DB5404T 0004-2023 林芝靈芝標(biāo)準(zhǔn)綜合體 第2部分：菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20B 05

5404林 芝 市 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB5404/T0004—2023林芝靈芝標(biāo)準(zhǔn)綜合體22022-12-03發(fā)布 2023-01-03實(shí)施林芝市市場(chǎng)監(jiān)督管理局??發(fā)布DB5404/T0004DB5404/T0004—2023目 次前言 II范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語和定義 1菌種來源 1場(chǎng)地、設(shè)施要求 1原材料要求 1原料 1容器 2培養(yǎng)原料 2培養(yǎng)基參考配方 2一級(jí)種 2二級(jí)種和三級(jí)種 2菌種制做 2拌料 2裝袋 3滅菌 3冷卻、消毒、接種 3發(fā)菌 3后熟培養(yǎng) 3菌絲生長(zhǎng)速度 4菌種成熟標(biāo)準(zhǔn) 4入庫(kù) 4I前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件是《林芝靈芝標(biāo)準(zhǔn)綜合體》的第2部分，《林芝靈芝標(biāo)準(zhǔn)綜合體》已經(jīng)發(fā)布了以下部分：——第1部分：菌種基本要求；——第2部分：菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程；——第3部分：菌袋制作規(guī)程；——第4部分：栽培技術(shù)規(guī)程；——第5部分：采收存儲(chǔ)技術(shù)規(guī)范；——第6部分：分級(jí)規(guī)范。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由林芝禹翔企業(yè)服務(wù)中心提出。本文件由林芝市市場(chǎng)監(jiān)督管理局歸口。本文件主要起草人：何天文、洛桑卓瑪、羅笑娟、龍莎莎、辛雙陽(yáng)、次仁卓嘎、邵強(qiáng)、次仁羅布、段金華、趙明。II林芝靈芝標(biāo)準(zhǔn)綜合體第2部分：菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程范圍本文件適用于林芝市靈芝菌種的培育。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GB/T191 包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T4456 包裝用聚乙烯吹塑薄膜GB4789.28食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求GB/T12728 食用菌術(shù)語GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)NY/T528 食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T1742 食用菌菌種通用技術(shù)要求NY5099 無公害食品食用菌栽培基質(zhì)安全技術(shù)要求術(shù)語和定義GB/T12728界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。菌種來源密縣、察隅縣、朗縣、墨脫縣共7個(gè)縣（區(qū)）現(xiàn)轄行政區(qū)域?yàn)橹行?，采集的野生白肉靈芝馴化培育的菌種。場(chǎng)地、設(shè)施要求應(yīng)符合NY/T528的要求。原材料要求原料GB/T4456NY50991GB5749一級(jí)種需經(jīng)出菇試驗(yàn)確認(rèn)農(nóng)藝性狀和商品性狀等種性合格。容器18mm×180mm20mm×200mm750mL121126cm（13cm～17cm～33121℃-126℃高溫高壓的聚丙烯塑料袋，各類容器都應(yīng)使用能滿足濾菌和透氣要求的無紡布塑料蓋。培養(yǎng)原料化學(xué)試劑類要使用化學(xué)純或以上級(jí)別的試劑。生物制劑和天然材料類材料要新鮮，無蟲、無螨、無霉、潔凈、干燥。培養(yǎng)基參考配方一級(jí)種以1000mL計(jì)：木屑PDA培養(yǎng)基 馬鈴薯（去皮、切塊或片）200g，雜木屑20g，葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL，pH自然。PDA培養(yǎng)基 馬鈴薯（去皮、切塊或片）200g，葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL，pH自然。綜合PDA（CPDA）培養(yǎng)基 馬鈴薯（去皮、切塊或片）200g，葡萄糖20g，蛋白胨2g，二鉀3硫鎂1.5g瓊脂20維素B10m水1000mLpH然。二級(jí)種和三級(jí)種以100g干料計(jì)：玉米（小麥、高粱）98g1g1g。高粱（或玉米、小麥）12h-24h自然。77g17g3g2g1g，加水至培養(yǎng)料含水量60%，pH自然。77g17g3g2g1g，加水至培養(yǎng)料含水60pH菌種制做工藝流程備料→拌料→裝袋→滅菌→冷卻→接種→培養(yǎng)。拌料將培養(yǎng)基按本規(guī)范第7章的配方比例稱取，拌勻，并掌握好PH值。代料以用手緊握培養(yǎng)料成團(tuán)，松開后龜裂，手掌有微量水跡為準(zhǔn)（含水量60%～65%）。2裝袋用長(zhǎng)33cm、寬17cm、厚0.05mm塑料菌袋。采用機(jī)械或手工裝袋。壓實(shí)填至袋口約4/5處，用菌種套環(huán)封袋口。滅菌常壓滅菌滅菌鍋加溫達(dá)到100（海拔3000m左右的地方，壓力達(dá)到0.04MPa時(shí)）保持12h～16h，?；?h后將料袋出鍋。高壓滅菌排氣2次,待冷氣排凈,壓力達(dá)到0.105MPa～0.15MPa，溫度121～12615min～30min或20min，自然冷卻至壓力表到“0”時(shí)打開放氣閥，打開爐門，待冷卻至可以搬動(dòng)時(shí)，將培養(yǎng)基袋取出。冷卻、消毒、接種冷卻料袋放置在接種室內(nèi)，自然冷卻至常溫。接種場(chǎng)所準(zhǔn)備好后，選用2～3菌種符合NY/T528的要求,種菌齡30d～35d。17cm×33cm規(guī)格的菌種，每袋接20個(gè)～30個(gè)料袋。發(fā)菌菌袋擺放3環(huán)境控制發(fā)菌溫度控制在20～2550～60發(fā)菌管理發(fā)菌15d后熟培養(yǎng)菌絲長(zhǎng)滿菌袋后，要后熟10d～30d。溫度（18±2）℃，空氣相對(duì)濕度40%～60%。3菌絲生長(zhǎng)速度一級(jí)種在PDA（馬鈴薯葡萄糖瓊脂）培養(yǎng)基上，在避光、適溫（25±1）℃條件下，菌絲長(zhǎng)速為（8.2±1.1）mm/d，菌絲長(zhǎng)滿斜面的時(shí)間為8d～10d。二級(jí)種在適宜培養(yǎng)基上、適宜培養(yǎng)容器里（以使用15cm×28cm聚丙烯塑料菌種袋、裝量300g干料每袋為例（25±1（8.0±0.8）mm/d，菌絲長(zhǎng)滿容器的時(shí)間為23d～30d。三級(jí)種在適宜培養(yǎng)基上、適宜培養(yǎng)容器里（以使用17cm×33