標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 18638-2002 流行性乙型腦炎診斷技術(shù)》這一國家標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了流行性乙型腦炎（簡稱乙腦）的診斷方法和程序，旨在為醫(yī)療和疾控機構(gòu)提供統(tǒng)一、規(guī)范的診斷依據(jù)，以提高該疾病的診斷準(zhǔn)確性和及時性。以下是該標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容概述：

  1. 范圍：標(biāo)準(zhǔn)明確了其適用范圍，即適用于疑似流行性乙型腦炎病例的確診及流行病學(xué)調(diào)查中的實驗室診斷。

  2. 規(guī)范性引用文件：列出了執(zhí)行本標(biāo)準(zhǔn)時所直接引用或參考的其他標(biāo)準(zhǔn)和文件，確保診斷過程遵循現(xiàn)行有效的技術(shù)規(guī)范和要求。

  3. 術(shù)語和定義：對流行性乙型腦炎、相關(guān)病毒以及診斷過程中涉及的專業(yè)術(shù)語進(jìn)行了明確界定，便于讀者理解。

  4. 診斷原則：強調(diào)了乙腦診斷需結(jié)合流行病學(xué)資料、臨床表現(xiàn)和實驗室檢測結(jié)果綜合判斷，并介紹了診斷流程的基本框架。

  5. 臨床診斷：詳細(xì)描述了乙腦的臨床特征，包括發(fā)熱、頭痛、嗜睡、昏迷等神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，以及根據(jù)這些癥狀進(jìn)行的初步臨床診斷方法。

  6. 實驗室診斷：

    • 病毒分離與鑒定：說明了如何通過細(xì)胞培養(yǎng)、動物接種等方法從患者樣本中分離并鑒定乙腦病毒。
    • 血清學(xué)檢測：包括了抗體檢測（如IgM捕捉ELISA法）和中和試驗，用于檢測乙腦特異性抗體，區(qū)分現(xiàn)癥感染與既往感染。
    • 分子生物學(xué)檢測：介紹了使用RT-PCR等技術(shù)檢測乙腦病毒RNA的方法，因其高靈敏度和特異性在早期診斷中尤為重要。

  7. 診斷標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)臨床癥狀的嚴(yán)重程度和實驗室檢測結(jié)果，將診斷分為疑似病例、臨床診斷病例和確診病例，每類病例均有具體的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

  8. 質(zhì)量控制：強調(diào)了實驗室檢測過程中的質(zhì)量控制措施，包括試劑選擇、操作規(guī)范、結(jié)果判讀及實驗室生物安全等，以確保檢測結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。

  9. 附錄：提供了診斷流程圖、實驗室檢測方法的具體操作步驟、參考品信息等技術(shù)細(xì)節(jié)，便于實際操作時參考。


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  • 2002-02-19 頒布
  • 2002-05-01 實施
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文檔簡介

IcS.11.220B41中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18638—2002流行性乙型腦炎診斷技術(shù)DiagnostictechniquesforepidemicencephalitisB2002-02-19發(fā)布2002-05-01實施中華人民共和國發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局

GB/T18638-2002流行性乙型腦炎又稱日本乙型腦炎(JapaneseBencephalitis),是由流行性乙型腦炎病毒引起的種蚊媒性人獸共患傳染病。成年動物和人常呈隱性感染，幼齡動物特別是馬感染后，可發(fā)生腦炎癥狀，好振母豬可引起流產(chǎn)、死胎及木乃伊胎，公豬塞丸腫大.兒童可發(fā)生嚴(yán)重的腦炎。多發(fā)生于7～9月份。我國許多省(市)都有本病發(fā)生，特別是六七十年代，發(fā)病率最高。對人畜的健康可造成嚴(yán)重的威脅。世界動物衛(wèi)生組織和日本的資料，都采用病毒分離鑒定、免疫熒光試驗、血凝抑制試驗、補體結(jié)合試驗、血清中和試驗等進(jìn)行診斷，我國對本病的研究報道較多，而比較常用的診斷方法仍是本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的病毒分離鑒定、血凝抑制試驗、補體結(jié)合試驗。病毒分離鑒定適用于流行性乙型腦炎新疫區(qū)的確定和病畜的確診。間接免疫熒光試驗適用于可疑流行性乙型腦炎病毒標(biāo)本的快速檢測和病毒分離株的初步鑒定。補體結(jié)合試驗·由于補體結(jié)合抗體一般在病后2～3周出現(xiàn),5～6周達(dá)高峰,并可維持1年以上·故可適用于流行性乙型腦炎的較早期診斷和流行病學(xué)調(diào)查，是最常用的方法。根據(jù)當(dāng)時的實際需要，可任選一種或兩種檢疫方法，以達(dá)到準(zhǔn)確診斷的目的。本標(biāo)準(zhǔn)的實施,對提高乙型腦炎的診斷和疫情預(yù)測水平,及時采取防制措施，保證人畜健康，將起到重要的作用。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B都是標(biāo)準(zhǔn)的附錄，本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國動物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國人民解放軍農(nóng)牧大學(xué)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：李佑民、宣華、李金中、劉振潤。

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18638-2002流行性乙型腦炎診斷技術(shù)DiagnostictechniquesforepidemicencephalitisB1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了流行性乙型腦炎的病毒分離與鑒定、間接免疫熒光試驗、補體結(jié)合試驗、血凝抑制試驗等技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于口岸、產(chǎn)地及集散地、飼養(yǎng)單位(或個人)的豬、馬、驃、驢、牛、羊等的流行性乙型腦炎的診斷和檢疫。病毒的分離與鑒定2.1材料準(zhǔn)備2.1.1器材:細(xì)胞培養(yǎng)瓶(或管)吸管.中試管,三角燒瓶.37℃水浴箱.37C恒溫箱.普通冰箱及低溫冰箱，離心機及離心管，研磨器械，普通光學(xué)顯微鏡.G5級玻璃濾器.孔徑0.45m的微孔濾膜.0.25mL注射器及針頭。2.1.2試劑：漢克氏（Hanks)液,0.5%水解乳蛋白Hanks液·2萬IU/mL青霉素液,2萬Pg/mL鏈霉素液.7%碳酸氫鈉液,1%胰蛋白酶液,1%酚紅(中性)液，伊格爾氏（Eagle)最低必要成分培養(yǎng)液（EMEM），小牛血清2.1.3小動物:小鼠(6g~8g）、乳鼠2.1.4雞旺細(xì)胞、綠猴腎傳代細(xì)胞(Vero）、倉鼠腎傳代細(xì)胞(BHK.）、白蚊伊蚊C6/36傳代細(xì)胞等2.2病毒分離2.2.1樣品的采取和運送2.2.1.1在流行的早期和發(fā)病的早期(即病毒血癥階段)無菌采取病畜的血液或腦脊髓液2.2.1.2應(yīng)在病畜死亡后3h內(nèi)(越早越好)采取腦組織(選大腦皮質(zhì)、腦干、中腦、海馬回及橋腦)數(shù)小塊放于滅菌玻璃瓶。2.2.1.3豬應(yīng)采取流產(chǎn)死胎的腦組織，置冰箱內(nèi)立即送檢2.2.1.4不能立即檢查者.應(yīng)放－25℃～－30C冰箱·或加50%甘油生理鹽水,4C保存送檢2.2.2樣品的處理2.2.2.1血液應(yīng)分離出血清或血漿。2.2.2.2腦脊髓液可直接應(yīng)用。2.2.2.3腦組織應(yīng)研磨成棚狀，加人0.5%水解乳蛋白Hanks液(或堿性肉湯或10%脫脂奶生理鹽水）,制成10%懸液,3000r/min離心30min,吸取上清液，加人青霉素500TU/mL和鏈霉素500g/mL,在4C處理3h～4h(無污染者可不加青、鏈霉素處理),即得接種樣品。2.2.2.4懷疑有污染的樣品，也可用0.45m微孔濾膜過濾法處理。2.2.3動物分離法2.2.3.1取6g～8g小鼠10只(或3～5日齡乳鼠一窩）.用左手固定.在耳與眼之間用碘酒消毒。右

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