實(shí)驗(yàn)動物學(xué)第二章實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)化

實(shí)驗(yàn)動物學(xué)第二章實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)化第一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日本章掌握及熟悉的內(nèi)容掌握：實(shí)驗(yàn)動物的遺傳學(xué)分類和微生物學(xué)分類的方法及級別。各遺傳學(xué)類別實(shí)驗(yàn)動物（如近交系動物、保種F1代動物、封閉群動物、突變系動物、同源突變近交系動物、同源導(dǎo)入近交系動物、分離近交系動物、重組近交系動物等）的概念。各微生物學(xué)級別實(shí)驗(yàn)動物的概念、區(qū)別。熟悉：各遺傳學(xué)類別實(shí)驗(yàn)動物的區(qū)別、特性及應(yīng)用；品種和品系的概念；各微生物學(xué)級別實(shí)驗(yàn)動物的來源、特性及應(yīng)用。第二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第一節(jié)

實(shí)驗(yàn)動物遺傳學(xué)質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)化第三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日

實(shí)驗(yàn)動物遺傳學(xué)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化的重要意義

1、可以增加動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可比性和可重復(fù)性

2、根據(jù)模擬動物基因組與人類基因組的異同，可以在遺傳限定的動物身上復(fù)制出更多的人類疾病動物模型。第四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日

3、標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動物有利于動物基因的作圖。4、對實(shí)驗(yàn)動物遺傳學(xué)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化的深入研究，可以建立一系列相關(guān)的生物信息數(shù)據(jù)庫。第五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日一、實(shí)驗(yàn)動物按遺傳學(xué)分類第六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日品種、品系的概念

品種（stock）和品系（strain）是基本分類單位。

作為一個品種、品系，應(yīng)具備以下條件：

（1）相似的外貌特征

（2）獨(dú)特的生物學(xué)特性

（3）穩(wěn)定的遺傳性能

（4）具有共同遺傳來源和一定的遺傳結(jié)構(gòu)

通常稱近交系動物為品系，稱封閉群動物為品種。第七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日按基因組成特點(diǎn)分近交系突變系雜交F1代封閉群按基因純和程度分相同基因類型不同基因類型實(shí)驗(yàn)動物分類方法第八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)動物相同基因類型不同基因類型雜種F1代普通近交系特殊近交系重組近交系分離近交系同源突變近交系同源導(dǎo)入近交系遠(yuǎn)交種突變種近交系突變系封閉群雜種F1代第九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日二、各類別實(shí)驗(yàn)動物的概念、特性及應(yīng)用第十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日近交系動物的概念

經(jīng)至少連續(xù)20代的全同胞兄妹交配培育而成，品系內(nèi)所有個體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對共同祖先。

近交系的近交系數(shù)（Inbreedingcoefficient）應(yīng)大于98.6％。

1.

近交系動物（inbredstrain)第十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日Fn=1-(1-△F)n

n為近交代數(shù)△F=19%

第十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日亞系和支系

亞系：由于突變和殘留雜和基因而導(dǎo)致部分遺傳組成的改變，從而形成的新的近交系品系，稱為亞系。支系：由于飼養(yǎng)環(huán)境的改變、進(jìn)行某種技術(shù)處理而引起某些生物學(xué)特性的改變，從而形成新的近交系品系，稱為支系。第十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日近交系動物的命名

近交系一般以大寫英文字母命名，亦可以用大寫英文字母加阿拉伯?dāng)?shù)命名，符號應(yīng)盡量簡短。如A系、TA1系等。近交系的近交代數(shù)用大寫英文字母F表示。例如當(dāng)一個近交系的近交代數(shù)為57代時，寫成（F57）。

亞系的命名方法是在原品系的名稱后加一道斜線，斜線后標(biāo)明亞系的符號，如：1）數(shù)字：DBA/22）培育或產(chǎn)生亞系的單位或人的縮寫英文名稱：CBA/J3）數(shù)字再加保持者的縮寫英文名稱：C57BL/6J、C57BL/10J4）慣用：BALB/c等。第十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日近交系動物的特性

（1）純和性（homozygosity）（2）同基因性（isogeneicity）（3）均一性（uniformity）（4）遺傳穩(wěn)定性（geneticstability）（5）可分辨性（identification）（6）個體性（individuality）（7）分布的廣泛性（extensivedistribution）（8）背景資料可查性（retrievalablebackgrounddate）第十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日近交系動物的應(yīng)用（1）與封閉群相比，近交系動物個體之間極其一致，可以消除雜合遺傳背景對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，因此在實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組和對照組都只需少量的動物。（2）在某些涉及組織細(xì)胞或腫瘤移植的實(shí)驗(yàn)中，個體之間組織相容性一致與否，是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵，在這里，近交系動物成為必不可少的實(shí)驗(yàn)動物。（3）由于近交，隱性基因純合性狀得以暴露，可以獲得大量先天性畸形及先天性疾病的動物模型，如糖尿病、高血壓等，是進(jìn)行基因連鎖分析、比較遺傳學(xué)、生理學(xué)和發(fā)育生物學(xué)研究的理想實(shí)驗(yàn)材料。（4）某些近交系具有一定的自發(fā)或誘發(fā)腫瘤發(fā)病率，并可以使許多腫瘤細(xì)胞株在活體動物上傳代。這些品系成為腫瘤病因?qū)W、腫瘤藥理學(xué)研究的重要模型。（5）多個近交系同時使用，可使不同研究者分析不同遺傳基因?qū)δ稠?xiàng)實(shí)驗(yàn)的影響，或者觀察結(jié)果是否具有普遍意義。第十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日特殊近交系同源突變近交系同源導(dǎo)入近交系分離近交系重組近交系第十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日特殊近交系的概念

●同源突變近交系：

是某個近交系在某基因位點(diǎn)上發(fā)生突變而分離、培育出來的新的近交系。兩個近交系，除了在一個指明位點(diǎn)等位基因不同外，其他遺傳基因全部相同?！裢磳?dǎo)入近交系：通過雜交-互交（Cross-intercross）或回交（Backcross）等方式將一個基因?qū)氲浇幌抵?，由此形成的一個新的近交系與原來的近交系只是在一個很小的染色體片段上的基因不同，稱為同源導(dǎo)入近交系（同類近交系），簡稱同源導(dǎo)入系（同類系）。第十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日●分離近交系:是在培育近交系的同時，采取一定的交配方法，迫使個別基因位點(diǎn)上的基因處于雜合狀態(tài)?！裰亟M近交系:

由兩個近交系雜交后，經(jīng)連續(xù)20代以上兄妹交配成的近交系。

同源導(dǎo)入近交系和同源突變近交系的不同之處在于與原來那株近交系相比，前者是一個染色體片段的差異，后者是單個基因的差異。分離近交系和同源突變近交系的區(qū)別:當(dāng)突變基因?yàn)殡s合狀態(tài)時，兩者的遺傳組成特征一樣，但培育的方法不同。第十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日特殊近交系的命名

●同源突變近交系：由發(fā)生突變的近交系名稱后加突變基因符號（用英文斜體印刷體）組成，二者之間以連接號分開，如：DBA/Ha-D.

當(dāng)突變基因必須以雜合子形式保持時，用“+”號代表野生型基因，如：A/Fa-+/c。

●同源導(dǎo)入近交系：在品系（亞系）的名稱（或名稱縮寫）后面加“·”和供體品系名稱縮寫，然后加連字號和目的基因稱號。例如：B10·129-H-12b表示以C57BL/10品系為遺傳背景，攜帶來自129品系H-12b基因的同源導(dǎo)入近交系。第二十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日

●分離近交系：在品系名稱后加連字號和雜合基因符號。如：DW-dw/+

●重組近交系：是在兩個祖系名稱縮寫中間加上大寫英文字母X。作母系的祖系名稱放在前，作父系的祖系名稱放在后。同一系列中不同的近交系可在其后面加連字號，再加數(shù)字表示。例如：AKR和C57BL雜交培育的一系列重組近交系可命名為AKXB-1、AKXB-2、AKXB-3等。第二十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日特殊近交系的應(yīng)用同源突變近交系、同源導(dǎo)入近交系、分離近交系：（1）在同一遺傳背景下比較某基因位點(diǎn)上不同等位基因的遺傳效應(yīng)。（2）在不同遺傳背景中研究同一基因與遺傳背景及其他基因的關(guān)系，消除雜合遺傳背景對某些突變基因表達(dá)的影響，以獲得更為穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)動物模型。（3）對復(fù)雜的多基因性狀進(jìn)行遺傳分析。

重組近交系：（1）分離分析（2）連鎖分析（

3）功能分析

第二十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日雜種F1代動物的概念

雜種F1代動物是由兩個不同的近交品系雜交而繁殖的第一代動物，各個體具有相同的表型和基因型。

2.雜種F1代動物第二十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日雜種F1代動物和重組近交系的區(qū)別雜種F1代動物是兩個近交系雜交產(chǎn)生的第一代雜種。重組近交系是兩個近交系雜交產(chǎn)生第一代雜種，再由兩個第一代雜種雜交后，所產(chǎn)生的雜種經(jīng)連續(xù)20代以上兄妹交配而育成的近交系。第二十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日雜種F1代動物的命名

雜種F1代動物的命名習(xí)慣上是在括號內(nèi)把親代母系名稱寫在前邊，以大寫英文字母X連接，后邊是親代父系名稱，再寫上F1。例如：（C57BL/6XDBA/2）F1第二十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日雜種F1代動物的特性及應(yīng)用（1）遺傳和表型上的一致性。（2）雜交優(yōu)勢雜種一代具有較強(qiáng)的生命力，對疾病的抵抗力強(qiáng)，壽命較長，容易飼養(yǎng)，適用于攜帶保存某些有害基因和長時間的慢性致死實(shí)驗(yàn)。（3）具有同基因性。（4）作為某些疾病研究的模型。(NZBXNZW)F1紅斑狼瘡自身免疫缺陷模型(C3HXI)F1肥胖病和糖尿病模型第二十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日封閉群動物概念

以非近親交配方式進(jìn)行繁殖生產(chǎn)的一個實(shí)驗(yàn)動物種群，在不從其外部引入新個體的條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上，稱為一個封閉群，或叫遠(yuǎn)交群。

封閉群動物的關(guān)鍵是不從外部引入任何新的基因，同時進(jìn)行隨機(jī)交配，不讓群體內(nèi)基因丟失，以保持封閉群一定的雜合性。

突變種是指攜帶個別突變基因的封閉群。

3.封閉群動物第二十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日封閉群動物的命名

例如：N：NIH表示由美國國立衛(wèi)生研究院（N）保持的NIH封閉群小鼠。Lac：LACA表示由英國實(shí)驗(yàn)動物中心（Lac）保持的LACA封閉群小鼠。某些命名較早，又廣為人知的封閉群動物，名稱與上述規(guī)則不一致時，仍可沿用其原來的名稱。如Wistar大鼠封閉群，日本的ddy封閉群小鼠等。

突變種的命名是在遠(yuǎn)交種命名的基礎(chǔ)上加上適當(dāng)?shù)幕蚍?，并且用連字號相連。如：N：NIH-nu/nu。

封閉群由2-4個大寫英文字母命名，種群名稱前標(biāo)明保持者的英文縮寫名稱，第一字母須大寫，后面的字母小寫，一般不超過4個字母。保持者與種群名稱之間用冒昧號分開。第二十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日封閉群動物特性及應(yīng)用

（1）遠(yuǎn)交種動物的遺傳組成具有很高的雜合性。（2）遠(yuǎn)交種具有較強(qiáng)的繁殖力和生活力。（3）突變種所攜帶的突變基因通常導(dǎo)致動物在某些方面的異常，從而可成為生理學(xué)、胚胎學(xué)和醫(yī)學(xué)研究的模型。第二十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日突變系動物的概念

突變系動物是指具有特殊遺傳性狀，并由基因符號表示出來的品系，以及基因符號表示雖不明顯，但經(jīng)淘汰和選擇后能保持特定遺傳性狀的品系。突變系動物可分為由自發(fā)突變而來和人工誘變而來的兩大類。

4.突變系動物第三十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日突變系動物的命名

在原品種或品系名稱后面加上連字號和突變基因符號。例如：BALB/c-nu/nu和N:NIN-nu/nu。

第三十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日三、實(shí)驗(yàn)動物遺傳監(jiān)測第三十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日1、實(shí)驗(yàn)動物遺傳監(jiān)測

遺傳監(jiān)測是對實(shí)驗(yàn)動物培育、維持和生產(chǎn)全過程進(jìn)行的遺傳學(xué)控制和質(zhì)量檢測。它是評價實(shí)驗(yàn)動物飼養(yǎng)管理水平和實(shí)驗(yàn)動物的遺傳學(xué)質(zhì)量的重要手段。遺傳監(jiān)測結(jié)果是實(shí)驗(yàn)動物遺傳學(xué)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化工作是否有效的最終判定標(biāo)準(zhǔn)。第三十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日2、近交系動物必須符合以下要求：

1）、具有明確的品系背景資料，包括品系名稱、近交代數(shù)、遺傳組成、主要生物學(xué)特性等，并能充分表明新培育的或引種的近交系動物符合近交系定義的規(guī)定。

2）、用于近交系保種及生產(chǎn)的繁殖系譜及記錄卡清楚完整，繁殖方法科學(xué)合理。

3）、經(jīng)遺傳檢測（生化標(biāo)記基因檢測法，皮膚移植法，免疫標(biāo)記基因檢測法）質(zhì)量合格。第三十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日3、造成遺傳改變，與標(biāo)準(zhǔn)遺傳概貌不一致，主要有以下原因：

1）遺傳污染

2）遺傳漂變

3）基因突變第三十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日4）數(shù)量性狀

下頜骨形態(tài)分析法4、遺傳檢測常用的性狀及方法1）形態(tài)學(xué)遺傳標(biāo)記如：毛色毛色基因測試法2）生化標(biāo)記如：同工酶、異構(gòu)蛋白生化標(biāo)記電泳法3）免疫學(xué)標(biāo)記如：組織相容性抗原皮膚移植法5)分子標(biāo)記DNA多態(tài)檢測法（DNAmarkers）:RFLP、RAPD、SSR（微衛(wèi)星DNA）、SNP

第三十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日P:DBA(已知基因型）aabbCCF1:待測基因型毛色性狀返回毛色基因測試法A_B_C_野鼠色

aaB_C_黑色

A_bbC_桂皮色aabbC_棕色

____cc白色第三十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日生化標(biāo)記電泳一、抽樣

對基礎(chǔ)群，凡在子代留有種鼠的雙親動物都應(yīng)進(jìn)行檢測。

對生產(chǎn)群，按下表要求從每個近交系中隨機(jī)抽取成年動物，雌雄各半。

生產(chǎn)群中雌性種鼠數(shù)量

抽樣數(shù)目

100只以下

6只

100只以上

>6只二、步驟

電泳樣品的制備（血漿、溶血素、組織勻漿上清液）浸膜點(diǎn)樣電泳染色與標(biāo)準(zhǔn)生化遺傳概貌對照，并判斷結(jié)果第三十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日返回第三十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日通過同系異體間的植皮的成功與否來判斷供體和受體是否屬同一品系或是否發(fā)生的遺傳變異或遺傳污染。凡受體含有供體基因皮膚移植就能接受。

近交系具有同基因性，同一品系不同個體之間的皮膚移植是不會產(chǎn)生排斥反應(yīng)的。

F1代動物可以接受任何一個雙親的組織移植物，雙親則不能接受F1代的移植物。

F1代動物可以接受F2代以后各代動物的移植物。親本品系可以接受某些F2代以后各代動物的移植物，但是絕大部分被排斥。皮膚移植法第四十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日背部皮膚移植法：

尾部皮膚移植法：

第四十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日注意以下幾點(diǎn)：1、供體和受體為同一性別。2、要嚴(yán)格消毒，防止產(chǎn)生非免疫排斥。3、最后判定，如不排斥，至少要觀察100天，才可判定不排斥。結(jié)果觀察:1、皮片在第一周內(nèi)蒼白、干癟、脫落，則為技術(shù)失敗。對照自體移植，技術(shù)失敗率不得大于10%。2、皮片在第2～3周內(nèi)發(fā)炎、水腫、壞死、結(jié)痂直至脫落，則為急性排斥。遺傳污染通常引起急性排斥。3、皮片在第3～9周內(nèi)逆毛逐漸脫落，直至無毛；或者因排斥留下凹陷疤痕，都為慢性排斥。遺傳突變通常引起慢性排斥。4、皮片在100d的觀察期內(nèi)，始終有逆毛，則為永久接受的標(biāo)志。5、如果對結(jié)果有懷疑，則要進(jìn)行重新移植，以得出明確結(jié)果。返回第四十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日與標(biāo)準(zhǔn)遺傳概貌完全一致未發(fā)現(xiàn)遺傳變異，遺傳質(zhì)量合格有一個位點(diǎn)的標(biāo)記基因與可疑

增加檢測位點(diǎn)數(shù)目和增加標(biāo)準(zhǔn)遺傳概貌不一致檢測方法后重檢，確定只有一個標(biāo)記基因改變可命名為同源突變系兩個或兩個以上位點(diǎn)的標(biāo)不合格

淘汰，重新引種記基因與標(biāo)準(zhǔn)遺傳概貌不一致5、遺傳檢測結(jié)果判斷

檢測結(jié)果判斷處理

第四十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第二節(jié)

實(shí)驗(yàn)動物微生物學(xué)質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)化第四十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)動物實(shí)行微生物學(xué)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化的意義1、保證實(shí)驗(yàn)動物的質(zhì)量以確保動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和可重復(fù)性。2、保證實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)和動物實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行。3、保證實(shí)驗(yàn)動物飼育管理人員和動物實(shí)驗(yàn)人員的健康和安全。第四十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日一、實(shí)驗(yàn)動物微生物學(xué)等級分類1、國際上的分類方法：普通級動物conventionalanimal(CVA)無特定病原體動物specificpathogenfreeanimal(SPFA)已知菌動物gnotobioticanimal(GNA)無菌動物germfreeanimal(GFA)2、我國的分類方法：普通級動物conventionalanimal(CVA)清潔動物cleananimal(CLA)無特定病原體動物specificpathogenfreeanimal(SPFA)無菌動物germfreeanimal(GFA)第四十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日種類飼養(yǎng)環(huán)境微生物控制程度附記無菌動物隔離系統(tǒng)

以封閉的無菌技術(shù)取得，用現(xiàn)有方法不能檢出任何微生物和寄生蟲的動物悉生動物隔離系統(tǒng)

確知帶有的微生物叢，特殊飼養(yǎng)的動物

確知帶有的微生物SPF動物屏障系統(tǒng)

沒有特定的致病性微生物和寄生蟲的動物

明確知道不帶有的微生物普通動物開放系統(tǒng)

不明確所帶微生物、寄生蟲的動物，亦稱通常動物。但不得帶有人畜共患傳染病病原體

對微生物帶有情況不夠明確3、按微生物控制程度的實(shí)驗(yàn)動物分類原則

第四十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日二、各級別實(shí)驗(yàn)動物的概念、特性、來源、應(yīng)用第四十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日1.普通動物

conventionalanimal(CVA)

指未經(jīng)嚴(yán)格的微生物和寄生蟲控制，飼育在開放系統(tǒng)中，其體內(nèi)外不帶有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的主要人畜共患病和動物烈性傳染病病原體的動物。第四十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日普通動物的特性及應(yīng)用特性：微生物寄生蟲控制要求最低，生產(chǎn)成本最低，量多價廉。應(yīng)用：供教學(xué)和一般性試驗(yàn)用。第五十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日2.清潔動物

cleananimal(CLA)

指經(jīng)嚴(yán)格的微生物和寄生蟲控制，飼育在屏障系統(tǒng)中，其體內(nèi)外除普通動物應(yīng)排除的病原體和寄生蟲外，不攜帶有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的對動物危害大和對科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的人畜共患病和動物烈性傳染病病原體的動物。

清潔動物來源于SPF動物或無菌動物或悉生動物或剖腹產(chǎn)動物。第五十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日屏障系統(tǒng)入口處第五十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日屏障系統(tǒng)洗消間第五十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日屏障系統(tǒng)內(nèi)部結(jié)構(gòu)第五十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日屏障系統(tǒng)內(nèi)部結(jié)構(gòu)第五十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日屏障系統(tǒng)內(nèi)操作第五十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日清潔動物的特性及應(yīng)用特性：微生物寄生蟲控制要求比普通動物高但比SPF動物低，無人畜共患病和主要傳染病，無明顯可見的疾病臨床癥狀，是價廉健康且易得的標(biāo)準(zhǔn)的動物。應(yīng)用：廣泛用于生物醫(yī)學(xué)研究各領(lǐng)域的要求不是十分嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)。第五十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日3.無特定病原體動物

specificpathogenfreeanimal(SPFA)

指經(jīng)嚴(yán)格的微生物和寄生蟲控制，飼育在屏障系統(tǒng)或隔離系統(tǒng)中，經(jīng)檢測其體內(nèi)外無質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的特定病原微生物和寄生蟲存在，但可帶有非特定的微生物和寄生蟲的動物。（除清潔動物應(yīng)排除的病原體和寄生蟲外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原體和寄生蟲。）

SPF動物來源于無菌動物。第五十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第五十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第六十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日無特定病原體動物的特性及應(yīng)用特性：不攜帶對實(shí)驗(yàn)有干擾的病原體的高標(biāo)準(zhǔn)的動物，無任何疾病的臨床癥狀，價格合適，來源容易。應(yīng)用：廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究的各個領(lǐng)域。第六十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日4.無菌動物

germfreeanimal(GFA)

概念:指在隔離系統(tǒng)中飼育的，經(jīng)檢測體內(nèi)外無可檢出的任何微生物和寄生蟲的動物。培育:無菌動物原種是在無菌條件下進(jìn)行剖腹產(chǎn)，然后由人工喂乳或無菌“奶媽”動物代乳飼育而成。第六十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日隔離系統(tǒng)第六十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日

主要特征：一般特征：增重慢、成熟晚、產(chǎn)仔少、壽命長。解剖生理特征：主要表現(xiàn)在消化系統(tǒng)（腸壁薄、微絨毛細(xì)）。免疫學(xué)特征：淋巴結(jié)與脾臟發(fā)育不良。

應(yīng)用：

微生物學(xué)寄生蟲學(xué)研究；免疫學(xué)研究；腫瘤學(xué)研究；老年學(xué)研究；營養(yǎng)學(xué)研究；放射醫(yī)學(xué)研究；心血管疾病研究；毒理和藥理學(xué)研究等。無菌動物的特性及應(yīng)用第六十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日5、悉生動物（已知菌動物）gnotobioticanimal(GNA)

在隔離系統(tǒng)中飼育的，經(jīng)檢測其體內(nèi)外僅有經(jīng)人工有計(jì)劃接種的已知的微生物或寄生蟲的動物。

根據(jù)所接種的已知菌種類，分為單菌、雙菌、三菌和多菌動物。第六十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日無特定病原體動物和悉生動物的區(qū)別無特定病原體動物體內(nèi)外排除了哪些微生物和寄生蟲是知道的。悉生動物體內(nèi)外攜帶那些微生物和寄生蟲是知道的。第六十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日我國實(shí)驗(yàn)動物等級的設(shè)定小鼠、大鼠：清潔級、SPF級、無菌級豚鼠、地鼠、兔：普通級、清潔級、

SPF級、無菌級犬、猴：普通級、SPF級第六十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日無菌動物、無特定病原體動物

和普通級動物優(yōu)缺點(diǎn)比較項(xiàng)目無菌動物SPF動物普通動物傳染病無無有或可能有寄生蟲無無有或可能有試驗(yàn)結(jié)果明確明確有疑問應(yīng)用動物數(shù)少量少量多或大量統(tǒng)計(jì)價值很好可能好不準(zhǔn)確長期實(shí)驗(yàn)可能好可能好困難死亡率很少少高長期實(shí)驗(yàn)存活率約100％約90％約40％實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確設(shè)計(jì)可能可能不可能實(shí)驗(yàn)結(jié)果的討論價值高中低第六十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日各種等級動物的相互關(guān)系第六十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日三、實(shí)驗(yàn)動物微生物與寄生蟲監(jiān)測

為了防止實(shí)驗(yàn)動物群中微生物和寄生蟲的污染，確保實(shí)驗(yàn)動物微生物學(xué)質(zhì)量，必須建立一套監(jiān)測手段，定期對動物群或飼養(yǎng)設(shè)施的環(huán)境進(jìn)行檢測。

必須從“引種運(yùn)輸飼養(yǎng)管理”認(rèn)真操作、嚴(yán)格管理第七十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日1、檢測內(nèi)容及意義1、外觀檢查精神狀態(tài)、運(yùn)動情況、體表有無異常、生產(chǎn)能力和哺乳情況、排糞是否正常、采食與飲水等。2、定期對各級實(shí)驗(yàn)動物群進(jìn)行微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)檢測，以確定各級實(shí)驗(yàn)動物是否符合原定級別；另一方面避免科學(xué)工作者誤用不合適的動物，避免人獸共患病病原體感染飼養(yǎng)人員或?qū)嶒?yàn)工作人員，保障這些人員的健康。3、對實(shí)驗(yàn)動物飼養(yǎng)設(shè)施的監(jiān)測，為確證這些設(shè)施能否控制微生物污染提供依據(jù)。第七十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日4、對引進(jìn)的實(shí)驗(yàn)動物進(jìn)行檢疫，避免病原體入侵原有的動物群。5、對患病動物進(jìn)行病因?qū)W診斷并積累對動物疾病的認(rèn)識和收集菌株或毒株，為診斷試劑和疫苗的制備，提供菌株或毒株。第七十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第七十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

實(shí)驗(yàn)動物微生物學(xué)等級及監(jiān)測

GB14922.2-2011Laboratoryanimal─Microbiologicalstandardsandmonitoring

表1小鼠、大鼠病原菌檢測項(xiàng)目第七十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日表2豚鼠、地鼠、兔病原菌檢測項(xiàng)目第七十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日表4小鼠、大鼠病毒檢測項(xiàng)目第七十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日表5豚鼠、地鼠、兔病毒檢測項(xiàng)目第七十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB14922.1—2011

實(shí)驗(yàn)動物寄生蟲學(xué)等級及監(jiān)測

Laboratoryanimal—Standardsandmonitoringforparasitology__________________________________________________________________表1小鼠和大鼠寄生蟲學(xué)檢測指標(biāo)第七十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日表2豚鼠、地鼠和兔寄生蟲學(xué)檢測指標(biāo)第七十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日2、檢測方法國家推薦性標(biāo)準(zhǔn)《實(shí)驗(yàn)動物微生物學(xué)檢測方法1～4》GB/T14926.1～14926.64－2001《實(shí)驗(yàn)動物寄生蟲學(xué)檢測方法》GB/T18448.1～18448.10－2001第八十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)動物病毒學(xué)檢測方法目前我國對實(shí)驗(yàn)動物病毒學(xué)檢測通常使用血清學(xué)方法，包括：1）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）2）免疫熒光試驗(yàn)（IFA）3）免疫酶染色試驗(yàn)（IEA）4）血球凝集（HA）和血球凝集抑制（HI）試驗(yàn)第八十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)動物細(xì)菌學(xué)檢測方法通常采用細(xì)菌分離和培養(yǎng)方法。根據(jù)培養(yǎng)基上菌落特征，將分離到的可疑菌落作生化鑒定。1）檢測人員的實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)，直接影響到其對檢測結(jié)果的判斷準(zhǔn)確性。2）對部分細(xì)菌，如沙門氏菌，支原體等已開展血清學(xué)方法檢測。3）泰澤氏病原體不能在人工培養(yǎng)基上生長，目前還以病變組織壓片鏡檢進(jìn)行檢測，并結(jié)合病理學(xué)檢查結(jié)果作出判斷。第八十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)動物寄生蟲檢測方法通常在光學(xué)顯微鏡下查找寄生蟲的蟲體、蟲卵或孢子。對人獸共患的弓形蟲，則采用各種血清學(xué)的方法進(jìn)行檢測。第八十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日3、檢測頻率

普通級動物：每三個月至少檢測動物一次。清潔動物：每三個月至少檢測動物一次。無特定病原體動物：每三個月至少檢測動物一次。無菌動物：每年檢測動物一次。每2-3周檢查一次動物的生活環(huán)境標(biāo)本和糞便標(biāo)本。第八十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日

群體大?。ㄖ唬?/p>

取樣數(shù)量<100>5100—500>10>500>204、取樣方法5、取樣數(shù)量

每個隔離器2只。第八十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日6、結(jié)果判定

如有一只動物的一項(xiàng)指標(biāo)不符合該等級標(biāo)準(zhǔn)要求，則判為不符合該等級標(biāo)準(zhǔn)。第八十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日練習(xí)第八十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日1.品種、品系——是實(shí)驗(yàn)動物分類的基本單位。作為實(shí)驗(yàn)動物的一個品種或品系，應(yīng)具備相似的外貌特征、獨(dú)特的生物學(xué)特性、穩(wěn)定的遺傳性能、具有共同遺傳來源和一定的遺傳結(jié)構(gòu)等條件。2.近交系動物——經(jīng)至少連續(xù)20代的全同胞兄妹交配培育而成的動物品系，品系內(nèi)所有的個體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對共同祖先，該品系動物稱為近交系動物。3.亞系——育成的近交系在長期的保種過程中由于基因突變、殘余雜合基因、遺傳污染等原因而導(dǎo)致部分遺傳組成改變而形成的新的近交系，稱為原近交系的亞系。4.支系——育成的近交系由于飼養(yǎng)環(huán)境改變或人工技術(shù)處理，如代乳、胚胎移植、冷凍保存等，導(dǎo)致某些生物學(xué)特性的改變而形成的新的近交系，相對于原來的近交系或亞系，稱為支系。5.同源突變近交系——簡稱同源突變系，是指某個近交系在某基因位點(diǎn)上發(fā)生突變而分離、培育出來的新的近交系。它和原近交系的差異只是突變基因位點(diǎn)上帶有不同的基因，而其他位點(diǎn)上的基因完全相同。第八十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日6.同源導(dǎo)入近交系——簡稱同源導(dǎo)入系，是指通過基因?qū)氲姆椒▽⒁粋€目的基因?qū)肽硞€近交系的基因組內(nèi)而培育出的新的近交系。它與原近交系比較，只是一個染色體片段的差異(一個或幾個基因的差異)。7.分離近交系——是在培育近交系的同時，采取一定的交配方法，迫使個別基因位點(diǎn)上的基因處于雜合狀態(tài)而培育出來的新的近交系。如果同源突變近交系的突變基因?yàn)殡s合狀態(tài)，則其遺傳組成特征與分離近交系相同，只是培育方法不同。8.重組近交系動物——是在兩個近交系雜交生育雜種一代之后，雜種一代互交生育雜種二代，從雜種二代中隨機(jī)選擇個體配對，再連續(xù)進(jìn)行20代以上的全同胞兄妹交配而培育出的近交系動物。通常從多對雜種二代中平行培育出一系列重組近交系。9.雜種F1代動物——是由兩個不同的近交系雜交而生育的第一代雜種動物，稱為雜種F1代動物。雜種F1代動物的基因組成大都是雜合的，但各個體具有相同的表型和基因型。10.封閉群動物——以非近親交配方式進(jìn)行繁殖生產(chǎn)的一個實(shí)驗(yàn)動物群體，在不從其外部引入新個體的條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上，稱為一個封閉群。該群體動物稱為封閉群動物。第八十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日11.遺傳概貌——是指用各種方法和技術(shù)對實(shí)驗(yàn)動物品種或品系的遺傳特性進(jìn)行檢測后的數(shù)據(jù)總匯，即品種或品系基因標(biāo)記表型的總匯。12.無菌動物(GFA)——是指在隔離系統(tǒng)飼育的，經(jīng)檢測體內(nèi)外無可檢測出的任何微生物和寄生蟲的動物。13.悉生動物(GNA)——又稱已知菌動物或已知菌叢動物，是指在隔離系統(tǒng)飼育的，經(jīng)檢測其體內(nèi)外僅有經(jīng)人工有計(jì)劃接種的已知的微生物或寄生蟲的動物。14.無特定病原體動物(SPFA)——是指在屏障系統(tǒng)或隔離系統(tǒng)飼育的，經(jīng)檢測其體內(nèi)外無質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的特定病原微生物和寄生蟲存在，但可攜帶有非特定的微生物和寄生蟲的動物。15.清潔動物(CLA)——也稱清潔普通動物，是指原種群為屏障系統(tǒng)中的SPF動物或剖宮產(chǎn)動物，飼養(yǎng)在亞屏障系統(tǒng)中的其體內(nèi)外不帶有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的人畜共患病病原體或動物傳染病病原體的動物16.普通動物——是指未經(jīng)嚴(yán)格的微生物和寄生蟲控制，飼養(yǎng)在開放系統(tǒng)中的其體內(nèi)外不帶有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的主要人畜共患病和動物烈性傳染病病原體的動物。第九十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日二、判斷是非1.種是實(shí)驗(yàn)動物學(xué)分類的基本單位。(×)2.C57BL/6是近交系小鼠的一種品種。(×)3.A/He(F87)是指近交到87代由Heston培育的A品系的亞系。(√)4.近交系小鼠由于飼養(yǎng)環(huán)境改變或某些技術(shù)性處理(如胚胎移植)而發(fā)生某些生物學(xué)特性改變，由此改變的生物學(xué)特性都是可以遺傳的。(×)5.近交系小鼠的近交系數(shù)應(yīng)大于98.6%。(√)6.同源突變近交系與同源導(dǎo)入近交系的不同之處在于與原來那株近交系相比較，前者是一個染色體片段的差異，后者是一個位點(diǎn)單個基因的差異。(×)7.當(dāng)同源突變近交系和分離近交系相同位點(diǎn)的突變基因都為雜合狀態(tài)時，區(qū)別兩者的方法是看培育過程。(√)8.重組近交系動物是由雜種F1代動物兄妹近交20代以上培育而成的。（×）9.兩個不同的近交系動物雜交，可培育出兩個不同的雜種F1代動物。(√)10.采用生化位點(diǎn)方法對近交系小鼠進(jìn)行遺傳監(jiān)測，應(yīng)當(dāng)采用不同的技術(shù)同時對各條染色體上的多個基因位點(diǎn)進(jìn)行檢測。(√)第九十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日三、填空1.根據(jù)基因組成特點(diǎn)，將實(shí)驗(yàn)動物分為近交系、突變系、雜種F1代和封閉群等4類。2.作為一個品種或品系，應(yīng)具備相同的外貌特征、獨(dú)特的生物學(xué)特性、穩(wěn)定的遺傳性能、具有共同遺傳來源和一定的遺傳結(jié)構(gòu)等條件。3.用兩個不同的近交系分別作母系或父系進(jìn)行雜交，可產(chǎn)生兩種雜種一代。這兩種雜種一代的區(qū)別在于Y染色體和母性因素。4.當(dāng)被檢測的遺傳性狀與遺傳概貌不一致時，可以考慮遺傳污染、遺傳漂變、基因突變等原因。5.按照微生物寄生蟲控制程度，國際上將實(shí)驗(yàn)動物分為無菌動物(GFA)、悉生動物(GNA)、無特定病原體動物(SPFA)和普通動物等四類。6.按照微生物寄生蟲控制程度，我國將實(shí)驗(yàn)動物分為四級，即一級為普通動物、二級為清潔動物、三級為無特定病原體動物、四級為無菌動物。7.廣義的悉生動物包括無菌動物、已知菌動物和無特定病原體動物；狹義的悉生動物即已知菌動物。第九十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日四、單項(xiàng)選擇1.下列情況可形成亞系的是(D)A、引種到另一實(shí)驗(yàn)室B、受精卵或胚胎移植C、冷凍保存D、在兄妹交配40代之前分離2.下列情況可形成支系的是(D)A、同一品系處于分離或基因突變B、殘余雜合基因分離或基因突變C、遺傳污染D、卵巢移植3.根據(jù)命名原則，下列小鼠中屬于近交系的是(A)A、C3H(F130)B、B6D2F1C、N：NIHD、BALB/c-nu／nu4.根據(jù)命名原則，下列小鼠中屬于近交系亞系的是(B)A、NZB(F95)B、C57BL/6JC、C3HfC57BLD、C57BL/6J∥Lac5.根據(jù)命名原則，下列小鼠中屬于同源導(dǎo)入近交系的是(C)A、N：NIH-nu/nuB、C57BL/6J-bg/bgC、B10·129-H-126D、DW-dw/+第九十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日6.根據(jù)命名原則，下列小鼠中屬于重組近交系的是(B)A、AKRB、AKXDC、D2B6F1D、(NZBXNZW)F17.同一品種或品系中，各個體的基因型均不相同的實(shí)驗(yàn)動物是(B)A、近交系動物B、封閉群動物C、雜種一代動物D、重組近交系動物8.同一品種或品系中，各個體的遺傳組成均等地來自于兩個親本的實(shí)驗(yàn)動是(C)A、重組近交系動物B、分離近交系動物C、雜種一代動物D、單親純合二倍體動物9.人類多基因遺傳研究、藥物篩選，宜選用的實(shí)驗(yàn)動物是(D)A、近交系動物B、突變系動物C、雜種一代動物D、封閉群動物10.基因分離、基因連鎖、基因功能分析，宜選用的實(shí)驗(yàn)動物是(C)A、雜種一代動物B、封閉群動物C、重組近交系動物D、遠(yuǎn)交種動物第九十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日11.BALB/c小鼠基礎(chǔ)群中由于殘余雜合基因的分離，造成BALB/c小鼠遺傳組成的改變，稱之為(B)A、遺傳污染B、遺傳漂變C、基因突變D、遺傳突變12.下列情況，移植物被排斥的是(B)A、H-2a／H-2a小鼠的皮膚移植給H-2a／H-2b小鼠B、A品系雄鼠皮膚移植給A品系雌鼠C、親代小鼠的皮膚移植給F1代小鼠D、F2代小鼠的皮膚移植給F1代小鼠13.按體內(nèi)外攜帶微生物寄生蟲種類數(shù)量從多到少排列，下列哪一項(xiàng)是正確的(B)A、無菌動物、無特定病原體動物、清潔動物、普通動物B、普通動物、清潔動物、無特定病原體動物、無菌動物C、悉生動物、無菌動物、清潔動物、普通動物D、普通動物、悉生動物、清潔動物、無菌動物14.飼養(yǎng)在屏障系統(tǒng)設(shè)施中的實(shí)驗(yàn)動物是(C)A、無菌動物B、悉生動物C、無特定病原體動物D、普通動物15.飼養(yǎng)在隔離系統(tǒng)設(shè)施中的實(shí)驗(yàn)動物是(A)A、無菌動物B、無特定病原體動物C、清潔動物D、普通動物第九十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日16.下列細(xì)菌中為清潔級小鼠體內(nèi)必須排除的是(D)A、金黃色葡萄球菌B、肺炎鏈球菌C、綠膿桿菌D、沙門菌17.下列細(xì)菌中為普通級小鼠體內(nèi)必須排除的是(D)A、金黃色葡萄球菌B、肺炎鏈球菌C、多殺巴桿菌D、沙門菌18.GN動物與SPF動物比較，下列哪一項(xiàng)是正確的(A)A、GN所帶菌種是已知的，SPF是未知的B、GN所帶菌種是未知的，SPF是已知的C、GN和SPF所帶菌種均是已知的D、GN和SPF所帶菌種均是未知的19.下列近交系中，僅在某一染色體片段與原來那株近交系不同的是(B)A、同源突變近交系B、同源導(dǎo)入近交系C、分離近交系D、重組近交系20.SPF動物可獲得的途徑是(A)A、GF→GN→SPFB、GN→GF→SPFC、GN→CL→SPFD、GF→CV→SPF第九十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日21.重組近交系與雜種一