GB/T 18089-2000藍舌病微量血清中和試驗及病毒分離和鑒定方法

TCS.65.020.30B41中華人民共和國國家標準GB/T18089—2000藍舌病微量血清中和試驗及病毒分離和鑒定方法Micro-serumneutralizationtest.virusisolationandidentificationforbluetongue2000-04-26發(fā)布2000-10-01實施國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

GB/T18089-2000前藝藍舌病(BLU)是一種綿羊、牛、山羊等反臺動物的嚴重傳染病，可通過檢測血清中抗體的存在，確定動物是否感染本病。按國際上通常的方法，瓊脂免疫擴散試驗和酶聯(lián)免疫吸附試驗用于藍舌病的定性，血清中和試驗用于藍舌病的定型。本標準根據(jù)國際常用的方法和我國多年的實踐.采用雞胚靜脈接種是最為敏感、實用的病毒分離方法藍舌病病毒分離物可通過免疫熒光試驗進行定性鑒定;用病毒中和試驗進行定型鑒定。本標準是在參考美國、澳大利亞實驗室的檢測規(guī)程和總結(jié)我國在這一領(lǐng)域多年研究和實踐經(jīng)驗的基礎(chǔ)上制定。本標準的附錄A是標準的附錄本標準由農(nóng)業(yè)部提出。本標準起草單位：中華人民共和國昆明出入境檢驗檢疫局。本標準主要起草人：石世區(qū)、張曉丁、徐自忠、徐維加、周曉黎

中華人民共和國國家標準藍舌病微量血清中和試驗及病毒分離和鑒定方法GB/T18089--2000Micro-serumneutralizationtest,virusisolationandidentificationforbluetongue1范圍本標準規(guī)定了藍舌病微量血清中和試驗及病毒分離和鑒定方法.本標準適用于動物感染藍舌病病毒后中和抗體的檢測及病毒分離和鑒定2引用標準下列標準所包含的條文·通過在本標準中引用而構(gòu)成為本標準的條文。本標準出版時.所示版本均為有效。所有標準都會被修訂.使用本標準的各方應探討使用下列標準最新版本的可能性GB/T6682—1992分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法(eqvISO3696:1987)略語3.1（CPE致細胞病變作用。3.22TCID.a半數(shù)組織培養(yǎng)感染量、3.3BLP乳糖蛋白陳緩沖肉湯、3.4SPF無特定病原體原理A1血清中和試驗原理特異性的血清中和抗體與病毒結(jié)合后，能使病毒失去對敏感細胞的感染能力,從而阻止病毒的繁殖。這一反應不但表現(xiàn)為一種病毒只能被相應的免疫血清所中和·而且還表現(xiàn)在中和一定量的病毒·必須有一定效價的免疫血清。中和試驗以測定病毒的感染力為基礎(chǔ),必須選用對病毒敏感的細胞、動物或雞胚為實驗材料,中和抗體滴度的判定以比較病毒受免疫血清中和后的殘存感染力為依據(jù)。藍舌病病毒感染動物后,7天左右出現(xiàn)中和抗體，中和抗體具有高度的型特異性，因此，可通過中和試驗對藍舌病病毒進行定型鑒定4.2病毒分離及鑒定原理動物感染藍舌病病毒后4天左右出現(xiàn)病毒血癥，羊的病毒血癥持續(xù)4周左右，牛的病毒血癥持續(xù)8周左右,病毒主要存在于動物的紅細胞內(nèi).并能從精液排毒。在動物病毒血癥期，可從其血液、精液和臟器分離到病毒。用特異性熒光抗體做直接免疫熒光試驗可對分離毒進行