血涂片復(fù)檢規(guī)則與應(yīng)用

血涂片復(fù)檢規(guī)那么

及應(yīng)用第一頁，共65頁。全血細(xì)胞分析檢測標(biāo)本接收及拒收標(biāo)本前處理血細(xì)胞分析儀檢測操作外周血涂片及染色顯微鏡鏡檢第二頁，共65頁。血細(xì)胞發(fā)育成熟過程細(xì)胞內(nèi)容物復(fù)雜度、細(xì)胞核密度增加細(xì)胞內(nèi)DNA/RNA量減少巨核細(xì)胞系第三頁，共65頁。細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡檢是判斷血細(xì)胞形態(tài)病理變化的金標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量高的“鏡檢〞包括觀察炎癥引起的白細(xì)胞毒性變化；白血病細(xì)胞病理變化；貧血紅細(xì)胞形態(tài)變化；血小板形態(tài)特點，以及血液內(nèi)寄生蟲檢查。血細(xì)胞分析儀不可取代！理想的血液檢查：儀器計數(shù)細(xì)胞；鏡檢觀察形態(tài)。鏡檢費人費時，必須制定挑選標(biāo)準(zhǔn)。第四頁，共65頁。分析儀白細(xì)胞分類結(jié)果可為鏡檢提供挑選手段,進(jìn)步鏡檢效率,保證醫(yī)療質(zhì)量鏡檢是細(xì)胞形態(tài)分析的最終手段具有特異診斷意義的形態(tài)變化必須鏡檢

第五頁，共65頁。三分類血球計數(shù)儀的血常規(guī)

復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)中華醫(yī)學(xué)會檢驗分會?三分群血細(xì)胞分析儀應(yīng)用指南?：儀器結(jié)果只有同時出現(xiàn)WBC、HGB、PLT及3個直方圖均正常且儀器無報警才可向臨床報告“分群〞結(jié)果而不需要鏡檢。白細(xì)胞三分群的結(jié)果只合適在正常血象。第六頁，共65頁。應(yīng)用五分類血細(xì)胞分析儀的復(fù)檢規(guī)那么2005年，“國際血液學(xué)復(fù)檢協(xié)作組〞提出41條規(guī)那么。15個實驗室，使用CD-4000、LH-750、XE-2100、ADVIA-120，對13298份樣品檢測并同時進(jìn)展鏡檢。整理驗證得出41條規(guī)那么如此高檔儀器在常規(guī)檢查中需涂片復(fù)查的樣本仍有20-25%之多。第七頁，共65頁。ISLH復(fù)檢專家組的41條復(fù)檢規(guī)那么關(guān)于血細(xì)胞計數(shù)—15條規(guī)那么關(guān)于白細(xì)胞分類參數(shù)—7條規(guī)那么關(guān)于網(wǎng)織紅細(xì)胞—1條規(guī)那么關(guān)于可疑報警—18條規(guī)那么第八頁，共65頁。ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)那么〔1〕①新生兒：首次檢測標(biāo)本；涂片鏡檢。②WBC、RBC、Hb、PLT、Reti：超出線性范圍；稀釋標(biāo)本后重新測定。③WBC、PLT：低于實驗室確認(rèn)的儀器線性范圍；按SOP文件進(jìn)展。④WBC、RBC、Hb、PLT：無結(jié)果；①檢查標(biāo)本是否有凝塊，②重測標(biāo)本，③假如維持不變，用替代方法計數(shù)。

第九頁，共65頁。ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)那么〔2〕⑤WBC：首次結(jié)果<4.0×109/L或>30.0×109/L；涂片鏡檢。⑥WBC：3天內(nèi)Delta值超限，并<4.0×109/L或>30.0×109/L；涂片鏡檢。⑦PLT：首次結(jié)果<100×109/L或>1000×109/L；涂片鏡檢(計數(shù))。⑧PLT：Delta值超限的任何結(jié)果；涂片鏡檢(計數(shù))。第十頁，共65頁。ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)那么〔3〕⑨Hb：首次結(jié)果<70g/L或>其年齡和性別參考范圍上限20g/L；①涂片鏡檢，②確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求。⑩MCV：24h內(nèi)標(biāo)本的首次結(jié)果<75fl或>105fl〔成人〕；涂片鏡檢。⑾MCV：24h以上的成人標(biāo)本>105fl；①涂片鏡檢觀察大紅細(xì)胞相關(guān)變化，②如無大紅細(xì)胞相關(guān)變化，要求重送新穎血標(biāo)本，③如無新穎血標(biāo)本，報告中注明。第十一頁，共65頁。ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)那么〔4〕⑿MCV：24h內(nèi)標(biāo)本的Delta值超限的任何結(jié)果；：確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求。⒀MCHC：≥參考范圍上限20g/L；檢查標(biāo)本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形紅細(xì)胞。⒁MCHC：<300g/L，同時，MCV正?；蛟龈?；尋找可能因靜脈輸液污染或其他標(biāo)本原因⒂RDW：首次結(jié)果>22%；涂片鏡檢。第十二頁，共65頁。ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)那么〔5〕⒃無DC結(jié)果或DC結(jié)果不全：無條件復(fù)檢；人工分類和涂片鏡檢。⒄Neut＃：首次結(jié)果<1.0×109/L或>20.0×109/L；涂片鏡檢。⒅Lym＃：首次結(jié)果>5.0×109/L〔成人〕或>7.0×109/L〔<12歲〕；涂片鏡檢。⒆Mono＃：首次結(jié)果>1.5×109/L〔成人〕或>3.0×109/L〔<12歲〕；涂片鏡檢。第十三頁，共65頁。ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)那么〔6〕(20)Eos＃：首次結(jié)果>2.0×109/L；涂片鏡檢。(21)Baso＃：首次結(jié)果>0.5×109/L；涂片鏡檢。(22)NRBC＃：首次出現(xiàn)任何結(jié)果；涂片鏡檢。(23)Ret＃：首次結(jié)果>0.10×109/L；涂片鏡檢。第十四頁，共65頁。ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)那么〔7〕24.疑心性報警[不成熟粒細(xì)胞(IG)/桿狀核中性粒細(xì)胞〔Band〕報警提示除外]：首次成人結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。25.疑心性報警：首次兒童結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。26.WBC結(jié)果不可信報警：陽性報警；①確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求并重測標(biāo)本，②如出現(xiàn)同樣報警提示，檢查儀器，③如需要，進(jìn)展人工分類。第十五頁，共65頁。ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)那么〔8〕27.RBC碎片：陽性報警；涂片鏡檢。28.雙形RBC：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。29.難溶性RBC：陽性報警；①檢查WBC直方/散點圖，②根據(jù)實驗室SOP證實Ret計數(shù)是否正確，③涂片鏡檢是否有異常形態(tài)的紅細(xì)胞。30.PLT聚集報警：任何計數(shù)結(jié)果；①檢查標(biāo)本是否有凝塊，②涂片鏡檢估計PLT數(shù)，③如PLT仍聚集，按實驗室SOP進(jìn)展。31.PLT報警：除PLT聚集外的PLT和MPV報警；涂片鏡檢。第十六頁，共65頁。ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)那么〔9〕32.IG報警：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。33.IG報警：WBC的Detal值超上限，有以前確認(rèn)的陽性報警結(jié)果；涂片鏡檢。34.左移報警：陽性報警；按實驗室SOP進(jìn)展。35.不典型和〔或〕變異Lym：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。36.不典型和〔或〕變異Lym：WBC的Detal值超上限，有以前確認(rèn)的陽性報警結(jié)果；涂片鏡檢。37.原始細(xì)胞報警：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。第十七頁，共65頁。ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)那么〔10〕38.原始細(xì)胞報警：3～7天內(nèi)WBC的Detal值通過，有以前確認(rèn)的陽性報警結(jié)果；按實驗室SOP進(jìn)展。39.原始細(xì)胞報警：WBC的Detal值超上限，有以前確認(rèn)的陽性報警結(jié)果；涂片鏡檢。40.NRBC報警：陽性報警；①涂片鏡檢，②如發(fā)現(xiàn)NRBC，計數(shù)NRBC，重新計算WBC結(jié)果。41.Ret：散點/直方圖異常；①檢查儀器狀態(tài)是否正常，②如吸樣有問題，重測標(biāo)本，③如結(jié)果維持不變，涂片鏡檢。第十八頁，共65頁。國內(nèi)的挑選標(biāo)準(zhǔn)2007年，中華醫(yī)學(xué)會檢驗分會成立“五分類血細(xì)胞分析儀復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)制定協(xié)作組〞，擬制定復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)規(guī)那么。國內(nèi)朱忠勇等提出7條復(fù)檢規(guī)那么目前國內(nèi)五分類血細(xì)胞分析儀沒有統(tǒng)一的復(fù)檢規(guī)那么標(biāo)準(zhǔn)，41條是較為公認(rèn)的規(guī)那么。第十九頁，共65頁。朱忠勇教授提出的7條復(fù)檢規(guī)那么①儀器出現(xiàn)血細(xì)胞計數(shù)、分類計數(shù)及相關(guān)指數(shù)的提示信號〔flags〕②直方圖或散點圖出現(xiàn)異常③儀器檢測結(jié)果各參數(shù)之間出現(xiàn)矛盾④儀器檢測結(jié)果與臨床表現(xiàn)和初診、擬診明顯不符⑤臨床初診或提示有白血病等血液?、夼R床醫(yī)生指定要鏡檢，如重度感染病人，要求查中性粒細(xì)胞左移程度和毒性改變，不典型淋巴細(xì)胞，找寄生蟲等。⑦新生兒的血樣第二十頁，共65頁。目前我科還未制定合適于本室的復(fù)檢規(guī)那么過程復(fù)雜：復(fù)檢規(guī)那么的制定→應(yīng)用顯微鏡鏡檢對復(fù)檢規(guī)那么進(jìn)展評估→復(fù)檢規(guī)那么的驗證〔重復(fù)〕。制定復(fù)檢規(guī)那么的必要性。第二十一頁，共65頁。血涂片復(fù)檢的必要性〔1〕實驗室認(rèn)可的要求ISO15189：血液學(xué)檢查部門應(yīng)制定如下標(biāo)準(zhǔn)/程序并形成文件1血細(xì)胞分析的顯微鏡復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)〔檢測結(jié)果出現(xiàn)異常計數(shù)，警示標(biāo)志，異常散點圖等情況時結(jié)果確實認(rèn)方法和程序〕2血涂片制備和檢驗的書面程序/過程3對患者血液檢查和凝固試驗的標(biāo)本進(jìn)展重復(fù)檢驗的標(biāo)準(zhǔn)及程序CAP認(rèn)可：HEM34200實驗室要建立標(biāo)準(zhǔn)以確保當(dāng)分類計數(shù)儀標(biāo)記出臨床異常結(jié)果時，必須對白細(xì)胞分類數(shù)據(jù)、直方圖、和/或血涂片進(jìn)展檢查和復(fù)檢。HEM34350所有的血涂片必須有唯一的標(biāo)識號，如病人的序列號，姓名等。HEM34450所有的血涂片至少保存一周，以便復(fù)查或參考。第二十二頁，共65頁。血涂片復(fù)檢的必要性〔2〕1過分依賴儀器，弱化人的才能及責(zé)任。2無或較少進(jìn)展顯微鏡下形態(tài)學(xué)檢查。3無或較少進(jìn)展手工白細(xì)胞分類檢查。4漏診：白血病、傳單、寄生蟲感染等。5誤診：貧血、血小板減少性紫癜、白血病6喪失部分重要病理改變的信息。第二十三頁，共65頁。復(fù)檢規(guī)那么制定的原那么1根據(jù)儀器對細(xì)胞形態(tài)識別才能，決定挑選標(biāo)準(zhǔn)的寬嚴(yán)程度。識別越差，標(biāo)準(zhǔn)越嚴(yán)。2挑選范圍要涵蓋所有人工鏡檢范圍。3在保證挑選質(zhì)量根底上，盡量使復(fù)檢率低。4假陰性率是關(guān)鍵參數(shù)，具有診斷意義的重要參數(shù)不能出現(xiàn)假陰性。其它參數(shù)假陰性率也要盡可能最低。5在低假陰性率前提下,調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)降低假陽性率第二十四頁，共65頁。復(fù)檢規(guī)那么制定的原那么6白血病患者(不管初診還是復(fù)診)不能挑選。7臨床醫(yī)生提出閱片者,必須鏡檢。8挑選標(biāo)準(zhǔn)涉及的參數(shù),應(yīng)用的儀器可以提供。9不同型號儀器挑選標(biāo)準(zhǔn)不同，同一型號儀器實驗室要求不同，標(biāo)準(zhǔn)也不同。第二十五頁，共65頁。XE-2100復(fù)檢規(guī)那么〔1〕①WBC：<3.0×109/L或>30.0×109/L；涂片鏡檢。②PLT：<80×109/L或>1000×109/L；涂片鏡檢。③Hb：<70g/L或>180g/L；涂片鏡檢。④MCV：<75fL或>105fL；涂片鏡檢。⑤MCHC：>380g/L；涂片鏡檢有無球形紅細(xì)胞。⑥RDW：首次結(jié)果>22%；涂片鏡檢。⑦DC：無結(jié)果或結(jié)果不全；涂片鏡檢和人工分類。第二十六頁，共65頁。XE-2100復(fù)檢規(guī)那么〔2〕⑧Neut＃：<1.0×109/L或>20.0×109/L；涂片鏡檢。⑨Lym＃：>5.0×109/L；涂片鏡檢。⑩Mono＃：>1.5×109/L；涂片鏡檢。⑾Eos＃：>2.0×109/L；涂片鏡檢。⑿Baso＃：>0.5×109/L；涂片鏡檢。第二十七頁，共65頁。XE-2100復(fù)檢規(guī)那么〔3〕⒀WBCIPMessage：白細(xì)胞異常散點圖；涂片鏡檢。⒁WBCIPMessage：未成熟粒細(xì)胞；涂片鏡檢。⒂WBCIPMessage：核左移；涂片鏡檢。⒃WBCIPMessage：異形淋巴細(xì)胞或原始細(xì)胞；涂片鏡檢。⒄WBCIPMessage：原始細(xì)胞；涂片鏡檢。第二十八頁，共65頁。XE-2100復(fù)檢規(guī)那么〔4〕⒅WBCIPMessage：有核紅細(xì)胞；涂片鏡檢。⒆CBC+DC：新生兒標(biāo)本；涂片鏡檢。⒇CBC+DC：血液病標(biāo)本；涂片鏡檢。第二十九頁，共65頁。復(fù)檢內(nèi)容，內(nèi)涵豐富標(biāo)本的復(fù)查人工對儀器報告的審核涂片鏡檢人工分類標(biāo)本確實認(rèn)和鑒定儀器運行狀態(tài)的檢查復(fù)檢≠人工分類第三十頁，共65頁。復(fù)檢內(nèi)容—細(xì)胞數(shù)量的驗證白細(xì)胞數(shù)量血小板數(shù)量在細(xì)胞分布適中部位閱讀血片，根據(jù)其與紅細(xì)胞的比例估計白細(xì)胞數(shù)、血小板數(shù)。Ex:正常情況下，每10-40個紅細(xì)胞會見到1個血小板。第三十一頁，共65頁。復(fù)檢內(nèi)容—白細(xì)胞分類計數(shù)和形態(tài)觀察白細(xì)胞分類計數(shù)粒細(xì)胞核象：核左移，核右移中毒性改變：中毒性顆粒、空泡變性、核固縮、核溶解。原幼細(xì)胞異形淋巴細(xì)胞其他第三十二頁，共65頁。異形淋巴細(xì)胞？第三十三頁，共65頁。異形淋巴細(xì)胞第三十四頁，共65頁。嗜酸性粒細(xì)胞〔成熟〕第三十五頁，共65頁。嗜堿性粒細(xì)胞〔成熟〕第三十六頁，共65頁。單核細(xì)胞第三十七頁，共65頁。中毒顆粒第三十八頁，共65頁。MonocytosisImmatureGran?LeftShift?DIFF:單核散點較多。中性上方幼稚細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)少量散點IMI:幼稚細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)相應(yīng)的散點IG%：儀器：3.5%鏡檢：中幼粒0.5%晚幼粒3.5%單核：儀器：18.7%鏡檢：17.5%第三十九頁，共65頁。AbnLympho/L-Blasts?鏡下見到分葉的異常淋巴細(xì)胞達(dá)15%DIFF散點圖上，正常淋巴和單核的區(qū)域有較多的散點第四十頁，共65頁。Acutemyeloidleukemia(AML)-M1DIFF:白細(xì)胞分化不良IMI:顯示大量原始細(xì)胞鏡檢:77.5%的原始細(xì)胞第四十一頁，共65頁。Acutelymphocyticleukemia(ALL)-L1DIFF:淋巴至OTHER區(qū)域出現(xiàn)大量灰白色散點，中性粒細(xì)胞上方有少量散點IMI:幼稚細(xì)胞和原始細(xì)胞區(qū)域也出現(xiàn)少量紅色散點，因此儀器提示原始細(xì)胞和幼稚粒細(xì)胞。鏡檢:93%原始細(xì)胞。第四十二頁，共65頁。復(fù)檢內(nèi)容—紅細(xì)胞形態(tài)觀察大小形狀血紅蛋白含量細(xì)胞內(nèi)包涵體紅細(xì)胞異形性第四十三頁，共65頁。正常紅細(xì)胞第四十四頁，共65頁。靶形紅細(xì)胞第四十五頁，共65頁。橢圓形紅細(xì)胞第四十六頁，共65頁。緡錢狀紅細(xì)胞第四十七頁，共65頁。豪-周氏小體〔Howell-Jollybody〕第四十八頁，共65頁。嗜堿性點彩紅細(xì)胞第四十九頁，共65頁。Hypochromia/Anemia/IronDeficiency?/Fragments?/PLTAbnDistributionRET：大量紅細(xì)胞碎片血小板直方圖異常，阻抗法將部分紅細(xì)胞碎片當(dāng)成血小板計數(shù)，而核酸熒光染色法排除了紅細(xì)胞碎片：PLT-I>PLT-O，PLT-O與鏡檢結(jié)果接近，儀器以PLT-O作為最終報告第五十頁，共65頁。復(fù)檢內(nèi)容—血小板形態(tài)觀察大小血小板聚集血小板數(shù)量評估第五十一頁，共65頁。大血小板第五十二頁，共65頁。復(fù)檢內(nèi)容—其他病理成分寄生蟲真菌第五十三頁，共65頁。真菌第五十四頁，共65頁。瘧原蟲(左：環(huán)狀體右：裂殖體)第五十五頁，共65頁。錐蟲第五十六頁，共65頁。血涂片復(fù)檢的報告方式描繪性報告異常病理成分的分級報告定量報告確認(rèn)儀器分類結(jié)果報告手工分類結(jié)果第五十七頁，共65頁。血細(xì)胞分析儀新功能介紹網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)和分析：XE-2100/SE-9500、LH750/STKS、CD3200/4000、ADVIA-120、Pentral120幼稚細(xì)胞和有核紅細(xì)胞分析：XE-2100、LH750、CD3700/4000、ADVIA-120紅細(xì)胞體積和細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白的分析：ADVIA-120淋巴細(xì)胞亞群測定：CD4000、GEN‘S動物血細(xì)胞分析：CD3700、ADVIA-2120同時分析血漿成分〔CRP〕：MicrosCRP第五十八頁，共65頁。血細(xì)胞分析新參數(shù)介紹IPF或RP〔網(wǎng)織血小板〕IG〔幼稚粒細(xì)胞〕NRBC〔有核紅細(xì)胞〕第五十九頁，共65頁。網(wǎng)織血小板的定量檢測

(ImmaturePlateletFraction)可報告參數(shù):IPF(%)研究參數(shù): IPF#H_IPF(%):1%的PLT區(qū)域PLT-X(ch)RET通道檢測IPF是未成熟血小板占血小板總數(shù)的比率第六十頁