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文檔簡(jiǎn)介
第一章1.簡(jiǎn)述發(fā)酵工程的觀點(diǎn)及其主要內(nèi)容。發(fā)酵工程是生物技術(shù)的重要構(gòu)成部分,是生物技術(shù)家產(chǎn)化的重要環(huán)節(jié)。它是應(yīng)用生物學(xué)、化學(xué)和工程技術(shù)學(xué)的原理,大規(guī)模(工廠化)培育動(dòng)植物和微生物細(xì)胞,生產(chǎn)生物量或產(chǎn)物的科學(xué)。發(fā)酵工程可分為上游工程、中游工程和下游工程。生產(chǎn)微生物細(xì)胞(或生物量);生產(chǎn)微生物的酶;因重組產(chǎn)物;將一個(gè)化合物經(jīng)過(guò)發(fā)酵改造其化學(xué)構(gòu)造
生產(chǎn)微生物的代謝產(chǎn)物;——生物轉(zhuǎn)變。
生產(chǎn)基2.什么叫次級(jí)代謝產(chǎn)物?次級(jí)代謝產(chǎn)物是微生物在哪些生長(zhǎng)時(shí)期形成的?其與初級(jí)代謝產(chǎn)物有什么關(guān)系?以初級(jí)代謝產(chǎn)物為原料經(jīng)過(guò)次級(jí)代謝合成的,對(duì)自己無(wú)明確生理作用的代謝產(chǎn)物叫次級(jí)代謝產(chǎn)物。關(guān)系:先產(chǎn)生初級(jí)代謝產(chǎn)物,后產(chǎn)生次級(jí)代謝產(chǎn)物;初級(jí)代謝是次級(jí)代謝的基礎(chǔ);次級(jí)代謝是初級(jí)代謝在特定前提下的持續(xù)與發(fā)展。3.發(fā)酵過(guò)程有哪些構(gòu)成部分?用于菌種擴(kuò)大培育和發(fā)酵生產(chǎn)用的培育基配方;培育基、發(fā)酵罐和協(xié)助設(shè)施的滅菌;足量的高活性、純培育的接種物;在適合條件的發(fā)酵罐中培育菌體生產(chǎn)產(chǎn)物;產(chǎn)物的提取和純化;生產(chǎn)過(guò)程的廢物的辦理。第二章1.發(fā)酵工程菌株的選育方法有哪些?各有何特色?自然選育:自覺(jué)突變率低,變異程度較稍微,變異過(guò)程十分遲緩;自覺(jué)突變不定向,負(fù)向變異可能性大,正向變異可能性小誘變育種:方法簡(jiǎn)單,快速,見(jiàn)效明顯。原生質(zhì)體交融:打破種屬間的界線(xiàn),提升重組頻次,擴(kuò)大重組幅度。雜交育種:使不一樣菌株的優(yōu)秀性狀集中在重組體中,擴(kuò)大變異范圍,擁有更強(qiáng)的方向性和目的性。基因工程育種:按人們的夢(mèng)想使生物體的遺傳性狀發(fā)生定向變異。2.發(fā)酵工程對(duì)菌種有何要求?菌種的分別和挑選基本流程是如何的?要求:能大批高效合成產(chǎn)物;發(fā)酵培育基原料低價(jià);培育條件簡(jiǎn)單控制;易于液中提取產(chǎn)物;不易污染其余雜菌和噬菌體;無(wú)毒無(wú)害;性能穩(wěn)固,不易退化3.菌種退化的主要表現(xiàn),并剖析原由和防治的方法。表現(xiàn):菌種的退化能夠是形態(tài)上的,也能夠是生理上的,如原有細(xì)胞形態(tài)性狀變得不典型,菌種生長(zhǎng)速度變慢,產(chǎn)生的孢子變少,代謝產(chǎn)物生產(chǎn)能力降落等。原由:一是菌種收藏不妥;二是菌種生長(zhǎng)的要求沒(méi)有獲取知足。方法:1)減少傳代次數(shù);2)創(chuàng)建優(yōu)秀的培育條件;3)常常進(jìn)行純種分別,并對(duì)相應(yīng)的性狀指標(biāo)進(jìn)行檢查;4)采納有效的菌種收藏方法;最有效的方法是菌種復(fù)壯,詳細(xì)是采納純種分別技術(shù)選出優(yōu)秀菌株;寄生性菌株經(jīng)過(guò)在寄主體內(nèi)生長(zhǎng)恢復(fù)寄生性;裁減衰敗的個(gè)體。4.說(shuō)明菌種收藏的基來(lái)源理和方法,并指出國(guó)內(nèi)的菌種的主要收藏機(jī)構(gòu)。原理:依據(jù)菌種特征,創(chuàng)建有益于其休眠的環(huán)境(如干燥、低溫、缺氧、缺少營(yíng)養(yǎng)、加保護(hù)劑等)保留孢子、芽孢等的休眠體。方法:斜面低溫收藏法;液體白臘封存收藏法;砂土管收藏法;懸液收藏法;真空冷凍干燥收藏法;低溫收藏法;液氮超低溫收藏法。CGMCC一般微生物菌種收藏管理中心CCTCC中國(guó)典型培育物收藏中心ACCC中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種收藏管理中心AS-IV中國(guó)科學(xué)院武漢病毒研究所CFCC中國(guó)林業(yè)微生物菌種收藏管理中心CICC中國(guó)工業(yè)微生物菌種收藏管理中心CMCC中國(guó)醫(yī)學(xué)細(xì)菌收藏管理中心CVCC獸醫(yī)微生物菌種收藏管理中心GIMCC廣東省微生物研究所微生物菌種收藏中心SH上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所BCRC臺(tái)灣生物質(zhì)源保留及研究中心5.常用的工業(yè)微生物種類(lèi)有哪些?每種舉3個(gè)典型代表并說(shuō)明其主要發(fā)酵產(chǎn)品。細(xì)菌:枯草芽孢桿菌;乳酸桿菌;醋酸桿菌;棒狀桿菌;短桿菌。淀粉酶;蛋白酶;乳酸;氨基酸;肌苷酸放線(xiàn)菌:常用的放線(xiàn)菌:鏈霉菌屬、小單孢菌屬和諾卡氏菌屬等。能產(chǎn)生多種抗生素。如鏈霉素、紅霉素、金霉素、慶大霉素等酵母菌:啤酒酵母;假絲酵母;類(lèi)酵母;釀酒;面包;低凝結(jié)點(diǎn)石油;脂肪酶;酵母菌體蛋白霉菌:根霉、毛霉、犁頭霉,紅曲霉,曲霉、青霉,酶制劑;抗生素;有機(jī)酸;甾體激素等6.采納什么方法能夠分別到能分解并利用苯作為碳源和能源物質(zhì)的細(xì)菌純培育物?(1)取樣:從苯含量較高的環(huán)境中收集土樣或水樣;(1)配制培育基,制備平板:一種僅以苯作為獨(dú)一碳源(A),另一種不含任何碳源作為比較(B);(3)稀釋?zhuān)簩悠泛线m稀釋(十倍稀釋法),涂布入平板;(4)培育:將平板置于合適溫度條件下培育,察看能否有菌落產(chǎn)生;(5)選擇培育:將A平板上的菌落編號(hào)并分別轉(zhuǎn)接至B平板,置于同樣溫度條件下培育(在B平板上生長(zhǎng)的菌落是可利用空氣中CO2的自養(yǎng)型微生物);(6)挑選培育:挑取在A乎板上生長(zhǎng)而不在B平板上生長(zhǎng)的菌落,在一個(gè)新的A平板上劃線(xiàn)、培育.獲取單菌落,初步確立為可利用苯作為碳源和能源的微生物純培育物;(7)將初步確立的目標(biāo)菌株轉(zhuǎn)接至以苯作為唯一碳源的液體培育基中進(jìn)行搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn),利用相應(yīng)化學(xué)剖析方法定量剖析該菌株分解利用苯的狀況。第三章1.簡(jiǎn)要說(shuō)明工業(yè)發(fā)酵培育基的選擇依照。①知足產(chǎn)物最經(jīng)濟(jì)的合成。②發(fā)酵后所形成的副產(chǎn)物盡可能的少。③培育基的原料應(yīng)就地取材,價(jià)錢(qián)便宜;且性能穩(wěn)固,資源豐富,便于采買(mǎi)運(yùn)輸,合適大規(guī)模儲(chǔ)蓄,能保證生產(chǎn)上的供應(yīng)。④應(yīng)能知足整體工藝的要求,如不影響通氣、提取、純化及廢物辦理等。2.發(fā)酵過(guò)程中泡沫形成的原由是什么?有何危害?如何除去泡沫?原由:與培育基的組分或微生物產(chǎn)生的一些因子相關(guān),主假如培育基中的蛋白質(zhì)在氣液界面處形成穩(wěn)固薄膜所致。泡沫會(huì)致使培育基中的細(xì)胞逃逸從而自溶,開(kāi)釋出胞內(nèi)蛋白,進(jìn)一步增添泡沫的穩(wěn)固性。危害:①致使發(fā)酵罐工作容積減小;②傳質(zhì)傳熱速率降低;③擾亂傳感器使發(fā)酵過(guò)程的監(jiān)控?zé)o效;④空氣過(guò)濾器受潮易污染雜菌;⑤發(fā)酵液逃逸致使產(chǎn)物損失。消泡沫方法:①改用合成培育基,改良某些物理參數(shù)(如pH、溫度、通風(fēng)和攪拌);②利用機(jī)械消泡器;③利用消泡劑(會(huì)降低傳氧速率)。3.種子培育基和發(fā)酵培育基有何異同?①種子培育基的糖分較少,氮源許多②種子培育基應(yīng)和發(fā)酵培育基成分鄰近③關(guān)于連續(xù)發(fā)酵,種子培育基和發(fā)酵培育基應(yīng)當(dāng)同樣④抗衡生素發(fā)酵,種子培育基應(yīng)含有充分的碳源和氮源4.在設(shè)計(jì)某一發(fā)酵培育基時(shí)應(yīng)當(dāng)認(rèn)識(shí)哪些知識(shí)?①依據(jù)古人的經(jīng)驗(yàn)和培育基成分確立一些一定考慮的問(wèn)題,初步確立可能的培育基成分②經(jīng)過(guò)單因子實(shí)驗(yàn)最后確立出最為適合的培育基成分;③培育基成分確立后,剩下的問(wèn)題就是各成分最適的濃度,因?yàn)榕嘤煞趾枚?,為減少實(shí)驗(yàn)次數(shù)常采納一些合理的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法第四章1.什么叫對(duì)數(shù)殘留定律?在應(yīng)用對(duì)數(shù)殘留定律進(jìn)行培育基滅菌工藝條件計(jì)算是滅菌度一般選多少?對(duì)數(shù)殘留定律:培育基中的微生物受熱的死亡速率與殘余的微生物數(shù)目成正比,即往常生產(chǎn)中取培育基的滅菌要求即滅菌度為N=10-3個(gè)/罐
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kN2.采納什么滅菌工藝條件既能達(dá)到滅菌要求,又能減少營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損壞。為何?連續(xù)滅菌。高溫短時(shí),當(dāng)滅菌溫度上漲時(shí),微生物殺滅速度的上漲,超出培育及成分的速度,依據(jù)這一理論,培育基滅菌采納高溫短時(shí)間的方法,以減少營(yíng)養(yǎng)成分的破裂,營(yíng)養(yǎng)成分雖因溫度增添,損壞也增添,但因滅菌溫度大為縮短,總的損壞量所以減少。3.過(guò)濾除菌的機(jī)理有哪些?纖維介質(zhì)過(guò)濾除菌起作用的是哪幾個(gè)機(jī)理?①慣性作用;②擴(kuò)散作用;③靜電吸附;④攔截作用1>慣性沖擊(捕集)作用2>攔截捕集作用3>擴(kuò)散作用4>重力沉降作用5>靜電吸引作用4.一臺(tái)連續(xù)滅菌器的滅菌溫度是129.5℃,要求在40min內(nèi)對(duì)30m3的培育基進(jìn)行滅菌,培育基的原始污染度是105個(gè)菌/cm3,要求滅菌后30m3培育基中只有一個(gè)菌,試計(jì)算滅菌時(shí)間應(yīng)為多長(zhǎng)(已知129.5℃下枯草桿菌芽孢比熱死速率常數(shù)是28.7min-1)。解:依據(jù)對(duì)數(shù)殘留定律5.某發(fā)酵罐的通風(fēng)量為103/min,發(fā)酵周期100h,要求倒罐率為0.1%,原始空氣含菌量為5000個(gè)/m3,試計(jì)算過(guò)濾器過(guò)濾介質(zhì)的厚度(采納直徑為16μm的棉花纖維,當(dāng)空氣的流速為0.1m/s時(shí)過(guò)濾常數(shù)是0.135cm-1)。第五章1.單細(xì)胞微生物分批培育過(guò)程分為哪幾個(gè)時(shí)期?各個(gè)時(shí)期的比生長(zhǎng)速率分別是多少?細(xì)胞生長(zhǎng)可分為遲滯期、加快期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)久、減速期、穩(wěn)固生長(zhǎng)久和衰滅期6個(gè)階段。①遲滯期,將少許的單細(xì)胞接種到必定體積的固定培育基中,開(kāi)始階段細(xì)胞其實(shí)不分裂,細(xì)胞數(shù)目不增添這一階段稱(chēng)為遲滯期。②.加快期,經(jīng)過(guò)遲滯期后,細(xì)胞開(kāi)始大批生殖,進(jìn)入一個(gè)短暫的加快期并很快抵達(dá)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)久。③對(duì)數(shù)生長(zhǎng)久,微生物經(jīng)過(guò)遲滯期的調(diào)整后,進(jìn)入快速生長(zhǎng)階段,使細(xì)胞數(shù)目和菌體質(zhì)量的增添隨培育時(shí)間成直線(xiàn)上漲,這一時(shí)期稱(chēng)為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。④.減速期,分批培育中,微生物集體不會(huì)長(zhǎng)時(shí)間保持指數(shù)增添這是因?yàn)闋I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的缺乏代謝產(chǎn)物的累積,從而致使生長(zhǎng)速率降落。進(jìn)入減速期⑤穩(wěn)固生長(zhǎng)久,微生物在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)后期,跟著基質(zhì)的耗費(fèi),即當(dāng)限制性基質(zhì)濃度S=Ks時(shí),基質(zhì)則不可以支持微生物的下一集細(xì)胞分裂。⑥.衰滅期,穩(wěn)固生長(zhǎng)久后,跟著基質(zhì)的嚴(yán)重缺少,代謝產(chǎn)物得更多累積,細(xì)胞的能量貯備耗費(fèi)完成以及環(huán)境條件的惡劣變化使細(xì)胞生進(jìn)步入衰滅期。2.何為分批式培育與發(fā)酵、連續(xù)式培育與發(fā)酵、分批補(bǔ)液式培育與發(fā)酵?試比較三者的優(yōu)弊端及其在發(fā)酵工業(yè)中的應(yīng)用狀況。分批培育與發(fā)酵法:采納單罐液體深層發(fā)酵法,即液體培育基一次性投入發(fā)酵罐,滅菌、冷卻、接種后,進(jìn)行一次性培育與發(fā)酵,最后一次性收獲的培育與發(fā)酵的方法。連續(xù)培育:指在以必定的速度向發(fā)酵罐內(nèi)連續(xù)供應(yīng)新鮮培育基,同時(shí)以同樣速度將培育液從發(fā)酵罐內(nèi)放出,從而使發(fā)酵罐內(nèi)液體量保持恒定,使培育物在近似恒定狀態(tài)下生長(zhǎng)和進(jìn)行代謝活動(dòng)的方法。長(zhǎng)處:恒定狀態(tài)可有效地延伸分批培育中的對(duì)數(shù)期,達(dá)到穩(wěn)固高速培育微生物或產(chǎn)生大批代謝產(chǎn)物的目的。防止分批培育所需的沖洗、投料、滅菌、接種、放罐等各樣操作,有益于提升生產(chǎn)率。發(fā)酵產(chǎn)質(zhì)量量穩(wěn)固。便于自動(dòng)控制。弊端:菌種在長(zhǎng)時(shí)間培育中易變異,且簡(jiǎn)單染菌。若操作不妥,新加入的培育基與原有的培育基不易完整混淆。分批補(bǔ)料培育;指在分批式培育液體深層培育至中后期時(shí),經(jīng)過(guò)間歇或連續(xù)向發(fā)酵罐中補(bǔ)加滅菌的新鮮液體培育基,增添發(fā)酵液的總量,以保持較高的發(fā)酵產(chǎn)物的增添幅度最后一次性收獲的發(fā)酵方式。與分批培育方式比較①.能夠排除培育過(guò)程中的底物克制、產(chǎn)物的反應(yīng)克制和葡萄糖的分解隔絕效應(yīng);②.關(guān)于耗氧過(guò)程,能夠防止在分批培育過(guò)程中因一次性投糖過(guò)多造成的細(xì)胞大批生長(zhǎng)、耗氧過(guò)多以致通風(fēng)攪拌設(shè)施不可以般配的狀況;在某種程度上可減少微生物細(xì)胞的生成量、提升目的產(chǎn)物的轉(zhuǎn)變率;③.微生物細(xì)胞能夠被控制在一系列連續(xù)的過(guò)渡態(tài)階段,可用來(lái)控制細(xì)胞的質(zhì)量;并可重復(fù)某個(gè)時(shí)期細(xì)胞培育的過(guò)渡態(tài),可用于理論研究。與連續(xù)培育方式比較①不需要嚴(yán)格的無(wú)菌條件;2.不會(huì)產(chǎn)生微生物菌種的老化和變異;③.最后產(chǎn)物濃度較高,有益于產(chǎn)物的分別;④.使用范圍廣3.何謂Monod方程?簡(jiǎn)述Monod方程的指導(dǎo)意義、試用范圍以及在可逆性克制劑作用下主要參數(shù)變化。Monod方程——菌體生長(zhǎng)比速μ與限制性基質(zhì)濃度S的關(guān)系方程(見(jiàn)課本)4.在分批式培育與發(fā)酵中,依據(jù)產(chǎn)物生成與微生物生長(zhǎng)和基質(zhì)耗費(fèi)的關(guān)系,發(fā)酵動(dòng)力學(xué)模型有哪些?這些動(dòng)力學(xué)模型對(duì)發(fā)酵生產(chǎn)實(shí)踐有什么指導(dǎo)意義?依據(jù)產(chǎn)物生成與微生物生長(zhǎng)和基質(zhì)耗費(fèi)之間的關(guān)系,Gaden(1959)將分批發(fā)酵產(chǎn)物生成動(dòng)力學(xué)種類(lèi)分為生長(zhǎng)偶聯(lián)型、非生長(zhǎng)偶聯(lián)型和部分生長(zhǎng)偶聯(lián)型。假如生產(chǎn)的產(chǎn)品是生長(zhǎng)偶聯(lián)型(如菌體與初級(jí)代謝產(chǎn)物),則宜采納有益于細(xì)胞生長(zhǎng)的培育條件,延伸與產(chǎn)物合成相關(guān)的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)久;假如產(chǎn)品是非生長(zhǎng)偶聯(lián)型(如次級(jí)代謝產(chǎn)物),則宜縮短對(duì)數(shù)生長(zhǎng)久,并快速獲取足夠量的菌體細(xì)胞后延伸均衡期,以提升產(chǎn)量。5.連續(xù)式培育發(fā)酵有哪些?在開(kāi)放式單級(jí)平均混淆非循環(huán)連續(xù)培育與發(fā)酵系統(tǒng)中,寫(xiě)出稀釋度(D)與限制性營(yíng)養(yǎng)物濃度(S)以及細(xì)胞濃度(x)的動(dòng)力學(xué)的數(shù)學(xué)表達(dá)式,繪出稀釋度(D)對(duì)限制性營(yíng)養(yǎng)物濃度(S)、細(xì)胞濃度(x)、細(xì)胞生長(zhǎng)速率(D·x)、倍增時(shí)間(td)影響的動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)并議論其意義。開(kāi)放式與關(guān)閉式連續(xù)培育與發(fā)酵;單級(jí)(罐)式與多級(jí)(罐)式連續(xù)培育與發(fā)酵平均混淆型與非平均混淆型連續(xù)培育與發(fā)酵;循環(huán)式與非循環(huán)式連續(xù)培育與發(fā)酵6.以生物素為限制性基質(zhì),當(dāng)北京棒桿菌的比生長(zhǎng)速率是0.036h-1時(shí),生物素的濃度應(yīng)當(dāng)是多少?已知該菌對(duì)生物素的最大比生長(zhǎng)速率是0.2h-1,飽和常數(shù)是0.40μg/L。(自己計(jì)算)第六章1、發(fā)酵罐應(yīng)知足哪些基本要求?能夠保證無(wú)菌狀態(tài),可滅菌,耐2.5kg/cm2(表壓)的壓力;供應(yīng)好氣(嫌氣)環(huán)境;設(shè)施能耗盡可能低;擁有溫度控制、pH控制及取樣裝置;蒸發(fā)損失不該過(guò)大;設(shè)施操作、沖洗和保護(hù)的人工盡可能少;通用性;內(nèi)壁要圓滑、減少死角;不一樣容積的設(shè)施應(yīng)擁有相像的幾何形狀,便于按比率放大;成本盡可能低。2、機(jī)械攪拌發(fā)酵罐攪拌器的型式有哪些?各有什么特色和應(yīng)用?1)軸向流的代表:螺旋槳攪拌器長(zhǎng)處:混淆成效好弊端:剪切作用差,不可以阻擋氣流沿?cái)嚢栎S上漲,不可以打壞氣泡,不利于溶氧,只用于培育基的配制,料液的混淆。(2)徑向流攪拌器的型式與特色:圓盤(pán)平直葉渦輪攪拌器:是徑向流的代表,在圓盤(pán)上焊有六片平直葉,圓盤(pán)可阻擋氣體沿?cái)嚢栎S上漲,軸向流差,不利于混淆,徑向流強(qiáng),剪切作用強(qiáng),有益于打壞氣泡,溶氧成效好,功率耗費(fèi)大。圓盤(pán)彎葉渦輪攪拌器:徑向流較差,剪切作用不如平直葉,溶氧成效不如平直葉,軸向流較強(qiáng),混淆成效較好,功率耗費(fèi)小。圓盤(pán)箭葉渦輪攪拌器:徑向流差,剪切作用小,溶氧成效差;軸向流強(qiáng),混淆成效最好,功率耗費(fèi)最小。3、試比較機(jī)械攪拌發(fā)酵罐、自吸式發(fā)酵罐、和升氣式發(fā)酵罐的構(gòu)造和優(yōu)弊端。(1)氣升式發(fā)酵罐:特色及構(gòu)造:利用壓縮空氣的動(dòng)能使醪液翻動(dòng),以減去機(jī)械攪拌和擋板,節(jié)儉動(dòng)力;罐外冷卻,減少了罐內(nèi)附件。長(zhǎng)處:構(gòu)造簡(jiǎn)單,附件少,簡(jiǎn)單制造,維修和沖洗。撤消了攪拌轉(zhuǎn)動(dòng),減少了投資,節(jié)儉動(dòng)力約50%,對(duì)菌體無(wú)損害。密封性能好,不易染菌。能自消泡,不須加消泡劑。裝料系數(shù)高,可達(dá)80%-90%。弊端:耗肚量特別大?;煜c通氣相耦合問(wèn)題,很難在不改變通氣的條件下改變混淆狀況。循環(huán)周期長(zhǎng),2.5分鐘以上,關(guān)于好氧菌,不可以知足溶氧需要。關(guān)于粘度大的醪液,相間混和接觸較差。無(wú)菌空氣壓力高,罐壓低,罐底易出現(xiàn)積淀。降溫也比較困難。(2)自吸式發(fā)酵罐:特色不用空壓機(jī),在攪拌時(shí)或液體高速發(fā)射時(shí)自動(dòng)吸入空氣。長(zhǎng)處:不需另設(shè)空氣制備系統(tǒng),投資少,能耗低,吸入的氣泡小,溶氧成效好,是通用罐的3倍.弊端:攪拌轉(zhuǎn)速要求高,如20立方米罐,要求400rpm,而通用罐<200rpm,功率耗費(fèi)大,產(chǎn)生泡沫多,裝料系數(shù)減少,≤70%;空氣過(guò)濾器的阻力要求小;發(fā)酵罐內(nèi)壓力低,僅有0.1-0.2kg/cm2,易染菌,主要用于飼料酵母,液體醋等粗放的通風(fēng)發(fā)酵。(3)通用式發(fā)酵罐的優(yōu)弊端長(zhǎng)處:合用范圍廣,便于控溫,醪液混淆成效好,罐壓高。弊端:攪拌功率耗費(fèi)大,每立方米需2千瓦左右;罐內(nèi)構(gòu)造復(fù)雜,不易沖洗,死角多,易滲漏,易染菌。培育菌絲體時(shí),攪拌易受傷。需宏大的無(wú)菌空氣制備系統(tǒng),投資高,能耗高。第七章什么叫攪拌軸功率?攪拌器以既定的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)時(shí)用以戰(zhàn)勝介質(zhì)的阻力所需用的功率發(fā)酵工業(yè)常有的非牛頓型流體有哪些?彬漢塑性流體擬塑性流體漲塑性流體凱松體流體3測(cè)定KLa的方法有哪些?各有那些優(yōu)弊端?亞硫酸鹽氧化法長(zhǎng)處:方法簡(jiǎn)易,取樣體積小,可減少因?yàn)榘l(fā)酵罐中液體體積的變化所造成的偏差弊端:費(fèi)時(shí)長(zhǎng),正確性很差排氣法A穩(wěn)態(tài)法長(zhǎng)處:快捷,一般僅需15min,可采納增添有死菌體的發(fā)酵培育基,合用于小型發(fā)酵裝置弊端:用于大型發(fā)酵罐時(shí)有必定的限制性,不可以用于超出1m高的裝置B動(dòng)向法長(zhǎng)處:在真是的發(fā)酵系統(tǒng)中測(cè)定KLa;在發(fā)酵過(guò)程的不一樣階段都可進(jìn)行;測(cè)定快速;僅需復(fù)膜溶氧電極即可弊端:溶氧濃度的增添范圍較小,對(duì)需氧量靠近發(fā)酵罐供氧能力的發(fā)酵過(guò)程不合用;恢復(fù)通風(fēng)后,微生物的呼吸速率xQO2不是一個(gè)常數(shù);在高于1m的發(fā)酵罐頂用此法測(cè)定的Kla值顯然偏低;不合用于黏性系統(tǒng)氧的衡算法長(zhǎng)處:最簡(jiǎn)易;可在發(fā)酵過(guò)程中測(cè)定溶氧效率4影響發(fā)酵罐的KLa的要素有哪些?其機(jī)理是什么?空氣流速KLa隨空氣流速的增添而增大,但空氣速度過(guò)大,則可使葉輪發(fā)生過(guò)載攪拌打散氣泡,增大氣液接觸面;形成渦流,延伸氣泡在液體中逗留時(shí)間;形成湍流,減吝嗇泡外的液膜阻力;防止菌絲結(jié)團(tuán),減少菌絲團(tuán)阻力發(fā)酵液的性質(zhì)黏度、pH、極性、表面張力、離子濃度、菌體濃度等,都會(huì)影響氣泡的大小、穩(wěn)固性和氧的傳達(dá)速率比較放大的基準(zhǔn)有哪些?反響器的幾何特色2、氧的體積傳達(dá)系數(shù)(kLa)3、最大剪切力(對(duì)機(jī)械攪拌反響器,可用攪拌器葉尖線(xiàn)速度表示)4、單位體積液體的攪拌耗費(fèi)功率(P/VL)5、單位反響器有效體積的通氣速率(VVM)6、通氣表觀線(xiàn)速度7、混淆時(shí)間8、攪拌雷諾準(zhǔn)數(shù)計(jì)算見(jiàn)課本第八章1PH對(duì)發(fā)酵過(guò)程有哪些影響,發(fā)酵過(guò)程中應(yīng)如何控制PH?1)①影響酶活性,改變菌體的代謝門(mén)路②影響細(xì)胞膜帶電狀況,改變膜透性,影響微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)汲取及產(chǎn)物的分泌③影響某些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的可給性④改變培育基的氧化復(fù)原條件⑤影響產(chǎn)物的穩(wěn)固性⑥影響某些微生物的形態(tài)2)①調(diào)理基礎(chǔ)培育基的配方調(diào)整碳氮源的配比調(diào)整生理酸/堿性物質(zhì)的比率使用緩沖劑或加入碳酸鈣②補(bǔ)料控制H2SO4和NaOH直接控制用補(bǔ)硫酸銨和氨水控制
PH較高時(shí)補(bǔ)加硫酸銨。當(dāng)
pH
較低時(shí)補(bǔ)加氨水。能夠經(jīng)過(guò)補(bǔ)加糖或油來(lái)調(diào)理
pH溶解氧對(duì)發(fā)酵過(guò)程有哪些影響?發(fā)酵過(guò)程中應(yīng)如何控制溶解氧?(10溶解氧影響菌體生長(zhǎng)和代謝產(chǎn)物累積對(duì)大多半需氧發(fā)酵,溶解氧高有益于菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成,但并不是越高越好(2)提升溶氧的方法有:改變氣體成分,用純氧增添氧分壓,也成“富氧通氣”提升罐壓,但CO2溶解度也增添提升通肚量,但會(huì)產(chǎn)生大批泡沫提升攪拌速度和增添?yè)醢?,但工業(yè)化大生產(chǎn)中,大型發(fā)酵罐的轉(zhuǎn)速一般都是固定的,高轉(zhuǎn)速也造成大批泡沫產(chǎn)生發(fā)酵過(guò)程中泡沫消長(zhǎng)的規(guī)律是什么?應(yīng)如何控制和除去泡沫?1)泡沫多少與通氣攪拌的程度相關(guān),攪拌是惹起泡沫的主要原由。泡沫的產(chǎn)生與培育基的成分相關(guān),蛋白質(zhì)原料是主要的發(fā)泡物質(zhì),豐富的有機(jī)質(zhì)增添黏度,有益于泡沫的穩(wěn)固。滅菌方法也會(huì)影響泡沫的形成。菌種不一樣,若有的生長(zhǎng)慢,易起泡。發(fā)酵過(guò)程中,早期泡沫穩(wěn)固,跟著營(yíng)養(yǎng)物的分解利用,泡沫減少,發(fā)酵中后期,菌體大批生殖,發(fā)酵液黏稠,菌體自溶造成可溶性蛋白質(zhì)濃度增添,泡沫上漲2)泡沫的除去:①機(jī)械消沫:在罐內(nèi)裝消沫漿。但作用不大。②化學(xué)消沫:消泡劑有天然油,豆油,菜子油等,它還作為碳源被菌利用。B.高分子物質(zhì)如聚氧丙烯甘油(GP)、聚氧乙烯氧丙烯甘油(GPE),又叫泡敵。消泡能力比植物油60-80倍強(qiáng)。當(dāng)前工業(yè)上已代替油。發(fā)酵生產(chǎn)中應(yīng)如何防治雜菌和噬菌體的污染?(1)無(wú)菌檢查顯微鏡檢查無(wú)菌試驗(yàn)法試劑盒查驗(yàn)法2)發(fā)酵設(shè)施的按期檢查3)嚴(yán)格按要求進(jìn)行操作第十一章積淀法主要包含哪些方法?其機(jī)理分別是什么?鹽析法損壞水化膜損壞水化膜,裸露出憎水地區(qū)中和電荷,減少靜電斥力等電點(diǎn)積淀法有機(jī)溶劑積淀法降低溶劑介電常數(shù)損壞水化膜相反力非離子型聚合物積淀法與有機(jī)溶劑相像,能降低水活度,損壞蛋白質(zhì)的水化膜。常用非離子性聚合物為Polyethyleneglycol(PEG):是一種水溶性的高分子聚合物,分子量4,000以上的PEG能夠用來(lái)積淀蛋白質(zhì)聚電解質(zhì)積淀法架橋與靜電金屬離子積淀法發(fā)酵工業(yè)常用的吸附劑有哪些?應(yīng)如何采納?活性炭它能吸附絕大多半有機(jī)氣體以及惡臭物質(zhì)SO2、NOx、Cl2、H2S、CO2等有害氣體也有優(yōu)秀的吸附能力長(zhǎng)處:性能穩(wěn)固、抗腐化。弊端:可燃性活性氧化鋁無(wú)毒、對(duì)水的吸附容量很大長(zhǎng)處:性能穩(wěn)固、抗腐化。弊端:可燃性廢氣的凈化可在挪動(dòng)床中使用硅膠常用于辦理含濕量較高的氣體干燥,烴類(lèi)物質(zhì)回收等沸石分子篩常用于含SO2、NOX、CO、CO2、NH3、CCl4、水蒸汽隨和態(tài)碳?xì)浠衔飶U氣的凈化大孔吸附樹(shù)脂選擇性好,解吸簡(jiǎn)單、機(jī)械強(qiáng)度好、可頻頻使用和流體阻力較小多級(jí)逆流萃取流程的萃取機(jī)理是什么?料液挪動(dòng)的方向和萃取劑挪動(dòng)的方向相反第十二章離子互換分別1.常用的離子互換樹(shù)脂有哪幾種?其互換機(jī)理是什么?離子互換樹(shù)脂陽(yáng)離子互換樹(shù)脂:強(qiáng)酸性陽(yáng)離子互換樹(shù)脂,弱酸性陽(yáng)離子互換樹(shù)脂陰離子互換樹(shù)脂:強(qiáng)堿性陰離子互換樹(shù)脂,弱堿性陰離子互換樹(shù)脂特種樹(shù)脂:大孔離子互換樹(shù)脂,螯合樹(shù)脂,多糖基離子互換劑,萃淋樹(shù)脂2.在發(fā)酵工業(yè)應(yīng)如何采納離子互換樹(shù)脂?3.簡(jiǎn)述離子互換分別技術(shù)的基來(lái)源理。離子互換分別技術(shù)是鑒于不溶性高分子化合物作為層析物質(zhì)的一種分別方法。經(jīng)過(guò)分子中的活性離子將溶液中帶相反電荷的物質(zhì)吸附在離子互換劑上,而后用合適的洗脫溶劑將吸附物質(zhì)再?gòu)碾x子互換劑上洗脫下來(lái),從而達(dá)到目的產(chǎn)物的分別、濃縮和純化的目的。第十三章膜分別技術(shù)截留分子量、膜的濃差極化和膜污染各是什么?如何減少膜污染?截留分子量:相當(dāng)于必定截留率(往常為90%或95%)的相對(duì)分子量。濃差極化:在膜分別過(guò)程中,膜表面上溶質(zhì)濃度高于主體溶質(zhì)濃度的現(xiàn)象。膜污染:因?yàn)槿苜|(zhì)與膜的相互作用而在膜表面和孔內(nèi)吸附,或因濃差極化,溶質(zhì)在膜表面產(chǎn)生積淀或結(jié)晶,形成“凝膠層”惹起膜性能變化的現(xiàn)象。對(duì)料液進(jìn)行預(yù)辦理:除菌;對(duì)膜進(jìn)行預(yù)辦理:開(kāi)發(fā)抗污染的膜;改變操作條件:加大料液流速。什么是膜分別?常用的膜分別過(guò)程有哪幾種?其機(jī)理是什么?膜分別:利用膜的選擇性(孔徑大小),以膜的雙側(cè)存在的能量差作為推進(jìn)力,因?yàn)槿芤褐懈鹘M分透過(guò)膜的遷徙率不一樣而實(shí)現(xiàn)分別的一種技術(shù)。反浸透,NF納濾,Ultrafiltration超濾,微濾,一般過(guò)濾膜分別過(guò)程的實(shí)質(zhì)是物質(zhì)透過(guò)或被截留于膜的過(guò)程,近似于篩分過(guò)程,依照濾膜孔徑大小而達(dá)到物質(zhì)分別的目的,故而能夠按分別粒子大小進(jìn)行分類(lèi)。什么是超濾?影響超濾的要素有哪些?超濾在發(fā)酵工業(yè)有哪些應(yīng)用?超濾:分別介質(zhì)同上,但孔徑更小,為0.001-0.02μm,分別推進(jìn)力仍為壓力差,截?cái)喾肿恿靠勺兓?。什么是反浸透??jiǎn)述其基來(lái)源理。反浸透:在溶質(zhì)濃度高的一側(cè)施加超出浸透壓的壓力,使溶劑透過(guò)膜的操作。其基來(lái)源理為溶解擴(kuò)散。在高于溶液浸透壓的壓力作用下,只有溶液中的水透過(guò)膜,而全部溶液中的大分子、小分子有機(jī)物及無(wú)機(jī)物全被截留住。第十四章蒸餾設(shè)施酒精發(fā)酵成熟醪中含有哪些雜質(zhì)?在蒸餾過(guò)程中應(yīng)如何除掉?雜質(zhì)類(lèi)型化學(xué)構(gòu)成理化特色去除方法頭級(jí)雜質(zhì)(醛酯雜乙醛、乙酸乙酯、沸點(diǎn)比乙醇低排醛塔排至大氣或冷凝收質(zhì))甲酸乙酯集做工業(yè)酒精中級(jí)雜質(zhì)(酯酒)異丁酸乙酯、異戊沸點(diǎn)與乙醇靠近在塔頂?shù)渭覰aOH溶液,酸乙酯等生成不揮發(fā)性鹽類(lèi)或積淀尾級(jí)雜質(zhì)(雜醇高級(jí)醇、戊醇、異沸點(diǎn)比乙醇高在進(jìn)料板以下(/上)第2~4油)丁醇、甘油、異丙塊氣(/液)相拿出醇等端級(jí)雜質(zhì)(甲醇)甲醇酒精濃度低時(shí)難揮脫甲醇塔,自塔頂排出做發(fā),酒精濃度高時(shí)易工業(yè)酒精揮發(fā)兩塔蒸餾流程液相過(guò)塔和汽相過(guò)塔各有哪些優(yōu)弊端?氣相:粗餾塔頂上漲的酒精蒸汽直接進(jìn)入精餾塔,能夠節(jié)儉加熱蒸汽和冷卻水兩塔直接聯(lián)通,相互影響。液相:較氣相過(guò)塔多一次清除頭級(jí)雜質(zhì)的時(shí)機(jī),所得的成品酒精質(zhì)量較高蒸汽耗費(fèi)量許多。常用的酒精粗餾塔有哪些種類(lèi)?各有哪些優(yōu)弊端?泡罩塔板特色:不易擁塞、不漏液、操作彈性較大;構(gòu)造復(fù)雜、成本高,阻力大、氣液接觸不平均、塔板效率低。篩孔塔板特色:構(gòu)造簡(jiǎn)單、造價(jià)低,阻力小、氣液接觸較平均;易漏液,操作彈性小,氣液接觸時(shí)間短,氣體向上直吹易產(chǎn)生霧沫夾帶。S(SD)形塔板特色:保持泡罩塔板的長(zhǎng)處,塔板上氣流與液流并行,防止固體沉降,板面液體落差小,氣液接觸較平均,塔板壓降較大。浮閥塔板上漲氣體量發(fā)生變化,浮閥起落改變氣相流通面積,氣流速度變化不大,不漏液,操作彈性大,氣液接觸時(shí)間長(zhǎng),塔板效率較高,浮閥易出故障。斜孔塔板特色:氣液接觸平均,霧沫夾帶較少,塔板效率較高,生產(chǎn)能力大常用的酒精精餾塔有哪些種類(lèi)?各有哪些優(yōu)弊端?浮閥板、斜孔板、篩孔板。成本:篩孔板<斜孔板<浮閥板操作:浮閥板>斜孔板>篩孔板第十五章蒸發(fā)與結(jié)晶設(shè)施發(fā)酵工程常用的蒸發(fā)設(shè)施有哪些種類(lèi)?在采納蒸發(fā)設(shè)施時(shí)應(yīng)試慮發(fā)酵液的哪些特征?1、按使用壓力分類(lèi):加壓、常壓、真空2、按蒸汽利用分類(lèi):?jiǎn)涡?、多效、熱?、按設(shè)施型式分類(lèi):中央循環(huán)管式、夾套式、盤(pán)管式、刮板式4、按物料啟動(dòng)狀況分類(lèi):自然循環(huán)、強(qiáng)迫循環(huán)、薄膜式熱敏性、結(jié)晶性、結(jié)垢性、起泡性、腐化性、黏滯性升模式蒸發(fā)器與降膜式蒸發(fā)器的差異有哪些?升模式蒸發(fā)器:形成的液膜與蒸發(fā)的汽流的方向同樣,由下而上的并流上漲。成膜方便,不存在液體分派不勻的問(wèn)題,可是不合適粘度大的液體濃縮降膜式蒸發(fā)器:形成的液膜與蒸發(fā)的汽流的方向同樣,由上而下并流向下。成膜平均度不如升膜式,合適粘度較高的物料濃縮。簡(jiǎn)述結(jié)晶的基來(lái)源理。晶體是擁有必定的幾何形狀、必定顏色的固體,物質(zhì)自溶液中成晶體狀態(tài)析出,或從熔融狀態(tài)受冷時(shí)成晶體狀態(tài)凝結(jié)的過(guò)程稱(chēng)為結(jié)晶。發(fā)酵工業(yè)起晶方法有哪些?舉例說(shuō)明。自然起晶:把溶液蒸發(fā)濃縮至過(guò)飽和區(qū)(不穩(wěn)固區(qū)),則有大批晶核自然形成。刺激起晶:把溶液蒸發(fā)至靠近過(guò)飽和線(xiàn)后把溶液放出,使溶
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