人工采精授精

人工授精技術(shù)

方文化

2013.8

一.豬人工授精發(fā)展概況二.公豬方面三.精液方面四.人工授精實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計目錄一.豬人工授精發(fā)展概況豬人工授精在中國的歷史背景商業(yè)化人工授精在歐洲和美國的發(fā)展豬人工授精概述本交和人工授精的比較使用人工授精技術(shù)使母豬受孕的各種因素成功進(jìn)行人工授精的操作規(guī)程和8個步驟人工授精經(jīng)?？赡苡龅降膯栴}豬人工授精在中國的歷史背景1.傳統(tǒng)上，運(yùn)用人工授精使母豬受孕在中國非常普及。1)群體非常小2)中國本地母豬發(fā)情特征明顯，持續(xù)時間長。3)中國本地母豬輸精一次就能受孕。4)即使母豬返情也比較小的經(jīng)濟(jì)壓力。5)公豬的遺傳基因不是顯得非常重要。豬人工授精在中國的歷史背景2.從二十世紀(jì)八十年代開始，中國引進(jìn)了大量的西方品種，建立了大型的現(xiàn)代集約化豬場。1)有經(jīng)濟(jì)條件在1♂:20♀的比例下購買公豬，甚至超過這一比例一到二頭。2)外來母豬通過公豬的存在而刺激發(fā)情。3)為確保受孕，外來母豬在一個情期內(nèi)最好進(jìn)行重復(fù)配種。4)使用早期斷奶技術(shù)使母豬體內(nèi)從泌乳到排卵的轉(zhuǎn)換過程中產(chǎn)生很多問題。其最終結(jié)果是，在二十世紀(jì)八十和九十年代，自然交配成為大型集約化豬場中最受歡迎的配種方式。商業(yè)化人工授精在歐洲

和美國的發(fā)展在過去10年中，豬人工授精技術(shù)有了很大的發(fā)展和突破。1)精液稀釋劑的研制使采集后的精液稀釋后最多能保存5-7天，每一次采集的精液能分成10-20個單獨(dú)的頭份。2)通過先進(jìn)的授精器材，準(zhǔn)確的發(fā)情鑒定和授精技術(shù)，更好地掌握發(fā)情周期，取得和本交一致甚至更好的結(jié)果。商業(yè)化人工授精在歐洲

和美國的發(fā)展3)通過使用人工授精技術(shù)，可以購買高質(zhì)量的公豬來生產(chǎn)生長速度快、瘦肉率高的商品豬，因?yàn)槿斯な诰活^公豬可以至少用在100頭母豬身上，而本交一頭公豬只能用在20頭母豬身上。4)由于幾種嚴(yán)重疾病的迅速傳播，農(nóng)場主都不愿意從幾個不同的群體把活種豬引進(jìn)到自己的豬場。通過從場外公豬供精站獲得精液，生產(chǎn)自留的替換后備母豬可以把自己的豬場完全封閉起來，同時還是能得到高質(zhì)量的遺傳基因。人工授精技術(shù)概述豬生產(chǎn)中相互制約的5個環(huán)節(jié)品種改良健康飼料豬群管理生產(chǎn)系統(tǒng)影響人工授精效益的因素:1.豬群管理2.健康3.品種改良使用人工授精技術(shù)使母豬受孕的有關(guān)因素人工授精站1.公豬的管理和照料2.精液采集3.精液加工4.精液包裝1.刺激母豬發(fā)情2.發(fā)情鑒定3.站立發(fā)情4.排卵配種區(qū)域5.精液儲存6.使用前準(zhǔn)備7.輸精8.妊娠檢測人工授精成功與否的八個技術(shù)因素管理公豬精液采集實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)備工作精液處理與質(zhì)量控制精液分裝、保存與運(yùn)輸發(fā)情鑒定輸精妊娠診斷成功應(yīng)用人工授精技術(shù)可讓母豬分娩率高于85%，每窩產(chǎn)仔數(shù)增加0-5頭二.公豬方面在公豬站里對公豬進(jìn)行良好的管理調(diào)教后備公豬精液采集馴化新種公豬1.大多數(shù)的種公豬都試著對任何物體躍起爬垮2.因品種的不同其配種的興趣也表現(xiàn)不同3.確認(rèn)假母臺上用帶有公、母豬氣味的分泌物涂抹好4.讓新種公豬觀看一頭有經(jīng)驗(yàn)的老公豬被采精的過程5.確認(rèn)年輕公豬不產(chǎn)生疑惑6.使新公豬集中注意力于假母臺的正確位置上7.保持足夠耐心。每天馴化公豬不要超過20—30分鐘8.不要生氣憤怒或去擊打公豬，如此會使公豬失去信心杜洛克大白長白我確信她們看起來不是這樣！討厭！大小子馴化新種公豬1.一些公豬在開始階段被操作時感非常敏感2.注意于樹立年輕公豬的信心3.開始幾次射出精液的精子密度很低，因此收取精液并不重要4.優(yōu)先要馴化新公豬快速、正確地爬跨假母臺5.在一個場內(nèi)精液采集站，一頭發(fā)情母豬可以關(guān)在緊鄰假母臺的欄內(nèi)以刺激公豬的性欲6.每周采集年輕公豬精液不超過一次7.至少用12頭母豬進(jìn)行精液配種測試，以確認(rèn)其受孕率8.等到母豬產(chǎn)仔后進(jìn)一步檢測新公豬不帶有任何遺傳缺陷嘿！你介意嗎？我很高興于你溫暖的雙手好！只剩一天又該采的精液了唇裂畸型腿疝氣無肛門畸型尾畸型背精液采集前實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)備工作1．實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)備工作至少在計劃采精前1小時必須開始2．實(shí)驗(yàn)室工作人員必須穿上工作服，擦凈所有工作臺、墻面和地面，保持室內(nèi)沒有灰塵，把實(shí)驗(yàn)室的溫度定在22-24度之間。3．打開恒溫水槽，預(yù)熱到37度，準(zhǔn)備好足夠的稀釋液，放入恒溫水槽中4．把所有的采精器皿放在預(yù)熱箱中，預(yù)熱到37度5．準(zhǔn)備好采精杯，放入預(yù)熱箱中6．準(zhǔn)備好檢測設(shè)備：恒溫載物臺、顯微鏡、精蟲計數(shù)器7．準(zhǔn)備好記錄本、識別用標(biāo)簽、筆等8．當(dāng)采精員要開始采精時，把預(yù)熱好的采精杯放入保溫運(yùn)送箱中，通過傳遞窗口送到采精區(qū)域。開始采精的時間開始做實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備工作的時間橡皮圈過濾紙1升采精袋采精區(qū)域?qū)嶒?yàn)室精液采集區(qū)1.與公豬養(yǎng)殖區(qū)用墻壁和門分隔開，可以維持本室為無灰塵環(huán)境。2.嚴(yán)格地控制溫度為18℃—24℃3.假母臺牢固地安置在地板上，位于一個角落處，面朝墻角。最好使用一塊配種墊放于假母臺下以使公豬可以牢固蹬踏。4.必須設(shè)計一個人員安全區(qū)以預(yù)防公豬突然攻擊。5.有一個通向?qū)嶒?yàn)室的唯一的傳遞窗，最好設(shè)計為雙側(cè)窗門。6.有污水出口的防滑水泥地板，以便于清洗。設(shè)計為“半清潔”工作區(qū)精液采集1.采精是第一個步驟，也是最容易受到污染的階段。2.準(zhǔn)備好采精杯，放上采精袋和過濾紙，預(yù)熱到37度。3.把預(yù)熱好的采精杯放入保溫的精液運(yùn)送箱中，然后拿到采精區(qū)域。4.把公豬趕到采精區(qū)域，然后誘導(dǎo)公豬爬上假母豬。5.把采精杯從精液運(yùn)送箱中取出，放在一個安全和容易拿到的地方。6.戴上雙層手套，用干凈的紙巾擦洗包皮囊。7..脫掉外層手套，用手握住陰莖，引誘公豬把陰莖全部伸出來。8.讓第一次射出的液體流在地上，然后用干紙巾擦干凈。精液受污染的危險來自于：1．包皮尿液2．水3．包皮囊上掉下的塵土4．空氣中的塵埃5．汗液以上任何一個因素都可能破壞精液的質(zhì)量。保溫采精杯1升的采精保鮮袋過濾紙橡皮筋兩雙采精手套采精杯精液采集1．當(dāng)奶油狀白色的液體開始流出來時，開始用采精杯采集。2.繼續(xù)采集直到公豬完全停止。3.馬上把采好精液的采精杯放入保溫運(yùn)送箱中，不要拿掉過濾紙。4.把保溫運(yùn)送箱放在轉(zhuǎn)移窗口中，關(guān)上窗口的門。5.讓公豬自己從假母豬上下來，不要推它或催它。6.把公豬放回自己的欄中，準(zhǔn)備下一個采集。7..記住：很多精液從一開始采集時就污染了，破壞了精液的質(zhì)量。8.我們必須在采集時保護(hù)精液受外界物質(zhì)或溫差變化的影響。實(shí)驗(yàn)室傳送窗口采精區(qū)域空氣中的塵埃水和空氣包皮囊中的灰包皮液和尿液低溫在進(jìn)入采精杯前就污染了灰塵三.精液方面保存新鮮精液的關(guān)鍵因素保存和稀釋新鮮精液的步驟精液采集前實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)備工作在實(shí)驗(yàn)里處理精液加工精液精子包裝和儲存精液保存新鮮精液的關(guān)鍵因素1溫度2滲透壓3PH值4污染5時間清洗設(shè)備的時候，不要使用肥皂液或洗滌液，只能使用熱水1．這些是能影響精液質(zhì)量的五個因素。2.采集、加工、儲存和使用精液時應(yīng)注意的事項(xiàng)3.防止溫差變化應(yīng)注意的事項(xiàng)。4.使用的水必須純凈，不含任何雜質(zhì)，最好用雙蒸水配置精液稀釋液時必須用高質(zhì)量的稀釋粉和純凈水5.把1包稀釋粉（大約50克）倒入1升蒸溜水中，至少在使用前1小時準(zhǔn)備好。6.有三種不同類型的稀釋粉，根據(jù)你的用途選澤正確的種類。7蒸餾水可以當(dāng)?shù)刭徺I，也可以用雙蒸水機(jī)自己制作。8.精液采集和使用之間的時間越長，精液質(zhì)量變壞的危險性就越大。1．防止溫差變化2．保持正確的滲透壓和PH值3．消除外界污染4．通過使用一次性器材來防止交叉感染和疾病傳播5．當(dāng)使用時確保是高質(zhì)量的精液1．溫度的變化必須緩慢，不能超過每5分鐘1度的速度2．在溫度下降到32度以前，混合精液和稀釋液3．當(dāng)混合時，精液和稀釋液必須等溫4．混合后，精液的溫度繼續(xù)慢慢下降，然后放在17度的冰箱中保存5．在人工授精實(shí)驗(yàn)時，室內(nèi)溫度控制在22-24度精液稀釋粉中包含：1．維持能量的純葡萄糖2．維持滲透壓和PH值平衡和穩(wěn)定的純鹽3．防止細(xì)菌生長的抗生素1．短效：稀釋好精液后24小時內(nèi)用掉2．中效：稀釋好精液后4天內(nèi)用掉3．長效：稀釋好精液后8天內(nèi)用掉短效中效長效蒸餾水蒸餾水蒸餾水蒸餾水進(jìn)水雙蒸水出精液瓶總是在使用前檢查精液的質(zhì)量滴一滴在預(yù)熱的載玻片上稀釋粉稀釋和保存新鮮精液的步驟1）誘導(dǎo)公豬爬上假母臺2）擦凈包皮囊3）握住陰莖4）采集射出的精液濃稠部分5）把采好的精液運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室里精液的采集1）打開恒溫水槽和預(yù)熱箱2）混合稀釋液3）準(zhǔn)備好采精杯4）打開和檢查所有的電子設(shè)備5）準(zhǔn)備好輸精瓶、器皿、標(biāo)簽等6）確保稀釋溶液加熱到37度，混合好至少1個小時。步驟1采精開始前實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)備工作步驟21）識別公豬2）稱重計算精液容量3）精液的顏色和味道4）穩(wěn)定采集5）精子濃度計算6）顯微鏡觀察精子的形狀和活力7）計算每次采集所能分裝的頭份數(shù)，每頭份至少含有30億活的精子8）加入稀釋液在實(shí)驗(yàn)室里對所采集的精液進(jìn)行加工和質(zhì)量檢測步驟3步驟4步驟5步驟6步驟7步驟81）準(zhǔn)備好分裝精液的輸精瓶和標(biāo)簽2）根據(jù)需要選擇輸精瓶/精液袋/精液管來分裝精液3）蓋上輸精瓶的蓋子或給精液袋/精液管封口分裝1）把分裝好的精液放在17度的恒溫冰箱中2）每隔24小時把輸精瓶轉(zhuǎn)動一下以保持精子的旋浮狀態(tài)3）小心冰箱門打開時溫度的上升儲存1）如果運(yùn)輸?shù)倪^程超過30分鐘，最好用可移動的恒溫冰箱2）如果運(yùn)輸?shù)倪^程少于30分鐘，可以用保溫的運(yùn)送箱，但必須放入可升溫/降溫的冰袋3）在輸精前抽樣檢查每一次采集的精液樣品。運(yùn)送輸精1）發(fā)情鑒定2）組織好輸精區(qū)域3）規(guī)范操作程序4）使用一次性用具以防止尿道感染的傳播5）輸精完后對母豬的照顧在實(shí)驗(yàn)室里準(zhǔn)備精液有兩個目的1把采集的精液分裝成若干頭份，每頭份100毫升，含有40億個活的精子。2保存好稀釋好的精液，使之在3-5天后能夠很好地使用實(shí)驗(yàn)室的操作規(guī)程必須使我們：1）不污染精液2）不使精液受溫差變化的影響在實(shí)驗(yàn)室里，才把采精杯從保溫運(yùn)送箱中取出，拿掉過濾紙，測量精液的溫度精液只能漫漫降溫，至34-37度，下降的速度不能超過每5分鐘1度的速度精液降溫的時間可能需要15-20分鐘，可以用這段時間來檢查精液的質(zhì)量，計算精子的密度。把計算好的稀釋液倒入另外一個燒杯，比較溫度當(dāng)精液和稀釋液的溫度完全一致時，把稀釋液漫漫倒入精液中精液稀釋液3-5天溫度的急劇變化將導(dǎo)致精子死亡38℃-39℃扔掉質(zhì)量控制射精時的正常精子頂體精子發(fā)育時，兩點(diǎn)發(fā)生改變原生質(zhì)滴由頸部向尾部緩慢移動頂體脫落四.人工授精實(shí)驗(yàn)室設(shè)計人工授精實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)成隔離檢疫區(qū)種公豬養(yǎng)殖區(qū)精液采集區(qū)人工授精實(shí)驗(yàn)室人工授精設(shè)備與耗材場內(nèi)人工授精實(shí)驗(yàn)室與種公豬站的設(shè)計1.2.3.4.6.5.場內(nèi)人工授精設(shè)施的六個組成部分1.新公豬隔離檢疫區(qū)2.公豬養(yǎng)殖區(qū)、養(yǎng)殖欄與養(yǎng)殖圈舍3.精液采集區(qū)4.人工授精實(shí)驗(yàn)室、清潔室標(biāo)準(zhǔn)5.精液貯存與發(fā)送區(qū)6.實(shí)驗(yàn)室入口與更衣區(qū)1、2區(qū)是養(yǎng)殖區(qū)；3是過渡區(qū)；4、5、6是清潔區(qū)新公豬適應(yīng)馴化1.環(huán)境控制溫度在18—24℃，濕度為65%—75%之間。公豬室內(nèi)溫度達(dá)到或超過28℃，可能造成暫時性或永久性公豬不育。2.必須設(shè)計通風(fēng)系統(tǒng)，以降低疾病傳播風(fēng)險。3.留出有效的養(yǎng)殖空間：公豬養(yǎng)在一個單獨(dú)的欄內(nèi)，長度2.4米、寬0.75米、高1.1米。4.公豬欄下使用全漏縫水泥地板以維持其清潔干燥。飼料槽應(yīng)高于地板平面，而非沉入水泥地面下。5.保留一個運(yùn)動圈,至少每8頭公豬使用5平方米，如有可能最好是4頭公豬共用一個運(yùn)動圈。必須設(shè)計一個生物安全設(shè)施，稱為一個“非清潔”工作區(qū)人工授精實(shí)驗(yàn)室1.相當(dāng)于GMP清潔室的標(biāo)準(zhǔn)1）地板、墻壁、天花板、臺面等必須是可清洗的瓷磚、玻璃、高密度塑料等材料。2）達(dá)到無塵環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)的空氣過濾系統(tǒng)。3）全控環(huán)境：溫度22℃—24℃；濕度為70%。2.用于冷、熱水的不銹鋼水池及排水口。3.足夠的供電插座便于設(shè)備使用。4.特殊設(shè)計的冷卻區(qū)用于精液緩慢冷卻至稀釋時。5.唯一雙側(cè)窗門的傳遞窗至更衣區(qū)，另有一雙側(cè)窗門的傳遞窗至精液采集區(qū)。設(shè)計為“清潔”工作區(qū)人工授精實(shí)驗(yàn)室設(shè)備人工授精基本應(yīng)用物品1.假母臺及配種墊2.雙蒸水機(jī)3.小水浴槽4.計量小于2千克的電子稱5.泡沫預(yù)熱箱*6.顯微鏡(簡易型)7.精蟲密度計數(shù)器**8.17℃恒溫冰箱*泡沫預(yù)熱箱=泡沫箱+數(shù)字溫度計+加熱燈**精蟲密度計數(shù)器=亞衛(wèi)精子密度測定器+10