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文檔簡介
實(shí)驗(yàn)五胰島素腎上腺素對血糖濃第一頁,共十八頁,2022年,8月28日血糖是指血液中糖,由于正常人血液中糖主要是葡萄糖,所以一般認(rèn)為,血糖是指血液中的葡萄糖。正常人空腹血糖濃度為4.4~6.7mmol/L(80~120mg/100ml)。血糖是糖在體內(nèi)的運(yùn)輸形式。全身各組織都從血液中攝取葡萄糖以氧化供能,特別是腦、腎、紅細(xì)胞、視網(wǎng)膜等組織合成糖原能力極低,幾乎沒有糖原貯存,必須不斷由血液供應(yīng)葡萄糖。當(dāng)血糖下降到一定程度時,就會嚴(yán)重妨礙腦等組織的能量代射,從而影響它們的功能。所以維持血糖濃度的相對恒定有著重要的臨床意義。第二頁,共十八頁,2022年,8月28日第三頁,共十八頁,2022年,8月28日血糖濃度的調(diào)節(jié)
血糖濃度能維持相對恒定是由于機(jī)體內(nèi)存在一整套高效率的調(diào)節(jié)機(jī)制,精細(xì)地控制著血糖的來源與去路,使之達(dá)到動態(tài)平衡。第四頁,共十八頁,2022年,8月28日神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用
神經(jīng)系統(tǒng)對血糖濃度的調(diào)節(jié)作用主要通過下丘腦和自主神經(jīng)系統(tǒng)對所控制激素的分泌,后者再通過影響血糖來源與去路關(guān)鍵酶的活性來實(shí)現(xiàn)。神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)最終通過細(xì)胞水平的調(diào)節(jié)來達(dá)到目的。第五頁,共十八頁,2022年,8月28日激素
使血糖濃度降低的激素胰島素使血糖濃度升高的激素胰高血糖素、腎上腺素、腎上腺皮質(zhì)激素、生長素、甲狀腺素它們對血糖的調(diào)節(jié)主要是通過對糖代謝各主要途徑的影響來實(shí)現(xiàn)的。在激素發(fā)揮調(diào)節(jié)血糖濃度的作用中,最重要的是胰島素和胰高血糖素。腎上腺素在應(yīng)激時發(fā)揮作用,而腎上腺皮質(zhì)激素、生長激素、甲狀腺素等都可影響血糖水平,但在生理性調(diào)節(jié)中僅居次要地位。第六頁,共十八頁,2022年,8月28日胰島素
使肌肉和脂肪組織細(xì)胞膜對葡萄糖的通透性增加,利于血糖進(jìn)入這些組織進(jìn)行代謝。誘導(dǎo)葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的合成,加速細(xì)胞內(nèi)葡萄糖的分解利用。通過使細(xì)胞內(nèi)cAMP含量減少,激活糖原合成酶和丙酮酸脫氫酶系,抑制磷酸化酶和糖異生關(guān)鍵酶等,使糖原合成增加,糖的氧化利用、糖轉(zhuǎn)變?yōu)橹镜姆磻?yīng)增加,血糖去路增快;使糖原分解和糖異生減少或受抑制,使血糖來源減少,最終使血糖濃度降低。第七頁,共十八頁,2022年,8月28日
胰高血糖素
主要通過提高靶細(xì)胞內(nèi)cAMP含量達(dá)到調(diào)節(jié)血糖濃度的目的。細(xì)胞內(nèi)的cAMP可激活依賴cAMP的蛋白激酶,后者通過酶蛋白的共價(jià)修飾改變細(xì)胞內(nèi)酶的活性,即激活糖原分解和糖異生的關(guān)鍵酶,抑制糖原合成和糖氧化的關(guān)鍵酶,使血糖升高。
腎上腺素
通過cAMP激活肝中糖原磷酸化酶使糖原分解,還有誘導(dǎo)肝中磷酸烯醇式丙酮酸激酶及果糖二磷酸酶的合成促進(jìn)糖異生作用,使氨基酸轉(zhuǎn)化成葡萄糖,從而使血糖上升。第八頁,共十八頁,2022年,8月28日激素對血糖濃度的影響
-------鄰甲苯胺法測血糖第九頁,共十八頁,2022年,8月28日目的及要求:掌握鄰甲苯胺測血糖的原理和方法掌握血糖的正常范圍和意義掌握胰島素和腎上腺素對血糖濃度的影響及作用機(jī)制
第十頁,共十八頁,2022年,8月28日
基本原理葡萄糖在有機(jī)酸溶液中能與某些芳香胺類化合物如苯胺、聯(lián)苯胺、鄰甲苯胺等起縮合反應(yīng),生成希夫氏(Schiff)堿式有色衍生物,再通過分光光度計(jì)比色測定得到葡萄糖濃度。本實(shí)驗(yàn)用的是鄰甲苯胺法。鄰甲苯胺不與非糖還原性物質(zhì)顯色,而與已醛糖顯色。葡萄糖的醛基在熱醋酸溶液中與鄰甲苯胺的氨基互相縮合成蘭綠色的希夫氏堿,該蘭綠色在一定范圍內(nèi)與葡萄糖濃度成正比。此法測得正常人的空腹血糖值為70-100mg/dl,兔約為130mg/dl左右。第十一頁,共十八頁,2022年,8月28日操作1.取預(yù)先饑餓14-16小時的正常家兔2只,稱重。2.從耳緣靜脈采血:剪毛→二甲苯棉球擦拭→干棉球擦干→碘酒、酒精消毒→7號針頭穿刺取血→放入加有抗凝劑(草酸鈉:2mg/ml)的燒杯中→搖勻。3.1只家兔肌肉注射胰島素(5u/Kg),另一只家兔皮下注射腎上腺素(0.5mg/每只動物)。4.30分鐘后,分別從耳緣靜脈取血。5.無蛋白血濾液的制備:取短試管3只,各加空腹、胰島素、腎上腺素處理抗凝血0.4ml,5%三氯醋酸3.6ml,混勻,3000rpm離心5min,上清即為無蛋白血濾液。第十二頁,共十八頁,2022年,8月28日6.取4支試管按下表操作(單位:ml)空白管標(biāo)準(zhǔn)管樣品管1(空腹)樣品管2(用藥)蒸餾水1.0---標(biāo)準(zhǔn)液-1.0--血濾液--1.0(空腹)1.0(用藥)鄰甲苯胺試劑2.52.52.52.5混勻,100℃水浴8分鐘,冷卻。630nm比色,讀取光密度。第十三頁,共十八頁,2022年,8月28日血糖mg/dl=
(mg%)計(jì)算測定管吸光度標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100第十四頁,共十八頁,2022年,8月28日
注意事項(xiàng)
1.離心機(jī)的使用
⑴.離心前一定要配平(位置配平和重量配平)。
⑵.使用時離心機(jī)的蓋子一定要蓋緊,以免發(fā)生意外。
⑶.要等離心機(jī)完全靜止后才能打開蓋子。
2.微量移液器的使用
3.取血時的注意事項(xiàng)
⑴.注射器、刀片的使用。⑵.注射器在取血前要肝素化。⑶.心臟取血時要注意進(jìn)針的位置和深度。
⑷.注意不要將空氣注入動物體內(nèi)。
⑸血液放入試管中時要先將注射器的針頭取下,以防溶血。4.鄰甲苯胺具有毒性和腐蝕性,操作時要注意。第十五頁,共十八頁,2022年,8月28日臨床意義
1.血糖升高:病理性主要見于糖尿病,其他內(nèi)分泌疾病如腎上腺皮質(zhì)機(jī)能亢進(jìn),垂體前葉機(jī)能亢進(jìn)等。
2.血糖降低:病理性如胰島細(xì)胞瘤、胰島素分泌過多,過量胰島素治療,腎上腺皮質(zhì)功能減退等。第十六頁,共十八頁,2022年,8月28日本次實(shí)驗(yàn)報(bào)告已論文形式書寫第十七頁,共十八頁,2022年,8月28日標(biāo)題作者單位郵編【摘要】目的:方法:結(jié)果:結(jié)論:
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