標準解讀
GB/T 20929-2007 是一項由中國發(fā)布的國家標準,全稱為《嗜酸氧化亞鐵硫桿菌及其活性的基因芯片檢測方法》。該標準規(guī)定了一套科學、統(tǒng)一的方法來檢測和評估嗜酸氧化亞鐵硫桿菌(Acidithiobacillus ferrooxidans)的存在及其生物活性,利用基因芯片技術(shù)作為核心手段。
標準適用范圍
本標準適用于環(huán)境樣本(如土壤、礦石、廢水等)中嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的鑒定及活性分析。這種細菌因其在礦物溶解、生物瀝濾等過程中的關(guān)鍵作用而受到關(guān)注,尤其在生物冶金和環(huán)境修復(fù)領(lǐng)域具有重要應(yīng)用價值。
主要內(nèi)容概覽
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術(shù)語與定義:明確了嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的基本概念,以及基因芯片技術(shù)相關(guān)的專業(yè)術(shù)語,為標準的應(yīng)用提供清晰的語言基礎(chǔ)。
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試劑與材料:詳細列出了進行基因芯片檢測所需的各種化學試劑、生物材料及基因芯片制備所需的原材料規(guī)格和質(zhì)量要求,確保實驗的準確性和可重復(fù)性。
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儀器設(shè)備:描述了實施基因芯片檢測所必需的儀器設(shè)備,包括核酸提取設(shè)備、PCR擴增儀、掃描儀等,以及這些設(shè)備的操作和校準要求。
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樣品采集與前處理:規(guī)范了從不同環(huán)境中采集樣品的方法,以及樣品預(yù)處理步驟,如均質(zhì)、過濾、核酸提取等,以去除雜質(zhì)并富集目標DNA。
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基因芯片設(shè)計與制備:介紹了如何根據(jù)嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的基因序列設(shè)計探針,以及芯片的合成、標記和質(zhì)量控制流程,確保芯片能夠特異性識別目標微生物的DNA。
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檢測步驟:詳細闡述了從DNA提取到雜交、洗脫、信號檢測及數(shù)據(jù)分析的全過程,每一步都配有具體操作指南和質(zhì)量控制指標。
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結(jié)果判斷與報告:提供了判斷測試結(jié)果的標準和方法,包括如何根據(jù)基因芯片上的信號強度來評估嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的豐度和活性,并對如何編寫檢測報告給出了指導(dǎo)。
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質(zhì)量控制與保證:強調(diào)了實驗過程中應(yīng)采取的質(zhì)量控制措施,確保檢測結(jié)果的可靠性和準確性,包括對照實驗的設(shè)置、儀器校準、操作人員培訓等。
實施意義
該標準的出臺,不僅為嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的研究和應(yīng)用提供了一個標準化的技術(shù)平臺,還促進了生物技術(shù)在資源開發(fā)、環(huán)境保護等領(lǐng)域的規(guī)范化發(fā)展。通過規(guī)范化的基因芯片檢測方法,可以更高效、準確地監(jiān)測和評估這一微生物的生態(tài)分布及其在特定環(huán)境條件下的功能活性,為相關(guān)科學研究、工業(yè)應(yīng)用及環(huán)境管理決策提供科學依據(jù)。
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2007-04-30 頒布
- 2007-11-01 實施
下載本文檔
文檔簡介
ICS07.100.01D16中華人民共和國國家標準GB/T20929—2007暗酸氧化亞鐵硫桿菌及其活性的基因芯片檢測方法Themethodsoftestingacidithiobacillusferrooxidansandltsactivitybymicroarraytechnology2007-04-30發(fā)布2007-11-01實施中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布中國國家標準化管理委員會
GB/T20929—2007前本標準由中國有色金屬工業(yè)協(xié)會提出本標準由全國有色金屬標準化技術(shù)委員會歸口本標準由中南大學資源加工與生物工程學院負責起草本標準主要起草人:邱冠周、劉學端、柳建設(shè)、劉新星、中麗、王軍。本標準由全國有色金屬標準化技術(shù)委員會負責解釋.
GB/T20929—2007生物治金是利用以礦物為營養(yǎng)基質(zhì)的微生物將礦物氧化分解,從而使金屬進入溶液,通過進一步分離、富集、純化而提取金屬的高新技術(shù),它具有流程短、成本低、環(huán)境友好和低污染等優(yōu)點,尤其在低品位、復(fù)雜難處理礦產(chǎn)資源的開發(fā)利用中,顯示出強大的優(yōu)勢,可以大幅度提高礦產(chǎn)資源的開發(fā)利用率和資源的保障程度。生生物治金速度慢、浸出率低是國際上未能解決的難題。特別是原生礦(如黃銅礦CuFeS.)生物治金速度慢的問題最為突出.主要原因是缺乏高效的浸礦微生物菌種.其關(guān)鍵是沒有一個統(tǒng)一的來自微生物本身的標準來評判微生物浸礦性能。22000年以來,中南大學開展了模式曙酸氧化亞鐵硫桿菌ATCC23270的研究,獲得了該菌3217個基因序列信息。本標準是以該菌作為模式菌,利用基因芯片技術(shù),建立暗酸氧化亞鐵硫桿菌及其活性的基因芯片檢測方法
GB/T20929—2007暗酸氧化亞鐵硫桿菌及其活性的基因芯片檢測方法T范圍本標準規(guī)定了利用基因芯片技術(shù)檢測暗酸氧化亞鐵硫桿菌(以下簡稱A.f菌)及其活性的術(shù)語、定義、符號、省略語、主要技術(shù)指標和待測樣品的要求、樣品圖譜的制作及分析方法。本標準適用于利用基因芯片技術(shù)來高效快速的鑒別A.f菌,并確定待測樣品中A.f菌株的氧化活性。2方法原理A.f菌的浸礦性能與其對亞鐵和硫的氧化能力及其環(huán)境適應(yīng)性相關(guān),而這些特征主要受基因控制利用獲得的純A.f標準菌ATCC23270及其全部3217個基因序列信息構(gòu)建高通量的基因芯片技術(shù)、通過不同活性類型(高氧化活性菌和低氧化活性菌)A.f菌與基因芯片雜交,找到高氧化活性菌的特征基因及其與浸礦作用密切相關(guān)的功能基因的表達情況.根據(jù)待測樣品特征基因的有無和比例以及功能基因的表達水平評定A.f菌的浸礦性能。術(shù)語和定義下列術(shù)語、定義、符號和縮略語適用于本標準A,f苗acidithiobacillusferrooxidans屬于原核生物門、細菌綱、硫化細菌科、硫桿菌屬,革蘭氏陰性,有鞭毛。該菌好氧暗酸、化能自養(yǎng)能氧化金屬硫化物.將Fe+氧化成Fe+·將還原態(tài)的硫氧化成SO,-,是生物治金中最常用的菌種。3.2基因芯片microarraytechnology將大量基因片段以預(yù)先設(shè)計的方式固定在片基上組成的密集分子排列33基因芯片圖譜microarraygeneexpressionprofiles將熒光標記的靶分子與芯片上的探針分子雜交后,通過激光共聚焦掃描所獲得的圖像和數(shù)據(jù)。生物治金biohydro-metallurgy一種利用以礦物為營養(yǎng)基質(zhì)的微生物·將礦物氧化分解后,再進一步分離提取金屬的工藝3.5探針DrobeDNA探針是指能識別特定堿基序列的經(jīng)過人工標記的一小段單鏈DNA分子,即一段與被測定的核苷酸序列(靶序列)互補的帶標記的單鏈脫氧核糖核苷酸。3.6熒光標記labellingusingfluorescentdyes
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