、耐化學(xué)品和消毒滅菌劑的腐蝕。地面應(yīng)平整、防滑，不應(yīng)鋪設(shè)地毯。BSL-1實(shí)驗(yàn)室1.5

實(shí)驗(yàn)室臺(tái)柜和座椅等應(yīng)穩(wěn)固，邊角應(yīng)圓滑。1.6

實(shí)驗(yàn)室臺(tái)柜等和其擺放應(yīng)便于清潔，實(shí)驗(yàn)臺(tái)面應(yīng)防水、耐腐蝕、耐熱和堅(jiān)固。1.7實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有足夠的空間和臺(tái)柜等擺放實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和物品。1.8應(yīng)根據(jù)工作性質(zhì)和流程合理擺放實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、臺(tái)柜、物品等，避免相互干擾、交叉污染，并應(yīng)不妨礙逃生和急救。1.9實(shí)驗(yàn)室可以利用自然通風(fēng)。如果采用機(jī)械通風(fēng)，應(yīng)避免交叉污染。1.10如果有可開(kāi)啟的窗戶，應(yīng)安裝可防蚊蟲(chóng)的紗窗。BSL-1實(shí)驗(yàn)室1.11實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)避免不必要的反光和強(qiáng)光。1.12若操作刺激或腐蝕性物質(zhì)，應(yīng)在30m內(nèi)設(shè)洗眼裝置，必要時(shí)應(yīng)設(shè)緊急噴淋裝置。1.13若操作有毒、刺激性、放射性揮發(fā)物質(zhì)，應(yīng)在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基礎(chǔ)上，配備適當(dāng)?shù)呢?fù)壓排風(fēng)柜。1.14若使用高毒性、放射性等物質(zhì)，應(yīng)配備相應(yīng)的安全設(shè)施、設(shè)備和個(gè)體防護(hù)裝備，應(yīng)符合國(guó)家、地方的相關(guān)規(guī)定和要求。1.15若使用高壓氣體和可燃?xì)怏w，應(yīng)有安全措施，應(yīng)符合國(guó)家、地方的相關(guān)規(guī)定和要求。1.16應(yīng)設(shè)應(yīng)急照明裝置。1.17應(yīng)有足夠的電力供應(yīng)。1.18應(yīng)有足夠的固定電源插座，避免多臺(tái)設(shè)備使用共同的電源插座。應(yīng)有可靠的接地系統(tǒng)，應(yīng)在關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)安裝漏電保護(hù)裝置或監(jiān)測(cè)報(bào)警裝置。1.19供水和排水管道系統(tǒng)應(yīng)不滲漏，下水應(yīng)有防回流設(shè)計(jì)。1.20應(yīng)配備適用的應(yīng)急器材，如消防器材、意外事故處理器材、急救器材等。1.21應(yīng)配備適用的通訊設(shè)備。1.22必要時(shí)，應(yīng)配備適當(dāng)?shù)南緶缇O(shè)備。BSL-2實(shí)驗(yàn)室2.1適用時(shí)，應(yīng)符合BSL-1的要求。2.2實(shí)驗(yàn)室主入口的門、放置生物安全柜實(shí)驗(yàn)間的門應(yīng)可自動(dòng)關(guān)閉；實(shí)驗(yàn)室主入口的門應(yīng)有進(jìn)入控制措施。2.3實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域外應(yīng)有存放備用物品的條件。BSL-2實(shí)驗(yàn)室2.4應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)配備洗眼裝置。2.5應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室或其所在的建筑內(nèi)配備高壓蒸汽滅菌器或其他適當(dāng)?shù)南緶缇O(shè)備，所配備的消毒滅菌設(shè)備應(yīng)以風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估為依據(jù)。BSL-2實(shí)驗(yàn)室2.6應(yīng)在操作病原微生物樣本的實(shí)驗(yàn)間內(nèi)配備生物安全柜。2.7應(yīng)按產(chǎn)品的設(shè)計(jì)要求安裝和使用生物安全柜。如果生物安全柜的排風(fēng)在室內(nèi)循環(huán)，室內(nèi)應(yīng)具備通風(fēng)換氣的條件；如果使用需要管道排風(fēng)的生物安全柜，應(yīng)通過(guò)獨(dú)立于建筑物其他公共通風(fēng)系統(tǒng)的管道排出。2.8應(yīng)有可靠的電力供應(yīng)。必要時(shí)，重要設(shè)備如培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等應(yīng)配置備用電源。BSL-2實(shí)驗(yàn)室分類

常壓狀態(tài)負(fù)壓狀態(tài)負(fù)壓狀態(tài)的生物安全防護(hù)性能高于常壓狀態(tài)。選擇—根據(jù)需要BSL-2實(shí)驗(yàn)室－負(fù)壓狀態(tài)平面設(shè)置－應(yīng)設(shè)更衣室、緩沖間、主實(shí)驗(yàn)室。壓力梯度－氣流由潔凈區(qū)流向污染區(qū)。氣流組織－上送下排均勻單向流。建筑結(jié)構(gòu)－縫隙必須密封，耐腐蝕。BSL-2實(shí)驗(yàn)室的運(yùn)行規(guī)范-實(shí)驗(yàn)室的進(jìn)入未經(jīng)批準(zhǔn)，任何人不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。兒童不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域?？赡茉黾荧@得性感染的危險(xiǎn)性或感染后可能引起嚴(yán)重后果的人員不允許進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室或動(dòng)物房。實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)保持關(guān)閉。工作人員進(jìn)入動(dòng)物房應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)特別批準(zhǔn)。與實(shí)驗(yàn)室工作無(wú)關(guān)的動(dòng)物不得帶入實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室的進(jìn)入BSL-2實(shí)驗(yàn)室門上應(yīng)標(biāo)有國(guó)際通用的生物危害警告標(biāo)志，包括通用的生物危險(xiǎn)性標(biāo)志，生物安全的級(jí)別、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人姓名、緊急聯(lián)系電話、以及進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的特殊要求。工作人員的防護(hù)要求1.在實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)，必須穿著合適的工作服或防護(hù)服。2.在進(jìn)行可能接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動(dòng)物的操作時(shí)，應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，隨后必須洗手。3.在處理完感染性實(shí)驗(yàn)材料和動(dòng)物后，以及在離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域前，都必須洗手。工作人員的防護(hù)要求4.為了防止眼睛或面部受到噴濺物的污染、碰撞或人工紫外線輻射的傷害,必須戴合適的安全眼鏡、面罩（面具）或其他防護(hù)設(shè)備。5.嚴(yán)禁穿著實(shí)驗(yàn)室防護(hù)服離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。6.不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)穿露腳趾的鞋。7.禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。工作人員的防護(hù)要求7.禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域儲(chǔ)存食品和飲料。8.在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用過(guò)的防護(hù)服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。有關(guān)操作的指導(dǎo)原則嚴(yán)禁用口吸移液管,嚴(yán)禁將實(shí)驗(yàn)材料置于口內(nèi)。嚴(yán)禁舔標(biāo)簽。所有的實(shí)驗(yàn)操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來(lái)進(jìn)行。應(yīng)限制使用注射針頭和注射器；不要打碎注射器、彎曲注射針頭、用后裝上針頭套、重復(fù)使用針管或針頭；不要把針頭或利器放在辦公室的垃圾收集處，可使用利器收集器收集；不要用手直接接觸破碎的玻璃；有關(guān)操作的指導(dǎo)原則可能產(chǎn)生致病微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作均應(yīng)在生物安全柜或其他物理抑制設(shè)備中進(jìn)行處理高濃度或大容量感染性材料均必須在生物安全柜或其他物理抑制設(shè)備中進(jìn)行有關(guān)操作的指導(dǎo)原則實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制訂并執(zhí)行處理溢出物的標(biāo)準(zhǔn)操作程序。出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時(shí)，必須向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)如實(shí)記錄有關(guān)暴露和處理的情況，保存相關(guān)記錄。污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染（采用化學(xué)或物理學(xué)方法）。根據(jù)所處理的微生物因子的危險(xiǎn)度評(píng)估結(jié)果準(zhǔn)備專門的污水處理系統(tǒng)。只有保證在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)沒(méi)有受到污染的文件紙張才能帶出實(shí)驗(yàn)室。有關(guān)操作的指導(dǎo)原則實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持清潔整齊，嚴(yán)禁擺放和實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的物品。每天工作結(jié)束后應(yīng)清除工作臺(tái)面的污染。若發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出應(yīng)立即清除污染。所有受到污染的材料、標(biāo)本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前，必須先清除污染。生物安全管理的指導(dǎo)原則實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)制訂和采用生物安全管理計(jì)劃以及實(shí)驗(yàn)室安全或/和操作手冊(cè)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)能提供常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室安全培訓(xùn)（每年都要進(jìn)行相關(guān)培訓(xùn)），并且建立制度。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人（或生物安全負(fù)責(zé)人）要將生物安全實(shí)驗(yàn)室的特殊危害告知實(shí)驗(yàn)室人員，同時(shí)要求他們閱讀生物安全或/和操作手冊(cè)，并遵循標(biāo)準(zhǔn)的操作程序。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)備有可供取閱的安全或/或操作手冊(cè)。所有實(shí)驗(yàn)室人員必須經(jīng)過(guò)培訓(xùn)，了解所從事工作的危險(xiǎn)、掌握有關(guān)的管理規(guī)定和操作程序，通過(guò)考核后方可從事相關(guān)實(shí)驗(yàn)室工作。應(yīng)當(dāng)制訂節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物的控制方案。如有必要，應(yīng)為所有實(shí)驗(yàn)室人員提供適宜的醫(yī)學(xué)評(píng)估、監(jiān)測(cè)和治療，并建立健康檔案（保留基線血清樣品和必要的預(yù)防接種）。生物安全柜（BSC）的使用規(guī)范①保護(hù)產(chǎn)品；②保護(hù)操作者；③保護(hù)環(huán)境。安全柜比較前窗氣流（m/s）氣流組分（%）排氣連接循環(huán)氣流排出氣流Ⅰ級(jí)>0.40100硬管式連接A1型>0.47030排入室內(nèi)或套管（罩）式連接A2型>0.57030排入室內(nèi)或套管（罩）式連接B1型>0.53070硬管式連接B2型>0.50100硬管式連接III級(jí)>0.7*0100硬管式連接I級(jí)BSCA-前窗操作口B-觀察窗

C-排氣過(guò)濾器D-負(fù)壓排氣系統(tǒng)

圖1Ⅰ級(jí)安全柜結(jié)構(gòu)和氣流模式示意圖

Ⅰ級(jí)安全柜操作者可通過(guò)前窗操作口在安全柜內(nèi)進(jìn)行操作。

前窗操作口向內(nèi)吸入的負(fù)壓氣流保護(hù)人員的安全污染氣流經(jīng)高效過(guò)濾器過(guò)濾后排出，保護(hù)環(huán)境不受污染。

不能對(duì)產(chǎn)品實(shí)施保護(hù)。II級(jí)BSC操作者可以通過(guò)前窗操作口在安全柜內(nèi)進(jìn)行操作。操作口流入氣流：保護(hù)人員經(jīng)高效過(guò)濾器過(guò)濾的下降氣流：保護(hù)產(chǎn)品被污染氣流經(jīng)高效過(guò)濾器過(guò)濾后排出：保護(hù)環(huán)境Ⅱ級(jí)安全柜根據(jù)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和氣流模式的不同分為A1、A2、B1、B2四種類型II級(jí)BSC使用范圍Ⅱ級(jí)A1型安全柜污染氣流經(jīng)過(guò)高效過(guò)濾器過(guò)濾后可以排到實(shí)驗(yàn)室或經(jīng)安全柜的外排接口通過(guò)排風(fēng)管道排到大氣中；安全柜內(nèi)的污染部位可以處于正壓狀態(tài)，且這些正壓區(qū)域可以沒(méi)有負(fù)壓區(qū)域包圍。A1型安全柜不能用于揮發(fā)性有毒化學(xué)品和揮發(fā)性放射性核素的實(shí)驗(yàn)。A前窗操作口B觀察窗C排氣過(guò)濾器

D下降氣流過(guò)濾器E壓力排氣系統(tǒng)F風(fēng)機(jī)

圖2Ⅱ級(jí)A1型安全柜結(jié)構(gòu)和氣流模式示意圖（側(cè)視圖）Ⅱ級(jí)A2型安全柜操作口流入氣流的最低速率為0.50m/s。下降氣流為部分流入氣流和部分下降氣流的混合，經(jīng)過(guò)高效過(guò)濾器過(guò)濾后送至工作區(qū)。污染氣流經(jīng)過(guò)高效過(guò)濾器過(guò)濾后可以排到實(shí)驗(yàn)室或經(jīng)安全柜的外排接口通過(guò)排風(fēng)管道排到大氣中。安全柜內(nèi)所有污染部位均處于負(fù)壓狀態(tài)或者被負(fù)壓通道和負(fù)壓通風(fēng)系統(tǒng)環(huán)繞。安全柜用于進(jìn)行以微量揮發(fā)性有毒化學(xué)品和痕量放射性核素為輔助劑的微生物實(shí)驗(yàn)時(shí)，必須連接功能合適的排氣罩。Ⅱ級(jí)A2型安全柜A-前窗操作口B-觀察窗C-排氣過(guò)濾器

D-下降氣流過(guò)濾器E-壓力排氣系統(tǒng)F-風(fēng)機(jī)

圖3Ⅱ級(jí)A2型安全柜結(jié)構(gòu)和氣流模式示意圖Ⅱ級(jí)B1型安全柜操作口流入氣流的最低平均速率為0.50m/s下降氣流大部分由未污染的流入氣流循環(huán)提供，經(jīng)過(guò)高效過(guò)濾器過(guò)濾后送至工作區(qū)。大部分被污染的下降氣流經(jīng)過(guò)高效過(guò)濾器過(guò)濾后通過(guò)專用的排氣管道排入大氣中。安全柜內(nèi)所有被污染部位均處于負(fù)壓狀態(tài)或者被負(fù)壓通道和負(fù)壓通風(fēng)系統(tǒng)包圍。如果揮發(fā)性有毒化學(xué)品或放射性核素隨空氣循環(huán)不影響實(shí)驗(yàn)操作或?qū)嶒?yàn)在安全柜的直接排氣區(qū)域進(jìn)行，B1型安全柜可以用于以微量揮發(fā)性有毒化學(xué)品和痕量放射性核素為輔助劑的微生物實(shí)驗(yàn)。Ⅱ級(jí)B1型安全柜B-觀察窗C-排氣過(guò)濾器D-下降氣流過(guò)濾器

E-負(fù)壓排氣系統(tǒng)F-風(fēng)機(jī)G-下降氣流過(guò)濾器

圖4Ⅱ級(jí)B1型安全柜結(jié)構(gòu)和氣流模式示意圖Ⅱ級(jí)B2型安全柜前窗操作口流入氣流的最低平均速率為0.50m/s；下降氣流來(lái)自經(jīng)過(guò)高效過(guò)濾器過(guò)濾的實(shí)驗(yàn)室或室外空氣(即安全柜排出的氣體不再循環(huán)使用)；流入氣流和下降氣流經(jīng)過(guò)高效過(guò)濾器過(guò)濾后通過(guò)專用排氣管道排到大氣中，不允許回到安全柜和實(shí)驗(yàn)室中；所有污染部位均處于負(fù)壓狀態(tài)或者被直接排氣（不在工作區(qū)循環(huán)）的負(fù)壓通道和負(fù)壓通風(fēng)系統(tǒng)包圍。B2型安全柜可以用于以揮發(fā)性有毒化學(xué)品和放射性核素為輔助劑的微生物實(shí)驗(yàn)。Ⅱ級(jí)B2型安全柜A-前窗操作口B-觀察窗C-排氣過(guò)濾器

D-下降氣流過(guò)濾器E-負(fù)壓排氣系統(tǒng)F-風(fēng)機(jī)G散流器

圖5Ⅱ級(jí)B2型安全柜結(jié)構(gòu)和氣流模式示意圖Ⅲ級(jí)安全柜具有全封閉、不泄漏結(jié)構(gòu)的通風(fēng)柜。人員通過(guò)與柜體連接的密閉手套在安全柜內(nèi)實(shí)施操作。安全柜內(nèi)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的負(fù)壓應(yīng)不低于120Pa。下降氣流經(jīng)高效過(guò)濾器過(guò)濾后進(jìn)入安全柜。排出氣流一般經(jīng)兩道高效過(guò)濾器過(guò)濾。III級(jí)BSC使用范圍Ⅲ級(jí)安全柜A-操作口B-觀察窗C-排氣過(guò)濾器

D-進(jìn)氣過(guò)濾器E-傳遞窗

圖5Ⅲ級(jí)安全柜結(jié)構(gòu)和氣流模式示意圖生物安全柜與超凈臺(tái)的區(qū)別超凈臺(tái)正壓柜氣流從頂部或底部經(jīng)過(guò)過(guò)濾器后從操作區(qū)正面流向工作臺(tái)面，被樣品污染的氣流排出柜外，沒(méi)有循環(huán)氣流。保護(hù)樣品不受污染，適用于普通實(shí)驗(yàn)室或1級(jí)生物安全水平中對(duì)人員和環(huán)境無(wú)保護(hù)要求的實(shí)驗(yàn)生物安全柜（BSC）的操作要點(diǎn)1.在開(kāi)始工作前把本次工作所有器材放入BSC；

2.打開(kāi)BSC，讓氣體流動(dòng)5-10分鐘；

3.用薄紙檢查操作口的氣流方向是否向內(nèi)；

4.直線方向進(jìn)入BSC，其內(nèi)的操作要緩慢而規(guī)則；

5.操作完成后對(duì)移出BSC的器材進(jìn)行必要消毒；

6.對(duì)BSC內(nèi)部進(jìn)行消毒處理；

7.讓BSC再運(yùn)轉(zhuǎn)5-10分鐘；

8.關(guān)機(jī)，開(kāi)啟紫外線燈照射30分鐘?！窠乖贐SC內(nèi)使用酒精燈物品擺放與污染預(yù)防措施1.生物安全柜內(nèi)應(yīng)盡量少放儀器和物品，只擺放本次工作所需的物品；2.器材預(yù)先放入BSC，不要放在前排的氣道網(wǎng)架上，也不要阻塞后面氣口處的空氣流通。物品擺放與污染預(yù)防措施3.操作時(shí)廢物袋或廢物盤(pán)應(yīng)放置在BSC內(nèi)；污染的吸管、器材在移出BSC前要消毒；

4.潔凈物品和使用過(guò)的污染物品要分開(kāi)放在不同區(qū)域，操作應(yīng)從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進(jìn)行，以免交叉污染；

classII型生物安全柜操作面器材放置平面圖物品擺放與污染預(yù)防措施5.在安全柜內(nèi)的操作都要在工作臺(tái)中央或后部進(jìn)行，操作者不要頻繁移動(dòng)及揮動(dòng)手臂以免破壞定向氣流；6.盡量減少操作者背后人員的走動(dòng)以及快速開(kāi)關(guān)房間的門，以防對(duì)生物安全柜的氣流造成影響；7.禁止將工作用紙放在生物安全柜內(nèi)。生物安全柜的操作要點(diǎn)生物安全柜內(nèi)感染性材料溢灑的處理1.當(dāng)發(fā)生少量溢灑時(shí)，應(yīng)用吸水紙巾立即處理，并立即用浸滿消毒液的毛巾或紗布對(duì)生物安全柜及其內(nèi)部的所以物品進(jìn)行擦洗。2.若發(fā)生大量溢灑，液體會(huì)通過(guò)生物安全柜前面或后面的格柵流到下面去，生物安全柜內(nèi)所有的物品都應(yīng)該進(jìn)行表面消毒并拿出生物安全柜，在確保生物安全柜的排水閥被關(guān)閉后，可將消毒液倒在工作臺(tái)面上，使液體通過(guò)格柵流到排水盤(pán)上。所有接觸溢出物品的材料都要進(jìn)行消毒和/或高壓滅菌處理。實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的使用規(guī)范干燥器爆裂、瓶子碎片和感染性物質(zhì)飛出培養(yǎng)物攪拌器，混合器，攪拌器產(chǎn)生氣溶膠、噴濺和溢出皮下注射針頭意外接種產(chǎn)生氣溶膠或感染性物質(zhì)溢出離心機(jī)產(chǎn)生氣溶膠、濺出和管子破裂超速離心機(jī)管子破裂高速攪拌器，組織勻漿器飛沫、滲漏和容器破裂超聲波破碎機(jī)、超聲波清潔器產(chǎn)生氣溶膠、聽(tīng)力受損、皮炎凍干機(jī)（冷凍干燥機(jī)）產(chǎn)生氣溶膠、直接接觸污染水浴微生物生長(zhǎng)，疊氮化鈉和一些金屬形成爆炸復(fù)合物

儀器相關(guān)危險(xiǎn)吸管和移液器的使用1.為防止感染，嚴(yán)禁用嘴吸液，應(yīng)使用機(jī)械移液裝置。2.所有的吸管都應(yīng)該有棉塞以減少對(duì)移液器或吸球的污染。建議使用帶有濾芯的吸頭。在BSL-2及以上級(jí)別實(shí)驗(yàn)室中，最好避免使用玻璃吸管。吸管和移液器的使用對(duì)于感染性材料不能用吸管吹打來(lái)達(dá)到混勻的目的，操作時(shí)吸管應(yīng)放入操作液面下的三分之二處，以防止產(chǎn)生氣泡和氣溶膠。從吸管吹出液體時(shí)也不要太用力，吸管內(nèi)的液體應(yīng)自動(dòng)流出，不要強(qiáng)制性排出預(yù)留液。污染的吸管應(yīng)立即浸沒(méi)在含有適宜的消毒劑的防破碎的容器里。在處理之前，應(yīng)浸泡足夠長(zhǎng)的時(shí)間。盛裝廢棄吸管的容器應(yīng)放在生物安全柜里，而非外面。嚴(yán)禁用帶有注射針頭的注射器吸液。為防止從吸管滴落的感染性物質(zhì)發(fā)生擴(kuò)散，工作臺(tái)表面應(yīng)放一塊具有吸收性能的材料，使用后應(yīng)按感染性廢棄物予以處理。離心機(jī)的使用所有的離心機(jī)應(yīng)處于正常的工作狀態(tài)并具有合格的機(jī)械性能，要根據(jù)廠家的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。離心機(jī)應(yīng)放到適宜的位置和高度，以使工作人員能看見(jiàn)離心桶并便于進(jìn)行各項(xiàng)操作。用于離心的離心管和標(biāo)本容器應(yīng)該根據(jù)廠家要求選用，最好使用塑料制品，而且在使用前應(yīng)檢查有無(wú)破損。必須在安全柜內(nèi)打開(kāi)蓋子。離心機(jī)的使用使用轉(zhuǎn)頭時(shí)應(yīng)注意轉(zhuǎn)頭蓋與轉(zhuǎn)頭型號(hào)是否匹配?？针x心桶配平時(shí)應(yīng)該用蒸餾水或70％乙醇、異丙醇，不應(yīng)使用鹽水和次氯酸鹽溶液。離心管內(nèi)液面水平距管口應(yīng)留出一定空隙，以確保離心過(guò)程中液體不會(huì)溢出，尤其是使用角轉(zhuǎn)頭時(shí)更要注意。離心機(jī)的使用對(duì)于高致病性病原微生物，必須要高度警惕離心過(guò)程中產(chǎn)生的氣溶膠風(fēng)險(xiǎn)。

大型離心機(jī)上應(yīng)加裝負(fù)壓罩，以及時(shí)吸出離心機(jī)排出的氣體，并排至實(shí)驗(yàn)室的過(guò)濾通風(fēng)系統(tǒng)，在BSL-3及以上級(jí)別實(shí)驗(yàn)室尤其要注意。

微型離心機(jī)則可放在安全柜內(nèi)離心。

如果不能在安全柜內(nèi)離心也無(wú)負(fù)壓罩，則必須將密封的轉(zhuǎn)頭在安全柜內(nèi)打開(kāi)。

所有的離心管必須帶蓋密封，其開(kāi)啟應(yīng)在安全柜內(nèi)進(jìn)行。BSL-3實(shí)驗(yàn)室-平面布局3.1.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)明確區(qū)分輔助工作區(qū)和防護(hù)區(qū)，應(yīng)在建筑物中自成隔離區(qū)或?yàn)楠?dú)立建筑物，應(yīng)有出入控制。3.1.2防護(hù)區(qū)中直接從事高風(fēng)險(xiǎn)操作的工作間為核心工作間，人員應(yīng)通過(guò)緩沖間進(jìn)入核心工作間。3.1.3適用于4.4.1的實(shí)驗(yàn)室輔助工作區(qū)應(yīng)至少包括監(jiān)控室和清潔衣物更換間；防護(hù)區(qū)應(yīng)至少包括緩沖間（可兼作脫防護(hù)服間）及核心工作間。3.1.4適用于4.4.2的實(shí)驗(yàn)室輔助工作區(qū)應(yīng)至少包括監(jiān)控室、清潔衣物更換間和淋浴間；防護(hù)區(qū)應(yīng)至少包括防護(hù)服更換間、緩沖間及核心工作間。3.1.5適用于4.4.2的實(shí)驗(yàn)室核心工作間不宜直接與其他公共區(qū)域相鄰。3.1.6如果安裝傳遞窗，其結(jié)構(gòu)承壓力及密閉性應(yīng)符合所在區(qū)域的要求，并具備對(duì)傳遞窗內(nèi)物品進(jìn)行消毒滅菌的條件。必要時(shí)，應(yīng)設(shè)置具備送排風(fēng)或自凈化功能的傳遞窗，排風(fēng)應(yīng)經(jīng)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾后排出。BSL-3實(shí)驗(yàn)室-平面布局國(guó)內(nèi)某BSL-3實(shí)驗(yàn)室平面工藝布置物流BSL-3實(shí)驗(yàn)室-圍護(hù)結(jié)構(gòu)3.2.1圍護(hù)結(jié)構(gòu)（包括墻體）應(yīng)符合國(guó)家對(duì)該類建筑的抗震要求和防火要求。3.2.2天花板、地板、墻間的交角應(yīng)易清潔和消毒滅菌。3.2.3實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)圍護(hù)結(jié)構(gòu)的所有縫隙和貫穿處的接縫都應(yīng)可靠密封。3.2.4實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)圍護(hù)結(jié)構(gòu)的內(nèi)表面應(yīng)光滑、耐腐蝕、防水，以易于清潔和消毒滅菌。3.2.5實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)的地面應(yīng)防滲漏、完整、光潔、防滑、耐腐蝕、不起塵。3.2.6實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有的門應(yīng)可自動(dòng)關(guān)閉，需要時(shí)，應(yīng)設(shè)觀察窗；門的開(kāi)啟方向不應(yīng)妨礙逃生。3.2.7實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有窗戶應(yīng)為密閉窗，玻璃應(yīng)耐撞擊、防破碎。3.2.8實(shí)驗(yàn)室及設(shè)備間的高度應(yīng)滿足設(shè)備的安裝要求，應(yīng)有維修和清潔空間。3.2.9在通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行狀態(tài)下，采用煙霧測(cè)試等目視方法檢查實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)圍護(hù)結(jié)構(gòu)的嚴(yán)密性時(shí)，所有縫隙應(yīng)無(wú)可見(jiàn)泄漏（參見(jiàn)附錄A）。BSL-3實(shí)驗(yàn)室-通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)3.3.1應(yīng)安裝獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室送排風(fēng)系統(tǒng)，應(yīng)確保在實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行時(shí)氣流由低風(fēng)險(xiǎn)區(qū)向高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)流動(dòng)，同時(shí)確保實(shí)驗(yàn)室空氣只能通過(guò)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾后經(jīng)專用的排風(fēng)管道排出。3.3.2實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)房間內(nèi)送風(fēng)口和排風(fēng)口的布置應(yīng)符合定向氣流的原則，利于減少房間內(nèi)的渦流和氣流死角；送排風(fēng)應(yīng)不影響其他設(shè)備（如:II級(jí)生物安全柜）的正常功能。3.3.3不得循環(huán)使用實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)排出的空氣。3.3.4應(yīng)按產(chǎn)品的設(shè)計(jì)要求安裝生物安全柜和其排風(fēng)管道，可以將生物安全柜排出的空氣排入實(shí)驗(yàn)室的排風(fēng)管道系統(tǒng)。3.3.5實(shí)驗(yàn)室的送風(fēng)應(yīng)經(jīng)過(guò)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾，宜同時(shí)安裝初效和中效過(guò)濾器。3.3.6實(shí)驗(yàn)室的外部排風(fēng)口應(yīng)設(shè)置在主導(dǎo)風(fēng)的下風(fēng)向（相對(duì)于送風(fēng)口），與送風(fēng)口的直線距離應(yīng)大于12m，應(yīng)至少高出本實(shí)驗(yàn)室所在建筑的頂部2m，應(yīng)有防風(fēng)、防雨、防鼠、防蟲(chóng)設(shè)計(jì)，但不應(yīng)影響氣體向上空排放。3.3.7HEPA過(guò)濾器的安裝位置應(yīng)盡可能靠近送風(fēng)管道在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的送風(fēng)口端和排風(fēng)管道在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的排風(fēng)口端。3.3.8應(yīng)可以在原位對(duì)排風(fēng)HEPA過(guò)濾器進(jìn)行消毒滅菌和檢漏（參見(jiàn)附錄A）。3.3.9如在實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)外使用高效過(guò)濾器單元，其結(jié)構(gòu)應(yīng)牢固，應(yīng)能承受2500Pa的壓力；高效過(guò)濾器單元的整體密封性應(yīng)達(dá)到在關(guān)閉所有通路并維持腔室內(nèi)的溫度在設(shè)計(jì)范圍上限的條件下，若使空氣壓力維持在1000Pa時(shí)，腔室內(nèi)每分鐘泄漏的空氣量應(yīng)不超過(guò)腔室凈容積的0.1%。3.3.10應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)送風(fēng)和排風(fēng)管道的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)安裝生物型密閉閥，必要時(shí)，可完全關(guān)閉。應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室送風(fēng)和排風(fēng)總管道的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)安裝生物型密閉閥，必要時(shí)，可完全關(guān)閉。3.3.11生物型密閉閥與實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)相通的送風(fēng)管道和排風(fēng)管道應(yīng)牢固、易消毒滅菌、耐腐蝕、抗老化，宜使用不銹鋼管道；管道的密封性應(yīng)達(dá)到在關(guān)閉所有通路并維持管道內(nèi)的溫度在設(shè)計(jì)范圍上限的條件下，若使空氣壓力維持在500Pa時(shí)，管道內(nèi)每分鐘泄漏的空氣量應(yīng)不超過(guò)管道內(nèi)凈容積的0.2%。3.3.12應(yīng)有備用排風(fēng)機(jī)。應(yīng)盡可能減少排風(fēng)機(jī)后排風(fēng)管道正壓段的長(zhǎng)度，該段管道不應(yīng)穿過(guò)其他房間。3.3.13不應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)安裝分體空調(diào)。BSL-3實(shí)驗(yàn)室-供水與供氣系統(tǒng)3.4.1應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)的實(shí)驗(yàn)間的靠近出口處設(shè)置非手動(dòng)洗手設(shè)施；如果實(shí)驗(yàn)室不具備供水條件，則應(yīng)設(shè)非手動(dòng)手消毒滅菌裝置。3.4.2應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室的給水與市政給水系統(tǒng)之間設(shè)防回流裝置。3.4.3進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的液體和氣體管道系統(tǒng)應(yīng)牢固、不滲漏、防銹、耐壓、耐溫（冷或熱）、耐腐蝕。應(yīng)有足夠的空間清潔、維護(hù)和維修實(shí)驗(yàn)室內(nèi)暴露的管道，應(yīng)在關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)安裝截止閥、防回流裝置或HEPA過(guò)濾器等。3.4.4如果有供氣（液）罐等，應(yīng)放在實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)外易更換和維護(hù)的位置，安裝牢固，不應(yīng)將不相容的氣體或液體放在一起。3.4.5如果有真空裝置，應(yīng)有防止真空裝置的內(nèi)部被污染的措施；不應(yīng)將真空裝置安裝在實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所之外。BSL-3實(shí)驗(yàn)室-污物處理及消毒滅菌系統(tǒng)3.5.1應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)設(shè)置生物安全型高壓蒸汽滅菌器。宜安裝專用的雙扉高壓滅菌器，其主體應(yīng)安裝在易維護(hù)的位置，與圍護(hù)結(jié)構(gòu)的連接之處應(yīng)可靠密封。3.5.2對(duì)實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)不能高壓滅菌的物品應(yīng)有其他消毒滅菌措施。3.5.3高壓蒸汽滅菌器的安裝位置不應(yīng)影響生物安全柜等安全隔離裝置的氣流。3.5.4如果設(shè)置傳遞物品的渡槽，應(yīng)使用強(qiáng)度符合要求的耐腐蝕性材料，并方便更換消毒滅菌液。3.5.5淋浴間或緩沖間的地面液體收集系統(tǒng)應(yīng)有防液體回流的裝置。3.5.6實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)如果有下水系統(tǒng)，應(yīng)與建筑物的下水系統(tǒng)完全隔離；下水應(yīng)直接通向本實(shí)驗(yàn)室專用的消毒滅菌系統(tǒng)。3.5.7所有下水管道應(yīng)有足夠的傾斜度和排量，確保管道內(nèi)不存水；管道的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)應(yīng)按需要安裝防回流裝置、存水彎（深度應(yīng)適用于空氣壓差的變化）或密閉閥門等；下水系統(tǒng)應(yīng)符合相應(yīng)的耐壓、耐熱、耐化學(xué)腐蝕的要求，安裝牢固，無(wú)泄漏，便于維護(hù)、清潔和檢查。3.5.8應(yīng)使用可靠的方式處理處置污水（包括污物），并應(yīng)對(duì)消毒滅菌效果進(jìn)行監(jiān)測(cè)，以確保達(dá)到排放要求。3.5.9應(yīng)在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基礎(chǔ)上，適當(dāng)處理實(shí)驗(yàn)室輔助區(qū)的污水，并應(yīng)監(jiān)測(cè)，以確保排放到市政管網(wǎng)之前達(dá)到排放要求。3.5.10可以在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)安裝紫外線消毒燈或其他適用的消毒滅菌裝置。3.5.11應(yīng)具備對(duì)實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)及與其直接相通的管道進(jìn)行消毒滅菌的條件。3.5.12應(yīng)具備對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和安全隔離裝置（包括與其直接相通的管道）進(jìn)行消毒滅菌的條件。3.5.13應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)的關(guān)鍵部位配備便攜的局部消毒滅菌裝置（如：消毒噴霧器等），并備有足夠的適用消毒滅菌劑。BSL-3實(shí)驗(yàn)室-電力供應(yīng)系統(tǒng)3.6.1電力供應(yīng)應(yīng)滿足實(shí)驗(yàn)室的所有用電要求，并應(yīng)有冗余。3.6.2生物安全柜、送風(fēng)機(jī)和排風(fēng)機(jī)、照明、自控系統(tǒng)、監(jiān)視和報(bào)警系統(tǒng)等應(yīng)配備不間斷備用電源，電力供應(yīng)應(yīng)至少維持30min

。保證實(shí)驗(yàn)人員有充足的時(shí)間進(jìn)行緊急處理和撤離。3.6.3應(yīng)在安全的位置設(shè)置專用配電箱。BSL-3實(shí)驗(yàn)室-照明系統(tǒng)3.7.1實(shí)驗(yàn)室核心工作間的照度應(yīng)不低于350lx，其他區(qū)域的照度應(yīng)不低于200lx，宜采用吸頂式防水潔凈照明燈。3.7.2應(yīng)避免過(guò)強(qiáng)的光線和光反射。3.7.3應(yīng)設(shè)不少于30min的應(yīng)急照明系統(tǒng)。BSL-3實(shí)驗(yàn)室-自控、監(jiān)視與報(bào)警系統(tǒng)3.8.1進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)有門禁系統(tǒng)，應(yīng)保證只有獲得授權(quán)的人員才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。3.8.2需要時(shí)，應(yīng)可立即解除實(shí)驗(yàn)室門的互鎖；應(yīng)在互鎖門的附近設(shè)置緊急手動(dòng)解除互鎖開(kāi)關(guān)。3.8.3核心工作間的緩沖間的入口處應(yīng)有指示核心工作間工作狀態(tài)的裝置（如：文字顯示或指示燈），必要時(shí)，應(yīng)同時(shí)設(shè)置限制進(jìn)入核心工作間的連鎖機(jī)制。3.8.4啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)時(shí)，應(yīng)先啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)，后啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)室送風(fēng)；關(guān)停時(shí)，應(yīng)先關(guān)閉生物安全柜等安全隔離裝置和排風(fēng)支管密閉閥，再關(guān)實(shí)驗(yàn)室送風(fēng)及密閉閥，后關(guān)實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)及密閉閥。3.8.5當(dāng)排風(fēng)系統(tǒng)出現(xiàn)故障時(shí)，應(yīng)有機(jī)制避免實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)正壓和影響定向氣流。3.8.6當(dāng)送風(fēng)系統(tǒng)出現(xiàn)故障時(shí)，應(yīng)有機(jī)制避免實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的負(fù)壓影響實(shí)驗(yàn)室人員的安全、影響生物安全柜等安全隔離裝置的正常功能和圍護(hù)結(jié)構(gòu)的完整性。3.8.7應(yīng)通過(guò)對(duì)可能造成實(shí)驗(yàn)室壓力波動(dòng)的設(shè)備和裝置實(shí)行連鎖控制等措施，確保生物安全柜、負(fù)壓排風(fēng)柜（罩）等局部排風(fēng)設(shè)備與實(shí)驗(yàn)室送排風(fēng)系統(tǒng)之間的壓力關(guān)系和必要的穩(wěn)定性，并應(yīng)在啟動(dòng)、運(yùn)行和關(guān)停過(guò)程中保持有序的壓力梯度。3.8.8應(yīng)設(shè)裝置連續(xù)監(jiān)測(cè)送排風(fēng)系統(tǒng)HEPA過(guò)濾器的阻力，需要時(shí)，及時(shí)更換HEPA過(guò)濾器。3.8.9應(yīng)在有負(fù)壓控制要求的房間入口的顯著位置，安裝顯示房間負(fù)壓狀況的壓力顯示裝置和控制區(qū)間提示。3.8.10中央控制系統(tǒng)應(yīng)可以實(shí)時(shí)監(jiān)控、記錄和存儲(chǔ)實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)有控制要求的參數(shù)、關(guān)鍵設(shè)施設(shè)備的運(yùn)行狀態(tài)；應(yīng)能監(jiān)控、記錄和存儲(chǔ)故障的現(xiàn)象、發(fā)生時(shí)間和持續(xù)時(shí)間；應(yīng)可以隨時(shí)查看歷史記錄。3.8.11中央控制系統(tǒng)的信號(hào)采集間隔時(shí)間應(yīng)不超過(guò)1min，各參數(shù)應(yīng)易于區(qū)分和識(shí)別。3.8.12中央控制系統(tǒng)應(yīng)能對(duì)所有故障和控制指標(biāo)進(jìn)行報(bào)警，報(bào)警應(yīng)區(qū)分一般報(bào)警和緊急報(bào)警。3.8.13緊急報(bào)警應(yīng)為聲光同時(shí)報(bào)警，應(yīng)可以向?qū)嶒?yàn)室內(nèi)外人員同時(shí)發(fā)出緊急警報(bào)；應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室核心工作間內(nèi)設(shè)置緊急報(bào)警按鈕。3.8.14應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室的關(guān)鍵部位設(shè)置監(jiān)視器，需要時(shí)，可實(shí)時(shí)監(jiān)視并錄制實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)情況和實(shí)驗(yàn)室周圍情況。監(jiān)視設(shè)備應(yīng)有足夠的分辨率，影像存儲(chǔ)介質(zhì)應(yīng)有足夠的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)容量。BSL-3實(shí)驗(yàn)室-實(shí)驗(yàn)室通訊系統(tǒng)3.9.1實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)應(yīng)設(shè)置向外部傳輸資料和數(shù)據(jù)的傳真機(jī)或其他電子設(shè)備。3.9.2監(jiān)控室和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)安裝語(yǔ)音通訊系統(tǒng)。如果安裝對(duì)講系統(tǒng)，宜采用向內(nèi)通話受控、向外通話非受控的選擇性通話方式。3.9.3通訊系統(tǒng)的復(fù)雜性應(yīng)與實(shí)驗(yàn)室的規(guī)模和復(fù)雜程度相適應(yīng)。BSL-3實(shí)驗(yàn)室-參數(shù)要求3.10.1實(shí)驗(yàn)室的圍護(hù)結(jié)構(gòu)應(yīng)能承受送風(fēng)機(jī)或排風(fēng)機(jī)異常時(shí)導(dǎo)致的空氣壓力載荷。3.10.2適用于4.4.1的實(shí)驗(yàn)室核心工作間的氣壓（負(fù)壓）與室外大氣壓的壓差值應(yīng)不小于30Pa，與相鄰區(qū)域的壓差（負(fù)壓）應(yīng)不小于10Pa；適用于4.4.2的實(shí)驗(yàn)室的核心工作間的氣壓（負(fù)壓）與室外大氣壓的壓差值應(yīng)不小于40Pa，與相鄰區(qū)域的壓差（負(fù)壓）應(yīng)不小于15Pa。3.10.3實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)各房間的最小換氣次數(shù)應(yīng)不小于12次/h3.10.4實(shí)驗(yàn)室的溫度宜控制在18℃～26℃范圍內(nèi)。3.10.5正常情況下，實(shí)驗(yàn)室的相對(duì)濕度宜控制在30%～70%范圍內(nèi)；消毒狀態(tài)下，實(shí)驗(yàn)室的相對(duì)濕度應(yīng)能滿足消毒滅菌的技術(shù)要求。3.10.6在安全柜開(kāi)啟情況下，核心工作間的噪聲應(yīng)不大于68dB(A)。3.10.7實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)的靜態(tài)潔凈度應(yīng)不低于8級(jí)水平。BSL-3實(shí)驗(yàn)室-儀器設(shè)備負(fù)壓罩、福爾馬林薰蒸滅菌器BSL-3實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證認(rèn)可－環(huán)評(píng)BSL-3實(shí)驗(yàn)室環(huán)評(píng)1、項(xiàng)目概況及工程分析2、項(xiàng)目所在地環(huán)境概況3、環(huán)境影響分析4、環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)與風(fēng)險(xiǎn)管理5、污染防治措施及可行性論證6、項(xiàng)目選址可行性分析7、清潔生產(chǎn)與總量控制8、環(huán)境管理、生物安全管理與監(jiān)測(cè)計(jì)劃9、經(jīng)濟(jì)損益分析10、公眾參與BSL-3實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證認(rèn)可－第三方檢測(cè)報(bào)告檢測(cè)單位：國(guó)家建筑工程質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心檢測(cè)結(jié)論：換氣次數(shù)、靜壓差、潔凈度、溫度與相對(duì)濕度、噪聲、送風(fēng)高效過(guò)濾器檢漏、工況轉(zhuǎn)換、安全柜檢測(cè)指標(biāo)均達(dá)到設(shè)計(jì)和實(shí)驗(yàn)室規(guī)范要求。生物安全管理體系運(yùn)行1、成立生物安全委員會(huì)和生物安全管理辦公室；2、編制并修訂生物安全管理手冊(cè)；3、開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估；4、開(kāi)展安全檢查和內(nèi)部評(píng)審和管理評(píng)審；5、對(duì)所有相關(guān)人員進(jìn)行培訓(xùn)、考核和評(píng)估；6、對(duì)所有設(shè)施設(shè)備建立檔案，進(jìn)行定期檢查維護(hù)；7、建立廢棄物處置程序，按程序處理廢棄物；8、建立意外事故應(yīng)急處置預(yù)案并開(kāi)展處置演練。中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)（CNAS）認(rèn)可申請(qǐng)資料：1、申請(qǐng)實(shí)驗(yàn)室法律地位的證明文件2、組織機(jī)構(gòu)框圖3、平面設(shè)計(jì)方案、論證報(bào)告及實(shí)驗(yàn)室建設(shè)背景資料4、《實(shí)驗(yàn)室操作生物因子及其危害程度分級(jí)一覽表》5、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告6、相關(guān)主管部門審批證明7、實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)行有效的安全管理體系文件8、實(shí)驗(yàn)室自查報(bào)告及對(duì)CNAS認(rèn)可要求的符合性聲明9、實(shí)驗(yàn)室簡(jiǎn)介視頻資料10、BSL-3實(shí)驗(yàn)室環(huán)境影響評(píng)審資料11、BSL-3實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)室工程驗(yàn)收?qǐng)?bào)告12、感染人員緊急救治醫(yī)院的協(xié)議書(shū)13、BSL-3實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程現(xiàn)場(chǎng)演示視頻資料CNAS現(xiàn)場(chǎng)評(píng)審，整改，認(rèn)證BSL-4生物安全實(shí)驗(yàn)室的使用個(gè)人防護(hù)主要是保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員免于感染性材料的各種方式的暴露，避免實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染。個(gè)人防護(hù)裝備所涉及的防護(hù)部位：眼睛、頭面部、軀體、手、足、耳（聽(tīng)力）、呼吸道裝備包括：眼鏡（安全鏡、護(hù)目鏡）、口罩、面罩、防毒面具、帽子、防護(hù)衣(實(shí)驗(yàn)服、隔離衣、連體衣、圍群)、手套、鞋套、聽(tīng)力保護(hù)器等眼睛防護(hù)裝備安全眼鏡和護(hù)目鏡：當(dāng)在進(jìn)行有可能發(fā)生化學(xué)和生物污染物質(zhì)濺出的實(shí)驗(yàn)時(shí)，必須佩戴護(hù)目鏡。當(dāng)進(jìn)行更為危險(xiǎn)的操作時(shí)，如進(jìn)行有潛在爆炸的反應(yīng)和使用或混合強(qiáng)腐蝕性和強(qiáng)酸溶液時(shí)，必須佩戴面罩或同時(shí)佩戴面罩和護(hù)目鏡或安全眼鏡。洗眼裝置：如果發(fā)生感染性物質(zhì)或腐蝕性物質(zhì)濺至工作人員眼睛時(shí)，工作人員應(yīng)該（或在同事的幫助下）使用就近的洗眼裝置用大量清水沖洗眼睛表面至少15-30分鐘。淋浴和應(yīng)急消毒噴淋裝置：

BSL-2實(shí)驗(yàn)室在必要時(shí)應(yīng)設(shè)應(yīng)急噴淋裝置；BSL-3實(shí)驗(yàn)室應(yīng)在清潔區(qū)設(shè)淋浴裝置，必要時(shí)在半污染區(qū)設(shè)應(yīng)急消毒噴淋裝置。頭面部防護(hù)裝備口罩：外科口罩可以保護(hù)部分面部免受生物危害物質(zhì)如血液、體液、分泌液以及排泄物等噴濺物的污染。外科口罩單獨(dú)使用不能為工作人員提供呼吸保護(hù)。防護(hù)面罩防護(hù)帽：可以保護(hù)工作人員避免化學(xué)和生物危害物質(zhì)飛濺至頭部（頭發(fā)）所造成的污染。呼吸防護(hù)裝備個(gè)人呼吸器使用要點(diǎn)：佩戴時(shí)選擇合格的個(gè)人呼吸器，遮蓋住鼻、口和下鄂用橡皮筋（松緊帶）固定在頭部調(diào)整在合適的面部位置并加以檢驗(yàn)吸氣時(shí)個(gè)人呼吸器應(yīng)該有塌陷呼氣時(shí)在呼吸器周圍不應(yīng)漏氣正壓面罩正壓防護(hù)服FFP3N95手部防護(hù)裝備－手套手套的選擇根據(jù)不同用途選擇合適的手套。生物安全實(shí)驗(yàn)室最常用的是乳膠手套。橡膠或塑料手套不能接觸高溫物體。處理極冷物體如液氮或干冰時(shí)要用特殊的絕緣耐冷手套。手套的使用一般情況下，佩戴一副手套即可，操作高致病性或潛在高致病性病原微生物時(shí)應(yīng)戴兩副手套。在操作過(guò)程中，外層手套被污染時(shí)應(yīng)立即用消毒劑噴灑手套，脫下后丟在生物安全柜內(nèi)的高壓袋中，并立即戴上新手套繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。手套戴好后應(yīng)覆蓋實(shí)驗(yàn)服袖口。身體和足部的防護(hù)裝備身體防護(hù)裝備實(shí)驗(yàn)服隔離衣正壓防護(hù)服圍裙套袖足部防護(hù)裝備鞋鞋套禁止在生物安全實(shí)驗(yàn)室中穿涼鞋、拖鞋、露趾和機(jī)織物鞋面的鞋病原微生物菌(毒)種或樣本管理病原微生物實(shí)驗(yàn)室從事實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中，除了使用菌（毒）種和樣本等感染性物質(zhì)以外，還可能涉及菌（毒）種和樣本的采集、攜帶、運(yùn)輸和保存（藏）管理。特點(diǎn)：所有生物安全的內(nèi)容均涉及；政策性強(qiáng)；菌（毒）種及樣本的管理和生物安全防護(hù)等級(jí)并不完全一致。我國(guó)對(duì)病原微生物菌（毒）種及樣本運(yùn)輸?shù)挠嘘P(guān)規(guī)定

盡量陸路運(yùn)輸；報(bào)衛(wèi)生主管部門批準(zhǔn)（跨省報(bào)衛(wèi)生部）包裝、容器和標(biāo)識(shí)符合要求二人護(hù)送，不能通過(guò)城市公交發(fā)生泄漏2小時(shí)內(nèi)報(bào)告國(guó)際上對(duì)所運(yùn)輸?shù)母腥拘晕镔|(zhì)感染性物質(zhì)分類管理，和實(shí)驗(yàn)室操作時(shí)的四級(jí)危害分類不同，在運(yùn)輸過(guò)程中，被運(yùn)輸?shù)母腥拘晕镔|(zhì)感染性物質(zhì)只分為A類和B類兩大類。A類比B類危害性大。A類感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)[聯(lián)合國(guó)編號(hào)UN2814和UN2900（只導(dǎo)致動(dòng)物致?。┎捎肞620包裝要求。

A類之外，僅具有一般危險(xiǎn)性，引起感染的機(jī)會(huì)較少的感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)為B類（聯(lián)合國(guó)編號(hào)UN3373），采用P650包裝要求。消毒與滅菌消毒和滅菌(滅活)是保護(hù)人員和環(huán)境不被病原微生物感染和污染的重要環(huán)節(jié)。含有病原微生物的廢物必須經(jīng)過(guò)滅菌才能作為普通廢物處理；對(duì)操作中可能產(chǎn)生的迸濺或泄漏，必須通過(guò)消毒達(dá)到對(duì)病原微生物的殺滅，對(duì)操作人員進(jìn)行保護(hù),對(duì)環(huán)境保護(hù)。關(guān)于清除污染的特殊要求，要根據(jù)實(shí)驗(yàn)工作類型以及所操作的感染性物質(zhì)的特性來(lái)決定。親脂類病毒或中等大小的病毒（如：HSV,CMV,RSV,HIV,HBV）細(xì)菌繁殖體（如：金葡，綠膿）真菌（如，念珠菌屬，曲霉屬）非脂類或小病毒（如脊髓灰質(zhì)炎病毒,柯薩奇病毒）分枝桿菌（如TB，M.terrae）Cryptosporidiumparvum細(xì)菌芽孢Prions敏感耐受低效中效高效滅菌（高，延時(shí)）消毒劑水平氣體滅菌蒸汽滅菌

常用化學(xué)滅菌劑的性能比較殺菌劑使用濃度（％）消毒水平滅活特征細(xì)菌親脂類病毒親水類病毒結(jié)核分枝桿菌細(xì)菌芽孢含氯

高效+++++/-過(guò)氧乙酸0.001～0.2

高效+++++戊二醛2化學(xué)滅菌/高效+++++甲醛3～8高效/中效+++++/-酒精60～

95中效++-+-季胺鹽0.4～1.6低效++---常用化學(xué)滅菌劑的安全性及特征殺菌劑腐蝕性殘留物有害被有機(jī)物滅活皮膚、眼刺激性呼吸道刺激性含氯

++++-過(guò)氧乙酸+-++-戊二醛-+-++甲醛-+-++酒精+/--++-季胺鹽--++-表面消毒－氯（次氯酸鈉）當(dāng)氯作為漂白劑使用時(shí)是強(qiáng)堿性的，能夠腐蝕金屬。一般而言：一天多次浸泡、含高濃度有機(jī)物的材料，應(yīng)每天至少更換一次；而使用頻率較低的漂白劑溶液，則可以維持一周時(shí)間。常規(guī)實(shí)驗(yàn)室用于消毒的有效氯濃度應(yīng)為1g/L。感染性物質(zhì)的溢出以及含有大量有機(jī)物的物質(zhì)，推薦使用更強(qiáng)作用的含5g/L有效氯的溶液來(lái)處理。在緊急情況下也可以用終濃度含1～2mg/L有效氯的漂白劑來(lái)消毒飲用水。注意事項(xiàng)：1）氯氣具有強(qiáng)毒性！因此漂白劑只能在通風(fēng)良好的地方儲(chǔ)存和使用。2）漂白劑也不能與酸混合以避免氯氣快速釋放。3）氯的許多副產(chǎn)物可能對(duì)人體及環(huán)境有害，應(yīng)該避免濫用含氯消毒劑，特別是漂白劑。酒精醫(yī)用酒精包括乙醇和異丙醇，都具有快速殺滅細(xì)菌作用，可殺滅結(jié)核分枝桿菌、真菌和親脂類病毒，但不能殺滅芽孢。最佳殺菌濃度為60％-90％，不同的病原微生物所需消毒濃度不同。酒精主要通過(guò)使微生物蛋白質(zhì)變性來(lái)達(dá)到殺菌作用，可作為儀器外表面和手的消毒劑。酒精能破壞用膠鑲嵌的儀器鏡頭，可使橡膠及某些塑料管在延長(zhǎng)使用或重復(fù)使用后變硬膨脹，故用酒精來(lái)消毒儀器應(yīng)加以注意。酒精屬易燃物，需置冷及通風(fēng)處保存。過(guò)氧乙酸

過(guò)乙酸或過(guò)氧乙酸可在低濃度（0.001%～0.2%）下快速殺滅所有微生物，包括細(xì)菌的芽孢。其作用機(jī)制是使蛋白質(zhì)變性，破壞細(xì)胞壁的滲透性，將蛋白質(zhì)、酶及其他代謝產(chǎn)物氧化、巰基化和硫基化。過(guò)氧乙酸的突出優(yōu)點(diǎn)在于分解產(chǎn)物無(wú)害（如乙酸、水、氧和過(guò)氧化氫）缺點(diǎn)是腐蝕性大，能腐蝕銅、黃銅、白鋼、鍍鋅鐵皮（馬口鐵）。通常不穩(wěn)定，特別當(dāng)稀釋后，6d后1%溶液損失一半效力，40%溶液每月活性丟失1%～2%?？諝庋舳嗍褂眉兹℉CHO）進(jìn)行空氣熏蒸。在溫度高于20℃時(shí)，甲醛是一種能夠殺滅所有微生物及其孢子的氣體。但甲醛對(duì)朊病毒沒(méi)有殺滅活性。甲醛起效相對(duì)較慢，需要70％左右的相對(duì)濕度。市場(chǎng)上出售的產(chǎn)品：

甲醛多聚體福爾馬林[甲醛濃度約為370g/L（37％）的水溶液，其中含甲醇（100mL/L）作為穩(wěn)定劑]兩種產(chǎn)品經(jīng)加熱都可以產(chǎn)生氣體，用于封閉空間（如生物安全柜和房間）的清除污染和消毒（見(jiàn)本章“清除局部環(huán)境污染”部分）。甲醛被懷疑是一種致癌劑，具有刺鼻的氣味，其氣體能夠刺激眼睛和黏膜，因此必須在通風(fēng)櫥或通風(fēng)良好的地方儲(chǔ)存和使用。甲醛的使用必須遵守國(guó)家化學(xué)品安全規(guī)定。高壓滅菌壓力飽和蒸汽滅菌（高壓滅菌）是對(duì)實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行滅菌的最有效和最可靠的方法。對(duì)于大多數(shù)目的，下列組合可以確保正確裝載的高壓